Les saunas sont-ils bénéfiques ou nocifs pour la maladie polykystique rénale autosomique dominante ? Examen avec une souris modèle Ⅱ

III Résultats

1. Modifications des paramètres généraux dues au sauna répété

Le tableau 1 résume les données physiologiques obtenues au point final de l'expérience. Le poids corporel du groupe SW s'est avéré significativement plus élevé que celui du groupe TS (p < 0,05). La consommation de nourriture et la consommation d’eau du robinet de tous les groupes étaient similaires (NS). La consommation d'eau contenant 4 % de saccharose n'a pas affecté la glycémie dans les groupes TS et SW (NS vs contrôle). L'osmolalité urinaire des groupes TS et SW semblait inférieure à celle du groupe témoin.

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2. Effet du sauna répété sur la fonction rénale et l'élargissement des kystes

Le tableau 2 résume les paramètres de la fonction rénale. Les taux de créatinine plasmatique ou d'azote uréique sanguin (BUN) dans le groupe TS étaient légèrement supérieurs à ceux du groupe témoin. En revanche, l’agrandissement des kystes dans le groupe TS était légèrement inhibé par rapport à celui du groupe témoin. Il y avait une hypertrophie kystique similaire des tubules dans tous les groupes à la fin de l'expérience. L'expansion kystique représentative des tubules est illustrée à la Fig. 2.

3. Expression et phosphorylation des Hsps dans les reins par sauna répété

Nous avons effectué une analyse par transfert Western des Hsps pour déterminer la charge thermique sur le rein (Fig. 3A). Comme nous l'avons signalé précédemment13), le groupe TS a montré une augmentation d'environ 3,08-fois de l'expression de Hsp27 et une augmentation d'environ 1,95-fois de l'expression de Hsp27 phosphorylée, par rapport au groupe témoin. Aucune augmentation de ce type n'a été observée dans le groupe SW par rapport au groupe témoin (Fig. 3A, D, E). Cependant, l'expression de Hsp9{{10}} dans les groupes TS et SW a diminué d'environ 0,61-fois et 0,51-fois, respectivement, par rapport au groupe témoin (Fig. .3A,C). Hsp90 phosphorylée était exprimée de manière similaire dans tous les groupes (Fig. 3A, B).

Fig. 2 A : photomicrographies représentatives (× 2,5) d'une coupe de rein colorée à l'HE. Barre d'échelle : 300 μm. B : La quantification de l’expansion kystique des tubules a été observée dans tous les groupes. Les données sont présentées sous forme de moyenne ± SEM. n=3 pour chaque groupe.

4. Expression de la croissance cellulaire et des protéines liées à la taille dans le rein

Il a été précédemment signalé que Hsp90, qui est impliquée dans la formation de kystes et la croissance de la PKD, était surexprimée dans les kystes rénaux associés à la PKD humaine et murine). Suite à la confirmation de l'expression réduite de Hsp90 dans les reins dans les groupes TS et WS, nous avons confirmé l'expression de protéines liées à la croissance cellulaire et à la taille16). La suractivation du réseau PI3K/Akt/mTOR est un événement pathogène bien connu conduisant à une hyperprolifération. Dans la polykystose rénale, la cascade mTOR favorise la croissance des kystes en augmentant la prolifération, la taille et le métabolisme des cellules épithéliales des tubules rénaux15), 17). L'expression de Erk1/2, impliquée dans la voie de signalisation de la prolifération des cellules épithéliales des kystes18), était réduite dans les groupes TS et SW par rapport à celle du groupe témoin (P < 0,05, TS par rapport au contrôle ; Fig. 4A, D , E). Cependant, il n'y a eu aucun changement dans l'expression de Akt et de mTOR (Fig. 4A, B, C, F, G).

5. Effet du sauna ou de l'eau de saccharose à 4 % sur la voie de l'apoptose

Les caspases sont exprimées sous forme de précurseurs inactifs à l’intérieur des cellules et sont activées en réponse à divers stimuli de mort cellulaire. L'activation implique une dimérisation et souvent une oligomérisation des pro-caspases, suivie d'un clivage en une petite sous-unité et une grande sous-unité19). Les caspases activées clivent des substrats cibles spécifiques et conduisent à la mort cellulaire. Il existe deux méthodes pour détecter l'activation de la caspase, l'une est une méthode utilisant un anticorps et l'autre est une méthode utilisant un substrat de caspase. Dans le procédé utilisant un anticorps, il peut être détecté par la quantité d'un précurseur non clivé et/ou d'une caspase clivée. La caspase3, l'une des caspases effectrices, est un régulateur clé de l'apoptose. La caspase activée-3 peut cliver plusieurs protéines structurelles et régulatrices, essentielles à la survie et au maintien des cellules. Pour évaluer si l'apoptose était affectée par le sauna, nous avons mesuré la quantité d'expression de pro-caspase3 et de caspase3 clivée par Western blot standard. La figure 5 montre qu'il y a eu une légère augmentation de l'activité de la caspase3 dans les groupes TS et SW par rapport à celle du groupe témoin.

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