Activité antioxydante, profil phénolique et potentiel néphroprotecteur des extraits éthanoliques et aqueux d'Anastatica Hierochuntica contre la néphrotoxicité induite par CCl4-chez le rat

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Résumé:Kaff-e-Maryam (Anastatica hierochuntica L.) est largement utilisé pour traiter une gamme de problèmes de santé, notamment pour faciliter l'accouchement et atténuer les troubles liés au système reproducteur. Cette étude visait à évaluer l'effet de l'extraction éthanolique (KEE) et aqueuse (KAE) d'A. hierophantic CCl 4- induite par le stress oxydatif et la néphrotoxicité chez le rat en utilisant les marqueurs biochimiques des fonctions rénales etantioxydantstatut ainsi que des examens histopathologiques des tissus rénaux.A. hiérophantique contenait 67,49 mg de GAE g−1 dedes composés phénoliques(TPC), 3,51 µg g−1 de caroténoïdes totaux (TC) et 49,78 et 17,45 mg QE g−1 de flavonoïdes totaux (TF) et de flflavonols totaux (TFL), respectivement. Il en est résulté 128,71 µmol de TE g−1 de DPPH-RSA et 141,92 µmol de TE g−1 de ABTS-RSA. A. hierophantic a présenté une activité antioxydante supérieure en inhibant les radicaux d'acide linoléique et en chélatant les métaux d'oxydation. L'analyse HPLC a donné 9 et 21acides phénoliqueset 6et 2flavonoïdesdans KEE et KAE avec une prédominance des acides sinapique et syringique, respectivement. Injection intramusculaire de vit. E plus Se et l'administration orale de KEE, KAE et KEE plus KAE à 250 mg kg-1 de poids corporel ont significativement restauré les taux sériques de créatinine, d'urée, de K, de protéines totales et d'albumine. De plus, ils ont réduit le malondialdéhyde (MOD), restauré le glutathion réduit (GSH) et amélioré les niveaux de superoxyde dismutase (SOD). KEE, KAE et KEE plus KAE ont protégé les reins de la néphrotoxicité CCl4-car ils ont principalement atténué le stress oxydatif induit. La néphroprotection totale était d'environ 83,27 %, 97,62 % et 78,85 % pour KEE, KAE et KEE plus KAE, respectivement. Les extraits vit.E plus Se et A. hierophantic ont atténué l'altération histopathologique chez les rats traités au CCl4-. En conclusion, A. hierophantic, en particulier KAE, a la capacité potentielle de restaurer la stabilité oxydative et d'améliorer la fonction rénale après une lésion rénale aiguë CCl4 mieux que KEE. Par conséquent, A. hierophantic a le potentiel d'être un agent thérapeutique utile dans le traitement de la néphrotoxicité induite par les médicaments.

Mots clés:Kaff-e-Maryam ; polyphénols; bioactivité; métabolites secondaires; marqueurs rénaux;enzymes antioxydantes; dysfonctionnement rénal

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Introduction

L'insuffisance rénale est la 9ème cause de décès avec plus de 1 sur 7, c'est-à-dire 15% des adultes américains ou 37 millions de personnes, sont estimés avoir une maladie rénale chronique (CKD) [1]. Remarquablement, la cause la plus fréquente d'IRC enregistrée en 2015 est le diabète sucré suivi de l'hypertension artérielle et de la glomérulonéphrite [2]. Les autres causes d'IRC sont idiopathiques (souvent associées à de petits reins à l'échographie rénale) [3]. Auparavant, le CCl4 était utilisé pour le dégraissage des métaux, le nettoyage à sec, le détachage des tissus, les liquides d'extinction d'incendie et la fumigation des céréales [4]. Il provoque des troubles graves du foie, des poumons et des testicules ainsi que du sang en générant des radicaux libres actifs [5]. Selon les conclusions d'Ogeturk et al. [6], l'exposition à ce solvant produit des lésions rénales aiguës et chroniques. On pense que la peroxydation lipidique induite par les radicaux libres est l'une des principales causes de lésions de la membrane cellulaire, conduisant à une variété de conditions pathologiques [7]. La génération de radicaux réactifs a été impliquée dans la néphrotoxicité induite par CCl4-, qui est impliquée dans la peroxydation des lipides et l'accumulation de protéines dysfonctionnelles, entraînant des lésions rénales [8]. Les usages étonnants et traditionnels des plantes médicinales se sont multipliés ces dernières années, et de nombreuses investigations ont confirmé leur rôle thérapeutique contre plusieurs maladies [9-12]. Kaff-e-Maryam (Anastatica hierochuntica) est une plante médicinale du désert qui appartient à la famille des Brassicaceae. Il pousse dans diverses régions du monde, en particulier dans les pays arabes (par exemple, Arabie saoudite, Égypte, Oman, Libye, Irak, Émirats arabes unis, Koweït) ainsi que dans certains pays asiatiques, européens et africains. A. hierophantic est censé avoir des potentiels médicaux supérieurs et est de préférence consommé pour diverses conditions médicales [13]. Il est principalement utilisé pour faciliter le processus d'accouchement et pour traiter les troubles liés au système reproducteur et les troubles métaboliques, principalement le diabète sucré [14]. Il est utilisé comme analgésique et comme traitement de l'épilepsie, des troubles gastro-intestinaux, de l'arthrite, de l'asthme bronchique, des aphtes, du paludisme et de la dépression mentale [15–17]. A. hierophantic contient des quantités importantes de minéraux, tels que Mg, Ca, Mn, Fe, Cu et Zn, qui sont comparables ou supérieurs à ceux de nombreuses plantes médicinales, ce qui peut conférer des propriétés de chélation des métaux [18]. Yoshikawa et al. [19] ont conclu que la présence de flavanones, telles que Anastasia A et B, est corrélée à de puissants effets hépatoprotecteurs en inhibant la cytotoxicité induite par la D-galactosamine dans les hépatocytes de souris en culture primaire. La production d'espèces réactives de l'oxygène (ROS) et de cytokines telles que le facteur de nécrose tumorale et l'interleukine-1 par les cellules de Kupffer dans le foie contribue à la destruction des hépatocytes dans l'hépatotoxicité de la D-galactosamine [20]. Les propriétés antioxydantes et anti-inflammatoires des composants d'A. hierophantic peuvent aider à réduire l'hépatotoxicité induite par la D-galactosamine [21]. A. hierophantic peut se permettre un extrait en fonction de la protection contre l'hépatotoxicité CCl4- [22]. Cependant, malgré la littérature montrant des potentialités prometteuses liées à l'utilisation d'A. hierophantic, le potentiel néphroprotecteur des extraits éthanoliques (KEE) et aqueux (KAE) d'A. hierophantic doit être soigneusement examiné. Par ailleurs, la revue de la littérature a principalement mis en évidence l'efficacité hépatoprotectrice d'A. hierophantic, mais le potentiel néphroprotecteur n'a pas été étudié jusqu'à présent, motivant ainsi ce travail. Par conséquent, l'étude actuelle vise à observer les changements dans les enzymes de défense antioxydante, à détecter les altérations de la microscopie rénale après l'administration de CCl4 chez le rat et à étudier les effets protecteurs possibles des extraits d'A. hierophantic contre les dommages rénaux induits par CCl4-.

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2. Matériels et méthodes

2.1. Préparation de l'échantillon Un échantillon de la plante Kaff-e-Maryam (A. hierophantic L.) a été acheté sur un marché indigène de la ville de Buraydah, région de Qassim, Arabie saoudite. Le matériel végétal a été authentifié par le Department of Plant Production and Protection, College of Agriculture and Veterinary Medicine, Qassim University, Saudi Arabia. L'échantillon a été lavé à l'eau claire du robinet pour éliminer le sable et la saleté des feuilles, puis le matériel végétal séché à l'air (à 28 ± 1 ◦C pendant 48 h.) a été réduit en poudre mécaniquement et conservé dans des sacs en polyéthylène opaques à 4 ± 1 ◦C jusqu'à utilisation. 2.2. Préparation des extraits éthanoliques et aqueux Environ 200 g d'A. hierophantic séché ont été extraits avec 3{{1{{106}}4}}0 mL 7{{150}} % d'éthanol dans un extracteur Soxhlet pour préparer l'extraction éthanolique (KEE). L'extrait a été concentré à l'évaporateur rotatif à 40 ◦C pour évaporer le solvant restant, puis à sec sous un courant de N2. L'extraction aqueuse (KAE) a été réalisée comme décrit par Asuzu [23] avec des modifications mineures. Deux cents grammes de matériel végétal séché ont été ajoutés à 500 ml d'eau distillée stérile chaude. Le mélange a ensuite été bien agité et laissé au repos pendant 1 h. Ensuite, un condenseur à reflux a été fixé au ballon, puis chauffé jusqu'à ébullition douce pendant 10 minutes, refroidi, bien agité et filtré à travers du papier filtre Whatman n° 1. Le filtrat est évaporé à l'évaporateur rotatif, puis à sec sous courant de N2. Les extraits alcoolique et aqueux (250 mg mL-1 ) ont été fraîchement formulés dans de l'eau distillée pour être utilisés par voie orale. 2.3. Teneur Phénolique Totale (TPC) La teneur en TPC d'A. hierophantic a été déterminée selon la méthode adaptée de Bettaieb et al. [24]. Les résultats ont été comparés à une courbe standard d'acide gallique (GA) tracée dans la plage de 50 à 500 mg mL−1 (R2=0.99), et le TPC a été calculé en mg d'équivalent d'acide gallique (GAE ) par gramme d'A. hierophantic (mg de GAE g−1 ). 2.4. Caroténoïdes totaux (TC), Flavonoïdes totaux (TF) et Flavonols totaux (TFL) Comme indiqué par Al-Qabba et al. [10], 5 g d'A. hierophantic ont été extraits à plusieurs reprises avec un mélange d'acétone et d'éther de pétrole (1:1, v/v). La teneur totale en caroténoïdes (TC) a été déterminée par spectrophotométrie à 451 nm. TC a été exprimé en mg g−1 DW. La teneur en TF d'A. hierophantic a été dosée selon le protocole décrit par Mohdaly et al. [25]. La teneur en TF a été calculée en mg d'équivalent de quercétine (QE) pour 100 g-1 de poids sec. Dans le même contexte, le contenu TFL a été réalisé [26]. L'absorbance à 440 nm a été enregistrée et le TFL a été calculé en mg d'équivalent de quercétine (QE) pour 100 g-1 DW. 2.5. Détermination de la capacité antioxydante Essai de piégeage des radicaux DPPH : Le RSA a été testé par spectrophotométrie en fonction du blanchiment de la solution de couleur violette DPPH selon une technique modifiée par Lu et al. [27]. La capacité antiradicalaire a été présentée en µmol d'équivalents Trolox (TE) par gramme d'A. hierophantic (µmol TE g−1 ). Activité de piégeage des radicaux ABTS : Le RSA d'A. hierophantic contre les radicaux ABTS a été testé par la méthode adaptée de Lu et al. [27]. Les résultats ont été exprimés en µmol TE g−1. Dosage de blanchiment de l'acide -carotène-linoléique : Le pourcentage d'antioxydants d'A. hierophantic a été évalué en termes de blanchiment du -carotène par rapport à l'hydroxyanisole butylé (BHA) en appliquant un protocole spectrophotométrique adapté désigné par Koleva et al. [28] ; les résultats ont été donnés en pourcentage lié au BHA. Action chélatrice d'A. hierophantic sur les ions ferreux : L'activité chélatrice d'A. hierophantic a été mesurée selon le protocole de Zhao et al. [29]. Le pourcentage d'inhibition de la création de complexe ferrozine-Fe2 plus en tant qu'action de chélation des métaux a été mesuré et présenté en mg mL-1 lorsque l'acide éthylènediaminetétraacétique (EDTA) a été utilisé comme contrôle positif. 2.6. Fractionnement des composés polyphénoliques d'extraits aqueux et éthanoliques d'A. hierophantic La détermination des polyphénols à partir d'extraits éthanoliques et aqueux a été réalisée par un système HPLC HP1100 (Agilent Technologies, Palo Alto, CA, USA) équipé d'un échantillonneur automatique, d'une pompe quaternaire et d'un réseau de diodes détecteur (Hewlett Packard 1050) utilisant une colonne (Altima C18 150 × 4,6 mm, 5 µm) avec une colonne de garde Altima C18 de 5 mm (Alltech, Nettetal, Allemagne) selon Goupy et al. [30]. Le système de solvant utilisé était un gradient de A (acide acétique 2,5 pour cent), B (acide acétique 8 pour cent) et C (acétonitrile). Le taux de solvant était de 1 mL min−1 et la séparation a été effectuée à 35 ◦C. Le volume injecté était de 10 µL. Les composés phénoliques ont été dosés par étalonnage standard externe et exprimés en mg g−1 DW d'équivalents ( plus )-catéchine pour les flavan-3-ols et d'équivalent coumarine pour les composés aromatiques polaires. Une variabilité de 8 % a été déterminée sur cinq extractions de composés phénoliques à partir du même échantillon. Toutes les valeurs étaient la moyenne des injections en double. Les polyphénols et leurs dérivés ont été identifiés et quantifiés à 280 et 320 nm, tandis que les flavonoïdes ont été identifiés à 360 nm. 2.7. Conception expérimentale Toutes les expériences ont été approuvées par le Comité institutionnel d'éthique animale (IAEC) de QU (No. 15-4-2017), KSA, qui est réglementé par le Comité de l'objet du contrôle et de la supervision des expériences sur les animaux (CPCSEA) sous le Comité national de bioéthique (NCBE), Règlement d'application de la loi d'éthique de la recherche sur les êtres vivants. Un total de 36 rats mâles albinos ont été utilisés dans l'étude actuelle et divisés en 6 groupes de 6 animaux chacun et traités comme suit : le groupe I (contrôle) a reçu une injection intrapéritonéale (ip) d'huile d'olive (1,0 mL kg-1 deux fois par semaine) et 0,5 ml d'eau distillée par voie orale/quotidienne pendant 21 jours consécutifs. Le groupe II a reçu une injection ip d'un mélange frais de volumes égaux de CCl4 et d'huile d'olive (à une dose de 1,0 mL kg-1 deux fois par semaine) et 0,5 mL d'eau distillée par voie orale/quotidienne selon Al-Qabba et al. [10] avec des modifications mineures. Le groupe III (groupe de référence) a reçu une injection intramusculaire (im) de 50 mg kg-1 vit. E plus Se (Selepherol, Vetoquinol Co., Magny-Vernois, France) deux fois par semaine, selon Asuka et al. [31] et El-Desoky et al. [32], et 0,5 ml d'eau distillée par voie orale/quotidienne. Le groupe IV a servi de test et a reçu 250 mg kg-1 de KEE par voie orale/quotidienne avec CCl4 ip deux fois par semaine. Le groupe V a reçu 250 mg kg-1 de KAE par voie orale/quotidienne avec CCl4 ip deux fois par semaine. Le groupe VI a reçu 250 mg kg -1 de KEE plus KAE (1: 1) par voie orale / quotidienne avec CCl4 ip deux fois par semaine. Vingt-quatre heures après le dernier traitement (jour 21), les rats ont été anesthésiés par le mélange (alcool : chloroforme : éther, 1 : 2 : 3). Des échantillons de sang provenant d'une ponction cardiaque ont été prélevés pour tous les animaux, et le sérum a été séparé par centrifugation à 4000 tr/min pendant 10 min et conservé à -20 ◦C pour examen biochimique. 2.7.1. Analyse biochimique des reins Les concentrations sériques de créatinine, d'urée, de protéines totales et d'albumine ont été déterminées par des méthodes spectrophotométriques automatisées (autoanalyseur BM/Hitachi-911 ; Boehringer Mannheim, Allemagne) conformément aux instructions du fabricant. Les niveaux de potassium ont été déterminés par photométrie de flamme à 766 nm. 2.7.2. Estimation de l'activité antioxydante rénale Après le prélèvement des échantillons de sang, les animaux de tous les groupes ont été sacrifiés ; les reins droits ont été rapidement isolés et rincés avec une solution saline glacée. Le tissu a ensuite été coupé, rincé dans une solution saline froide, essuyé et placé immédiatement sur de la glace. En utilisant un homogénéisateur de tissu électrique, des portions de tissu (1,0 g) ont été pesées et homogénéisées avec 9 volumes de tampon phosphate 0,05 M glacé à pH 7,4. Les débris cellulaires ont été éliminés par centrifugation à 12 000 tr/min (4 ◦C) pendant 20 min pour recueillir les surnageants afin de déterminer la concentration de malondialdéhyde (MDA) [33], l'activité de la superoxyde dismutase (SOD) [34] et la teneur réduite en glutathion (GSH) [ 35]. La concentration en protéines dans l'homogénat de rein a été déterminée en utilisant la méthode de Bradford [36]. 2.7.3. Pourcentage de néphroprotection Les pourcentages de néphroprotection (F) de vit. E plus Se, KEE, KAE et KEE plus KAE ont été calculés séparément pour chaque paramètre biochimique selon Wakchaure et al. [37] en utilisant l'équation suivante : F pourcentage=[1 − (T − N) (C − N)] × 100 (1) où T=valeur moyenne du groupe de traitement, C {{ 171}} valeur moyenne du groupe témoin positif et N= valeur moyenne du groupe témoin négatif. De plus, le pourcentage total de néphroprotection (pourcentage TFP) y a été comparé. E plus Seas suit TFP pour cent=Somme de F pour cent des paramètres biochimiques de chaque extrait somme de F pour cent des paramètres biochimiques de celui-ci. E plus Se × 100 (2) 2.7.4. Études histopathologiques Des échantillons d'autopsie ont été prélevés du rein gauche de groupes distincts de rats et fixés dans une solution saline de formol à 10 % pendant 24 h. Le lavage à l'eau du robinet a été suivi d'une déshydratation avec des dilutions en série d'alcool (méthyle, éthyle et éthyle absolu). Les spécimens ont été nettoyés dans du xylène et inclus dans de la paraffine pendant 24 h à 56 ◦C dans un four à air chaud. Des blocs de tissu de cire d'abeilles en paraffine ont été préparés pour être sectionnés à une épaisseur de 4- microns à l'aide d'un microtome à traîneau. Des tranches de tissu ont été recueillies sur des lames de verre, déparaffinées et colorées à l'hématoxyline et à l'éosine pour une inspection régulière au microscope électrique léger [38]. 2.8. Analyse statistique Les résultats sont présentés sous forme de moyenne ± erreur standard (SE). La signification des différences entre les moyennes dans divers groupes a été examinée à l'aide d'une analyse de variance à un facteur (ANOVA) suivie du test de Duncan, et une valeur p parmi les moyennes a été donnée au niveau p < 0,05="" [39].="" 3.="" résultats="" 3.1.="" phytochimiques="" et="" capacité="" antioxydante="" d'a.="" hierophantic="" l'analyse="" quantitative="" des="" composés="" phytochimiques="" d'a.="" hierophantic="" et="" des="" activités="" antioxydantes="" associées="" à="" l'aide="" du="" piégeage="" des="" radicaux="" dpph="" et="" abts,="" des="" activités="" de="" blanchiment="" de="" l'acide="" -carotène-linoléique="" et="" de="" la="" capacité="" de="" chélation="" (ca)="" a="" été="" réalisée.="" comme="" on="" peut="" le="" voir="" clairement="" dans="" le="" tableau="" 1,="" la="" teneur="" en="" tpc="" était="" de="" 67,49="" mg="" gae="" g-1.="" la="" teneur="" en="" tc="" était="" de="" 3,51="" µg="" g−1.="" les="" teneurs="" en="" tf="" et="" tl="" étaient="" de="" 49,78="" et="" 17,45="" mg="" qe="" g-1,="" respectivement.="" de="" plus,="" dpph-rsa="" et="" abts-rsa="" ont="" été="" utilisés="" pour="" mesurer="" la="" progression="" des="" activités="" antioxydantes.="" les="" résultats="" ont="" indiqué="" 128,71="" µmol="" de="" te="" g-1="" et="" 141,92="" µmol="" de="" te="" g-1="" pour="" dpph-rsa="" et="" abts-rsa,="" respectivement.="" de="" plus,="" l'activité="" antioxydante="" (aoa)="" d'a.="" hierophantic="" est="" présentée="" dans="" le="" tableau="" 1.="" le="" pourcentage="" d'inhibition="" des="" radicaux="" d'acide="" linoléique="" a="" été="" calculé="" à="" 45,74="" %="" par="" rapport="" au="" bha="" en="" utilisant="" le="" test="" de="" blanchiment="" au="" carotène="" (-cb).="" de="" plus,="" l'évaluation="" de="" l'activité="" de="" chélation="" des="" métaux="" a="" révélé="" 42,89="" mg="" g−1,="" ce="" qui="" semble="" être="" capable="" d'interférer="" avec="" la="" formation="" du="" complexe="" fe2="" plus="" –ferrozine,="" indiquant="" sa="" capacité="" à="" chélater="" les="" métaux="" d'oxydation.="" tableau="" 1.="" contenu="" phénolique="" total,="" caroténoïdes="" totaux,="" flavonoïdes="" totaux,="" flflavonols="" totaux="" et="" activités="" antioxydantes="" potentielles="" relatives="" d'a.="" hierophantic="" (moyenne="" ±="" se),="" n="">

3.2. Quantification des composés phénoliques d'A. hierophantic L'analyse quantitative des composés phénoliques pour KEE et KAE par analyse HPLC a été effectuée et les données sont présentées dans le tableau 2. Neuf acides phénoliques séparés et six flavonoïdes ont été identifiés en quantités détectables à partir du KEE d'A. hiérophantique. Les acides phénoliques les plus abondants étaient les acides hydroxycinnamiques comme l'acide sinapique (28,704 mg 1{{50}}0 g−1 ) suivi de l'acide caféique (6,621 mg 1{ {63}}0 g−1 ), acide rosmarinique (2,884 mg 100 g−1 ), acide férulique (1,854 mg 10{{85} } g−1 ), et l'acide cinnamique (0.094 mg 100 g−1 ); et les acides hydroxy-benzoïques tels que l'acide p-hydroxybenzoïque (3,440 mg 100 g-1 ), l'acide protocatéchuique (1,811 mg 100 g-1 ), l'acide vanillique (3,326 mg 100 g-1 ) et l'acide syringique (1,083 mg 100 g-1 −1 ). Flavonoïdes tels que la myricétine (16,269 mg 100 g−1 ), la D-catéchine (2,410 mg 100 g−1 ), le kaempférol (0,434 mg 100 g−1 ), la rutine (0,539 mg 100 g−1 ), l'apigénine{{58} }glucoside (0,192 mg 100 g−1 ) et quercétine (0,184 mg 100 g−1 ) des quantités inestimables ont été détectées. Les composés phénoliques dans le KAE d'A. hierophantic ont également été déterminés et les données sont présentées dans le tableau 2. L'acide syringique a été enregistré comme l'acide phénolique le plus élevé parmi les 21 composés phénoliques identifiés. Le catéchol et le pyrogallol étaient respectivement de 2,526 et 1,589 mg 100 g−1. Les données ont indiqué que certains acides phénoliques tels que les acides caféique, catéchine, chlorogénique, épicatéchine, e-vanillique, p-hydroxybenzoïque et protocatéchuique ont été détectés en quantités modérées de 0,725, 0,256, 0,136, 0,193, 0,443, 0,223 et 0,454 mg 100 g−1, respectivement. Dans le même contexte, de faibles quantités de 3,4,5-triméthoxycinnamique, 4-aminobenzoïque, benzoïque, cinnamique, coumarine, ellagique, férulique, gallique, iso-férulique, -coumarique, p-coumarique et les acides salicyliques ont été quantifiés après avoir été identifiés. L'épicatéchine et la D-catéchine en tant que flavonoïdes ont également été quantifiées dans le KAE d'A. hierophantic.

3.3. Taux sériques de créatinine, d'urée, de K, de protéines totales et d'albumine L'injection de CCl4 a considérablement augmenté les taux sériques de créatinine, d'urée et de k chez les rats GII par rapport aux rats témoins (GI). À l'inverse, les taux de protéines totales et d'albumine ont diminué de manière significative chez les rats traités au CCl 4- (tableau 3). Vit. Les extraits E plus Se et A. hierophantic (G III, IV, V et VI) ont considérablement réduit les altérations de la créatinine et de l'urée causées par l'injection de CCl4, tout en augmentant l'albumine et les protéines totales pour être proches des valeurs normales en GI (tableau 3 ). Le taux sérique de k a été nettement augmenté chez les rats traités au CCl 4- (GII) par rapport au GI (tableau 3). L'injection de vit. E plus Se et l'administration d'extraits alcooliques et aqueux d'A. hierophantic (G IV, V et VI) ont également amélioré positivement le niveau k par rapport à GI (tableau 3).

3.4. Biomarqueurs antioxydants rénaux Comme le montre le tableau 4, l'administration de CCl4 a significativement réduit les niveaux de SOD et de GSH et a augmenté le niveau de MDA dans le tissu d'homogénat de rein GII. Cependant, par rapport à GI, les rats traités à la fois avec vit. Les extraits E plus Se et A. hierophantic (GIII, VI, V et VI) ont montré une amélioration substantielle de l'activité des enzymes antioxydantes SOD et GSH, ainsi qu'une réduction des niveaux de MDA (tableau 4). L'extrait alcoolique d'A. hierophantic (GIV) a surpassé l'extrait aqueux d'A. hierophantic (GV) et a combiné les extraits alcooliques et aqueux d'A. hierophantic pour atténuer les niveaux d'antioxydants et combattre le processus d'auto-oxydation a entraîné de faibles niveaux de MDA par rapport au GI.

3.5. Pourcentage de néphroprotection Le pourcentage de néphroprotection (par rapport aux groupes de contrôle négatif (GI) et positif (GII)) des fonctions rénales telles que la créatinine, l'urée, le k, le TP et l'albumine ainsi que les activités antioxydantes dans l'homogénat de rein (MDA, SOD, GSH ) est illustré dans le tableau 5. Le pourcentage de néphroprotection a enregistré la valeur la plus élevée en tant que créatinine, urée, k dans GIII, TP et albumine dans GV, MDA et GSH dans GIII et SOD dans GV (tableau 5). Le pourcentage total de néphroprotection par rapport à la vit. Le traitement E plus Se a enregistré des niveaux maximaux dans le groupe traité par KAE (GV, 97,62 %), puis KEE (GIV, 83,27 %), puis KEE plus KAE (GVI, 78,85 %), comme le révèle le tableau 5.

Discussion

agents antioxydants supérieurs. Les substances polyphénoliques auraient des propriétés anti-cancérigènes et anti-mutagènes chez l'homme [40]. Une teneur en TPC valable chez A. hierophantic était légèrement supérieure à celle obtenue par Mohamed et al. [21] comme 51,97 mg GAE g−1 dans l'herbe A. hierochuntica et par AlGamdi et al. [41], qui ont trouvé 4 mmol L−1 GAE dans les graines d'A. hierophantic. Récemment, Zin et al. [42] ont indiqué la présence de tanins chez A. hierophantic en tant que composé bioactif et ont recommandé sa bioactivité, qui devait être étudiée en profondeur. La teneur en -carotène, en tant que partie des caroténoïdes totaux, était de 2,27 µg g−1 comme mentionné par Mohamed et al. [21], et même les résultats actuels présentaient des caroténoïdes totaux à 3,51 µg g−1. Des résultats similaires dans les teneurs en flavonoïdes et en flavonols ont été indiqués par Mohamed et al. [21]. Les composants biologiquement actifs, tels que les composés phénoliques, présentent une activité antioxydante sous forme de ruptures des réactions en chaîne d'oxydation des lipides en donnant de l'hydrogène aux radicaux libres actifs. Ce potentiel de piégeage des composés phénoliques pour inhiber les radicaux a été élucidé par leurs groupes hydroxyles phénoliques [8,10,22]. Cet acide phénolique a été décrit comme un composant antioxydant efficace, notamment le peroxyde d'hydrogène, le radical hydroxyle et l'anion superoxyde [43]. L'activité de chélation des métaux d'A. hierophantic semble être capable d'interférer avec la construction du complexe "Fe2 plus –ferrozine", suggérant sa capacité à capturer les ions "ferreux" avant "ferrozine". Une relation positive entre une augmentation de leur teneur en composés phénoliques est directement indiquée avec leur capacité antioxydante [42]. Andjelkovic et al. [44] ont établi l'activité de nombreux acides phénoliques pour former des complexes avec des métaux. Le TPC précieux et les activités antioxydantes pertinentes utilisant différentes approches de mesure donnent une assiette claire et confirment la bioactivité d'A. hierochuntica en tant qu'herbe médicinale pour les applications alimentaires ou de boissons. Les composants biologiquement actifs, tels que les composés phénoliques, présentent une activité antioxydante sous forme de ruptures des réactions en chaîne d'oxydation des lipides en donnant de l'hydrogène aux radicaux libres actifs [45]. Ce potentiel de piégeage des composés phénoliques pour inhiber les radicaux a été élucidé

composant antioxydant efficace, y compris le peroxyde d'hydrogène, le radical hydroxyle et l'anion superoxyde [43,45,47]. Les composés identifiés et quantifiés par HPLC dans KAE d'A. hierophantic étaient plus élevés que le nombre de composés identifiés dans KEE, mais les composés identifiés dans KEE d'A. hierophantic étaient présentés en quantités plus élevées [22]. Les résultats reflètent que la consommation d'A. hierophantic pourrait présenter de nombreux composants sous des formes polaires et non polaires. Ces résultats sont présentés de manière similaire par AlGamdi et al. [41] car ils ont identifié et quantifié 20 composés polyphénoliques dans les graines d'A. hierochuntica. L'extrait contenait des acides chlorogéniques et des acides hydroxybenzoïques, mais les composants principaux étaient les C-glycosides de flavone, les C-glycosides, les O-glycosides et les O-glycoside-C-glycosides se présentant principalement sous forme de conjugués de lutéoline. De plus, 14 des 20 composés contenus dans l'extrait d'A. hierophantic ont présenté une activité antioxydante à l'aide d'un système de détection d'antioxydants HPLC en ligne [41]. Fait intéressant, les données actuelles ont confirmé qu'A. hierophantic est riche en composés phytochimiques et est une bonne source d'antioxydants naturels avec des avantages potentiels pour la santé, comme cela a été à peine mis en évidence auparavant dans les graines [41]. Par conséquent, le thé préparé à partir de la poudre de plante entière est la forme traditionnelle de consommation ; les données ont illustré de nouveaux composés bioactifs identifiés dans KEE et KAE d'A. Hierochuntica, qui différaient de ceux trouvés dans AlGamdi et al. [41] Dans de nombreuses études, la néphrotoxicité induite par le CCl4-est utilisée comme système modèle pour tester l'effet néphroprotecteur des extraits de plantes/médicaments [48,49]. L'étude actuelle a examiné l'effet des extraits d'A. hierophantic sur les lésions rénales induites par le CCl4-, ainsi que sa néphroprotection et son potentiel antioxydant chez le rat. Dans l'étude actuelle, le groupe de traitement CCl4 (GII) a augmenté de manière significative les niveaux de créatinine, d'urée et de k et a diminué les concentrations totales de protéines et d'albumine par rapport au groupe GI. Cela pourrait être dû au fait que l'intoxication au CCl4 est une source majeure de production de radicaux libres dans de nombreux organes, notamment le foie, les reins, les poumons, le cerveau et le sang [50]. Il a également été observé que suite à l'injection de CCl4 chez le rat, la concentration de CCl4 est répartie plus uniformément dans les reins que dans le foie [51], car le rein a une forte affinité pour le CCl4 et contient du cytochrome P450, majoritairement dans le cortex. Les radicaux libres les plus courants du CCl4 sont le radical trichlorométhyle (CCl3• ) et le radical peroxyle trichlorométhyle (CCl3O2• ) [52]. Ces radicaux se fixent à une protéine intracellulaire, aux lipides de la membrane cellulaire et à l'ADN, provoquant une dénaturation des protéines, une peroxydation des lipides et des dommages oxydatifs à l'ADN qui conduisent à la mort cellulaire [53]. En revanche, traiter les rats CCl4- avec. Les extraits E plus Se (GIII) et A. hierophantic (GVI: VI) ont efficacement atténué ces augmentations des taux de créatinine et d'urée ainsi que l'augmentation de l'albumine sérique et des protéines totales pour être très proches de leurs niveaux dans le GI. Cela peut être dû aux propriétés antioxydantes et à la riche teneur en phénols des extraits d'A. hierophantic et à leur capacité antioxydante et à leur activité chélatrice. E plus Se, qui piège les radicaux libres, inhibant ainsi les dommages rénaux. Les composés phytochimiques sont les piégeurs de radicaux libres les plus efficaces et sont considérés comme des agents antioxydants supérieurs issus des plantes [54]. Les composés phénoliques les plus abondants étaient les acides hydroxycinnamiques, tels que l'acide sinapique, parmi les neuf composés phénoliques identifiés dans KEE, tandis que l'acide syringique était l'acide phénolique le plus élevé parmi les 21 acides phénoliques identifiés dans KAE. Six flflavonoïdes ont été identifiés dans KEE et deux dans KAE en utilisant l'analyse HPLC [55]. De plus, en tant qu'antioxydant, il. E est censé protéger les tissus contre les dommages causés par les métabolites réactifs de l'oxygène. Le sélénium est également reconnu comme un oligo-élément essentiel pour la santé humaine, protégeant les cellules des effets néfastes des radicaux libres [22]. Dans la présente étude, l'administration de CCl4 a nettement diminué le GSH et la SOD et augmenté les niveaux de MDA dans les homogénats rénaux par rapport au GI. Vit. Les extraits E plus Se et A. hierophantic ont amélioré les divers effets du CCl4 en restaurant l'activité altérée des agents antioxydants tels que la SOD et le GSH et peuvent désactiver le processus de production du MDA, comme cela a été récemment rapporté [15,21,40,41] . Le GSH est un antioxydant non enzymatique présent dans toutes les cellules de mammifères. Sous sa forme oxydée, le GSSG, le GSH agit comme cofacteur de nombreuses enzymes détoxifiantes (GPx, GST, et autres) contre le stress oxydatif et maintient l'équilibre redox cellulaire [47]. Ce résultat est en accord avec ceux de Khan et Siddique [56] et Makni et al. [57], qui ont rapporté que CCl4 diminuait le taux de GSH dans les reins de rats. Traitement avec elle. Les extraits E plus Se et A. hierophantic ont montré une protection contre la réduction du niveau de GSH déclenchée par CCl4. Dans le même contexte, la SOD catalyse la dismutation de deux molécules d'anion superoxyde (*O2) en peroxyde d'hydrogène (H2O2) et en oxygène moléculaire (O2), rendant par conséquent l'anion superoxyde potentiellement nocif moins dangereux [58,59]. L'intoxication au CCl4 modifie le niveau d'expression des gènes en appauvrissant la SOD rénale [60]. Une diminution de l'activité SOD est un indice sensible de dommages cellulaires. Nos extraits testés d'A. hierophantic ont amélioré la toxicité rénale en atténuant le niveau de SOD. Il participe à divers processus enzymatiques pour réduire la concentration des réactions de désacidification [61]. Le MDA est le premier produit de la peroxydation lipidique et est l'un des marqueurs importants du stress oxydatif. Les extraits d'A. hierophantic ont diminué l'augmentation des niveaux de MDA et restauré le pouvoir antioxydant total dans les reins de rats traités au CCl4-. Ces effets protecteurs peuvent être dus à la puissante activité antioxydante des extraits d'A. hierophantic [15,21,40,41]. Ces résultats suggèrent également que les extraits d'A. hierophantic peuvent atténuer le stress oxydatif en diminuant les niveaux de peroxyde lipidique dans les reins de rat exposés au CCl 4- et prévenir les lésions rénales. Ces résultats concordaient avec les résultats des activités antioxydantes du Zn sur la néphrotoxicité aiguë induite par le CCl4- [62,63]. Les extraits d'A. Hierochuntica ont présenté une capacité de néphroprotection précieuse concernant les tests de la fonction rénale (créatinine, urée, K, TP et albumine) et les activités antioxydantes de l'homogénat rénal (GSH, SOD, MDA) dans GIV, V et IV, respectivement. Le pourcentage total de néphroprotection par rapport à la vit. Le traitement E plus Se a enregistré des niveaux maximaux dans le groupe traité par KAE (GV, 97,62 %), puis KEE (GIV, 83,27 %), puis KEE plus KAE (GVI, 78,85 %), respectivement, par ordre décroissant. Cela peut être dû aux différences de quantité et de qualité des contenus phénoliques et antioxydants des extraits d'A. Hierochuntica, qui ont une relation avec la capacité antioxydante [15, 19, 22, 40, 42]. Les résultats histopathologiques dans les reins sont cohérents avec les estimations biochimiques des groupes expérimentaux étudiés. L'administration de CCl4 (GII) a provoqué une lésion glomérulaire et tubulaire avec vasocongestion dans les reins. Dogukan et al. [64] ont découvert un schéma histologique similaire dans le tissu rénal de rat en réponse à un traitement prolongé au CCl4. On considère également que les modifications histologiques sont causées par une surcharge fonctionnelle des néphrons, qui entraîne un dysfonctionnement rénal [65], et/ou sont dues à la destruction des tissus provoquée par la génération de radicaux libres via le métabolisme du CCl4 [56,66]. . L'effet de celui-ci. Les extraits E plus Se et A. hierophantic pour réparer et restaurer les effets de destruction des reins par le CCl4 étaient notables. C'est peut-être à cause de ça. E plus Se (en tant qu'antioxydant puissant) agit sur les ROS induites par CCl4 [67]. Les extraits d'A. hierophantic suppriment la néphrotoxicité aiguë induite par le CCl4- en raison du rôle antioxydant et des propriétés de piégeage des radicaux libres des composés phénoliques présents dans les extraits d'A. hierochuntica [22]. Nos résultats sont cohérents avec ceux d'autres chercheurs qui ont montré que divers dérivés de plantes ont des effets pharmacologiques en éliminant les abus de CCl4 et en rétablissant la normalité [6].

conclusion

Les résultats de cette étude ont clairement démontré que la plante A. hierophantic est riche en composés phénoliques polaires et non polaires avec une capacité antioxydante supérieure, qui est directement liée au contenu phytochimique. A. hierophantic (en particulier l'extrait aqueux) protège les rats contre le stress oxydatif induit par le CCl4- et les lésions rénales aiguës, comme en témoigne une baisse significative des niveaux de MDA et une augmentation de l'activité du GSH et de la SOD, ainsi que l'arrêt de l'activité biochimique et histologique. altérations des reins. L'efficacité protectrice pourrait provenir des propriétés antioxydantes et de piégeage des radicaux libres des composés phénoliques présents dans les extraits d'A. hierophantic. Ces caractéristiques aident à expliquer l'efficacité médicinale de la plante en tant que médicament à base de plantes. Des recherches supplémentaires sont nécessaires pour décrire complètement les principes actifs d'A. hierophantic, et cette étude vise à stimuler une recherche connexe plus complète afin d'offrir des données et des recommandations suffisantes pour définir ses mécanismes et les doses sûres.

Références

1. Statistiques, maladie rénale chronique KD aux États-Unis. 2021. Disponible en ligne : https://www.cdc.gov/kidneydisease/pdf/Chronic-Kidney-Disease-in-the-US-2021-h.pdf (consulté le 20 juillet 2021).
2. Ku, E.; Glidden, DV; Johansen, KL; Sarnak, M.; Tighiouart, H.; Grimes, B.; Hsu, CY Association entre le contrôle strict de la pression artérielle au cours de l'insuffisance rénale chronique et la baisse de la mortalité après l'apparition de l'insuffisance rénale terminale. Rein Int. 2015, 87, 1055-1060. [Référence croisée] [PubMed]
3. Tumlin, JA ; Madaio, député ; Hennigar, R. Néphropathie idiopathique à IgA : pathogenèse, histopathologie et options thérapeutiques. Clin. Confiture. Soc. Néphrol. 2007, 2, 1054-1061. [Référence croisée] [PubMed]
4. Olah, G. ; Reddy, vice-président ; Prakash, GS ; Réactions, encyclopédie FC Kirk-Othmer de la technologie chimique. Lentilles de contact 1978, 720–742.
5. Ozturk, F. ; Ucar, M.; Ozturk, IC; Vardi, N.; Batcioglu, K. Néphrotoxicité induite par le tétrachlorure de carbone et effet protecteur de la bétaïne chez les rats Sprague-Dawley. Urologie 2003, 62, 353–356. [Référence croisée]
6. Ogetürk, M. ; Kus, je. ; Colakoglu, N.; Zararsiz, I. ; Ilhan, N.; Sarsilmaz, M. L'ester phénéthylique de l'acide caféique protège les reins contre la toxicité du tétrachlorure de carbone chez le rat. J. Ethnopharmacol. 2005, 97, 273-280. [Référence croisée]
7. Slater, Mécanismes des radicaux libres TF dans les lésions tissulaires. Dans la fonction cellulaire et la maladie ; Cañedo, LE, Todd, LE, Packer, L., Jaz, J., Eds. ; Springer : Boston, MA, États-Unis, 1988 ; p. 209–218. [Référence croisée]
8. Khan, M. ; Rizvi, W.; Khan, GN; Khan, RA; Shaheen, S. Néphrotoxicité induite par le tétrachlorure de carbone chez le rat : rôle protecteur de Digera muricata. J. Ethnopharmacol. 2009, 122, 91–99. [Référence croisée]
9. Afsar, T. ; Khan, M. ; Razak, S.; Ullah, S.; Mirza, B. Activité antipyrétique, anti-inflammatoire et analgésique d'Acacia hydaspica R. Parker et son analyse phytochimique. Complément BMC. Alterner. Méd. 2015, 15, 1–12. [Référence croisée]
10. Al-Qabba, MM ; El-Mowafy, MA; Althwab, SA; Alfheaid, HA ; Enfin, T. ; Barakat, H. Profil phénolique, activité antioxydante et amélioration de l'efficacité des germes de quinoa de Chenopodium contre le stress oxydatif induit par le CCl4 - chez le rat. Nutriments 2020, 12, 2904. [CrossRef]