Paramètres d'extraction et méthodes de séchage de Cistanche Deserticola

Cistanche est la Cistanche deserticola YC Ma ouCistanche tubuleuse (Schenk) Wighttige charnue sèche avec des feuilles écailleuses de la plante OrobanchiaceaeCistanche deserticola YC Ma[1]. Le principal ingrédient actif de Cistanche deserticola est les glycosides de phényléthanol [2-4]. Des études pharmacologiques ont montré qu'il a des fonctions deaphrodisiaque, améliorer l'immunité, etaméliorer la mémoire[4-9].

Ces dernières années, la méthodologie des surfaces de réponse a été largement utilisée dans l'extraction de la médecine traditionnelle chinoise [{{0}}]. La méthode de la surface de réponse présente les avantages inhérents d'une précision de détection élevée, d'un nombre réduit d'expériences nécessaires, d'une prédiction précise des modèles de fonction et de la capacité de refléter la relation entre les facteurs et les valeurs prédites [15-17]. Par conséquent, cette expérience utilise le score complet du contenu des cinq glycosides de phényléthanol comme valeur de réponse et utilise le logiciel Design-Expert 8.0.6.1 pour concevoir l'expérience, optimiser le processus d'extraction de Cistanche deserticola et fournir des informations pour l'identification et établissement de normes de qualité deCistanche désertique.

Actuellement, l'indicecomposants échinacéaside et verbascosidesont des sujets de recherche brûlants dans la technologie d’extraction et de traitement desCistanche désertique. L'édition 2015 de la Pharmacopée chinoise stipule que la méthode de traitement de la Cistanche deserticola consiste à « éliminer les impuretés, laver, humidifier, couper en tranches épaisses et sécher ». [1], il n’existe pas de réglementation claire sur la méthode de séchage. Par conséquent, cette expérience a utilisé huit méthodes de séchage différentes, notamment le séchage au soleil, le séchage à l'ombre, le séchage au four (40, 60, 80, 100, 120 degrés) et la lyophilisation, pour traiter Cistanche deserticola [18], qui ont fourni une base théorique pour le processus de séchage de Cistanche deserticola.

Sur l'orientation.

EXTRAIT DE CISTANCHE AVEC 30% D'ÉCHINCAOSIDE

1 Matériels et instruments

La Cistanche deserticola fraîche a été récoltée en octobre 2018. Le lieu d'origine est le canton de Mitan, comté de Minqin, Baiyin, province du Gansu. Le professeur agrégé Guo Yehong de l'Université agricole de Gansu l'a identifié comme étant Cistanche deserticola YC Ma, une tige charnue avec des feuilles écaillées. Substances de référence échinacéaside (numéro de lot 82854-37-3, fraction massique supérieure ou égale à 98 %), cistancheaside A (numéro de lot 93236-42-1, fraction massique supérieure ou égale à 95 %), verbascoside (numéro de lot { {5}}, fraction massique supérieure ou égale à 98 %), isomurabasine (numéro de lot 61303-13-7, fraction massique supérieure ou égale à 98 %), 2′-acétyl verbascoside (numéro de lot 94492-24-7 , fraction massique supérieure ou égale à 95 %) ont été achetées auprès de Chengdu Pu. Feide Biotechnology Co., Ltd.; l'acide formique et le méthanol sont de qualité chromatographique, Merck Company of Germany ; l'eau est de l'eau purifiée et les autres réactifs sont de qualité analytique.

Chromatographe liquide Waters Acquity, détecteur PDA, poste de travail de chromatographie Empower et système de gestion des solvants quaternaires ; Nettoyeur à ultrasons KQ-100E, Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.

Entreprise; Balance analytique AL104, Mettler-Toledo Instruments Co., Ltd. ; Lyophilisateur LyoQuest-85, Telstar, Espagne.

2 Méthodes et résultats

2.1 Préparation de la solution de référence

Peser avec précision les quantités appropriées deéchinacéaside, cistancheoside A, verbascoside, isorbascoside, et les étalons de référence du 2'-acétyl verbascoside, et ajoutez 70 % de méthanol pour obtenir les concentrations massiques 1.04, 0.61, 0.63, 0,39 et 0,48 mg/mL de solution de référence mixte.

2.2 Conditions chromatographiques de Cistanche deserticola

Symétrie des eaux C18 (25 0 mm × 4,6 mm, 5 µm); température de la colonne 30 degrés, débit volumique 1,0 mL/min ; la phase mobile est du méthanol -0, solution aqueuse d'acide formique à 1 %, gradient d'élution : 0 ~ 12 min, 29 % ~ 34 % de méthanol ; 12-40 min, 34 %-40 % de méthanol ; 30-35 min, 40 %-35 % de méthanol ; 35-40 min, 30 % de méthanol ;

1-échinacoside 2-cistanche A 3-verbascoside 4-isoacteoside 5-2′-acétylactéoside

Fig. 1 HPLC d'un échantillon de référence mixte (A) et de C. deserticola (B)

2.3 Préparation de la solution d'essai

Peser précisément 1 g de poudre séchée de Cistanche deserticola dans un erlenmeyer (passé à travers un tamis à mailles 65-), ajouter 50 ml de méthanol à 50 %, peser la masse, ultrasons à 40 kHz à 150 W, laisser refroidir à température ambiante , et constituez la masse pour l'obtenir.

2.4 Enquête sur la relation linéaire

Prendre {{0}}.1, {{20}}.5, 1, 2, 4 et 8 ml de la solution de référence mélangée ci-dessus dans un flacon de 10 ml. fiole jaugée et ajoutez 70 % de méthanol jusqu'au trait. Prélever précisément 10 μL et mesurer selon les conditions chromatographiques de « 2,2 ». La concentration massique est l'abscisse (X) et l'aire du pic est l'ordonnée (Y). Effectuez une régression linéaire et les équations de régression sont : Échinacée Y=128 049 X -830 189, r=0.999 5, plage linéaire 10,4~832,0 ug/mL ; Cistancheside AY=87 980 -447 963, r＝0.999 8, plage linéaire 6.3-504,0 ug/mL ; Isomurabasine Y＝92 831 Glycoside Y=79 207 X-304 428, r=0.999 4, plage linéaire 4,8 ~ 384,0 ug/mL.

2.5 Revue méthodologique

2.5.1 Contrôle de précision

Prendre 20 μL de la solution de référence mixte au point « 2.1 » et injecter 6 fois en continu pour mesurer les zones de pic d'échinacéaside, de cistancheaside A, de verbascoside, d'isorébascoside et de 2'-acétylverbascoside. Les RSD sont respectivement de 0,23 %. , {{10}},71 %, 0,59 %, 0,41 %, 0,29 %, indiquant que l'instrument a une bonne précision.

2.5.2 Test de répétabilité

Prélever 6 portions du même échantillon de Cistanche deserticola, préparer la solution d'essai selon le point « 2.3 », injecter l'échantillon dans les conditions chromatographiques du point « 2.2 » et mesurer la surface du pic. Résultats Les fractions massiques moyennes d'échinacéaside, de cistancheoside A, de verbascoside, d'isorébascoside et de 2′-acétyl verbascoside étaient de 1,83 %, 0,21 %, 2,34 %, 0,13 % et {{15 }},68 % respectivement, et les RSD étaient respectivement de 1,32. %, 0,83 %, 1,24 %, 2,19 %,

0,78 %, ce qui indique que la méthode a une bonne répétabilité.

2.5.3 Essai de stabilité

Déterminer la stabilité de la même solution d'essai (préparée selon « 2.3 ») à 0, 2, 4, 8, 12, 24 et 48 heures pour obtenir l'échinacéaside, le cistancheoside A, le verbascoside et l'isolebascoside. , aire de pic du 2′-acétyl verbascoside, RSD étaient respectivement de 0,58 %, 0,21 %, 1,58 %, 1,46 % et 2,19 %, ce qui indique que la solution d'essai était stable dans les 48 h.

2.5.4 Test de récupération des échantillons

Prélever 1 g de 6 échantillons de Cistanche deserticola dont le contenu est connu et ajouter avec précision une certaine quantité de solution de référence mixte (Echinaceaside 1.06 mg/mL, Cistancheoside A 0.86 mg /mL, Verbascoside 2,17 mg/mL, Isolebascoside 0,79 mg/mL, 2′-acétyl verbascoside 0,91 mg/mL), ajouter 70 % de méthanol pour obtenir 50 ml, et injecter des échantillons selon les conditions chromatographiques de « 2.2 ». Les récupérations moyennes mesurées sont respectivement de 101,52%, 99,21% et 102,62%. , 98,62 %, 97,36 %, les RSD sont respectivement de 1,64 %, 1,95 %, 0,87 %, 1,59 % et 1,13 %, et le taux de récupération de l'échantillon est bon.

La cistanche est une plante tonique bien connue qui peut nourrir et protéger les reins. Dans la théorie de la médecine traditionnelle chinoise, le Cistanche est la meilleure herbe pour les reins. Le Cistanche est riche en échinacoside, en acteoside et en flavonoïdes. Ces ingrédients efficaces du Cistanche peuvent réduire l'apoptose des cellules rénales et augmenter la prolifération des cellules rénales. Cistanche est donc un complément naturel pour les reins.