L'apocynine améliore les dommages aux testicules induits par le glutamate monosodique par une barrière hémato-testiculaire altérée et des paramètres de stress oxydatifⅡ

Résultats

3.1. Niveaux sériques de testostérone, de FSH et de LH

Les niveaux de testostérone dans le groupe MSG étaient inférieurs à ceux du groupe témoin. Bien que le groupe MSG plus APO ait montré une augmentation des niveaux de testostérone par rapport au groupe MSG, cette augmentation n'était pas statistiquement significative (Figure 1A). Le niveau de FSH était plus élevé dans le groupe MSG par rapport au groupe témoin. Le niveau de FSH dans le groupe MSG plus APO a diminué par rapport au groupe MSG (Figure 1B). La diminution des niveaux de LH dans le groupe MSG et l'augmentation des niveaux de LH dans le groupe MSG plus APO n'étaient pas statistiquement significatives par rapport aux groupes expérimentaux (Fig 1C).

3.2. Niveaux testiculaires de MDA, GSH et SOD

Le niveau tissulaire de MDA a été augmenté dans le groupe MSG par rapport au groupe témoin. D'autre part, lorsque l'on compare le groupe MSG plus APO avec le groupe MSG, une diminution significative du MDA a été observée (Figure 1D). Les niveaux de GSH et de SOD ont diminué de manière significative dans le groupe MSG par rapport aux groupes contrôle et APO, respectivement. Une augmentation significative des niveaux de GSH et de SOD a été révélée dans le groupe MSG plus APO par rapport au groupe MSG (Figure 1E, F).

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3.3. Numération, motilité et morphologie des spermatozoïdes

Une morphologie normale a été observée dans les échantillons de sperme du groupe témoin et des groupes APO (figure 2A, B). Un grand nombre de spermatozoïdes présentant des anomalies morphologiques ont été observés dans le groupe MSG (figure 2C). Dans le groupe MSG plus APO, peu de spermatozoïdes anormaux ont été détectés, car la majorité des spermatozoïdes étaient de morphologie normale (Figure 2D).

Le nombre et la motilité des spermatozoïdes étaient inférieurs dans le groupe MSG par rapport aux groupes contrôle et APO. Ces paramètres ont augmenté de manière significative dans le groupe MSG plus APO par rapport au groupe MSG (Figure 2E, F).

3.4. Rapport poids testiculaire/poids corporel

Bien que le rapport poids testiculaire/poids corporel du groupe MSG ait été observé comme étant inférieur par rapport aux autres groupes expérimentaux, cette diminution n'était pas statistiquement significative. Il n'y avait pas de différence statistique dans le rapport poids testiculaire/poids corporel entre les groupes expérimentaux (figure 3E).

3.5. Résultats histopathologiques

L'examen au microscope optique du tissu testiculaire par coloration H&E a révélé une morphologie normale des tubules séminifères dans le groupe témoin. (Figure 3(A1)). Une morphologie testiculaire intacte a été observée dans le groupe APO (figure 3(B1)). Dans le groupe MSG, les épithéliums germinaux des tubules séminifères étaient désorganisés. Des vacuoles indiquant des lésions tissulaires importantes ont été détectées dans le compartiment basal des tubules séminifères (figure 3(C1)). Ces troubles morphologiques se sont traduits par un score histopathologique significativement élevé pour ce groupe. Dans le groupe MSG plus APO, la majorité des tubules séminifères reflétaient la morphologie normale, avec un nombre limité de tubules séminifères dégénérés (Figure 3 (D1)).

Comparé au groupe MSG, le score histopathologique était significativement bas dans les groupes contrôle et APO. Le score histopathologique a augmenté de manière significative dans le groupe MSG et a diminué de manière significative dans le groupe MSG plus APO, par rapport au groupe MSG (Figure 3F). De plus, l'épaisseur des tubules séminifères dans le groupe MSG était faible par rapport aux autres groupes expérimentaux. Dans le groupe MSG plus APO, il y avait une augmentation significative de l'épaisseur des tubules par rapport au groupe MSG (figure 3G). Les groupes contrôle et APO présentaient une forte PAS-positivité (Figure 3(A2, B2)) pour les membranes basales des tubules séminifères à morphologie régulière. Les membranes basales détériorées des tubules séminifères de MSG ont entraîné une diminution de la positivité PAS des sections. (Figure 3(C2)). La positivité PAS du groupe MSG plus APO était presque équivalente à celle du groupe témoin, avec un petit nombre de tubules séminifères perturbés présentant des membranes basales détachées (Figure 3 (D2)). Les morphologies des tubules testiculaires et de la tunique albuginée étaient normales dans le groupe témoin (Figure 3(A3)), le groupe APO (Figure 3(B3)) et le groupe MSG plus APO (Figure 3(D3)). Cependant, dans le groupe MSG (Figure 3 (C3)), du tissu adipeux a été observé dans la tunique albuginée et la morphologie du stroma tubulaire était également normale.

3.6. Résultats pour PCNA

Un grand nombre de cellules PCNA-positives dans l'épithélium séminifère, de couleur brun foncé, ont été observées dans les groupes contrôle et APO (Figure 4 (A1, B1)). Dans le groupe MSG, une diminution du nombre de cellules PCNA-positives de l'épithélium séminifère a été constatée (Figure 4(C1)). En outre, des cellules spermatogènes PCNA-positives dans la lumière des tubules séminifères sont observées dans le groupe MSG. L'indice de prolifération, le plus bas dans le groupe MSG, a été augmenté dans le groupe MSG plus APO par rapport au groupe MSG (Figure 4E). Le groupe MSG plus APO a également montré une augmentation des cellules PCNA-positives dans l'épithélium séminifère (Figure 4 (D1)).

3.7. Résultats pour TUNEL Immunocytochimie

Dans les groupes contrôle et APO, les cellules TUNEL-positives étaient faibles (Figure 4 (A2, B2)). Le nombre de cellules TUNEL-positives était plus élevé dans le groupe MSG que dans les autres groupes expérimentaux (Figure 4(C2)). Les cellules positives au TUNEL étaient moins nombreuses dans le groupe MSG plus APO que dans le groupe MSG (Figure 4 (D2)). L'indice apoptotique était plus élevé dans le groupe MSG que dans les autres groupes expérimentaux. Il y avait une diminution comparative de cet indice dans le groupe MSG plus APO (figure 4F).

3.8. Résultats pour l'immunofluorescence NOX-2

Une faible immunopositivité NOX-2 a été observée dans les groupes contrôle (Figure 5A–C) et APO (Figure 5D–F). L'immunoréactivité la plus élevée a été observée dans le groupe MSG (Figure 5G – I), alors qu'une diminution a été détectée dans le groupe MSG plus APO (Figure 5J – L). Les contrôles négatifs de l'analyse d'immunofluorescence NOX -2 ont été présentés à la figure S1.

3.9. Résultats pour ZO-1 et Occludin Immunohistochimie

Les positivités ZO-1 et occludine ont été détectées sous la forme d'une couleur rouge foncé dans le cytoplasme basolatéral des cellules de Sertoli situées dans le tubule séminifère de l'épithélium germinal. Alors que les intensités de ZO-1 et de l'immunoréactivité de l'occludine étaient les plus élevées dans le groupe témoin (Figure 6A–C, Figure 7A–C, Figure 8(A1, A2) et Figure 9A, B) et le groupe APO (Figure 6D– F, Figure 7D–F et Figure 8(B1, B2)) et une diminution de la distribution des immunoréactivités a été observée dans le groupe MSG (Figure 6G–I, Figure 7G–I et Figure 8(C1, C2)). Des augmentations des positivités de ZO-1 et d'occludine ont été observées dans le groupe MSG plus APO, par rapport au groupe MSG (Figure 6J–L, Figure 7J–L et Figure 8(D1, D2)).

3.10. Résultats de microscopie électronique à transmission

Dans les groupes contrôle et APO, une ultrastructure normale de l'épithélium germinal tubulaire séminifère présentant de nombreux spermatozoïdes et des cellules de Sertoli interconnectées avec des jonctions serrées ont été observées (Figure 10A). Le groupe APO avait une ultrastructure similaire à celle du groupe témoin (Figure 10B). Dans le groupe MSG, une vacuolisation et des gouttelettes lipidiques dans les cellules épithéliales germinales du tubule séminifère, des séparations entre les jonctions de cellules de Sertoli-Sertoli et une détérioration de la lame basale des tubules séminifères ont été observées (Figure 10C). L'ultrastructure du groupe MSG plus APO reflétait l'organisation normale des tubules séminifères avec peu de gouttelettes lipidiques dans le cytoplasme (Figure 10D)

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Cistanche est une herbe traditionnellement utilisée dans la médecine chinoise pour stimuler l'énergie, la libido et la vitalité globale. On pense que Cistanche peut augmenter les niveaux de testostérone en inhibant l'activité d'une enzyme appelée aromatase, qui convertit la testostérone en œstrogènes. Cistanche a également été trouvé pour augmenter la production de l'hormone lutéinisante (LH) dans le corps. La LH joue un rôle crucial dans la régulation de la production de testostérone dans les testicules. En augmentant les niveaux de LH, Cistanche peut indirectement stimuler la production de testostérone. De plus, Cistanche contient également plusieurs composés phytochimiques tels que l'échinacoside et l'actéoside, qui possèdent des propriétés antioxydantes. Ces composés peuvent aider à protéger les testicules et d'autres organes reproducteurs des dommages oxydatifs, améliorant ainsi leur fonction et augmentant la production de testostérone. Dans l'ensemble, les mécanismes exacts par lesquels Cistanche augmente les niveaux de testostérone ne sont pas entièrement compris, mais il s'agit probablement d'une interaction entre l'inhibition de l'aromatase, l'augmentation de la production de LH et la fourniture d'un soutien antioxydant au système reproducteur.

À suivre...

Merve Acikel-Elmas 1,*, Salva Asma Algilani 1, Begum Sahin 1, Ozlem Bingol Ozakpinar 2, Mert Gecim 2, Kutay Koroglu 3 et Serap Arbak 1

1 Département d'histologie et d'embryologie, École de médecine, Université Acibadem Mehmet Ali Aydinlar, Icerenkoy Mah., Kayisdagi Cad. No. 32, Atasehir, Istanbul 34752, Turquie

2 Département de biochimie, Faculté de pharmacie, Université de Marmara, Basibuyuk Yolu, 4/A, Basibuyuk, Istanbul 34854, Turquie

3 Département d'histologie et d'embryologie, École de médecine, Université de Marmara, Basibuyuk Yolu No. 9 D:2, Maltepe, Istanbul 34854, Turquie