Actéoside : recherche sur l'activité antioxydante et antihypertensive

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Activités antioxydantes et antihypertensives de l'actéoside et de ses analogues

Chao-Hsiang CHEN1,2, Yin-Shiou LIN3, Mei-Yin CHIEN2,4, Wen-Chi HOU5,6,* et Miao-Lin HU1,*

Résumé. Actéoside(Act), un glycoside phényléthanoïde, est un composé actif dans plusieurs plantes et plantes médicinales traditionnelles. Agir avec son isomère structurel,isoacteoside(Isoact), et un analogue, 6-O-acéty-lactéoside (6-O-acetylact), ont été utilisés dans l'étude pour étudier laantioxydant, enzyme de conversion anti-angiotensine (ECA) et activités inhibitrices de l'hémolysedans in vitroet activité antihypertensive contre les rats spontanément hypertendus (SHR)dans vivo. Nous avons montré que Act, Isoact et 6-O-acetylact piégeait efficacement les radicaux 1,1-diphényl-2-picryl-hydrazyle (avec IC50 à 11,4, 9,48 et 9,55 μM, respectivement) et les radicaux superoxyde (avec IC50 à 66,0, 38,5 , et 39,1 μM, respectivement). Comme Isoact et 6-O-acetylact avait des activités similaires de piégeage des radicaux, seuls Act et Isoact ont été utilisés pour les études suivantes. Act et Isoact ont tous deux inhibé l'activité de la xanthine oxydase avec une CI50 à 53,3 et 62,2 μM, respectivement. Act et Isoact ont également inhibé de manière significative l'activité de l'ECA et l'hémolyse induite par le dichlorhydrate de 2,2'-azo-bis(2-amidinopropane), mais les effets d'Act étaient plus forts que ceux d'Isoact. Nous avons ensuite administré par voie orale une dose unique d'Act ou d'Isoact (10 mg/Kg de poids corporel) à SHR et mesuré les modifications de la pression artérielle systolique (PAS) et de la pression artérielle diastolique (PAD) sur 24 h. Act, mais pas Isoact, a montré une activité antihypertensive en abaissant la PAS et la PAD. Les résultats suggèrent l'utilité potentielle de la loi en tant que produit alimentaire de santé pourantioxydantprotection et régulation de la tension artérielle.

Mots clés: Actéoside; Activité antihypertensive; Enzyme de conversion de l'angiotensine (ECA); Antioxydant; Hémolyse.

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Introduction

Actéoside(Act), un glycoside phényléthanoïde contenant de l'acide caféique, du 3',4'-dihydroxy phényléthanol, du glucose et du rhamnose, a été isolé pour la première fois à partir de fleurs deSeringue Vul- garis(Birkofer et al., 1968), et avec l'isomère structurel deisoacteoside(Isoact) et la dérivée de6-O-acétylactéoside(6-O-acetylact), a été trouvé dans de nombreuses plantes et plantes médicinales, telles queLigstrum purpurascens(Wong et al., 2001),Callicarpe dichotome(Koo et al., 2006 ; Lee et al., 2006),Cistanche désertiqueetBoschniaquie rossique(Wu et al., 2006),Scrophulaire ningpoenis(Huang et al., 2008),Rehmannia glutineux(Li et al., 2006). Il a été rapporté que l'acte présentait une activité antimétastatique sur les cellules de mélanome B16 dans des modèles de souris C57BL/6 (Ohno et al., 2002). Agir, Isoact et 6-O-acetylact a récemment montré qu'il inhibait l'expression activée par l'IL-1 - de la CAM intercellulaire-1 et de la CAM vasculaire-1 dans les cellules endothéliales de la veine ombilicale humaine (Chen et al., 2009). Act protège également les cellules endothéliales pulmonaires bovines du stress oxydatif induit par les radicaux hydroxyles (Chiou et al., 2004) et inhibe la production d'oxyde nitrique et de TNF en bloquant l'activation de l'AP-1 dans les macrophages stimulés par les lipopolysaccharides (Rao et al. , 2009). Act et Isoact présentent des activités neuroprotectricesdans in vitro(Koo et al., 2005). Koo et al. (2006) ont rapporté qu'Act et ses aglycones récupèrent efficacement le 1,1-diphényl-2-picryl-hydrazyl (DPPH) et l'oxyde nitriquedans in vitro. Cependant, peu d'études ont comparé côte à côte lesdans in vitro antioxydantactivités d'Act et de ses composés structurellement apparentés tels que Isoact et 6-O- acétylact.

Plusieurs classes d'agents pharmacologiques ont été utilisées dans le traitement de l'hypertension (Mark et Davis, 2000). Une classe de médicaments antihypertenseurs, connus sous le nom d'inhibiteurs de l'enzyme de conversion de l'angiotensine I (IEC) (c'est-à-dire les inhibiteurs de peptidase), a une faible incidence d'effets secondaires indésirables et constitue la classe préférée des antihypertenseurs.

agents lors du traitement de patients atteints de maladies secondaires concomitantes (Fotherby et Panayiotou, 1999). L'ACE (peptidyl-dipeptide hydrolase EC 3.4.15.1) est une exopeptidase contenant du Zn libérant un dipeptide, qui élimine un dipeptide de l'extrémité C-terminale de l'angiotensine I pour former l'angiotensine II, un composé très hypertenseur. Plusieursantioxydantles peptides (peptides liés au glutathion réduit et à la carnosine) présentent des activités inhibitrices de l'ECA (Hou et al., 2003). Le premier inhibiteur de l'ECA actif par voie orale disponible en clinique, le captopril, a été développé pour les traitements hypertensifs (Ondetti et al., 1977 ; Borer, 2007). Il a été rapporté que l'acte exerce des effets relaxants médiés par l'oxyde nitrique sur les anneaux aortiques intacts de l'endothélium des rats SD (Wong et al., 2001). Ahmed et al. (1995) ont rapporté qu'Act induit une diminution dose-dépendante de la pression artérielle systolique (PAS) et de la pression artérielle diastolique (PAD) suite à son injection intraveineuse chez des rats Wistar anesthésiés normotendus. Cependant, il n'est pas clair si Act administré par voie orale et/ou ses isomères apparentés sont des antihypertenseurs.dans vivo. Dans la présente étude, nous avons étudié lesdans in vitro antioxydantcapacité et les activités inhibitrices de l'ECA ainsi que ladans vivoactivité antihypertensive d'Act, Isoact et/ou 6-O-acetylact en utilisant les rats spontanément hypertendus (SHR). Ces études devraient fournir des données utiles pour le développement d'Act en tant que produit alimentaire de santé.

Matériaux et méthodes

Matériaux

Dichlorhydrate de 2,2'-azo-bis(2-amidinopropane) (AAPH), ACE (unité I, poumon de lapin), butylhydroxytoluène (BHT), DPPH, N-(3-[{{7 }}furyl]acryloyl)-Phe-Gly-Gly (FAPGG), le NADH, le méthosulfate de phénazine (PMS), la xanthine et la xanthine oxydase ont été achetés auprès de Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, USA). Le captopril a été acheté auprès de Calbiochem Co. (CA, USA). Act, Isoact et 6-O-acetylact (Figure 1) ont été achetés auprès d'Equal Corp. (puresté > 98 %, Shanghai, Chine). Les autres produits chimiques et réactifs provenaient de Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, USA).

Récupération activité de Loi, Isoacte, et 6-O- acétylact contre dPPH radicaux par spectrophotométrie

Un volume (0.3 mL) d'Act, Isoact et 6-O-acetylact (les concentrations finales étaient de 1,56 à 50 µM), du BHT et de l'acide ascorbique (les concentrations finales étaient de 2,4 à 60 µM) ont été ajoutés à 0,1 mL de tampon Tris-HCl 1 M (pH 7,9 ) puis mélangé avec 0,6 ml de DPPH 100 µM dans du méthanol jusqu'à une concentration finale de 60 µM pendant 20 min sous protection lumineuse à température ambiante (Liu et al., 2004; Lin et al., 2008). La diminution de l'absorbance à 517 nm a été mesurée et exprimée en ΔA517 nm. De l'eau déminéralisée a été utilisée comme expérience à blanc. L'activité de piégeage du radical DPPH (pourcentage) a été calculée avec l'équation : (ΔA517blanc - ΔA517échantillon) ÷ ΔA517blanc × 100. L'IC50 représente la concentration de demi-inhibition.

Inhibiteur activité de Loi et Isoacte contre xanthine oxydase

L'activité xanthine oxydase a été mesurée en déterminant la formation d'acide urique à 295 nm en utilisant la xanthine comme substrat (Kalckar, 1947). Les différentes quantités d'Act et d'Isoact (les concentrations finales étaient de 25, 50 et 75 µM) ont été pré-mélangées avec 50 μL de xanthine oxydase 1 mU/mL à 4 degrés pendant 1 h, puis les 300 μL de xanthine 1 mM ont été ajoutés. Les changements d'absorbance à 295 nm ont été enregistrés sur 2 min et exprimés en ΔA295 nm/min. L'activité inhibitrice de la xanthine oxydase (pourcentage) a été calculée comme suit : (ΔA295 nm/min noir - ΔA295 nm/min échantillon) ÷ ΔA295 nm/min noir × 100. De l'eau désionisée a été utilisée à la place de la solution d'échantillon comme expérience à blanc. IC50 représente la concentration de demi-inhibition.

Récupération activité de Loi, Isoacte, et 6-O- acétylact contre superoxyde radicaux par spectrophotométrie

Le radical superoxyde a été généré par le système PMS-NA-DH (Liu et al., 2004 ; Lin et al., 2008). Tous les échantillons de 0,2 mL, contenant différentes quantités d'Act, d'Isoact et de 6-O-acétylate (la concentration finale était de 15,6, 31,3, 62,5, 125 et 250 µM), ont été ajoutés en séquence à 0.2 mL de 630 µM de nitroblue tétrazolium, 0,2 ml de PMS 33 µM et 0,2 ml de NADH 156 µM dans un tampon phosphate 100 mM (pH 7,4). De l'eau déminéralisée a été utilisée à la place de la solution d'échantillon comme expérience à blanc. L'acide ascorbique (la concentration finale était de 6, 9, 12 et 24 µM) a été utilisé comme contrôle positif. Les changements d'absorbance à 560 nm ont été enregistrés pendant 2 min et exprimés en ΔA560 nm/min. L'activité de piégeage des radicaux superoxydes (pourcentage) a été calculée comme suit : (ΔA560 nm/min noir - ΔA560 nm/min échantillon) ÷ ΔA560 nm/min noir × 100. IC50 représente la concentration de demi-inhibition.

détermination de As inhibiteur activité de Loi et Isoacte par CLHP

Chaque 50 µL d'Act (0.2, 0.4, 0.5 et 2.0 µmole) et Isoact ({{ 11}}.1, 0.2, 0.5, 1.0 et 2.0 µmole) ont été prémélangés avec 15 µL d'ACE 1U/mL pendant 5 min, puis 200 µL de FAPGG 0,5 mM ont été ajoutés et mis à réagir à température ambiante pendant 10 min (Anzenbacherova et al., 2001). Les 800 ul de méthanol ont été ajoutés pour arrêter la réaction. L'expérience à blanc était FAPGG uniquement. Dans l'expérience témoin, ACE a réagi avec FAPGG dans les mêmes conditions. La séparation chromatographique de FAPGG et de FAP a été réalisée sur le système chromatographique Hitachi (Japon) avec une boucle de 10 µL. L'analyse HPLC a été réalisée sur une colonne Biosil Aqua-ODS-W 5 µm (Biotic Chemical Co., Ltd., Taïwan, 250 × 4,6 mm id), granulométrie 5 µm. Le mélange ayant réagi a été séparé de manière isocratique avec une phase mobile constituée de nonylamine 0,02 M (ajustée à pH 2,4 avec de l'acide phosphorique) et d'acétonitrile dans un rapport de 67,5:32,5 (V/V) (Anzenbacherova et al., 2001). Le débit était de 1 mL/min ; le volume d'injection était de 10 µL ; le détecteur a été réglé à 345 nm. Les inhibitions de l'ECA (pourcentage) de Act et Isoact ont été calculées comme suit : [(Zone de FAPGGblank − Zone de FAPGGcontrol) − (Zone de FAPGGblank − Zone de FAPGGsample) ÷ (Zone de FAPGGblank − Zone de FAPGGcontrol) × 100.

Inhibiteur activité de Loi et Isoacte contre Médiation AAPH hémolyse

L'oxydation radicalaire de la chaîne des globules rouges de rat (RBC) par l'hémolyse médiée par l'AAPH (Miki et al., 1987). Le sang de rat a été placé dans des tubes héparinés et centrifugé à 1000 ×gpendant 10 min. Après avoir été lavé trois fois avec du NaCl 0,15 M, le culot globulaire a été obtenu par centrifugation à 1000 ×gpendant 10 min. Les différentes quantités d'Act et d'Isoact (les concentrations finales étaient de 2, 5 et 10 µM) ont été mélangées à 25 μL de suspension de GR à 20 % (V/V, dans du PBS 10 mM) et 25 μL de solution AAPH 500 mM à 37 degrés pendant 0 , 1, 1,5, 2, 2,5, 3 et 3,5 h sous agitation douce. Chaque mélange a été centrifugé à 1000 ×gpendant 10 min, et le surnageant a été mesuré à 536 nm. De l'eau déionisée a été utilisée à la place de la solution AAPH ou de la solution d'échantillon, respectivement, comme groupe blanc ou comme groupe témoin. L'inhibition de l'hémolyse (pourcentage) de Act et Isoact à 3 h ou à 3,5 h a été calculée comme suit : (ΔA536 nmcontrôle - ΔA536 nméchantillon) ÷ ΔA536 nmcontrôle × 100.

Antihypertenseur effets de Loi et Isoacte sur SHR

Les effets d'Act, d'Isoact et de captopril administrés par voie orale par sonde d'alimentation (2,0 × 80 mm) sur la PAS réduite et la DBP réduite ont été déterminés selon la méthode des rapports précédents (Lin et al., 2006 ; Lin et al., 2008 ; Han et al., 2011). Toutes les procédures d'expérimentation animale ont suivi les lignes directrices publiées (National Science Council, 1994). Les mâles SHR (âgés de 8 semaines, National Laboratory Animal Center, Taipei) ont été logés individuellement dans des cages en acier maintenues à 24 degrés avec un cycle lumière-obscurité de 12-h et avaient libre accès à une nourriture standard pour souris/rat ( Prolab RMH2500, 5P14 Diet, PMI Nutrition International, Brentwood, MO) et de l'eau. Les SHR ont été divisés au hasard en traitements de contrôle et d'échantillon pour les déterminations de SBP et de DBP (six rats par groupe). Pour une expérience antihypertensive à court terme, 0,5 mL de 10 mg Act ou Iso-act/Kg de SHR ou 5 mg de captopril/Kg de SHR ont été administrés par voie orale une fois, et la pression artérielle de la queue a été mesurée à 2, 4, 6 et 24 h après une seule administration orale. L'eau distillée de 0,5 ml a été utilisée pour une expérience à blanc. Un tensiomètre indirect (BP-98A, Softron Co. Ltd. Tokyo, Japon) a été utilisé pour mesurer la PAS et la PAD quatre fois à chaque détermination pour chaque traitement.

Les données une analyse

Les valeurs sont présentées sous forme de moyennes ± SD et analysées à l'aide d'une ANOVA unidirectionnelle, suivie du test de Tukey post hoc pour des comparaisons de moyennes multiples. Les étudiantst-test a été effectué, lorsque seulement deux groupes de données ont été comparés (comme entre Act et Isoact à la même concentration). Une valeur de p <0.05 est="" considérée="" comme="" statistiquement="" significative.="" l'analyse="" statistique="" a="" été="" réalisée="" à="" l'aide="" de="" spss="" pour="" windows,="" version="" 10="" (spss,="" inc.,="" chicago,="" il,="">

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Résultats

Récupération activité de HPP et superoxyde radicaux

Act, Isoact et 6-O-acetylact présentait des activités de piégeage du DPPH dose-dépendantes à pH 7,9 (Figure 2). Les valeurs IC50 étaient de 11,4, 9,48 et 9,55 µM, respectivement, pour Act, Isoact et 6-O-acétylact. Les valeurs IC50 des témoins positifs d'acide ascorbique et de BHT étaient de 13,1 et 18,5 µM, respectivement.

Inhibition de xanthine oxydase activité

Act et Isoact se sont avérés présenter une inhibition dose-dépendante de la xanthine oxydase (Figure 3). L'IC50 a été calculée comme étant de 53,3 et 62,2 µM, respectivement, pour Act et Isoact.

Inhibition de superoxyde dismutase activité

Comme Act et Isoact inhibent tous deux l'activité de la xanthine oxydase, nous avons utilisé le système PMS-NADH pour générer des radicaux superoxydes (Liu et al., 2004 ; Lin et al., 2008). Loi,

Isoact, et 6-O-acetylact présentait des activités de piégeage des radicaux superoxydes dose-dépendantes (Figure 4). Les valeurs IC50 étaient de 66,0, 38,5 et 39,1 µM, respectivement, pour Act, Isoact et 6-O-acétylact. Les valeurs IC50 du contrôle positif de l'acide ascorbique étaient de 9,0 µM. D'après les résultats des figures 2 et 4, il était clair qu'Isoact et 6-O-l'acétylate avait des activités similaires de piégeage des radicaux contre les radicaux DPPH et superoxyde, et donc seuls Act et Isoact ont été sélectionnés pour d'autres criblages d'activité biologique.

As inhibiteur Activités de Loi et Isoacte

Dans le test préliminaire, nous avons constaté que Act et Isoact interféraient avec l'absorbance du substrat ACE FAPGG et de son produit hydrolysé FAP à 345 nm tel qu'utilisé pour le dosage spectrophotométrique en continu (Holmquist et al., 1979). Par conséquent, la séparation couplée à la détection d'Act ou d'Isoact et de FAPGG par HPLC a été utilisée pour surveiller les activités inhibitrices de l'ECA. La figure 5A à la figure 5D sont des chromatogrammes HPLC typiques de mélanges réactionnels de 10 µl d'un test à blanc (FAPGG uniquement, figure 5A) ; test de contrôle (ACE a réagi avec FAPGG pour produire FAP, figure 5B); 00,5 µmole d'Act (312,5 µg), ACE et FAPGG (Figure 5C) ; et 0,5 µmole d'Isoact (312,5 µg), ACE et FAPGG (figure 5D). La zone de FAPGG sur la figure 5B était la plus faible et celle sur la figure 5A la plus élevée des quatre chromatogrammes HPLC typiques. Les zones de FAPGG sur les figures 5C et 5D dépendent des activités inhibitrices de l'ECA de différentes concentrations d'Act et d'Isoact. Les inhibitions ACE calculées de Act et Isoact sont illustrées à la figure 5E. L'acte a montré des activités inhibitrices de l'ECA plus élevées qu'Isoact, et l'IC50 de l'ancien a été calculée à 472 µM par surface dans les chromatogrammes HPLC.

Inhibiteur activité de Loi et Isoacte contre Médiation AAPH hémolyse

Les activités inhibitrices de Act et Isoact contre l'hémolyse médiée par l'AAPH à des concentrations de 2, 5 et 10 µM ont été évaluées sur 3,5 h (Miki et al., 1987). Les résultats de la figure 6A démontrent que l'hémolyse dans les globules rouges du rat a considérablement augmenté (exprimée en ΔA536 nm) après 3-h ou 3.5-h de réactions en présence de radicaux AAPH (en tant que groupes témoins, symbole de cycle blanc ). Peu ou pas d'hémolyse a été observée en l'absence de radicaux AAPH au cours de la réaction de 3,5-h (sous forme de groupes blancs, symbole de cycle noir). Par conséquent, l'inhibition de l'hémolyse de Act et Isoact à 3 h ou à 3,5 h a été calculée comme suit : (ΔA536 nmcontrol - ΔA536 nmsample) ÷ ΔA536 nmcontrol × 100. Figure 6B

montre qu'Act et Isoact à 2, 5 et 10 µM ont présenté une inhibition dépendante de la concentration sur l'hémolyse induite par l'AAPH, les effets inhibiteurs d'Act étant significativement plus forts que ceux d'Isoact à chaque concentration utilisée.

Antihypertenseur effets de Loi et Isoacte sur SHR

Les SHR ont reçu une seule administration orale d'Act et d'Isoact (10 mg/Kg SHR), et les changements de PAS et de DBP ont été enregistrés sur 24 h. Nous avons précédemment signalé que la pression artérielle (SBP et DBP) des SHR était variable pendant 24-h (Lin et al., 2006 ; Han et al., 2011). Par conséquent, une comparaison à un moment fixe (tel que 2, 4, 6, 8 et 24 h) entre le blanc et l'échantillon au lieu d'avant et après l'administration orale elle-même a été utilisée. Il a été constaté que Act, mais pas Isoact, réduisait efficacement la SBP et la DBP des SHR par rapport au groupe témoin (eau distillée). La PAS a été significativement réduite dans le groupe Act à 2, 4 et 6 h de 18,8, 16,5 et 14,9 mmHg, respectivement, mais la réduction de la PAS (3,3 mmHg) à 24 h après le traitement par Act n'a pas été établie.

artistiquement significatif (figure 7A). Comme le montre la figure 7B, la DBP a diminué dans le groupe Act à 2, 4 et 6 h (de 8,5, 7,6 et 12, 0 mmHg, respectivement), bien que seul le résultat obtenu à 6 h ait été statistiquement significatif (P< 0.05).="" il="" a="" été="" noté="" que="" act="" et="" le="" captopril="" (en="" tant="" que="" contrôle="" positif)="" avaient="" des="" effets="" similaires="" sur="" la="" pas="" à="" des="" stades="" précoces="" (2,="" 4="" et="" 6="" h)="" après="" l'administration="">

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DISCUSSION

Les espèces actives de l'oxygène et les réactions induites par les radicaux libres sont impliquées dans des processus dégénératifs ou pathologiques tels que le vieillissement, le cancer, les maladies coronariennes et la maladie d'Alzheimer (Ames, 1983 ; Gey, 1990 ; Smith et al., 1996). Plusieurs rapports se sont concentrés sur le dépistage desantioxydantactivités à partir des ressources naturelles. Dans la présente étude, nous avons d'abord comparé lesantioxydantactivités d'Act, Isoact et 6-O-acétylé. Act et Isoact sont des isomères structuraux dans lesquels le constituant de la fraction acide caféique est lié au groupe hydroxyle C-4 du glucose dans le premier et au groupe hydroxyle C-6 du glucose dans le second. Alors que les constituants du rhamnose et du 3',4'-dihydroxy phényl éthanol, respectivement, sont liés aux groupes hydroxyle C-3 et C-1 de la fraction glucose dans la même molécule Act et Isoact, { {8}}O-acetylact est un dérivé Act dans lequel l'acide acétique est lié au groupe hydroxyle C-6 dans la fraction glucose (Figure 1). Koo et al. (2006) ont rapporté que Act et ses aglycones présentaient des activités de piégeage du DPPH, et l'ordre de ces activités (exprimé en IC50) était Act (1,28 µM) > acide caféique (2,22 µM) > 3',4'-dihydroxy phényl éthanol ( 7,72 µM) > -tocophérol (15,1 µM). Dans le présent rapport (Figure 2), l'ordre des activités de piégeage du DPPH (exprimé en IC50) est 6-O-acétylate (9,55 µM) ≈ Isoact (9,48 µM) > Act (11,4 µM). Ces valeurs étaient comparables ou meilleures que celles de l'acide ascorbique (IC50 de 13,1 µM) et du BHT (IC50 de 18,5 µM) pour piéger les radicaux DPPH. L'IC50 plus élevée d'Act dans le présent rapport pourrait provenir de la concentration finale de 60 µM de DPPH au lieu des 30 µM utilisés par Koo et al. rapporté (2006). Comme le dosage des radicaux DPPH appartient à la réaction de transfert d'électrons (Huang et al., 2005), on suppose que le dérivé dans le groupe hydroxyle C-6 du fragment glucose, tel que le groupe acétyle dans {{21 }}O- les fragments acétylate et acide caféique d'Isoact peuvent fournir plus facilement une réaction de transfert d'électrons que ceux du groupe hydroxyle libre C-6 dans le fragment glucose d'Act pour le test de piégeage du DPPH.

Agis, 6-O-acetylate et Isoact ont été signalés comme possédant une activité de piégeage des superoxydes in vitro en utilisant le système xanthine/xanthine oxydase pour générer des radicaux superoxydes (Wang et al., 1996; Gao et al., 1999). Cependant, notre étude actuelle a indiqué que Act présentait des activités inhibitrices de la xanthine oxydase (Figure 3). Par conséquent, le radical superoxyde a été généré en utilisant le système PMS-NADH dans le présent rapport (Liu et al., 2004 ; Lin et al., 2008) au lieu du système xanthine/xanthine oxydase. En effet, en utilisant le système xanthine/xanthine oxydase pour générer des radicaux superoxydes, Wang et al. (1996) ont obtenu une IC50 de 63 µM Act contre les radicaux superoxydes, et cette valeur est proche de celle de l'inhibition de l'activité xanthine oxydase par Act, telle que rapportée dans la présente étude (53,3 µM). Il a été rapporté que l'acide caféique présentait des activités inhibitrices de la xanthine oxydase (Chiang et al., 1994). On peut supposer que les activités de piégeage des superoxydes utilisant le système générateur de xanthine/xanthine oxydase de certains composés phytochimiques avec des structures associées aux acides caféiques, comme Act ou Isoact (Wang et al., 1996 ; Gao et al., 1999), peuvent avoir contribué, au moins en partie, aux inhibitions de la xanthine oxydase. Fait intéressant, Wang et al. (1996) ont découvert que Act (0,5 et 2,5 mM) n'inhibait pas l'activité de la xanthine oxydase qui était déterminée par une électrode à oxygène pour les consommations d'oxygène pendant l'oxydation de la xanthine. Ainsi, il est important de garder à l'esprit que différentes méthodes de dosage de l'activité de piégeage du superoxyde peuvent produire des données contradictoires.

Li et al. (1993) ont rapporté un degré similaire d'inhibition de Act et Isoact contre l'hémolyse médiée par l'AAPH dans les globules rouges de souris. Cependant, nous avons montré ici qu'Act présentait une activité inhibitrice beaucoup plus élevée contre l'hémolyse induite par l'AAPH dans les globules rouges de rats qu'Isoact (Figure 6). Il n'est pas clair si une telle incohérence peut être due à la différence entre les espèces de rongeurs.

Kang et al. (2003) ont rapporté qu'Act présentait des activités inhibitrices de l'ECA et que l'IC50 était de 373,3 µg/mL, ce qui a été calculé à 598 µM en utilisant Hip-His-Leu comme substrats. Dans le présent rapport, l'Act a montré des activités inhibitrices de l'ECA plus élevées que l'Isoact, et l'IC50 de l'ancien a été calculée à 472 µM par zone dans les chromatogrammes HPLC (Figure 5). Il a été rapporté que l'acte exerce des effets relaxants médiés par l'oxyde nitrique sur les anneaux aortiques intacts de l'endothélium des rats SD (Wong et al., 2001). Bien qu'il ait été démontré qu'Act est antihypertenseur chez les rats Wistar,

l'étude a utilisé l'injection intraveineuse d'Act chez un rat anesthésié afin d'exclure le facteur d'adsorption (Ahmad et al., 1995). Ici, nous avons administré Act oralement aux SHR et déterminé les changements de pression artérielle. Nous avons constaté que le fait de l'administration orale, mais pas d'Isoact, présentait des effets antihypertenseurs en abaissant la PAS et la PAD sur 24 h après une seule administration (Figure 7). Agir à la dose de 10 mg/kg de poids corporel a eu un effet proche de celui du captopril à la dose de 5 mg/kg SHR sur la baisse de la PAS et a été meilleur que le captopril sur la baisse de la PAD.

En conclusion, Act exposéantioxydantactivités, les activités inhibitrices de l'ECA et les effets antihypertenseurs sur les SHR. Les résultats présentés ici bénéficieront à l'effort de développement de médicaments à base de plantes ou de produits apparentés utilisant la loi, qui a été trouvée dans de nombreuses plantes et médicaments à base de plantes, pour une protection antioxydante et des effets thérapeutiques à l'avenir.

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1Département des sciences de l'alimentation et de la biotechnologie, Université nationale Chung Hsing, Taichung, Taïwan

2Ko Da Pharmaceutical Co., Ltd, Tao-Yuan, Taïwan

3École de pharmacie, Université médicale de Taipei, Taipei, Taïwan

4Institut supérieur des matériaux et de l'ingénierie biomédicaux, Université médicale de Taipei, Taipei, Taïwan

5Traditional Herbal Medicine Research Center, Taipei Medical University Hospital, Taipei, Taïwan

6Institut supérieur de pharmacognosie, Université médicale de Taipei, Taipei, Taïwan

(Reçu le 12 mars 2012; accepté le 20 avril 2012)

OUVRAGES CITÉS

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