Abstrait

Objectif : Explorer le mécanisme potentiel of Cistanche glycosides totauxsurmaladie inflammatoire de l'intestin(IBD) grâce à la pharmacologie en réseau et à la recherche expérimentale sur les animaux. Méthodes : La base de données Pubchem et la littérature ont été utilisées pour collecter les structures tridimensionnelles des sept principaux ingrédients actifs des glycosides totaux de Cistanche. Obtenez des informations sur les cibles liées aux ingrédients actifs et les cibles génétiques liées aux MII via des bases de données telles que PharmMapper, UniProt et GeneCards. Dessinez ensuite un diagramme de Venn entre les cibles d'ingrédient actif de Cistanche et les cibles d'IBD pour obtenir les cibles d'intersection, et téléchargez les cibles d'intersection dans la base de données String pour l'analyse de dépistage des interactions protéine-protéine (IPP). Utilisation de la base de données DAVID pour comparer les principes actifs des glycosides totaux de Cistanche dans les MII

Les cibles qui exercent des effets protecteurs ont été analysées parOntologie des gènes (GO)enrichissement fonctionnel et enrichissement de la voie de l'Encyclopédie de Kyoto des gènes et des génomes (KEGG). Le logiciel Cytoscape3.8.0 a été utilisé pour construire un « réseau d'ingrédients actifs-cibles-voies » afin de prédire le nombre total deCistanche. Cibles et voies des glycosides dans le traitement des MII, et un modèle de souris MII a été construit pour une vérification plus approfondie. Résultats : 254 cibles du total des ingrédients actifs de Cistanche ont un effet protecteur sur les MII, et 30 cibles principales ont été éliminées par l'analyse PPI. L'enrichissement fonctionnel GO et l'enrichissement des voies KEGG ont révélé que les glycosides totaux de Cistanche peuvent principalement réguler les voies du cancer, les voies mTOR, les voies TGF, les voies JAK-STAT, les voies AMPK, etc., affectant ainsi la signalisation cellulaire, la prolifération, la différenciation et l'apoptose. Jouer un rôle. Les résultats des expériences animales montrent que les glycosides totaux de Cistanche peuvent atténuer efficacement la perte de poids et les saignements fécaux chez les souris MII, réduire l'indice d'activité de la maladie et inhiber efficacement l'expression de deux protéines cibles dans la rate, mTOR et TGF-. En séquençant l'amplicon d'ADNr 16S des selles de souris pour l'annotation fonctionnelle du gène PICRUSt2, l'analyse a révélé que les glycosides totaux de Cistanche régulent la maladie des MII et la biogenèse de la paroi cellulaire/membrane/enveloppe cellulaire, le métabolisme des lipides, les processus du métabolisme du sucre et la transduction des signaux de défense associés chez la souris. . Il existe une relation étroite avec le mécanisme de guidage, qui est cohérente avec les résultats de pharmacologie du réseau. Conclusion : Les glycosides totaux de Cistanche peuvent traverser plusieurs composants et plusieurs cibles

Des points et des voies multiples peuvent prévenir efficacement les MII, ce qui fournit de nouvelles méthodes et de nouvelles idées pour élucider l'application clinique de Cistanche dans le traitement des MII. Son mécanisme spécifique et sa base matérielle doivent être vérifiés par des recherches expérimentales plus approfondies.

Mots clés:Cistanche glycosides totaux; pharmacologie de réseau ;inflammation;

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Les maladies inflammatoires de l’intestin (MII) constituent une maladie particulièremaladie inflammatoire intestinale chroniquede cause inconnue, comprenant deux sous-types : la maladie de Crohn (MC) et la colite ulcéreuse (colite ulcéreuse, UC) [1]. En date du 2017, 6,8 millions de personnes dans le monde avaient reçu un diagnostic de MII, et l'incidence et la prévalence mondiales augmentent d'année en année. La prévalence des MII est plus élevée en Amérique du Nord et en Europe occidentale [2-3]. De 1990 à 2019, le taux d'incidence des MII en Chine est passé de 1,45/100,000 à 3,62/100,000, avec une augmentation globale de 149,66 % ; le taux de mortalité est passé de 0,47/100,000 à 0,33/100,000, avec une diminution globale de 29,79 %[4] . À mesure que la population chinoise vieillit, une légère augmentation du nombre élevé de patients âgés fera peser un énorme fardeau sur le système médical et de soins de santé.

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Des études ont prouvé que la régulation alimentaire peut aider à soulager les symptômes tels que les douleurs abdominales ou la diarrhée chez les patients atteints de MII et à réduire leurs complications ; il peut également réguler la composition et la fonction des micro-organismes intestinaux, affecter l'homéostasie intestinale et maintenir des fonctions intestinales normales [5]. Le cistanche, en tant que plante alimentaire et médicinale de longue histoire, est largement utilisé dans le traitement des maladies intestinales en médecine traditionnelle chinoise. On considère également qu'il a divers effets sur la santé, c'est pourquoi il a attiré beaucoup d'attention dans le domaine des aliments santé [6-7 ]. En 2020, le Cistanche (désert) a été répertorié comme substance homologue aux aliments et aux médicaments, et des travaux pilotes de production et d'exploitation ont été lancés [6-7]. En tant qu'aliment, le Cistanche peut prévenir les MII dans la vie quotidienne ; en tant que matière médicinale, elle peut soulager les symptômes pendant le traitement des MII et a une certaine valeur économique et médicinale.

Certains chercheurs ont découvert que l'extrait aqueux de Cistanche du désert peut stimuler le système immunitaire, réguler l'activité immunitaire et prévenir les maladies inflammatoires de l'intestin [8]. Jia et coll. [9] ont découvert que l'échinacoside (ECH) extrait du Cistanche pouvait améliorer la colite induite par le DSS chez la souris ; L'ECH peut prévenir la mort cellulaire et améliorer la muqueuse en stimulant la prolifération des cellules épithéliales intestinales et en régulant positivement le TGF-. Effet de réparation des tissus[10]. L'ECH peut également atténuer l'apoptose et l'inflammation induites par le LPS dans les cellules épithéliales intestinales du rat en inhibant le niveau d'expression de la voie mTOR/STAT3 (11). De plus, le verbascoside peut agir comme un piégeur de radicaux libres dans l'organisme, ralentissant la progression de la colite induite par l'acide 2,4-dinitrobenzène sulfonique (DNBS) chez le rat et réduisant les lésions tissulaires [12].

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La pharmacologie de réseau est un sujet interdisciplinaire qui intègre la bioinformatique, la biochimie, la pharmacologie et la science informatique. Il utilise le Big Data, la bioinformatique et des outils informatiques pour analyser et simuler le métabolisme complexe des médicaments dans les organismes. La prédiction du mécanisme d'action et de l'efficacité des médicaments fournit un soutien important pour le développement de nouveaux médicaments et l'optimisation des médicaments existants [13-14]. Le cœur de la pharmacologie des réseaux consiste à établir un modèle de réseau entre les médicaments et les molécules dans les organismes afin de révéler les relations entre les médicaments et les protéines cibles, les voies métaboliques, les voies de signalisation cellulaire, etc. [15]. Avec les progrès continus de la science et de la technologie, la pharmacologie en réseau continuera à jouer un rôle important dans le domaine de la médecine et contribuera à améliorer la qualité de vie et la santé des patients.

Des études ont montré que les glycosides totaux de Cistanche peuvent inhiber efficacement la réponse inflammatoire des cellules BV2 induite par le LPS [16], inhiber la progression du cancer du foie [17], protéger le foie [18], améliorer la mémoire et la cognition [19-20 ], et résiste au vieillissement [ 21] et à d'autres fonctions. À l'heure actuelle, il existe peu de rapports de recherche sur l'effet des glycosides totaux de Cistanche sur les maladies inflammatoires de l'intestin. Cette étude explore le mécanisme d'action des glycosides totaux de Cistanche sur les maladies inflammatoires de l'intestin sur la base de la pharmacologie en réseau et des expérimentations animales, et propose de nouvelles méthodes et idées pour son application clinique dans letraitement des MII.

1 Matériels et instruments

1.1 Réactifs

Sulfate de sodium de dextrane (DSS, poids moléculaire relatif 36 000 ~ 50 000), American MP Company ; kit de test d'urine et de sang occulte dans les selles, Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute ; éthanol absolu, Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.; xylène, Shanghai Ling Feng Chemical Reagent Co., Ltd.; Tampon PBS, solution d'extraction d'ARN, kit de transcription inverse du premier brin, solution de prémélange d'amplification PCR quantitative en temps réel 2 ×, amorces RTQPCR, Wuhan Sevier Biotechnology Co., Ltd. ; eau stérile et sans enzymes,

HyClone États-Unis.

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1.2 Principaux instruments et équipements

Broyeur à basse température KZ-III-FP, Wuhan Sevier Biotechnology Co., Ltd. ; Centrifugeuse à grande vitesse CT15RE, société HITACHI du Japon ; Instrument de PCR quantitative par fluorescence CFX, Bio-rad Company des États-Unis ; Établi ultra-propre SW-CJ-1FD, Suzhou Antai Air Technology Co., Ltd. ; Spectrophotomètre à ultra-traces NanoDrop2000, Thermo Company, Allemagne ; Compteur d'eau pure de type réactif standard FBZ2001-up-p, Qingdao Fulham Technology Co., Ltd. ; Lecteur de microplaques multifonction INFINITE MNANO, TECAN, société suisse, spectrophotomètre UV UV1600, Shanghai Miputa Instrument Co., Ltd.

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