L'échinacoside améliore les lésions hépatiques diabétiques
Mar 28, 2022
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Luo Yang, Xiang Zhang, Min Liao, Yarong Hao *
ABSTRAIT
Objectifs :L'échinacoside (ECH) est un composé naturel extrait de la tige de la plante Cistanche deserticola, possède des propriétés biologiques importantes, notamment des propriétés antioxydantes, anti-inflammatoires, neuroprotectrices, antitumorales, hépatoprotectrices et immunomodulatrices. Dans cette étude, nous avons cherché à explorer les effets protecteurs et les mécanismes de l'ECH sur les lésions hépatiques diabétiques chez les souris DB/DB.
Principales méthodes :Dans l'ensemble, des 6-souris DB/DB âgées d'une semaine (n=20) ont été réparties au hasard dans 2 groupes : groupe modèle diabétique (groupe DB/DB, administration intragastrique de solution saline normale, n=10 ) et groupe traité par ECH (DB/DB plus groupe ECH, n=10). De plus, le groupe témoin normal comprenait 6-souris db/m âgées d'une semaine (groupe db/m, administration intragastrique de solution saline normale, n=10). ECH a été administré une fois par jour pendant 10 semaines. Le poids et la glycémie à jeun (FBG) ont été mesurés toutes les deux semaines. La coloration HE et la coloration à l'huile O ont été utilisées pour évaluer respectivement les changements pathologiques des tissus hépatiques et l'accumulation de lipides. La coloration par immunofluorescence, le Western blot et l'analyse RT-PCR ont été utilisés pour détecter l'expression des composants de l'axe de signalisation AMPK/SIRT1.
Principales conclusions:Les résultats ont montré que l'administration d'échinacoside pendant 10 semaines pouvait améliorer de manière significative les lésions hépatiques et la résistance à l'insuline chez les souris DB/DB (p <0.01). de="" plus,="" le="" traitement="" à="" l'échinacoside="" a="" contribué="" à="" réduire="" les="" lipides="" sanguins="" et="" la="" glycémie="" (p="">< 0,01).="" de="" plus,="" ech="" a="" activé="" la="" signalisation="" ampk/sirt1,="" le="" co-activateur="" gamma="" 1="" alpha="" du="" récepteur="" activé="" par="" les="" proliférateurs="" de="" peroxysomes="" (pgc-1),="" le="" récepteur="" activé="" par="" les="" proliférateurs="" (ppar),="" la="" carnitine="" palmitoyltransférase-1a="" (cpt1a)="" chez="" les="" souris="" db/db="" (p=""><>
Importance:L'effet de l'ECH peut être provoqué par l'activation de la voie hépatique AMPK/SIRT1 et de ses facteurs en aval pour améliorer l'adiposité, la résistance à l'insuline et la dyslipidémie.
cistanche redditamélioreadiposité, résistance à l'insuline et dyslipidémie.
1. Introduction
Le diabète sucré de type 2 (T2DM) est une maladie métabolique chronique et une menace sérieuse pour la santé physique et mentale humaine. Il peut causer des dommages à plusieurs organes, y compris des lésions hépatiques. La stéatose hépatique non alcoolique (NAFLD) est l'atteinte hépatique la plus fréquente [1,2]. Une accumulation excessive de lipides dans les hépatocytes perturbe le processus métabolique et provoque une inflammation, une fibrose hépatique et même un cancer du foie [3,4]. La pathogenèse de la maladie reste incertaine. Bien qu'il existe une forte prévalence de complications hépatiques cliniquement significatives chez les patients atteints de DT2, elles sont souvent négligées dans le cadre du traitement. Les agents actuellement utilisés pour traiter le diabète comprennent la metformine, les sulfonylurées, la thiazolidinedione (TZD) et les inhibiteurs de la dipeptidyl peptidase-4 (DPP-4). Cependant, la plupart de ces agents provoquent un dysfonctionnement hépatique et ne sont pas recommandés chez les patients insuffisants hépatiques, ce qui implique la nécessité d'étudier des agents ayant une efficacité thérapeutique et un faible profil d'effets indésirables. Des études ont démontré les propriétés antioxydantes, anti-inflammatoires, anti-tumorales, hépatoprotectrices et immunomodulatrices de l'échinacoside (ECH), principal composant de Cistanche deserticola [5]. De plus, la voie de la protéine kinase activée par l'AMP (AMPK) a été reconnue comme le principal interrupteur du métabolisme énergétique cellulaire associé à la régulation des lipides dans le foie et une cible thérapeutique pour la NAFLD. L'AMPK améliore l'activité de la protéine régulatrice de silence des mammifères -1 (SIRT1) en augmentant les niveaux de NAD plus cellulaire, ce qui entraîne la désacétylation et la modulation de l'activité des cibles SIRT1 en aval qui incluent le récepteur-coactivateur 1 activé par les proliférateurs de peroxysomes (PGC{ {20}} ) [6]. En raison de nombreuses fonctions positives à la fois dans la stéatose hépatique alcoolique (AFLD) et dans la NAFLD, SIRT1 a été largement étudiée au sein de la famille SIRT. La protéine est un régulateur clé du métabolisme des lipides et du glucose et peut améliorer la sensibilité à l'insuline du foie et d'autres tissus et réduire la stéatose hépatique [7]. PPAR- appartient aux PPAR, une sous-famille de récepteurs hormonaux nucléaires, PPAR- améliore le métabolisme des lipides par la bêta-oxydation mitochondriale et peroxydase des acides gras, médiée par CPT1A. Les souris Db/DB sont des souris diabétiques de type 2 obèses spontanées. Au fur et à mesure que ces souris vieillissent, il peut y avoir une manifestation progressive de conditions diabétiques telles que la boulimie, l'obésité, l'hyperglycémie évidente, l'hyperlipidémie et la résistance à l'insuline [8]. La pathogenèse est similaire à celle observée chez les patients atteints de DT2. Cette étude a émis l'hypothèse de l'effet thérapeutique de l'ECH sur les lésions hépatiques induites par le DT2 et la médiation de cet effet en activant la voie AMPK/SIRT1 et ses effecteurs en aval. Les souris DB/DB ont été utilisées comme modèle de lésion hépatique T2DM et ECH a été administré par voie intragastrique.
2. Matériels et méthodes
2.1. Animaux d'expérimentation
Le foie de souris DB/DB diabétiques de type 2 a été considéré comme le modèle de lésion hépatique spontanée du DT2, des souris db/m ont été utilisées comme groupe témoin et des souris diabétiques db/db ont été utilisées comme groupe modèle et groupe traité par ECH (mâle , 6 semaines, grade SPF) avec 10 souris dans chaque groupe. Toutes les souris ont été achetées à l'Université de Nanjing (Nanjing Institute of Biomedicine, Chine ; N° de certificat de production animale : SCKK (Su) 2015-0001). Les animaux (n=5 par cage) ont été hébergés dans la salle des animaux du laboratoire central de l'hôpital Renmin de l'Université de Wuhan (SPF) dans des conditions standard de température (22 ◦C ± 2 ◦C), d'humidité relative (60 %) , et cycle lumière/obscurité (12 h/12 h), avec accès ad libitum à l'eau potable et à la nourriture pendant la période expérimentale de 10 semaines. Les expériences ont été réalisées conformément aux directives d'éthique des animaux expérimentaux recommandées par l'hôpital Renmin de l'Université de Wuhan.
2.2. Principaux instruments et réactifs
Lecteur de glycémie OneTouch Ultra et bandelettes de test de glycémie (LifeScan Inc., Johnson & Johnson); anticorps monoclonal anti-humain de lapin SIRT-1 (#9475 ; CST Company des États-Unis) ; AMPK (Ab80039), p-AMPK (Ab23875), PGC-1 (Ab54481), PPAR- (Ab8934) et GAPDH (Ab37168 ; tous de la société Abcam ); CPT1A (15184-1-AP ; Wuhan Sanying Biotechnology Co., Ltd) ; kit de détection de concentration de protéines BCA (Biyuntian Biotechnology Co., Ltd.); kit de préparation de gel SDS-PAGE (Google Biotechnology Co., Ltd.); et le kit de transcription inverse RT-PCR (Takara, Japon) ont été utilisés pour les expériences.
2.3. Regroupement et administration des animaux
Avant de lancer l'expérience, {{0}}souris âgées d'une semaine ont été mises en quarantaine pendant 1 semaine et nourries de manière adaptative pendant 1 semaine. Les souris Db/DB ont été numérotées au hasard et réparties soit dans le groupe modèle diabétique (groupe db/db, n=10) soit dans le groupe traité à l'échinacoside (db/db plus groupe ECH, n =10), et 10 souris db/m ont été attribuées au groupe témoin normal (groupe DB/m, n=10). À l'âge de 8 semaines, les souris du groupe témoin normal et du groupe modèle diabétique ont reçu par voie intragastrique une solution saline normale (0, 05 ml / 10 g) et les souris du groupe traité à l'ECH ont reçu par voie intragastrique 300 mg / kg / j d'ECH. Pendant cette période, les souris ont eu un accès ad libitum à la nourriture et à l'eau pendant 10 semaines.
2.4. État général et glycémie à jeun
Les conditions de santé, la consommation de nourriture et d'eau potable et la brillance du pelage ont été observées au cours de l'expérience. À partir de la première semaine de l'expérience, le poids corporel des souris a été mesuré toutes les 2 semaines. Des échantillons de sang pour tester la glycémie à jeun ont été obtenus à partir de la veine caudale. Après le traitement ECH de 10- semaine, le test oral de tolérance au glucose (OGTT) a été effectué. Après une nuit de jeûne, les souris ont reçu du glucose (2 g/kg de poids corporel) et les concentrations de glucose sanguin ont été évaluées avant (0 min.) et 15, 30, 60 et 120 min après l'administration de glucose. L'aire sous la courbe (AUC) a été déterminée à l'aide de GraphPad Prism 7.0.
2.5. Collecte d'échantillons
Après 10 semaines d'intervention, la nourriture mais pas l'eau a été retenue pendant 12 h, les animaux ont été anesthésiés pour obtenir des échantillons de sang du plexus rétro-orbitaire. Le sérum du sang collecté a été rapidement séparé et stocké à − 80 ◦C pour déterminer l'indice biochimique. Après avoir obtenu des échantillons de sang, les souris ont été tuées et perfusées avec une solution saline normale. Le foie a été disséqué et pesé. L'indice hépatique (LI) a été calculé à l'aide de la formule suivante : LI=[poids du foie (g)/poids corporel (g)] × 100 %. Une partie du tissu hépatique frais a été conservée pour analyse pathologique, et le reste du tissu hépatique a été placé dans de l'azote liquide pendant 1 h, puis stocké à - 80 ◦C pour la détection des protéines de suivi et la réaction quantitative en chaîne de la polymérase en temps réel ( PCR).
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2.6. Examen histopathologique du foie
Le tissu hépatique frais a été rapidement séparé et une section a été fixée dans du paraformaldéhyde à 4 % pendant 24 h, suivie d'une déshydratation et d'une inclusion dans de la paraffine. Les sections ont été déparaffinées avec du xylène et réhydratées à travers un gradient d'éthanol dans de l'eau. Le noyau et le cytoplasme ont été colorés avec de l'hématoxyline et de l'éosine (HE) et scellés avec de la gomme neutre après déshydratation. Une autre partie du tissu utilisait des tranches intégrées de composé de température de coupe optimale (OTC) pour la coloration Oil Red-O.
2.7. Détection des indices biochimiques du sérum et des tissus hépatiques
Des échantillons de sérum ont été envoyés au département de laboratoire de l'hôpital Renmin de l'Université de Wuhan pour une analyse biochimique automatisée. Les indices lipidiques sanguins comprenaient les triglycérides (TG), le cholestérol total (TC), le cholestérol des lipoprotéines de haute densité (HDL-C), le cholestérol des lipoprotéines de basse densité (LDL-C). Les indices de la fonction hépatique comprenaient la transaminase glutamique pyruvique (ALT) et la transaminase glutamique oxaloacétique (AST). Les taux d'insuline à jeun (FINS) ont été déterminés à l'aide du kit ELISA (Meimian Biological Inc. Chine). Une courbe standard a été construite sur la base de la concentration et de la densité optique (DO) de l'échantillon standard ; la concentration de l'échantillon a ensuite été calculée à partir de la courbe standard. Enfin, l'indice de sensibilité à l'insuline (ISI) et l'indice de résistance à l'insuline (HOMA-IR) ont été calculés comme suit : ISI=1/(FPG × FINS) ; HOMA-IR=FPG × FINS/22.5.
2.8. Les expressions AMPK, p-AMPK, SIRT-1, PGC-1 , PPAR- et CPT1A dans le tissu hépatique ont été détectées par transfert Western
Le tissu hépatique congelé a été coupé en sections. Pour l'extraction totale des protéines, 1 ml de lysat RIPA a été ajouté à une section de 50 g et soumis à une centrifugation à 13,000 rpm à 4 ◦C pendant 5 min, suivi d'une collecte du surnageant. La concentration en protéines a été déterminée à l'aide du kit de détermination de la concentration en protéines BCA. Environ 40 ug de protéine ont été prélevés dans chaque groupe et transférés sur la membrane de fluorure de polyvinylidène (PVDF). Les membranes ont été marquées avec les anticorps secondaires indiqués à température ambiante pendant 1 h et développées. Les valeurs de gris de chaque bande protéique ont été analysées et la GAPDH a été utilisée comme référence interne pour l'analyse semi-quantitative.
2.9. Les expressions de p-AMPK et de SIRT1 dans le tissu hépatique ont été détectées par coloration par immunofluorescence
Les tissus hépatiques ont été fixés dans du paraformaldéhyde à 4 %, inclus dans de la paraffine, puis sectionnés en tranches de foie de 10- μm d'épaisseur. Ajouter 3 pour cent de BSA pendant 30 min. Incuber les lames avec l'anticorps primaire pendant une nuit à 4 ◦C. Couvrir le tissu objectif avec un anticorps secondaire, incuber à température ambiante pendant 50 min dans l'obscurité. Puis incuber avec une solution DAPI à température ambiante pendant 10 min, conservée dans un endroit sombre. Ajouter un réactif d'extinction de fluorescence spontanée pour incuber pendant 5 min. Détection par microscopie et collecte d'images par microscopie fluorescente.
2.10. Les expressions d'ARNm de SIRT-1, PGC-1, PPAR- et CPT1A dans le tissu hépatique ont été détectées par RT-PCR
Environ 100 mg de tissu hépatique stocké à - 80 ◦C de chaque groupe a été utilisé. L'ARN total a été extrait à l'aide du kit Trizol ; la méthode d'absorption ultraviolette (UV) a été utilisée pour déterminer la qualité de l'ARN, et cet ARN a ensuite été rétrotranscrit en ADNc. La qPCR verte SYBR a été exécutée sur le système de détection PCR en temps réel Bio-Rad CFX96 Touch (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA, USA). Les séquences d'amorce de SIRT-1, PGC-1 , PPAR- et CPT1A ont été conçues par le logiciel Primer Premier5.0 et synthétisées par Wuhan Seville Biotechnology Co., Ltd., avec le gène domestique GAPDH servant comme référence interne. Les conditions d'amplification étaient les suivantes : pré dénaturation à 95 ◦C, dénaturation à 95 ◦C et annelage à 60 ◦C (30 s), avec un total de 40 cycles. À la fin de la réaction, la spécificité de l'amplification par PCR a été déterminée par analyse de la courbe de dissolution, la valeur Ct a été lue et l'expression relative de l'ARNm du gène cible a été calculée par la méthode 2-ΔΔCt. Les séquences d'amorces sont présentées dans le tableau 1.
2.11. Méthodes statistiques
Le logiciel statistique SPSS22.0 a été utilisé pour le traitement des données et l'analyse statistique et GraphPad Prism7.0 pour le dessin. Les données normalement distribuées sont présentées sous forme de moyenne ± écart type (variance x ± s). La comparaison par paires entre les groupes a été effectuée par une analyse de variance à un seul facteur. La signification des différences entre les groupes a été identifiée avec le test des différences les moins significatives (LSD) (homogénéité des variances) ou le test t de Dunnett (non homogène) pour les comparaisons multiples. Si les données n'étaient pas conformes à la distribution normale, la différence médiane et quartile, ainsi que le test non paramétrique (test de Kruskal-Wallis), ont été utilisés. Valeur AP de<0.05 was="" considered="" statistically="">
avantages masculins cistanchepourun rein
3. Résultats
3.1. L'ECH améliore l'état de santé général et le LI des souris db/db
Tout au long de l'expérience, les souris du groupe db/m étaient en bonne santé et actives et présentaient un pelage brillant. Les souris du groupe db/db ont présenté une consommation excessive d'eau et d'aliments, de l'obésité, de la léthargie et de l'accroupissement, ainsi que des cheveux rugueux et foncés. Par rapport aux souris du groupe db/db, les souris du groupe db/db plus ECH ont présenté des conditions améliorées dans toutes les études. De plus, leur poids corporel et leur indice hépatique étaient inférieurs à ceux des souris du groupe modèle diabétique (P <0.05) (tableau="">
Tableau 1 Amorces PCR quantitatives à fluorescence RT.
Tableau 2 Poids corporel, poids humide du foie et index hépatique chez les souris de chaque groupe.
3.2. L'ECH réduit la glycémie à jeun et la résistance à l'insuline et augmente la tolérance au glucose et la sensibilité à l'insuline chez les souris db/db
Au fur et à mesure que l'expérience progressait, par rapport au groupe db/m, la glycémie à jeun dans le groupe db/db augmentait significativement (P< 0.01)="" (fig.="" 1a).="" in="" contrast,="" blood="" glucose="" decreased,="" and="" glucose="" tolerance="" and="" insulin="" sensitivity="" improved="" in="" the="" db/db="" +="" ech="" group="" (p="">< 0.01)="" (fig.="" 1b,="">
3.3. L'ECH améliore les troubles structurels du foie et atténue les changements pathologiques tels que l'accumulation de lipides chez les souris db/db
La coloration HE a révélé que la taille et la morphologie des hépatocytes dans le groupe db/m étaient normales et que les structures des lobules hépatiques et des sinusoïdes étaient claires. Il y avait une dégénérescence étendue des hépatocytes dans le groupe db/db, une augmentation du volume des hépatocytes, une taille nucléaire variable, une nécrose des cellules focales et une infiltration de cellules inflammatoires dans la zone porte. Dans le groupe db / db plus ECH, il y avait une diminution significative des gouttelettes lipidiques et des cellules inflammatoires, la lésion cellulaire nécrotique a été atténuée (Fig. 2A). L'analyse microscopique du tissu hépatique coloré au rouge d'huile O a révélé un arrangement net de cellules, sans gouttelettes lipidiques ni changements pathologiques, dans le groupe db/m. Dans le groupe db/db, les cellules avaient une disposition désordonnée et un grand nombre de particules de graisse de différentes tailles étaient présentes dans le cytoplasme. Comparé au groupe db / db, le nombre de gouttelettes lipidiques dans le groupe db / db plus ECH était significativement plus faible, suggérant l'effet protecteur possible de l'ECH sur le foie (Fig. 2B, C).
Fig. 1. L'ECH a amélioré la tolérance au glucose et atténué la résistance à l'insuline des souris db/db.
3.4. L'ECH améliore le métabolisme des lipides et la fonction hépatique chez les souris db/db
Par rapport au groupe db/m, les taux de lipides sanguins de TC, TG et LDL ont augmenté de manière significative, et le HDL a diminué de manière significative dans le groupe db/db (P <{{0}}.{{4} }1).="" cependant,="" les="" niveaux="" de="" tc,="" tg="" et="" ldl="" ont="" diminué="" et="" le="" niveau="" de="" hdl="" a="" augmenté="" dans="" le="" groupe="" db/db="" plus="" ech="" par="" rapport="" au="" groupe="" db/db="" (p=""><0.05, p="">< 0.01)="" (fig.="" 3a).="" par="" rapport="" au="" groupe="" db/m,="" les="" taux="" d'alt="" et="" d'ast="" étaient="" significativement="" augmentés="" dans="" le="" groupe="" db/db="" (p="">< 0,05,="" p="">< 0,01).="" les="" taux="" d'ast="" et="" d'alt="" étaient="" significativement="" plus="" faibles="" dans="" le="" groupe="" db/db="" plus="" ech="" que="" dans="" le="" groupe="" db/db="" (p="">< 0,05,="" p="">< 0,01)="" (fig.="" 3b,="">
Fig. 2. L'ECH a atténué le trouble structurel du tissu hépatique et l'accumulation de lipides chez les souris atteintes de NAFLD.
3.5. L'effet de l'ECH sur l'activation de la voie AMPK/SIRT1 dans différents groupes de souris
Selon les résultats du transfert Western, par rapport au groupe db/m, les taux de protéines p-AMPK/AMPK, SIRT1, PGC-1 , PPAR- et CPT1A dans le tissu hépatique étaient significativement plus faibles dans le groupe db/db ( P < 0.01).="" cependant,="" les="" taux="" de="" protéines="" étaient="" significativement="" plus="" élevés="" dans="" le="" groupe="" db/db="" plus="" ech="" que="" dans="" le="" groupe="" db/db="" (p="">< 0,01)="" (fig.="" 4a,="" b).="" en="" outre,="" la="" coloration="" par="" immunofluorescence="" a="" montré="" que="" l'expression="" de="" p-ampk="" et="" de="" sirt1="" était="" manifestement="" retrouvée="" dans="" le="" tissu="" hépatique="" des="" souris="" traitées="" à="" l'ech="" que="" dans="" le="" groupe="" db="" db="" (fig.="">
3.6. Effet de l'échinacoside sur l'expression de l'ARNm de la voie SIRT1 dans le foie de souris de différents groupes
Selon les résultats de la RT-PCR, les niveaux de SIRT1, PGC-1, PPAR- et CPT1A ont diminué de manière significative dans le groupe db/db par rapport au groupe db/m. Cependant, ces niveaux ont augmenté de manière significative dans le groupe db/db plus ECH par rapport au groupe db/db (Fig. 5).
Fig. 3. Les indices liés au sérum chez les souris de chaque groupe.
4. Discussion
Le diabète est une préoccupation médicale majeure dans le monde et le nombre de personnes atteintes de diabète devrait augmenter pour atteindre environ 592 millions d'ici 2035 [9]. Le taux de prévalence du diabète, principalement le DT2, en Chine, montre une tendance à la hausse significative [10,11]. Il existe une relation complexe entre le DT2 et les maladies du foie, et la NAFLD, caractérisée par un dépôt excessif de graisse dans le foie, est la lésion hépatique la plus courante causée par le DT2 et la maladie hépatique chronique la plus fréquente dans le monde [12,13]. La recherche sur les tests génétiques cliniques suggère que le gène associé au DT2 est associé à une augmentation de l'IMC, à une hypercholestérolémie et à une diminution du HDL-C, qui confèrent un risque plus élevé de NAFLD [14]. La NAFLD est étroitement liée à la résistance à l'insuline et à la dyslipidémie et est donc très répandue chez les patients atteints de DT2 et/ou d'obésité. Bien que plusieurs facteurs métaboliques semblent être liés au développement de la NAFLD, sa pathogenèse reste largement floue et complexe [15]. Cistanche deserticola est une plante parasite vivace qui pousse sur les racines des plantes fixatrices de sable. Selon la pharmacopée chinoise, Cistanche deserticola est utilisé comme médicament traditionnel pour traiter les maladies rénales et l'infertilité [16,17]. Ces dernières années, des études ont confirmé que Cistanche deserticola peut inhiber de manière significative l'augmentation de la glycémie à jeun et postprandiale chez les souris diabétiques, améliorer la résistance à l'insuline et la dyslipidémie et favoriser la perte de poids [18]. En tant que composant principal de Cistanche deserticola, l'ECH devrait contribuer davantage à l'amélioration des lésions hépatiques associées au DM. Nos résultats expérimentaux ont révélé que l'obésité et le diabète pouvaient causer des lésions hépatiques chez la souris, caractérisées par des augmentations significatives des taux sériques d'ALT et d'AST et des modifications histopathologiques typiques. L'ECH a significativement réduit la LI et la glycémie, diminué les niveaux de TC, TG et LDL, augmenté les niveaux de HDL et amélioré la sensibilité à l'insuline. L'examen histopathologique a révélé une réduction de la dégénérescence de la stéatose hépatocytaire et de l'infiltration des cellules inflammatoires chez les souris traitées à l'ECH, confirmant que l'agent peut améliorer les lésions hépatiques chez les souris obèses et diabétiques.
L'AMPK est une protéine kinase hautement conservée largement distribuée dans les organismes et est appelée récepteur du métabolisme énergétique. Il joue un rôle dans l'atténuation du stress oxydatif, de l'inflammation, de la prolifération et de l'apoptose [19]. L'activation de l'enzyme par des activateurs indirects attire l'attention des scientifiques pour traiter le diabète, l'obésité, le cancer et d'autres troubles métaboliques connexes [20,21]. Il peut réguler le métabolisme des lipides par plusieurs approches, telles que l'inhibition de la synthèse des acides gras et des triglycérides, l'inhibition de la synthèse du cholestérol et la promotion de l'oxydation et de la décomposition des acides gras [22]. Dans le foie, l'AMPK régule le métabolisme des lipides par phosphorylation.
Lorsque le rapport intracellulaire AMP / ATP augmente, l'AMPK est activé, ce qui augmente le p-AMPK / AMPK et la régulation à la hausse de l'expression de SIRT1 en augmentant les niveaux cellulaires de NAD plus [23, 24]. Il a récemment été démontré que SIRT1, une désacétylase NAD-dépendante, est liée à la physiopathologie de la NAFLD [25]. L'enzyme est impliquée dans divers processus physiologiques cellulaires, tels que l'homéostasie des lipides et du glucose et la sensibilité à l'insuline, et est un régulateur clé du métabolisme [26]. Les patients obèses, en particulier ceux qui présentent une résistance à l'insuline, le diabète et la NAFLD, ont des niveaux inférieurs de SIRT1 [27,28]. Prix et al. ont examiné le rôle de SIRT1 dans la prévention de la stéatose hépatique et ont constaté que l'expression de SIRT1 est diminuée chez les patients atteints de NAFLD [29]. D'autres études ont montré que l'inactivation spécifique des hépatocytes de SIRT1 peut réduire l'oxydation des acides gras et induire une stéatose et une inflammation du foie, tandis que la surexpression de SIRT1 peut améliorer le métabolisme des lipides via la voie PGC-1 [30]. SIRT1 régule l'activité de PGC-1 , et les deux sont essentiels au maintien de l'homéostasie de l'énergie cellulaire. Par conséquent, SIRT1 et les facteurs en aval PGC-1 peuvent être la cible clé des lésions hépatiques. Le coactivateur PGC est une protéine qui peut se lier à des facteurs de transcription ou à des récepteurs nucléaires pour augmenter l'activité transcriptionnelle [31]. La plupart des facteurs de transcription ont besoin de coactivateurs, en particulier PPAR-, principalement dans les tissus oxydés tels que le foie, le myocarde et le muscle squelettique. Il peut activer la transcription génique qui favorise le transport et l'oxydation des acides gras, la production de cétones et la gluconéogenèse [32,33]. CPT1A est une enzyme clé limitant la vitesse de l'oxydation des acides gras. Son expression est régulée par des mécanismes transcriptionnels complexes, impliquant plusieurs facteurs de transcription et coactivateurs, dont SIRT1, PGC-1 et PPAR [34]. Dans cette étude, nous avons constaté que sous la concentration élevée de glucose sanguin dans le groupe db/db, l'accumulation de lipides dans les hépatocytes augmentait avec la régulation à la baisse des facteurs en aval de l'expression de la voie de signalisation AMPK/SIRT1 ; dans le groupe traité à l'ECH, les expressions p AMPK/AMPK, SIRT1 et PGC-1 ont été significativement augmentées, et les expressions des facteurs en aval PPAR et CPT1A ont été significativement augmentées, indiquant que l'axe du signal AMPK/SIRT1 et ses facteurs en aval jouent un rôle bénéfique dans le traitement de l'atteinte hépatique diabétique (Fig. 6). Cependant, les données fournies ici étaient basées sur des expériences in vivo ; ainsi, des études in vitro supplémentaires sont nécessaires pour confirmer l'impact de l'ECH sur les voies de signalisation AMPK/SIRT1 et les protéines effectrices.
Dans l'ensemble, l'ECH peut réguler la glycémie et le métabolisme des lipides en régulant l'expression de l'AMPK/SIRT1 et de ses facteurs en aval, améliorant ainsi les lésions hépatiques diabétiques.
Cistanche ECHboîteréguler la glycémieetmétabolisme des lipides.
