Détermination de la teneur totale en saponines dans Boschniakia Rossica et Herba Cistanches par spectrophotométrie Ⅰ

Abstrait:

Objectif Cette méthode quantitative est établie à partir des saponines totales de Boschniakia rossica etCistanches aux herbeset le contenu dules saponines totales sont déterminées． Méthodes Le salidroside a été sélectionné comme substance de référence, la réaction colorée a été utilisée avec la vanilline et l'acide perchlorique. Ensuite, la teneur en saponines totales de Boschniakia rossica et Herba cistanches a été déterminée à 523 nm par spectrophotométrie. Ｒrésultats La courbe du salidroside était linéaire sur la plage de 0． 05133 - 0． 2567mg·ml－ 1avec la corrélation de 0． 9992, et l'équation de régression linéaire était Y=1． 611X + 0． 0573． Pour Boschniakia rossica, la récupération moyenne du salidroside était de 99． 68% avec ＲSD de 1． 68 % (n= 6); et pour les distances Herba, la récupération moyenne du salidroside était de 101． 18% avec un ＲSD de 0． 94 % (n= 6)． Conclusion La méthode est précise, simple et fiable． Il peut donc être utilisé pour déterminer la teneur en saponines totales de Boschniakia rossica et Herba cistanches.

Mots clés:Boschniakia rossica;Cistanches aux herbes; Saponines totales; Détermination; Spectrophotométrie ; Salidroside

COMBIEN DE TEMPS FAUT-IL POUR CISTANCHE FONCTIONNE?

Cistanche désertique Y． C. Ma et Bosehniakia rossica Fedtseh et Flerov sont des plantes médicinales parasites appartenant à la famille des Orobanchiaceae. Cistanche deserticola est une plante parasite qui vit sur les racines de Haloxylon ammodendron, un arbre du désert. Il est principalement produit au Xinjiang et dans la Ligue Alxa, en Mongolie intérieure. Il est connu sous le nom de « ginseng du désert » en raison de son faible rendement et de sa haute valeur médicinale. Grasshopper [1] est produit dans le nord-est de mon pays [2]. Selon le folklore, il a pour effet d'immortalité, c'est pourquoi on l'appelle "l'herbe de l'âge éternel" du Nord-Est. Il est utilisé pour l'impuissance due à une insuffisance rénale, aux douleurs froides à la taille et aux genoux, à la sécheresse des intestins et à la constipation. Il peut nourrir et renforcer le corps, retarder le vieillissement et constitue une véritable ressource médicinale dans le Nord-Est [3]. Les deux ont des effets similaires, et tous deux ont pour effet de tonifier les reins, de renforcer le yang, d'humidifier les intestins et de laxatif [4]. Selon les archives sur la Cistanche deserticola dans le « Compendium of Materia Medica » de Li Shizhen de la dynastie Ming, « Cette substance est tonique mais pas dure, c'est pourquoi on l'appelle calme. Il est rare de l'obtenir de Congrong, elle est donc remplie de Cistanche désertique." C’est-à-dire que le Cistanche deserticola était autrefois utilisé comme matière médicinale alternative au Cistanche deserticola. , La recherche moderne a montré que Cistanche deserticola et Estuary deserticola ont des effets pharmacologiques tels que l'anti-âge [5, 6], l'anti-fatigue [7, 8], l'amélioration de la fonction immunitaire [9, 10] et l'amélioration de la mémoire [{{ 12}}].

La teneur en glycosides totaux de Grasshopper et Cistanche deserticola mérite une étude approfondie. Les deux contiennent des saponines, des huiles volatiles, des sucres, des acides aminés et d’autres composants. Les chercheurs ont rapporté des études comparatives sur les composants des huiles volatiles, des sucres, des acides aminés et d'autres composants des deux [4, 14, 15], mais la détermination de la teneur totale en glycosides des deux n'a fait l'objet d'aucun rapport dans la littérature. . Les principaux composants de Cistanche deserticola sont des glycosides phénylpropanoïdes (série de glucosides A, B, C, D, E, F, G, H, I, J, K) [16], et Cistanche deserticola est constitué de glycosides phényléthanoïdes (série de Cistanche deserticola )[17,18], les saponines des deux sont similaires et partagent un composant similaire, le salidroside. Nous pensons que les glycosides sont des ingrédients actifs importants dans les deux cas et nous explorons l'utilisation de la spectrophotométrie pour déterminer la teneur en glycosides totaux. , pour fournir une base théorique pour le développement et l'utilisation ultérieurs des ressources d'Echinacea deserticola et de Cistanche deserticola.

1 Matériels et instruments

1.1 Matériel et réactifs : Amarante officinale, récoltée autour du mont Changbai, identifiée comme une plante de la famille des Orobanacées

La plante entière séchée d'Orobanche coerulescens, laver l'échantillon et égoutter l'eau

Séparer, placer dans une boîte de séchage à température constante à 40 degrés, sécher jusqu'à poids constant, écraser, passer au tamis 40 mesh et préparer.

[19] ; Cistanche deserticola, Hohhot Enhe Trading Co., Ltd., identifiée comme répertoriée

Cistanche désertique Y． Viande séchée de C. Ma

Tiges, lavées, séchées à l'air, séchées jusqu'à poids constant, broyées, passées au tamis à mailles 40-, mises de côté ; rouge

Substance de référence crassuside (fournie par l'Institut chinois des produits pharmaceutiques et biologiques, numéro de lot 110818

- 200404, pour la détermination du contenu ); tous les réactifs expérimentaux utilisés sont de qualité analytique domestique.

1. 2 Spectrophotomètre UV-visible Instruments 752N (Shanghai Jingke); Tu-1901 paire

Spectrophotomètre UV à faisceau (Beijing Puxi General Co., Ltd.) ; balance analytique électronique

AL104 1/100,000 (Mettler-Toledo Instrument Shanghai Co., Ltd.) ; FW-80

Concasseur universel à grande vitesse (Shandong Hualu Electric Heating Instrument Co., Ltd.).

2 méthodes

2.1 Préparation de la solution de référence

Utilisez une balance analytique pour peser avec précision le salidroside 15, 40 mg, dissoudre dans le transfert de méthanol dans une fiole jaugée 25- et ajuster le volume au repère. Préparez-vous à contenir 0,0 % de salidroside par ml. La solution à 616 mg est utilisée comme solution de référence et est scellée au réfrigérateur pour une utilisation ultérieure.

2.2 Préparation de la solution d'essai

Utilisez une balance analytique pour peser avec précision les poudres médicinales de Grasshopper et Cistanche deserticola. 2. 0 g, placez-le dans un ballon à fond rond, ajoutez 40 ml d'éthanol à 90 %, extraction par chaleur et reflux de Grasshopper une fois, et chaleur et reflux Cistanche deserticola deux fois, chaque temps d'extraction est de 1, 5 h, après filtration par aspiration, mélanger le filtrat, concentrer à sec dans un bain-marie, ajouter 25 ml d'eau pour dissoudre, extraire 3 fois avec de l'éther de pétrole, 25 ml à chaque fois, jeter le liquide d'éther de pétrole dans la couche supérieure, puis continuer à extraire 3 fois avec du n-butanol saturé d'eau. 25 ml à chaque fois, combiner trois extraits de n-butanol, évaporer le liquide de n-butanol au bain-marie sous une hotte, le diluer avec du méthanol dans une fiole jaugée de 10 ml, bien mélanger, puis mesurer avec précision 1 ml de solution et diluer avec méthanol jusqu'à un volume de 25 ml. bouteille, mélangez bien et utilisez-la comme solution de test pour une utilisation ultérieure.

2. 3. Sélection de la longueur d'onde de mesure

va 1. Placer 25 ml de la solution de référence et la solution d'essai dans des tubes à essai gradués avec des bouchons, évaporer le solvant méthanolique dans un bain-marie à température constante à 60 degrés et ajouter 0. 2 ml de solution à 5% de vanilline et d'acide acétique glacial et 0, 8 ml de solution d'acide perchlorique ont été mis à réagir dans un bain-marie à 60 degrés pendant 15 min. Sortez le tube à essai et refroidissez-le immédiatement avec de l'eau glacée pendant 5 min. Ajouter 5 ml d'acide acétique glacial et bien agiter [20]. Préparez la solution de référence en utilisant du méthanol de la même manière. La solution après développement de la couleur a été soumise à un balayage de longueur d'onde et la longueur d'onde d'absorption maximale de 523 nm après la réaction colorée du salidroside a été sélectionnée entre 400 et 800 nm comme longueur d'onde de mesure des glycosides totaux d'Escherichia coli et de Cistanche deserticola. Les modèles de balayage de la substance témoin et de la substance d’essai sont illustrés à la figure 1.

2. 4. Enquête sur la relation linéaire : utilisez une pipette pour dessiner avec précision la solution de référence 0. 5,1. 0,

1.5,2． 0,2． 5 ml ont été mis dans des tubes à essai bouchés numérotés de 1 à 5, et la réaction colorée a été réalisée selon les étapes de "2. 3". Une expérience à blanc a été réalisée avec du méthanol dans des conditions parallèles et l'absorbance a été mesurée à une longueur d'onde de 523 nm. L'absorbance A (Y ) est l'ordonnée, concentration mg·ml-1

(X) est l'abscisse, une régression linéaire est effectuée et l'équation de régression est Y {{0}}. 611X +0. 0573 ( r=0. 9992), le résultat montre que la concentration massique de salidroside est à 0. La relation linéaire est bonne dans la plage de 05133-0,2567 mg·ml-1. Les résultats sont présentés dans la figure 2.

2.5 Test de stabilité

Mesurez avec précision une quantité appropriée de la solution d'essai de Grasshopper et Cistanche deserticola, développez la couleur selon la méthode sous « 2.3 » et mesurez la valeur d'absorbance uniformément en 6 fois en 30 minutes. Cela montre que dans les 30 minutes suivant le développement de la couleur, Grasshopper et Cistanche deserticola. La stabilité de la solution de test est relativement bonne. Les résultats sont présentés dans le tableau 1.

2. 6 Test de précision

Mesurez avec précision une quantité appropriée de la solution de référence, développez la couleur selon la méthode décrite sous « 2.3 » ci-dessus et mesurez l'absorbance 6 fois en continu. Les résultats sont présentés dans le tableau 2. Les résultats montrent que la précision de cet instrument expérimental est bonne.

Figure 1 Modèles de balayage en couche mince de la substance de référence salidroside (A), de la solution d'essai de sauterelle (B) et de la solution d'essai de cistanche deserticola (C)

2. 7. Test de répétabilité.

Pesez avec précision 6 portions de poudre de sauterelle et de cistanche deserticola, chaque portion contient 2, 0 g, après chauffage et extraction à reflux en utilisant le processus d'extraction optimal qui a été déterminé, suivez les étapes sous « 2, 3 » et mesurez la absorbance à une longueur d’onde de 523 nm. Les résultats des mesures sont présentés dans les tableaux 3 et 4.

2. 8. Test de taux de récupération de l'échantillon.

Pesez avec précision 6 échantillons de Grasshopper et Cistanche deserticola avec un pourcentage massique connu de glycosides totaux. Chaque échantillon contient 12 mg. Ajouter avec précision 2 ml de solution de référence de salidroside. Suivez "2. 2". Extrayez l'échantillon sous l'élément, déterminez la teneur totale en glycosides après développement de la couleur selon l'élément "2.3" et calculez le taux de récupération de l'échantillon. Les résultats sont présentés dans le tableau 5 et le tableau 6.