Cistanche Tubulosa protège les neurones dopaminergiques grâce à la régulation de l'apoptose et du facteur neurotrophique dérivé des cellules gliales : in vivo et in vitro-Ⅱ

Tests comportementaux

Test de natation (Zhu et al., 2014)

La coordination des mouvements corporels chez la souris a été mesurée par le test de natation. Les souris ont été placées individuellement dans un réservoir d'eau (25 cm de hauteur et 10 cm de diamètre) contenant 10 cm d'eau et testées dans un environnement calme pour enregistrer leur durée d'arrêt sur 5 min.

Test en champ ouvert (Kawai et al., 1998)

L'activité locomotrice a été mesurée à l'aide du test Open Field. Les souris ont été testées dans un environnement calme et faiblement éclairé et placées individuellement dans un récipient en acrylique transparent de 30 cm × 30 cm × 15 cm avec une grille de séparation de 6 cm × 6 cm au fond. Les souris ont eu 10 minutes pour s'adapter à l'environnement, puis la déambulation du numéro de grille et la fréquence d'élevage de souris individuelles ont été mesurées cinq fois consécutives pour obtenir des valeurs moyennes.

CISTANCHE TUBULOSA NATUREL POUR AMÉLIORER LA FONCTION SEXUELLE PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Échantillonnage de tissus cérébraux

Avant le prélèvement de tissus, les souris ont été nourries ad libitum avec libre accès à l’eau et ont reçu une intervention médicamenteuse pendant 14 jours consécutifs. Quatre souris dans chaque groupe ont été sélectionnées et rapidement décapitées. Le SN (Bregma : -2,75 mm -2,92 mm) de chaque animal a été isolé et placé sur de la glace. Les tissus cérébraux ont été rincés avec une solution de chlorure de sodium glacée à 0,9% pour éliminer tout sang et séchés sur du papier filtre avant d'être conservés à -80 ° C. Quatre souris de chaque groupe ont été anesthésiées par voie intrapéritonéale et leur poitrine a été ouverte. Une aiguille de perfusion a ensuite été insérée dans le ventricule gauche de chaque animal. Pour éliminer le sang dans le système circulatoire, l'appendice auriculaire droit a été coupé et l'animal a été perfusé avec une solution saline normale à 4 ° C jusqu'à ce que le foie pâlisse pour assurer une perfusion successive. Une fois que l'effluent de l'oreillette droite est devenu clair, chaque animal a été perfusé avec un fixateur de paraformaldéhyde à 4 %. Après la perfusion, le tissu cérébral de chaque animal a ensuite été soigneusement disséqué et post-fixé dans du paraformaldéhyde à 4% pendant 24 h. Les tissus cérébraux fixés ont ensuite été rincés à l'eau courante, déshydratés dans une série graduée de solutions d'éthanol et nettoyés dans une solution de xylène. Ceci a été suivi d'une immersion et d'une inclusion dans la paraffine.

Modifications de la quantité de DA mesurées par HPLC

Le SN nanopoudre de chaque groupe a été placé dans un bain de glace contenant une solution de chlorure de sodium à 0,9 % (rapport 1 : 9). Le tissu cérébral a été homogénéisé à l'aide d'un perturbateur cellulaire à ultrasons et centrifugé à 1 200 tr/min pendant 20 min à 4 °C pour obtenir le surnageant. Pour la HPLC, une colonne Hypersil AA-ODS (2,1 mm × 200 mm, 5 µm) à une température de colonne de 30 °C a été utilisée. La détection de fluorescence a été réalisée à 280 nm λex et 340 nm λem. Le volume d'injection était de 10 µL.

Expression de TH, GDNF, GFR 1 et Ret détectée par immunohistochimie

Des coupes de paraffine (5 µm d'épaisseur) de tissu cérébral individuel ont été isolées de chaque animal et placées dans un bain d'eau tiède à 40◦C pour aplatir et adhérer aux lames de verre. Toutes les lames de tissus ont été incubées dans un four à 60 ° C pendant 3 à 6 h, suivies d'un déparaffinage au xylène, d'une déshydratation par gradient d'éthanol et d'une récupération de l'antigène par incubation dans un tampon d'acide citrique et chauffage au micro-ondes pendant 20 min. Les lames de tissus ont ensuite été incubées dans une solution à 3 % de H2O2 à température ambiante pendant 10 min. Après avoir été lavées trois fois dans du PBS, les lames de tissus ont été incubées avec du sérum normal dans une chambre fermée à température ambiante pendant 20 min. La coloration immunohistochimique a été réalisée conformément aux instructions du fabricant. Un analyseur d'image Motic Med 6.0 a été utilisé pour calculer la valeur de la densité optique intégrée dans les cellules colorées positivement.

Analyse par Western Blot dans les tissus cérébraux de souris

Cette étude a évalué l'expression protéique de la tyrosine hydroxylase (TH), du GDNF, du GFR 1, du Ret, du Bcl2 et du Bax. Le lysat cérébral de chaque groupe a été homogénéisé pendant 3{{10}} min sur de la glace, suivi d'une centrifugation à basse température, 20,000 tr/min, à 4 ◦C pendant 5 min pour récupérer le surnageant. Les échantillons de protéines ont été séparés sous pression constante à l'aide d'un gel SDS-PAGE à 1 0 % comme décrit ci-dessus. La concentration d'anticorps primaire : TH 0,15 mg/ml, GDNF 0,5 mg/ml, GFR 1 0,8 mg/ml, Ret 0,63 mg/ml, Bcl-2 0,34 mg/ml et Bax 0,11. mg/ml. La procédure était la même que ci-dessus.

CISTANCHE TUBULOSA NATUREL POUR ANTI-ÂGE ANTI-ALZHEIMER PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Analyses statistiques

Cette étude a utilisé le logiciel statistique SPSS 20.0 pour le traitement et l'analyse des données. Les valeurs des paramètres ont été exprimées en moyenne ± écart type (¯x ± S). L'ANOVA a été utilisée pour l'analyse des données à un seul facteur. Le LSD ou le test Games-Howell a été utilisé pour comparer les groupes. P.< 0.05 (or P < 0.01) was considered as a statistically significant difference.

RÉSULTATS

Les composants actifs de la nanopoudre de C. tubulosa

Dans la plage de balayage de 200 à 400 nm, ECH chez C. tubulosa et VER à 330 nm présentaient le pic d'absorption maximal, qui apparaissait dans les 20 minutes. L'ICA présentait des pics d'absorption maximaux à 270 nm et apparaissait après 20 minutes (Figure 1A). Les résultats ont montré que les échantillons négatifs n’interféraient pas avec la détection (Figure 1B). Les échantillons et le contrôle présentaient les mêmes pics chromatographiques et l'échantillon négatif n'en présentait aucun. Cela a montré que les autres ingrédients de l’échantillon n’interféraient pas avec le composant mesuré. De plus, les trois composants et les pics adjacents peuvent atteindre la ligne de base de séparation et le degré de séparation est supérieur à 1,5.

La nanopoudre de C. tubulosa réduit la cytotoxicité induite par le MPP+ - dans les cellules MES23.5

La viabilité des cellules MES23.5 était significativement réduite avec l’augmentation des concentrations de MPP+. La figure 2F montre la cytotoxicité significative de différentes concentrations de MPP+.

La nanopoudre de C. tubulosa a réduit la cytotoxicité induite par le MPP+- et amélioré la viabilité des cellules MES23.5. La figure 2G montre que des doses de nanopoudre de C. tubulosa de 10 à 250 µg/mL ont exercé des effets protecteurs dépendants de la dose sur les cellules MES23.5 traitées au MPP+-.

Effet cytomorphologique de la nanopoudre de C. tubulosa

Les cellules MES23.5 normales avaient une bonne adhésion cellulaire et étaient en forme de fuseau avec des limites cellulaires et des synapses claires. Les cellules MES23.5 endommagées par le MPP+- présentaient une mauvaise adhésion et un rétrécissement cellulaire, et beaucoup étaient en suspension dans les médias avec des synapses contractées. Ces cellules étaient agrégées, rétrécies et rondes avec des vacuoles à l'intérieur, et les noyaux étaient désintégrés ou effondrés. La nanopoudre de C. tubulosa à différentes doses a amélioré la cytomorphologie des cellules MES23.5 à différents degrés en améliorant l'adhésion cellulaire et la clairance synaptique du groupe de véhicules. Les cellules MES23.5 du groupe de traitement à haute dose de C. tubulosa présentaient une morphologie similaire à celle du groupe témoin normal (Figures 2A – E).

Effet de la nanopoudre de C. tubulosa sur l'expression des TH et l'apoptose dans les cellules

La figure 3 montre une réduction significative de l'expression de la protéine TH dans le groupe véhicule. L'expression de la protéine TH a augmenté différemment dans les groupes traités avec différentes doses de C. tubulosa. Cependant, le test LSD n’a montré aucune différence significative entre les trois groupes traités.

La figure 4 montre les résultats de l'évaluation de l'apoptose par cytométrie en flux. Le taux d'apoptose dans le groupe véhicule était significativement plus élevé que dans les autres groupes. Les cellules traitées avec différentes doses de nanopoudre de C. tubulosa ont montré différents degrés de baisse du taux d'apoptose par rapport au groupe véhicule. Les cellules du groupe de traitement à dose moyenne et élevée de C. tubulosa présentaient l'amélioration la plus significative du taux d'apoptose par rapport aux autres groupes de traitement de C. tubulosa. Le test LSD a montré qu’il n’y avait pas de différence significative entre les deux groupes traités, mais également une différence significative entre le groupe à faible dose.

Effet de la nanopoudre de C. tubulosa sur l'expression de la protéine Bcl2/Bax dans les cellules

La figure 5 montre que l'expression de la protéine Bcl2 dans les cellules du groupe véhicule était significativement inférieure à celle du groupe témoin normal. En revanche, l’expression de la protéine Bax dans les cellules du groupe véhicule était significativement plus élevée que dans le groupe témoin normal. Les groupes de traitement de C. tubulosa ont montré une expression accrue de la protéine Bcl2 et une diminution de l'expression de la protéine Bax dans les cellules MES23.5 traitées au MPP+-. Entre les trois groupes traités, il y avait des différences significatives au test LSD. Ces effets étaient dose-dépendants.

Tests comportementaux

Les résultats du test de natation suggèrent que les souris du groupe véhicule avaient des durées d'arrêt relativement longues, qui augmentaient avec le temps. Au jour 14, les souris du groupe véhicule avaient une durée d'arrêt significativement plus longue que les souris du groupe témoin normal. La durée stationnaire des souris dans

la faible doseC. tubuleuseLe groupe de traitement n'était pas significativement différent de celui des souris du groupe véhicule. Cependant, la durée stationnaire des souris du groupe de traitement à forte dose de C. tubulosa était significativement inférieure à celle des souris du groupe véhicule.

Les résultats du test en champ ouvert suggèrent qu'après les dommages induits par le MPTP chez les souris, les souris du groupe véhicule ont démontré une diminution significative de leur capacité d'activité spontanée, comme le montre la fréquence d'élevage. Après une administration de 14-journée deNanopoudre de C. tubulosa, les souris des groupes de traitement à doses modérées et élevées avaient des fréquences d'élevage significativement plus élevées que les souris du groupe véhicule (Figures 6A, B).

Effet de la nanopoudre de C. tubulosa sur la teneur en DA chez la souris

Les modifications de la teneur en DA du SN ont été déterminées par HPLC. Il a été constaté que le contenu en DA dans le cerveau du groupe de véhicules était considérablement réduit. La teneur en DA dans le cerveau des souris PD du groupe de traitement à faible dose de C. tubulosa ne différait pas de manière significative de celle des souris du groupe véhicule. Cependant,Traitement contre C. tubulosaaugmenté les niveaux de DA dans le cerveau des souris PD de manière dose-dépendante. Les cerveaux des souris PD traitées avec une dose élevée de C. tubulosa avaient une teneur en DA significativement plus élevée que les cerveaux des souris du groupe véhicule (Figure 6C).

Effet de la nanopoudre de C. tubulosa sur l'expression de TH chez la souris

Le nombre de cellules TH-positives et le niveau d’expression de la protéine TH dans le SN des souris PD induites par MPTP étaient inférieurs à ceux des souris du groupe témoin. Après le traitement par C. tubulosa, le nombre de cellules TH-positives et le niveau d'expression de la protéine TH dans le SN des souris PD induites par MPTP ont augmenté, avec une différence significative entre le groupe de traitement à haute dose par C. tubulosa et le groupe véhicule. par test LSD ; et il y avait des différences significatives entre les trois groupes traités (Figure 7).

Effet de la nanopoudre de C. tubulosa sur l'expression protéique du GDNF et de ses récepteurs, GFR 1 et Ret chez la souris

L'expression protéique du GDNF et de ses récepteurs, GFR 1 et Ret, dans les cellules colorées positivement, a été évaluée par immunohistochimie. L'analyse par Western blot a été utilisée pour évaluer les niveaux d'expression des protéines dans le SN des différents groupes de souris. Les résultats pour les différents groupes étaient similaires en utilisant les deux méthodes de détection. L'expression du GDNF et de ses protéines réceptrices, GFR 1 et Ret, dans les cellules positivement colorées du SN des souris du groupe véhicule, était significativement inférieure à celle des souris du groupe témoin normal. Différentes doses de traitement par C. tubulosa ont augmenté le nombre de cellules GDNF-, GFR 1- et Ret-positives (Figures 8A à S).

L'expression protéique de GDNF, GFR 1 et Ret dans le SN des souris du groupe véhicule était significativement inférieure à celle des souris du groupe témoin. Augmentation des concentrations de traitement deNanopuissance de C. tubulosaa considérablement amélioré l’expression de ces protéines. L'expression protéique de GDNF, GFR 1 et Ret dans le SN des souris du groupe de traitement à forte dose de C. tubulosa était significativement plus élevée que chez les souris du groupe véhicule (P< 0.01; Figures 8T, U). 

Effet de la nanopoudre de C. tubulosa sur l'expression protéique de Bcl2/Bax chez la souris

L'expression de la protéine Bcl2 était significativement réduite et celle de la protéine Bax était significativement améliorée dans le SN des souris du groupe véhicule (P< 0.01) compared with the mice in the normal control group. High-dose C. tubulosa treatment significantly increased Bcl2 protein expression and significantly reduced Bax protein expression in the brains of the vehicle mice (P < 0.01; Figure 9). LSD test showed there was no significant difference between the middle-dose and high-dose groups but a significant difference between the low-dose group. 

DISCUSSION

PD et apoptose

La MP est une maladie neurodégénérative. Selon Zhang et al. (2005), la prévalence est de 10,7 % dans la population chinoise de plus de 55 ans et de 1,67 % chez celle de plus de 65 ans. Le nombre de patients parkinsoniens augmente chaque année avec l'accélération du vieillissement mondial, faisant peser une lourde charge financière sur les familles des patients. et la société dans son ensemble. Dans le cerveau, les neurones dopaminergiques sont principalement impliqués dans la synthèse et la sécrétion de DA. Ils sont largement répartis dans le système nerveux central et localisés principalement dans le SN (80 %). TH est l’enzyme clé limitante pour la synthèse de DA. Ainsi, l'inhibition de l'activité des TH réduit la synthèse de DA (Huot et Parent, 2007). Les principaux changements pathologiques et biochimiques de la MP sont l'apoptose des neurones dopaminergiques du SN, une réduction significative de la DA nigrostriatale et la formation de corps de Lewy dans les neurones dopaminergiques (Dexter et Jenner, 2013). L'étiologie de la MP implique des facteurs génétiques associés, des facteurs environnementaux et le vieillissement du système nerveux (Allam et al., 2005). La pathogenèse de la MP reste floue en médecine moderne. Depuis la fin des années 1960, la thérapie de remplacement par la lévodopa a été utilisée avec succès pour traiter la MP et a été reconnue comme un tournant majeur dans le traitement de la MP. Cependant, l'application à long terme de cette thérapie provoque des effets secondaires et la thérapie ne traite pas les causes sous-jacentes de la MP (Del Sorbo et Albanese, 2008). Par conséquent, la recherche active de nouveaux médicaments ou méthodes de traitement ciblant la protection des neurones dopaminergiques est cruciale pour traiter la MP.

Dans des études antérieures, l'application du marquage terminal dUTP médié par la désoxynucléotidyl transférase indiquait que 0, 6 % à 4,8 % des neurones dopaminergiques du SN des patients parkinsoniens présentaient une apoptose (Mochizuki et al., 1996). La microscopie électronique a montré des caractéristiques apoptotiques, notamment une condensation chromatique et des corps apoptotiques dans les cellules dopaminergiques (Anglade et al., 1997). Tompkins et coll. (1997) ont effectué une analyse ultrastructurale d'autopsies de tissus cérébraux de patients atteints de MP, de MA et de maladie diffuse à corps de Lewy (DLBD). Ils ont trouvé des corps apoptotiques dans la couche dense du SN chez les patients atteints de MP et de DLBD, fournissant des preuves concluantes de l'apoptose neuronale dans la MP et les maladies associées. Par conséquent, la réduction ou la suppression de l’apoptose des neurones dopaminergiques est fondamentale pour le traitement de la maladie de Parkinson.

Des études antérieures ont montré que le MPTP induisait des symptômes de type PD. Le MPTP traverse la barrière hémato-encéphalique et est métabolisé par les monoamine oxydases de type B dans les astrocytes. Il est ensuite converti en MPP+ toxique, qui s'accumule dans les mitochondries des neurones dopaminergiques grâce à l'apport protéique du transporteur DA. Il génère ainsi un excès d’oxygène de radicaux libres qui inhibent l’activité du complexe I de la chaîne respiratoire mitochondriale et la synthèse d’ATP. Ces événements favorisent en outre la formation de radicaux libres et les réactions de stress oxydatif, et conduisent finalement à la dégénérescence et à la mort des neurones dopaminergiques. Par conséquent, cette étude a utilisé MPP+ pour établir un véhicule in vitro dans les neurones dopaminergiques MES23.5 et MPTP pour induire un véhicule chez la souris pour une vérification mutuelle. Selon les résultats du test MTT, MPP+ a réduit de manière significative la viabilité des cellules MES23.5, ce qui suggère que MPP+ était cytotoxique pour les neurones dopaminergiques. Les résultats ont également démontré que C. tubulosa améliorait efficacement l'expression de protéines anti-apoptotiques et inhibait l'augmentation de l'apoptose induite par le MPP+-.

PD et GDNF

Le GDNF est un facteur neurotrophique isolé pour la première fois par Lin et al. (1993). Lin et coll. (1993) ont également montré que le GDNF avait des effets nutritionnels spécifiques sur les neurones dopaminergiques du mésencéphale des rats. Le GDNF, la neurturine (NTN), la perséphine (PSP) et l'artémine (ART) constituent la famille des GDNF. Ce sont des protéines sécrétoires structurellement similaires et fonctionnellement liées (Kotzbauer et al., 1996 ; Baloh et al., 1998 ; Milbrandt et al., 1998 ; Woodbury et al., 1998).

Le récepteur GDNF se compose de deux composants. Le premier composant, GFR, est fixé à la membrane externe du glycosylphosphatidylinositol (GPI) et ancré à la surface de la connexine. Le deuxième composant est la protéine Ret. La recherche a montré qu'il existe quatre types différents de GFR : GFR 1, GFR 2, GFR 3 et GFR 4. GFR 1 est un récepteur de haute affinité du GDNF (Onochie et al., 2000 ; Chen et al., 2001 ; Lindahl et al., 2001). La protéine Ret est un récepteur fonctionnel du GDNF. La molécule homodimère de GDNF se lie directement au GFR 1 pour former des complexes et interagit avec Ret, entraînant la dimérisation et l'activation de Ret. En raison de l'autophosphorylation de Ret, Ret active plusieurs voies de signalisation TH courantes. En l'absence de protéine Ret, le GDNF provoque la phosphorylation des protéines MAPK, PI-3 et PLC-, en plus de l'expression de l'ARNm et de l'activité fonctionnelle de C-fos via sa protéine réceptrice, GFR 1 (He et al., 2008).

Des études ont démontré que le GDNF avait l'effet protecteur le plus puissant sur les neurones dopaminergiques (Rangasamy et al., 2010 ; Campos et al., 2012). Dans les véhicules utilisant le MPTP et l'6-hydroxydopamine (6-OHDA) pour induire des dommages aux neurones dopaminergiques, le GDNF protège les neurones dopaminergiques en réduisant l'apoptose et en favorisant la croissance axonale pour induire la différenciation des cellules souches (Lucas et al., 2012 ; Littrell et al., 2013). Lin et coll. (1993) ont montré que le GDNF favorisait spécifiquement la viabilité, la différenciation et la croissance axonale des neurones dopaminergiques afin de favoriser l'absorption de DA dans les neurones. L'étude a également montré que le GDNF empêchait non seulement la toxicité aiguë, mais atténuait également la toxicité à long terme du MPP+ ou du 6-OHDA dans les neurones dopaminergiques, empêchant ainsi la mort cellulaire dans les cellules stressées ou endommagées (Yu et al., 2010). De plus, le GDNF a favorisé la prolifération et la différenciation des cellules souches neurales en neurones dopaminergiques dans le mésencéphale (Lindsay, 1995) pour sauver les neurones dopaminergiques de la dégénérescence rétrograde (Hong-Juan et al., 2011).

Des études ont montré que l'expression du GDNF dans le SN était significativement réduite dans les véhicules animaux (Yang et al., 2010). Cela suggère qu'il pourrait s'agir de l'un des mécanismes de pathogenèse chez les rats atteints de maladie de Parkinson. L'injection de 5 à 15 µg/j de GDNF dans le ventricule latéral ou le striatum d'un animal véhicule induit par la MPTP pendant trois mois consécutifs a favorisé la réparation nigrostriatale du système dopaminergique chez l'animal véhicule (Grondin et al., 2002). Des études sur le traitement par GDNF de la MP dans des véhicules animaux ont montré que l'injection intracérébrale de GDNF dans différentes régions du cerveau, telles que le SN, le noyau caudé et le ventricule latéral, améliorait les troubles du mouvement associés aux modèles animaux de MP, notamment une diminution de l'activité motrice, de la rigidité musculaire et tremblement (Grondin et al., 2002). Cependant, le GDNF ne peut pas traverser directement la barrière hémato-encéphalique. Par conséquent, l’injection cérébrale locale de GDNF implique des risques importants et des difficultés d’application clinique. Les applications visant à introduire du GDNF exogène via des microsphères à libération contrôlée, des capsules à libération prolongée et des gènes viraux sont toujours à l'étude (Liang et al., 2010 ; Yang et al., 2010 ; Qiao et al., 2012). Compte tenu des limites des diverses techniques permettant d'introduire du GDNF exogène dans le cerveau, les agents neuroprotecteurs qui favorisent la libération de GDNF endogène sont importants pour les applications cliniques.

PD etC. tubuleuseNanopoudre

La MP est plus fréquente chez les adultes d'âge moyen et les personnes âgées. La théorie de la MTC considère que la MP se situe principalement dans le cerveau et est principalement due à une insuffisance hépatique et rénale, en plus d'une insuffisance énergétique vitale et sanguine. Selon cette théorie, le traitement de la maladie de Parkinson devrait donc se concentrer sur la revigoration des reins et de la moelle osseuse.Yang et coll. (2010)a utilisé des essais cliniques randomisés, en double aveugle et contrôlés par placebo et a découvert qu'une thérapie combinée utilisant Madopar et des recettes tonifiantes pour les reins atténuait les dysfonctionnements moteurs des patients parkinsoniens. Le résultat du traitement était meilleur qu’une seule thérapie utilisant Madopar. L'efficacité thérapeutique de la MTC en monothérapie ou de la prescription de composés dans la MP a été confirmée dans des modèles animaux et des applications cliniques de la MP. Les applications de MTC pour tonifier les reins et favoriser la circulation sanguine ont réduit la dose de monothérapie pour la MP utilisant Madopar. Certaines études ont suggéré que la MTC améliorait les symptômes de la maladie de Parkinson et protégeait les neurones dopaminergiques, ce qui pourrait être étroitement lié à la promotion de l'expression endogène du GDNF (Hong-Juan et al., 2011 ; Qiao et coll., 2012).

Le composé tonifiant les reins utilisé dans cette étude,C. tubuleusenanopoudre, contenueCistanche, épimède, etRhizome polygonal. La recherche moderne suggère que la composition chimique deCistancheest ECH, qui protège les neurones dopaminergiques du SN chez les souris PD induites par MPTP et inhibe la réduction de DA et du transporteur DA (Zhao et coll., 2010). De plus, il empêche la réduction de la DA induite par la 6-OHDA et protège les neurones dopaminergiques striataux (Chen et coll., 2007). Epimedium inhibe l'activation de la caspase-3 et exerce des rôles neuroprotecteurs (Liu et coll., 2011). Les flavonoïdes d'Epimedium favorisent efficacement la prolifération et la différenciation des cellules souches neurales (Yao et coll., 2010).

Dans cette étude,C. tubuleusela nanopoudre a contrarié l'augmentation du MPP+-apoptose induite de manière dose-dépendante. Il a considérablement amélioré l'expression des TH dans lein vitrovéhicule et avait des effets anti-apoptotiques significatifs sur les neurones dopaminergiques. Les souris véhicules induites par le MPTP ont présenté des troubles du comportement et une expression significativement réduite de TH dans les tissus du mésencéphale et des niveaux de DA, qui sont des caractéristiques pathologiques typiques de la MP. Différents dosages deC. tubuleusela nanopoudre a raccourci la durée d'immobilisation, amélioré les activités autonomes, amélioré les troubles du comportement, élevé les niveaux de DA dans le cerveau et augmenté l'expression du TH dans les véhicules. Ces résultats suggèrent queC. tubuleusela nanopoudre a exercé des effets protecteurs sur les neurones dopaminergiques, améliorant ainsi les troubles du comportement des véhicules. Différents dosages deC. tubuleusela nanopoudre a augmenté l'expression de la protéine GDNF et de ses protéines réceptrices dans le cerveau des souris véhicules. Haute doseC. tubuleusele traitement a significativement régulé positivement l’expression de Bcl2 et réduit l’expression de Bax, ce qui suggère queC. tubuleusenanopoudrepourrait favoriser l'expression et la sécrétion du GDNF dans le cerveau de souris endommagé par le MPTP. En outre, il pourrait exercer des effets neuroprotecteurs sur les neurones dopaminergiques et minimiser l’apoptose neuronale grâce aux rôles de soutien neurotrophique du GDNF.

Cette étude a démontré queC. tubuleusela nanopoudre a exercé des effets protecteurs sur les neurones dopaminergiques dans les deux casin vitroetin vivoet augmentation de l’expression du TH pour améliorer le contenu du DA. Il a également amélioré les troubles du comportement chez les souris véhicules induites par le MPTP, régulé l'expression protéique du GDNF et de ses protéines réceptrices dans le SN et eu des effets anti-apoptotiques chez les souris PD. Le mécanisme sous-jacent aux effets cliniques deC. tubuleusela nanopoudre dans la MP peut impliquer une augmentation de la teneur en GDNF endogène dans le cerveau et ainsi une réduction des dommages causés aux neurones dopaminergiques.

CISTANCHE TUBULOSA NATUREL POUR AMÉLIORER LA FONCTION SEXUELLE PHGS75% ECH 30% ACT 12