Évaluation des caractéristiques de diverses formulations de crème anti-âge à partir d'extrait de caroténoïde de la souche bactérienne Symbiote Virgibacillus Salarius
Apr 14, 2023
Mots clés:crème;cistanche;antioxydants; crème solaire; symbiote bactérien

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1. Introduction
Vieillissement prématuréest une maladie dégénérative caractérisée par une peau sèche, ridée et rugueuseet des points noirs [1]. Deux facteurs déclenchent un vieillissement prématuré, à savoir des facteurs internes tels quecomme le stress, l'endurance, les changements hormonaux et la santé ainsi que des facteurs externes, y comprisrayons ultraviolets et radicaux libres. Les radicaux libres sont des molécules contenant de l'oxygène dontl'arrangement atomique est instable et, par conséquent, subit des réactions en chaîne qui peuvent se produire dans lecorps et entraîner des dommages continus [2].
Les radicaux libres sont des substances très réactives et dangereuses qui endommagent letissus du corps qui peuvent conduire au développement de diverses maladies chez les personnes âgées [3]. Cependant, il est possible de vaincre les radicaux libres en utilisant des antioxydants [4] qui s'arrêtentréactions en chaîne déclenchées par les radicaux libres en donnant des électrons aux molécules instables.Des exemples de composés antioxydants comprennent le cistanche, la vitamine C et la vitamine E [5].
cistanche sont des composés qui se sont révélés être des antioxydants potentiels [6–10] car ils contiennentun composé isoprène à longue chaîne avec une double liaison conjuguée [5,7,11]. Le conjuguéla double liaison élimine l'oxygène singulet et désactive les autres radicaux libres se produisant à traversle processus de transfert d'électrons [12,13]. Par la suite, les composés qui ont conjugué doubledes liaisons peuvent être trouvées dans les organismes terrestres et marins. Composés marinsles organismes ont des caractéristiques uniques et plusieurs découvertes sur de nouveaux composés bioactifspour les antibiotiques, les anticancéreux, les produits pharmaceutiques, les cosmétiques, les enzymes et les pigmentsont été obtenus à partir de nombreux écosystèmes coralliens, en particulier les coraux mous.
L'utilisation massive de coraux mous ne devrait pas être utilisée, car cela endommageraitl'écosystème. Le symbiote bactérien associé au corail mou pourrait devenir un potenalternative qui produit du cistanche comme source d'antioxydants [14,15]. Cosmétiquedes formulations qui peuvent être appliquées sans effort et confortablement sont nécessaires lors de l'utilisationcomposés caroténoïdes. Ainsi, la formulation cosmétique préférée se présente sous la formede crème. La crème est la préparation semi-solide sélectionnée qui s'étale facilement et uniformément sur la peau,est non collant et facile à nettoyer, il est donc confortable à utiliser par les consommateurs. L'utilisation deles bactéries symbiotes comme source de matières premières cosmétiques est la dernière percée quidoit être développé.
2.1. Matériaux et outils
Le symbiote bactérienV. salairessouche 19.PP.Sc1.6 isolée deSinulairesp. d'origineoriginaire de l'île de Panjang, Jepara, Java central, Indonésie ; le point spécifique est aux coordonnéesde "6◦340 37.3500 S", "110◦370 52.0100 E". Les matériaux requis incluent le méthanol (analysegrade) acheté chez Merck (Darmstadt, Allemagne);
2,2-Diphényl-1-picrylhydrazyle
(DPPH) de Sigma-Aldrich Co. (St. Louis, MO, USA). Autres ingrédients utilisés dans les formulations de crèmetels que l'acide stéarique, la glycérine, le tétraborate de Na, la triéthanolamine (TEA), la lanoline,l'huile de tournesol, la cire d'abeille, l'alcool cétylique, le span 80, le monostéarate de glycérol et le Tween 80 étaientacheté chez Merck (Darmstadt, Allemagne). Les instruments utilisés étaient un UV-visSpectrophotomètre Shimadzu 1240 (Kyoto, Japon), Viscosimètre Brookfield LVDV-I Prime(Toronto, ON, Canada), pH-mètre numérique USB Phs 3c 3d Rohs, centrifugeuse IEC Centra MP4R(Thermo Electron, Waltham, MA, USA) et agitateur orbital Daihan SHO 2D (Wonju, Corée).
2.2. Isolement du symbiote bactérien de Sinularia sp.
LeSilunairesp. Les tissus ont été placés dans des boîtes de Pétri stériles partiellement remplies deeau de mer stérilisée. Les surfaces des tissus de corail mou ont été coupées, et seul l'intérieurde l'échantillon a été utilisé pour l'isolement microbien. Pour l'isolement bactérien, une série de dilutionsa été réalisée pour tous les échantillons. Dans chaque boîte de Pétri, 10 ml de l'échantillon ont été prélevés avecune pipette stérile et placé dans un flacon contenant 90 mL d'eau de mer stérilisée pour obtenir une10−1 dilution. Dès le 10−1 dilution, 1 ml a été transféré dans un tube contenant 9 ml de solution stérileeau de mer pour obtenir un 10−2 dilution. Ce processus de dilution a été répété jusqu'à ce qu'un 10−5 dilutiona été obtenu. Un échantillon (1 ml) de chaque série de dilutions a été prélevé et placé dans un récipient stérileboîte de Pétri contenant le milieu gélosé Zobell 2216E (Himedia, Mumbai, Inde) pour les bactériesisolement. Ensuite, les boîtes de Pétri ont été incubées à 30◦C pendant 2 jours. Bactérie de couleur jauneles colonies qui poussent à la surface du milieu gélosé ont été séparées par une méthode de stries pourobtenir des souches bactériennes pures.

2.3. Culture bactérienne symbiote
Les bactériesV. salariussouche 19.PP.Sc1.6 [16] a été inoculé en transférant 1 mL del'isolat dans 2 L de Zobell Marine Broth 2216 stérile (Himedia, Mumbai, Inde). C'étaitpuis placé sur le shaker à 100 rpm à 27◦C jusqu'à ce que la couleur du support devienne jaune (±7 jours).Par la suite, les bactéries symbiotiques qui avaient produit le cistanche ont été isolées etcentrifugé pendant 15 min à 6000 rpm, après quoi les culots se sont séparés puis filtrésen utilisant du papier filtre Whatman n° 1 (Maidstone, Royaume-Uni).
2.4. Extraction de caroténoïdes
Extraction de cistanche selon la méthode de macération rapide effectuée dans une obscuritéchambre. Le méthanol (qualité analytique) acheté chez Merck (Darmstadt, Allemagne) a étéajouté au culot de culture puis centrifugé 10 min à 6000 rpm. Par la suite, unun filtrat contenant du cistanche et des pastilles sous forme de masse bactérienne a été obtenu,filtré avec un papier filtre Wahtman n° 1, évaporé et séché à l'aide de gaz N [14,15].
2.5. Formules de crème
La formule utilisait trois formulations avec différents types de crème, à savoir vs,aïe et oh [16–18]. La formule utilisée est celle indiquée dans le tableau1.
Tableau 1.Formules crèmes d'extrait de caroténoïdeV. salairessouche 19.PP.Sc1.6.

2.5.1. Formule 1 : Crème vs
Nous avons fait fondre l'acide stéarique et la glycérine dans un bol. Le tétraborate de Na et la TEA ont étédissous dans un peu d'eau, puis mis dans une solution d'acide stéarique et de glycérine. Ensuite, nous avons remuéet homogénéisé, et ajouté un peu d'eau pour que les résultats soient bons. La dernière étape étaitajouter l'extrait de caroténoïde et remuer jusqu'à ce qu'il soit uniformément réparti.2.5.2. Formule 2 : Crème owTout d'abord, le monostéarate de glycérol et l'alcool cétylique ont été fondus dans la tasse 1. Tournesol etLe Tween 80 a été mélangé dans le gobelet 2. Après cela, nous avons placé le mélange du gobelet 2 dans le gobelet 1. Celaest agité jusqu'à homogénéité avec un peu d'eau chaude. Enfin, nous avons ajouté le caroténoïdeextraire et remuer jusqu'à homogénéité.
2.5.3. Formule 3 : Crème wo

2.6. Évaluation de la crème
Les caractéristiques de trois formulations de crème ont été évaluées ; l'évaluation initialeréalisé un test organoleptique. Dans les tests organoleptiques, les observations comprennent des changements danscouleur, odeur (rancissement) et toucher. Dans le test organoleptique, 25 personnes ont été utilisées comme répondants,composé de 15 personnes formées et 10 personnes non formées. Le test suivant était l'homogénéité,qui est accompli en appliquant la crème sur des plaques de verre et en observant la régularité dela couleur, qu'elle soit uniforme ou non. Par la suite, lors du test de pH, la crème a été déposéedans un bécher en verre, puis la mesure du pH a été effectuée à l'aide d'un pH-mètre qui avaitpréalablement calibré avec un étalon Dappar (pH de 4 et pH 7). Le pouvoir de dispersiontest a été effectué sur du verre transparent placé sur du papier millimétré et 0.5 g de crème a été
placé sur le verre puis recouvert d'un autre verre transparent et laissé pour±5 s àobtenir le diamètre de la zone formée. Ensuite, différents poids de 50, 100, 150, 200, 250, 300,350, 400 et 450 g ont été placés sur le verre transparent et le diamètre de la zone forméea été observé. Le cahier des charges stipule que la crème doit s'étaler facilement et uniformément.
Pendant ce temps, le test de viscosité de la crème a été déterminé à l'aide d'un Brookfield LVDV-I PrimeViscosimètre Un test d'adhérence a été effectué avec un objet en verre marqué comme4 × 2,5cm, puis jusqu'à 0.25 g de crème ont été placés au milieu de la zone et recouverts deautres objets en verre. Par conséquent, une charge de 1 kg a été placée pendant 5 min, puis les deux objets en verrequi avaient été attachés ont été montés sur l'équipement d'essai qui a reçu une charge de 80g. Après cela, le temps nécessaire pour séparer les deux objets en verre a été noté. Observations pourtous les tests ont été effectués chaque semaine pendant 5 semaines.

2.7. Mesure de l'activité antioxydante
Des crèmes dissoutes dans du méthanol ont été préparées en une série de concentrations. Dès lors, unun total de 3 ml de l'échantillon a été dilué avec 1 ml de solution 0.1 mM DPPH et laisséreposer pendant 30 min. Lors de la décantation, la solution a été homogénéisée et son absorption a étémesuré à l'aide d'un spectrophotomètre à une longueur d'onde de 517 nm. L'absorbance de lala solution de contrôle, c'est-à-dire DPPH sans solution d'essai, a également été lue. En outre, lequantité d'activité antioxydante a été mesurée à l'aide de l'équation suivante [19]:

2.8. Mesure du facteur de protection solaire (SPF)
La mesure de la valeur du facteur de protection solaire (FPS) a été effectuéein vitro. Le FPStest a été réalisé pour déterminer l'activité solaire de la crème à l'aide d'un UV-Visspectrophotomètre. Chaque crème, pesant 0.1 g, a été dissoute dans 100 mL de méthanol dans unfiole jaugée et filtrée à l'aide de Whatman n° 1. Un total de 3 mL de la solution a été misdans une cuvette pour mesurer son absorbance à l'aide d'un spectrophotomètre UV-Vis. Par la suite, lela détermination de la valeur SPF à l'aide du spectrophotomètre UV-Vis était connue de lacaractéristiques d'absorption de la crème à des longueurs d'onde de 290 à 320 nm avec des intervalles de 5 nm.Le calcul de la valeur SPF utilise l'équation suivante [20,21]:

abs=Absorbance de l'échantillon.
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