Le Cistanche Glycoside A inhibe l'activité des ostéoclastes via la voie JNK/MAPK

Cistanche deserticola YCMa, une médecine traditionnelle chinoise pour tonifier les reins, est enregistrée dans l'édition 2015 de la Pharmacopée chinoise. C'est une tige succulente du genre Cistanche de la famille des Lewandaceae, principalement distribuée en Mongolie intérieure, au Ningxia, au Gansu, au Qinghai et au Xinjiang. La Cistanche deserticola et la Cistanche deserticola tubulaire ont une valeur médicinale extrêmement élevée. Ils pénètrent dans les méridiens des reins et du gros intestin. Le Compendium of Materia Medica rapporte que la Cistanche deserticola "est une substance nourrissante mais pas sévère, c'est pourquoi elle est appelée Cistanche deserticola" et "elle est chaude mais peut humidifier, reconstituer mais pas sécher, lisser mais pas la diarrhée".

Cistanche désertique

Il a pour effets de tonifier le yang des reins, de bénéficier de l'essence et du sang, d'humidifier les intestins et de déféquer. Traditionnellement, il est utilisé pour le déficit en yang des reins, le déficit d'essence et de sang, l'impuissance, l'infertilité, les douleurs à la taille et aux genoux, la faiblesse des muscles et des os et la constipation due à la sécheresse intestinale. C'est le médicament tonifiant pour le yang des reins le plus fréquemment utilisé. dans l'histoire. La recherche pharmacologique moderne montre que Cistanche deserticola a de nombreux effets tels que l'amélioration de la fonction sexuelle, l'anti-âge, l'amélioration des capacités d'apprentissage et de mémoire, la lutte contre la maladie d'Alzheimer, la défécation, etc. Il est largement utilisé dans les prescriptions cliniques de la médecine chinoise, les médicaments traditionnels chinois brevetés. , et des préparations simples et des produits de soins de santé.

Les principaux composants chimiques de Cistanche deserticola sont les glycosides phényléthanoïdes, les iridoïdes et leurs glycosides, les lignanes et les polysaccharides. Des études pharmacologiques modernes ont montré que les glycosides phényléthanoïdes sont les substances actives les plus importantes de Cistanche deserticola et ont des effets évidents contre la maladie d'Alzheimer, la maladie de Parkinson, l'ischémie myocardique et d'autres effets.

Principaux constituants chimiques de Cistanche deserticola

Cistanoside A (CisA): Une classe de glycosides phényléthanoïdes extraits de Cistanche deserticola, avec des activités biologiques anti-inflammatoires, antioxydantes et anti-ostéoporose.

La voie de la protéine kinase activée par les mitogènes (MAPK) est une chaîne de transmission d'informations importante dans les cellules, qui peut participer à des processus tels que le développement neuronal, la différenciation des ostéoclastes, la migration cellulaire et le cancer en favorisant l'apoptose et la prolifération cellulaires, ainsi qu'en régulant les fonctions. de diverses cytokines.

Le glycoside de phényléthanol est le principal composant actif de Cistanche deserticola.

Arrière-plan: Des études ont confirmé que le glycoside A de Cistanche deserticola a des effets anti-inflammatoires, antioxydants et anti-ostéoporose, mais ses effets et ses mécanismes potentiels sur la différenciation et la fonction des ostéoclastes font encore défaut dans la recherche.

Objectif: Étudier les effets et les mécanismes du glycoside A de Cistanche deserticola sur la différenciation des ostéoclastes in vitro et la résorption osseuse induite par le ligand activateur du récepteur du facteur nucléaire kappa B.

Méthode:Les macrophages de la moelle osseuse ont été extraits et cultivés du fémur et du tibia de souris C57BL/6 âgées de 4-6 semaines. La toxicité de différentes concentrations de glycoside A de Cistanche deserticola (5, 10, 20, 40, 80, 160 μ mol/L) sur les macrophages de la moelle osseuse a été testée à l'aide du test de toxicité CCK-8. La coloration à la phosphatase acide résistante au tartrate a été utilisée pour observer l'intervention de différentes concentrations de glycoside A de Cistanche deserticola sur la différenciation des ostéoclastes et déterminer la concentration d'intervention efficace du médicament. L'expérience a été divisée en groupes témoins positifs, groupes à doses faibles, moyennes et élevées de glycoside A de Cistanche deserticola (40, 80, 160 μ mol/L). Après l’adhésion cellulaire, 50 ng/mL de ligand activateur du récepteur du facteur nucléaire kappa B ont été ajoutés à chaque groupe pour induire la différenciation des ostéoclastes. Les groupes de doses faibles, moyennes et élevées de glycoside A de Cistanche deserticola ont été traités avec des doses correspondantes de glycoside A de Cistanche deserticola. L'effet du glycoside A de Cistanche deserticola sur la formation d'ostéoclastes a été détecté à l'aide d'une coloration peptidique du stylo fantôme à anneau d'actine et d'une coloration DAPI ; Observation de l'effet des glycosides A de Cistanche sur la fonction de résorption osseuse des ostéoclastes par des comprimés de broyage osseux colorés au bleu de toluidine ; Le Western blot a été utilisé pour détecter l’expression de protéines en amont et en aval dans la voie JNK/MAPK ; La RT qPCR a été utilisée pour détecter l'expression de gènes liés à la différenciation des ostéoclastes et à la fonction de résorption osseuse, tels que la phosphatase acide résistante au tartrate, DC-STAMP, Nfatc-1, Ctsk et c-Fos.

Cistanche deserticola-améliorer l'immunité

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Résultats et conclusion :

① La coloration à la phosphatase acide résistante au tartrate, la coloration à l'anneau d'actine et la coloration au bleu de toluidine dans les fosses osseuses ont montré que, par rapport au groupe témoin positif, les glycosides A de Cistanche avaient un effet inhibiteur significatif et dépendant de la dose sur la fonction de différenciation et de résorption osseuse des ostéoclastes induite par le noyau. ligand activateur du récepteur du facteur kappa B in vitro.

② Les résultats de la RT qPCR ont montré que, par rapport au groupe témoin positif, les niveaux d'expression d'ARNm de la phosphatase acide résistante au tartrate, DC-STAMP, Nfatc-1, Ctsk et c-Fos dans les doses élevée et faible. Les groupes de glycoside A de Cistanche deserticola étaient significativement réduits, et l'effet de réduction du glycoside A de Cistanche deserticola était plus significatif dans le groupe à forte dose. Les résultats du Western blot ont montré que le glycoside A de Cistanche deserticola à forte dose inhibait de manière significative l'expression de la protéine p-JNK à 10, 20, 30 et 60 minutes d'intervention ; Par rapport au groupe témoin positif, les groupes à dose faible, moyenne et élevée de glycoside A de Cistanche deserticola ont inhibé de manière significative l'expression des protéines Nfatc1 et c-Fos de manière dose-dépendante. Les résultats indiquent que le glycoside A de Cistanche deserticola peut inhiber la formation et la fonction de résorption osseuse des ostéoclastes en réduisant le niveau de protéine p-JNK, en supprimant l'activation de la voie MAPK et l'expression de gènes clés dans les ostéoclastes.

La publication dans le Chinese Journal of Organizational Engineering Research se concentre sur la construction organisationnelle ; cellules osseuses; Chondrocytes ; Culture cellulaire ; Fibroblastes ; Cellules endothéliales vasculaires ; l'ostéoporose; ingénierie tissulaire

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Mots-clés: Cistanche glycosides A, ostéoclastes, MAPK, JNK, RANKL, RANK, Ostéoporose, glycoside phényléthanoïde