Atriplex Canescens est un nouvel hôte pour Cistanche Deserticola

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Fangming Wang, et al

Résumé

Cistanche désertiquea été historiquement utilisé dans la médecine traditionnelle chinoise pour compléter la fonction rénale (yang), bénéficier au sang et à l'essence, et humidifier les intestins afin d'évacuer les selles. Son hôte, Haloxylon ammodendron, est une plante pionnière importante utilisée pour les brise-vent et la fixation des dunes de sable, qui sont des stratégies utilisées pour lutter contre la désertification. Pendant longtemps, on a considéré que C. deserticola ne pouvait parasiter que H. ammodendron. Dans cette étude, des expériences d'identification morphologique, d'identification de code-barres génétiques et d'inoculation ont été menées, nous avons finalement découvert que C. deserticola peut également parasiter Atriplex canescens. A. canescens est une espèce de Chénopodiacées avec une large gamme d'adaptabilité. Comparé à H. ammodendron, il a plus de biomasse et une plus large gamme d'adaptabilité écologique, ce qui le rend plus adapté à la production industrielle de C. deserticola. De plus, nous avons également constaté que la concentration des composants actifs était plus élevée chez C. deserticola parasité sur A. canescens que chez ceux parasités sur H. ammodendron ; cette découverte suggère en outre que l'application de C. deserticola à plus grande échelle justifie une exploration plus approfondie.

Mots clés:Cistanche désertique, Parasitisme, Identification par code-barres ADN, Médecine traditionnelle chinoise, Cistanche salsa

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1. Introduction

L'utilisation de Cistanche dans la médecine traditionnelle chinoise a été enregistrée pour la première fois dans les Écritures à base de plantes de Shennong, pour ses effets detonifiantun reinyang, boosterlaessencededu sang, etmouillagelaintestinspour faciliter le passage des selles. Il a également été enregistré dans des ouvrages de phytothérapie ancienne sous le nom de "désertginseng'. Les tiges charnues sèches et les feuilles écailleuses de Cistanche deserticola YC Ma et Cistanche tubulosa (Schenk) Wight ont été la première articulation décrite en 2005 dans la Pharmacopée chinoise. Cistanche est principalement cultivé dans le Xingjiang, la Mongolie intérieure et le Gansu en Chine, et dans le monde, on le trouve dans les zones semi-arides et arides de la péninsule ibérique européenne, de l'Afrique du Nord, de l'Arabie, de l'Iran, de l'Afghanistan, du Pakistan, de l'Inde du Nord, de la Mongolie et Al. [1]. Il résiste aux conditions environnementales difficiles, telles que les climats extrêmement arides, les fortes variations de températures et les sols appauvris [2]. Selon l'index taxonomique des plantes supérieures chinoises, il existe six espèces de Cistanche en Chine. Cependant, une autre étude a confirmé l'existence de seulement quatre espèces et une variante de Cistanche, à savoir C. deserticola YC Ma, C. tubulosa (Schenk) R. Wight, C. salsa (CA Mey.) G. Beck, C. sinensis G. Beck et C. salsa var. albiflora PF Tu et al., [3].

C. deserticola est considérée comme la seule source traditionnelle de Cistanche et a une longue histoire d'utilisation en médecine, depuis la dynastie des Han de l'Est (25 après JC-220 après JC) [4]. Dans le Compendium of Materia Medica (écrit par Li Shizhen, dynastie Ming), il a été documenté pour tonifier en douceur le yang (contrairement à d'autres herbes qui ont une action plus vigoureuse). Un éventail de constituants chimiques efficaces, notamment des glycosides phényléthanoïdes, des iridoïdes, des lignanes, des alditols, des oligosaccharides, des polysaccharides et des alcaloïdes, ont été isolés de C. deserticola par des méthodes phytochimiques modernes [5]. Des études pharmacologiques ont montré que le phénéthylglycoside est le principal composant actif, et il a été rapporté qu'ilaméliorersexuelfonction, exercerneuroprotecteureffets, améliorerapprentissageetMémoire, etprotégerlafoie. Il exerce également des effets thérapeutiques contre la démence,Alzheimermaladie, Parkinson maladie, fatigue, ettumeursainsi que des expositionsanti-inflammatoireetimmunomodulateurpropriétés [6, 7].

C. deserticola est une plante parasite obligatoire qui vit exclusivement sur les racines d'Haloxylon ammodendron [8]. Une étude a rapporté que C. deserticola n'est même pas trouvé dans Haloxylon persicum [9]. Ces dernières années, une attention croissante a été accordée à C. deserticola, car non seulement il est une source de composants à valeur médicinale, mais il contribue également grandement au contrôle de la désertification [10]. H. ammodendron est le seul hôte qui a été utilisé dans des études impliquant C. deserticola. En avril 2017, Wang Shuai, un employé du Zhejiang Quheng Public Welfare Fund, a inoculé des graines de C. deserticola sur Atriplex canescens dans le jardin botanique du désert de Minqin, province de Gansu, et C. deserticola a fleuri en mai 2018 et a continué pour fleurir jusqu'en mai 2019. Cependant, les graines ont été achetées sur le marché, et il est douteux qu'elles soient vraiment des graines de C. deserticola. De plus, ce phénomène brise les savoirs traditionnels et doit être étudié plus avant

A. canescens est un arbuste vivace C4 originaire des déserts du sud-ouest de l'Amérique et s'adapte rapidement aux conditions de salinité, de métaux lourds, de sécheresse et de températures élevées [11]. Comme il est très appétissant et riche en nutriments, il est utilisé comme fourrage pour la plupart du bétail et des gros animaux [12]. De plus, il est particulièrement utile pour le contrôle de l'érosion et la remise en état des terres marginales en raison de son excellente adaptabilité et de son système racinaire étendu. Il a été introduit pour la première fois en Chine depuis les États-Unis d'Amérique en 1989 et a été largement utilisé pour la conservation des sols et de l'eau, la fixation du sable et la restauration des terres salines [13]. Bien que l'étude faisant état de la croissance de C. deserticola sur A. canescens renverse la compréhension parasitaire exclusive de C. deserticola, cela pourrait s'avérer être une découverte révolutionnaire, car A. canescens est plus adapté à la croissance de C. deserticola car il a plus de biomasse et une plus large gamme d'adaptabilité écologique par rapport à H. ammodendron.

Afin d'assurer l'exactitude de la découverte accidentelle, des expériences d'identification des plantes et d'inoculation artificielle ont été réalisées. L'identification traditionnelle des plantes comprend l'évaluation organoleptique (comme le toucher, l'odorat, la vue et le goût), l'analyse des caractéristiques morphologiques (telles que microscopiques et macroscopiques) et le profilage chimique (comme la chromatographie liquide à haute performance, la chromatographie en couche mince et la chromatographie en phase gazeuse). chromatographie) [14]. Il est relativement simple d'exclure C. tubulosa et C. Sinensis en raison de la différence de taille, de couleur et de disposition des faisceaux vasculaires dans la tige. Le véritable défi est de faire la distinction entre C. deserticola et C. salsa. Selon la Flore de Chine, la longueur de la bractée de C. salsa est d'environ 1/3 de la corolle, alors qu'elle est égale chez C. deserticola. La section transversale des tiges charnues est similaire entre C. deserticola et C. salsa et est composée de l'épiderme, du cortex, des faisceaux vasculaires et de la moelle. La principale différence réside dans la gaine du faisceau vasculaire puisqu'elle est caudée pour C. deserticola et triangulaire ou semi-circulaire pour C. salsa.

Ces dernières années, la technologie des codes-barres ADN a été fréquemment utilisée pour l'identification des espèces. C'est un processus qui utilise une courte séquence d'ADN du génome standard, qui est généralement conservée et n'est pas affectée par des facteurs externes, tels que l'âge et le type de tissu végétal. Les séquences candidates populaires pour les codes-barres d'ADN végétal sont rbcL, matK, psbA-trnH, ITS et ITS2 [15]. Plusieurs études ont indiqué que l'ITS/ITS2 est l'outil d'identification le plus efficace pour les plantes. Il a également été suggéré que la région ITS2 devrait être incorporée dans les codes-barres de base en raison de son pouvoir discriminant supérieur à celui des codes-barres plastidiques. Il a été admis que ITS2 pourrait être utilisé comme un nouveau code-barres universel pour l'identification d'un large éventail de taxons végétaux [16, 17, 18, 19, 20, 21]. Bien que de nombreuses études aient tenté d'identifier un code-barres végétal universel, aucun des loci disponibles ne fonctionne pour toutes les espèces, une méthode multi-locus est donc nécessaire pour discriminer les espèces végétales [22, 23, 24, 25, 26, 27, 28] . Dans cette étude, ITS2, rbcL, psbA-trnL ont été utilisés comme codes-barres.

En plus des techniques d'identification morphologiques et moléculaires, des preuves directes proviennent d'expériences d'inoculation. Des expériences d'inoculation doivent être réalisées afin de démontrer que C. deserticola peut parasiter A. canescens. En plus de l'identification, le contrôle de la qualité devient une considération primordiale. Des investigations supplémentaires sont nécessaires afin de déterminer la différence entre la qualité de C. deserticola parasité sur la racine de H. ammodendron et celle parasitée sur A. canescens.

2. Matériels et méthodes

2.1. Matières végétales

Cistanche pousse sur des sols sableux mous avec une légère salinisation, parasitant généralement les racines latérales profondes de 30–100 cm de l'hôte. Le climat dans la zone de culture appropriée est aride, moins pluvieux, avec une forte évaporation, de longues heures d'ensoleillement et une grande différence de température entre le jour et la nuit. Le comté de Minqin et la ville de Baiying sont les lieux de collecte de ces échantillons. Ils sont géographiquement proches et ont un climat continental aride tempéré, avec des précipitations annuelles moyennes de 113,2 mm et une humidité relative annuelle moyenne de 44 %. Des informations spécifiques et détaillées sur la collecte d'échantillons sont présentées dans le tableau 1. Tous les échantillons ont été congelés et conservés à -20 C dans le State Key Laboratory of Natural and Biomimetic Drugs Lab, Pékin, Chine.

2.2. Coloration et observation des tissus

Des échantillons frais ont été obtenus et stockés dans une solution composée de 70 % d'éthanol, d'acide acétique glacial et de formaldéhyde dans un rapport de 90:5:5 et ont été déshydratés à l'aide d'un gradient d'éthanol (75 %, 95 %, 100 %, 100 %) pendant 1h. Les coupes déshydratées ont été soumises à un gradient de xylène (25%, 50%, 75%, 100%, 100%) pendant 1h afin d'obtenir des coupes transparentes. Les sections transparentes ont été soumises à une infiltration de paraffine, dans laquelle un volume de paraffine égal au volume de xylène a été ajouté au xylène contenant l'échantillon, la moitié de la solution résultante a ensuite été aspirée et un volume égal de paraffine a été ajouté à nouveau. Ce processus a été répété 10 fois, et finalement, toutes les solutions ont été aspirées et remplacées par un volume égal de paraffine ; cette fifinale étape a été répétée deux fois, et la solution résultante après chaque étape a été incubée pendant 1 h à 75 C. Après infiltration de paraffine, les sections ont été soumises à l'enrobage, où les échantillons ont été placés dans un réservoir de fer contenant de la paraffine liquide et de la paraffine liquide supplémentaire a été rapidement ajouté pour remplir tout le réservoir et laissé se solidifier. Le bloc de cire résultant a été taillé et sectionné. Les sections incluses ont été placées dans de l'eau chaude, finies, placées sur une lame et incubées à 45 ° C pendant 30 min. Les coupes sur la lame ont été déparaffinées par trempage en série dans 100 % de xylène, 100 % de xylène, 50 % de xylène, 50 % de xylène, 100 % d'éthanol, 100 % d'éthanol, 95 % d'éthanol et 75 % d'éthanol, puis trempées dans de la safranine O pendant 40 heures. min. Cela a été suivi d'un autre cycle de trempage rapide en série dans de l'éthanol à 75 % et de l'éthanol à 95 %, puis les lames sont immergées dans du vert rapide pendant 1 min. Enfin, les sections ont été soumises à un dernier trempage en série dans 95 % d'éthanol, 95 % d'éthanol, 100 % d'éthanol, 100 % d'éthanol, 50 % de xylène, 50 % de xylène et 100 % de xylène. Une fois les sections colorées, une goutte de colle de résine a été placée sur la lame et une lamelle couvre-objet a été placée dessus. Les lames ont été laissées au repos pendant une semaine et les coupes de tissus ont été observées à l'aide d'un microscope optique Olympus et imagées.

2.3. Extraction d'ADN et amplification PCR

L'ADN génomique total a été extrait de spécimens de fleurs à l'aide d'un kit d'extraction d'ADN génomique végétal (Solarbio Science & Technology Co., Ltd., Pékin, Chine) conformément aux protocoles du fabricant. Les amorces pour l'amplification et le séquençage de gènes et les conditions de réaction sont présentées dans le tableau 2. Chaque amplification de gène a été répétée trois fois pour chaque échantillon.

2.4. Analyse de séquençage

Afin d'obtenir des séquences précises, les produits de PCR fifinals, après purification à l'aide des kits d'extraction de gel rapide Transgene, ont été clonés séparément dans des vecteurs de clonage pEASY®-Blunt, selon les instructions du fabricant. Après clonage, elles ont été transformées en cellules Trans5ɑ chimiquement compétentes. Trois colonies de chaque échantillon ont été sélectionnées au hasard et séquencées à l'aide d'amorces M13. Ces colonies ont été séquencées de manière bidirectionnelle par séquençage Sanger, à l'aide des kits de séquençage de cycle BigDye Terminator V3.1 sur les analyseurs d'ADN ABI Prism 3700. Les séquences obtenues ont été alignées à l'aide de Clustal X (v1.8.7) [29] et synchronisées manuellement dans BioEdit (v7.1.3.0) [30]. En utilisant les données de séquence alignées, nous avons reconstruit la phylogénie à l'aide du logiciel MEGA 7 en utilisant la méthode de jonction de voisins (NJ), le modèle de paramètre Kimura 2- (K2P) a été utilisé et le bootstrap était de 1000 répétitions [31].

2.5. Inoculation de C. deserticola

Trois grammes de graines de C. deserticola ont été ajoutés aux pots (diamètre hauteur diamètre inférieur ¼ 20 cm- 20 cm-12 cm) contenant un sol sableux et agités pour assurer une répartition uniforme. Le groupe témoin consistait en 3 g de graines de C. salsa ajoutées à des pots similaires contenant un sol sableux. Enfin, A. canescens a été planté dans chaque pot, et les pots ont été placés à l'extérieur. Lorsque la teneur en humidité du sol est inférieure à 13 pour cent (g/g), les pots ont été arrosés. L'expérience a été menée au parc des sciences de la vie de Zhongguancun, à Pékin, en Chine (latitude 39-560 N, longitude 116 200 E ; 20 m au-dessus du niveau de la mer) de mai à juillet. La température diurne variait entre 16 et 35 C, la température nocturne entre 12 et 16 - C. L'humidité relative de l'air est supérieure à 50 %. La lumière du soleil est abondante. Environ 80 jours plus tard, le sol a été retiré des pots et le taux d'inoculation a été déterminé.

2.6. Détermination de la concentration des composants médicinaux

La détermination de la concentration des composants médicinaux comprend deux parties, l'une est la procédure de chromatographie liquide et l'autre est la préparation de la substance de référence et de la substance d'essai, plus de détails sont les suivants :

je). Détermination de l'échinacoside et du verbascoside - l'échinacoside et le verbascoside ont été pesés et ajoutés dans du méthanol à 50 % pour obtenir une solution de 0,2 mg/ml, qui a été utilisée comme solution de référence. La première consiste à broyer C. deserticola sec en poudre, la poudre a été mélangée à 5 0 ml de méthanol à 50 % dans une fiole jaugée brune de 100 ml, et le liquide d'essai a été obtenu après avoir soumis le mélange à agitation, trempage , sonication, repos et filtration. La colonne chromatographique était une colonne Agilent ZORBAX SB-C18 (4,6 mm 150 mm, 5 μm), avec du méthanol (A) - 0. Solution d'acide formique à 1 % (B) en tant que phase mobile, élution en gradient (0 à 17 min, 26,5 % A ; 17–20 min, 26,5 % → 29,5 % A ; 20–27 min, 29,5 % A), le débit était de 1,0 mL/min, la température de la colonne était de 35 C, la longueur d'onde de détection était de 330 nm, le volume d'injection était 10ul.

ii). Détermination de la bétaïne, du mannitol, du fructose, du glucose et du saccharoseLa bétaïne, le mannitol, le fructose, le glucose et le saccharose ont été pesés avec précision et ajoutés à de l'eau pour obtenir une solution de {{0}}.25 mg/ml, qui a été utilisé comme solution de référence. Cinq millilitres de la solution de test Cistanche susmentionnée ont été mélangés avec 50 pour cent de méthanol dans une fiole jaugée de 25 ml, bien agités et filtrés avec une membrane microporeuse de 0,2 μm. La colonne chromatographique était une colonne de gel polymérisé SHODEXASHAIPAK NH2P-50 4E (250 mm 4,6 mm, 5μm), la phase mobile était de l'acétonitrile-eau (77:23), le débit était de 0,7 mL/min, la température de la colonne était 25 C, en utilisant un détecteur de diffusion de lumière par évaporation (ELSD), la température du tube de dérive était de 100 C, le débit de gaz porteur était de 3 L/min, le volume d'injection de la substance de référence et de l'échantillon était de 5 ul.

3. Résultats

3.1. Identification morphologique des fleurs

Pour confirmer l'espèce de Cistanche qui parasite A. canescens, une analyse morphologique des spécimens de fleurs a été réalisée (Figure 1 et Figure S1). La morphologie globale des fleurs de la plante parasite était similaire à celle de C. deserticola. De plus, la corolle était plus épaisse que celle de C. salsa sur différents hôtes. Selon Flora of China, C. deserticola et C. salsa ont des différences évidentes dans la bractée des fleurs. Chez C. deserticola, les bractées sont inférieures à la corolle, tandis que la bractée de C. salsa mesure 1/3 de la longueur de la corolle. D'après notre analyse statistique, les bractées de Cistanche parasitées sur A. canescens et celle de C. deserticola sous-égalaient la corolle (Figure S2). Le Cistanche sur A. canescens présentait des caractéristiques morphologiques de C. deserticola, suggérant que C. deserticola pourrait être le parasite sur A. canescens.

Figure 1. Caractéristiques morphologiques des fleurs de Cistanche. (A) Cistanche deserticola (hôte : Haloxylon ammodendron) ; (B) Cistanche (hôte : Atriplex canescens) ; (C) Cistanche salsa (hôte : Sympegma regelii); (D) Cistanche salsa (hôte : Salsola passerina).

3.2. Identification microscopique d'échantillons de tissus colorés

La section transversale de la tige charnue de C. deserticola est très similaire à celle de C. salsa, et les deux sont composées de l'épiderme, du cortex, du faisceau vasculaire et de la moelle. Les faisceaux vasculaires des deux plantes sont disposés en anneaux ondulés ou ondulés profonds, et les moelles sont évidemment visibles. La principale différence réside dans la forme latérale de la gaine du faisceau vasculaire ; il est caudé chez C. deserticola et triangulaire ou semi-circulaire chez C. salsa. Après avoir effectué une analyse de microstructure sur le Cistanche parasité sur A. canescens, nous avons constaté qu'il avait une gaine de faisceau vasculaire de forme caudée, ressemblant à celle de C. deserticola (Figure 2).

Figure 2. Caractéristiques microscopiques de la tige charnue chez différentes espèces de Cistanche. (A) Caractéristiques microscopiques de la tige charnue de Cistanche deserticola : 1. épiderme, 2. cortex, 3. faisceau de traces foliaires, 4. faisceau vasculaire, 5. rayon médullaire, 6. gaine du faisceau vasculaire, 7. phloème, 8. xylème , 9. moelle. (B) Vue agrandie du faisceau vasculaire chez Cistanche deserticola : 1. gaine du faisceau vasculaire, 2. fibre, 3. cellules de proline, 4. fibre libérienne, 5. phloème, 6. xylème, 7. vaisseau, 8. nylon. (C) Caractéristiques microscopiques de la tige charnue de Cistanche salsa : 1. épiderme, 2. faisceau de traces foliaires, 3. cortex, 4. faisceau vasculaire, 5. rayon médullaire, 6. moelle. (D) Vue agrandie du faisceau vasculaire de la salsa de Cistanche : 1. gaine du faisceau vasculaire, 2. cellules de proline, 3. Fibre, 4. phloème, 5. vaisseau, 6. xylème. (E) Caractéristiques microscopiques de la tige charnue de Cistanche parasitée sur Atriplex canescens 1. épiderme, 2. cortex, 3. faisceau vasculaire, 4. rayon médullaire, 5. moelle. (F) Vue agrandie du faisceau vasculaire de Cistanche parasité sur Atriplex canescens 1. vaisseau, 2. xylème, 3. cambium, 4. phloème, 5. gaine du faisceau vasculaire.

3.3. Identification moléculaire

En plus de l'identification morphologique, nous avons également effectué une identification moléculaire et sélectionné trois fragments de gène, à savoir ITS2, rbcL et psbA-trnL. Un arbre évolutif a été construit en utilisant les informations de séquence de chaque fragment (Figure 3), et les trois arbres phylogénétiques ont montré que le Cistanche parasité sur A. canescens avait une relation phylogénétique étroite avec C. deserticola. Ces résultats indiquent que C. deserticola pourrait être le parasite d'A. canescens. Des divergences génétiques détaillées entre les différentes espèces de Cistanche ont été observées lors de l'alignement de séquences multiples (figure 4). Nous avons trouvé trois polymorphismes nucléotidiques simples (SNP) dans le corps du gène ITS2 entre C. deserticola et C. salsa, aux bases 139, 295 et 472. Dans le corps du gène rbcL, il y avait quatre divergences de gènes entre C. deserticola et C. salsa, contenant deux SNP et deux mutations d'insertion et de délétion (indel). Par rapport à ITS2 et rbcL, les différences dans le corps du gène psbA-trnL entre C. deserticola et C. salsa étaient plus évidentes, avec sept divergences de séquence, dont quatre étaient des SNP et trois des mutations InDel. En particulier, une série de répétitions de thymine, commençant à la base 414 de la séquence alignée, pourrait être utilisée pour développer des marqueurs de répétition de séquence simple (SSR) pour distinguer C. deserticola et C. salsa.

3.4. Inoculation de C. deserticola

Pour tester si C. deserticola ou C. salsa pouvaient parasiter A. canescens, une expérience d'inoculation a été réalisée et nous avons trouvé des preuves de parasitisme dans tous les pots inoculés de C. deserticola avec un taux d'inoculation de près de 100 % (Figure 5). Aucun parasitisme n'a été observé dans les groupes témoins. Ce résultat prouve directement que C. deserticola parasitait facilement A. canescens, contrairement à C. salsa.

3.5. Détermination de la concentration des composants médicinaux importants

Nous avons estimé la concentration de composants médicinaux importants dans C. deserticola parasité sur A. canescens. Le chromatogramme spécifique est présenté dans le matériel supplémentaire. Pour obtenir des résultats précis, quatre expériences indépendantes ont été mises en place. Sur la base de nos mesures (tableau 3), nous avons constaté que la concentration de verbascoside et d'échinacoside était 20 fois supérieure à celle rapportée dans la pharmacopée chinoise (selon la pharmacopée chinoise, le pourcentage de la somme des concentrations d'échinacoside et le verbascoside chez C. deserticola doit être inférieur à 0,30 %). Les concentrations étaient également significativement plus élevées que celles de C. deserticola parasitées sur H. ammodendron (généralement 0,2 à 1,5 pour cent) [32]. La concentration de mannitol, de bétaïne, de fructose et d'autres composants glucidiques était également très élevée, et la qualité globale était meilleure que celle de C. deserticola parasitée sur H. ammodendron. Ainsi, ces résultats indiquent que A. canescens peut être utilisé pour cultiver C. deserticola à un niveau industriel et protéger les ressources sauvages menacées.

4. Discussion

Auparavant, C. deserticola était considérée comme parasitant exclusivement H. ammodendron. Cependant, dans cette étude, en utilisant des techniques d'identification morphologiques et moléculaires, nous avons démontré que C. deserticola peut également parasiter A. canescens. Bien que H. ammodendron, A. canescens et H. persicum appartiennent tous à la famille des Chénopodiacées, il est intéressant et particulier que C. deserticola ait une sélectivité spécifique, éventuellement régie par les molécules de signalisation sécrétées par l'hôte. A. canescens, originaire des États-Unis d'Amérique, présente une forte résistance aux perturbations environnementales et possède une biomasse relativement importante. A. canescens est un hôte viable pour C. deserticola pour diverses raisons. Premièrement, il peut survivre dans un large éventail de conditions environnementales. Deuxièmement, la biomasse et le taux de croissance de C. deserticola peuvent être plus importants et plus rapides, respectivement, sur A. canescens que sur H. ammodendron. Troisièmement, en raison du large éventail d'adaptabilité d'A. canescens, la zone de plantation peut être encore étendue. Ainsi, A. canescens a des avantages distinctifs sur H. ammodendron en tant qu'hôte et aidera la production industrielle de C. deserticola.

C. deserticola et C. salsa sont difficiles à distinguer et l'identification morphologique dans le passé a produit des résultats confondants. Avec les progrès dans le domaine de la biologie moléculaire, les techniques d'identification basées sur les molécules ont été largement utilisées en phytothérapie chinoise. Étant donné que la plupart des plantes médicinales chinoises offrent peu d'informations génomiques, la technologie des codes-barres ADN est devenue une technique d'identification révolutionnaire. Dans cette étude, la technologie de codage à barres morphologique et ADN a été appliquée de manière exhaustive pour identifier les espèces inconnues de Cistanche ; cela n'a jamais été tenté auparavant, et nos résultats démontrent que cette approche est faisable.

Puisque C. deserticola parasite A. canescens, il est important de déterminer les différences de qualité de C. deserticola sur les racines d'A. canescent et celle sur les racines d'H. ammodendron. D'après nos résultats, la concentration en composants actifs était plus élevée chez C. deserticola parasitée sur A. canescens que chez celle parasitée sur H. ammodendron. Ainsi, nos résultats jettent une base théorique solide pour la production à grande échelle de C. deserticola parasité sur A. canescens.

5. Conclusions

Pendant longtemps, C. deserticola a été considérée comme parasitant exclusivement H. ammodendron. Auparavant, il a été constaté que les graines de C. deserticola achetées sur le marché peuvent parasiter A. canescens, un autre

Plante de Chénopodiacées. En utilisant des méthodes d'identification morphologique et moléculaire, nous avons confirmé que l'espèce Cistanche parasitant A. canescens était C. deserticola. Ce résultat a été confirmé par l'expérience d'inoculation. Nous avons déterminé la concentration des composants médicinaux significatifs, et nos résultats suggèrent que la concentration et la qualité des composants étaient plus élevées chez C. deserticola parasité sur A. canescens que chez celui parasité sur H. ammodendron. La découverte de nouveaux hôtes peut favoriser la production industrielle de C. deserticola, mais aussi protéger efficacement les ressources sauvages et l'environnement écologique.

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