Isolement et identification des glycosides de phényléthanol de Cistanche Deserticola

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Introduction

Cistanche désertiquerecueillie dans la pharmacopée chinoise est la tige charnue sèche deCistanche désertique, plante Orobanchaceae, qui est un médicament couramment utilisé pour tonifier le rein en médecine traditionnelle chinoise. Il existe de nombreuses variétés de Cistanche deserticola, et il existe de nombreux rapports de recherche sur la salsa Cistanche etCistanche tubulosadans la littérature, mais il existe peu d'études sur les variétés collectées dans la Pharmacopée. Luo Shangfeng et d'autres ont obtenu du mannitol, de l'8-acide épigastrique et des acides aminés à partir de Cistanche deserticola. Pour développer et étudier davantage Cistanche, le département de pharmacie du Xinjiang Medical College a extrait et séparé ses composants solubles dans l'eau - les glycosides de phényléthanol. Les résultats ont montré que quatre composants ont été séparés et identifiés, ils sontéchinacoside, castanoside A,actéoside, et 2'-acétylactéoside. Les composants ci-dessus ont des effets pharmacologiques tels que la promotion des fonctions rénales etanti-âge.

Partie expérimentale

Les matériaux médicinaux expérimentaux ont été achetés auprès de la société de matériaux médicinaux d'Urumqi et produits dans le comté de Jinghe. Les variétés ont été identifiées par Li Jiazheng, chercheur associé à l'Institut de médecine ethnique du Xinjiang. Le modèle de résine macroporeuse était AB-B, qui est un produit chimique de l'Université de Nankai. Le gel de silice utilisé dans la couche de colonne était un produit de l'usine chimique marine de Qingdao, Stephan-dex LH-20 était le produit de l'usine pharmaceutique de Shanghai Changzheng. Le modèle du spectrophotomètre UV était Shimadzu UV-360. Le spectrophotomètre infrarouge était Shimadzu IR-440. Les modèles d'instruments H-NMR et C-NMR étaient Bruker MSL -300 (300 mégacycles)

1. Extraction et séparation

Cistanche deserticola extraite10 kg trois fois par le reflux d'éthanol, combiner l'extrait et le concentrer pour le coller sous pression réduite, ajouter une petite quantité d'eau pour la suspension, le dégraisser avec de l'acétate d'éthyle, l'extraire avec du n-butanol, combiner l'extrait, le concentrer à sec sous pression réduite, ajouter une petite quantité d'eau pour la dissolution, recueillir et concentrer successivement la partie méthanol à travers une colonne de résine macroporeuse et une colonne de polyamide (laver d'abord à l'eau puis au méthanol). Les glycosides de phényléthanol totaux sont obtenus par la couche de colonne de gel de silice. Avec CHCl3-MeOH (10:3 à 10:5) gradient d'élution, un total de 78 flux (environ 300 ml par flux) ont été collectés, dont 16-23 étaient des composés bruts IV (2,1 g), 28-42 étaient des composés bruts III (5,4 g), 48-61 étaient des composés bruts II (3,2 g), 65-78 étaient des composés bruts I (5,1 g). Les composants ci-dessus ont été purifiés par chromatographie sur colonne de gel de silice (les conditions d'élution étaient les mêmes que ci-dessus), puis purifiés par la colonne de gel de dextran LH-20. Eluer avec CH3OH: H20 (l:1) et recueillir la partie méthanol pour obtenir les composés monomères IV (1,3 g), III (3,5 g), II (1,8 g) et I (3,5 g)

2. Identification

Composé I : poudre amorphe jaune clair, réaction FeCl3 et - test de naphtol positif, chromatographie sur couche mince de gel de silice valeur Rf de 0.3 (CHCl3:MeOH:H2O=6:expansion 4:1, 20 % de détection de pulvérisation de H2SO4), UV λ (MeOH/nm) : 244, 292, 333. IR (KBr/MAX) : cm-1 : 3 360, 1 690, 1 625, 1 598, 1 518. H-RMN (méthanol- d1) δ : 1,08 (3H, D, J=6Hz, CH3), 2,79 (2H, t, J=7Hz, Ar-CH2-CH2-) , 4,29, 4,39 (1H, D, J=8Hz, deux protons terminaux glucose), 5,18 (1H, D, J=1Hz, protons terminaux rhamnosyle), 6,28 (1H, J{{50 }}Hz, Ar-CH=CH-), 6.5-7.1 (6H, aryle H), 7.59 (1H, D, J=16Hz, Ar-CH{ Les données {63}}CH-) C-RMN sont présentées dans le tableau 1. La réaction chimique et les données spectrales ci-dessus sont cohérentes avec le rapport deéchinacosidedans la littérature. Par conséquent, le composé I est identifié comme étant l'échinacoside.

Composé II : poudre amorphe jaune clair, réaction FeCl3, et - Le test au naphtol était positif, et chromatographie sur couche mince de gel de silice Rf 0.35 (les conditions de développement et de détection étaient les mêmes que ci-dessus). Ses spectres UV et IR étaient très similaires à ceux deéchinacoside, mais H-NMR apparaît signal δ 3,84 (3H, s), C-NMR apparaît signal δ 56,5, indiquant que la structure contient 1 méthoxy. UV λ (MeOH/nm) : 246, 290, 333. IR (KBr/MAX)cm-1 : 3 350, 1 655, 1 620, 1 596, 1 508. RMN-H (méthanol-d1) δ : 1,08 (3H, d, J=6Hz, groupe méthyle dans le rhamnose), 2.86 (2H, t, J=7Hz, Ar-CH2- CH2-), 3,84 (3H, s, OCH3), 4,28, 4,39 (1H, d, J=8Hz, deux protons du groupe terminal du glucose), 5,18 (1H, s, protons du groupe terminal de rhamnose), 6,27 (1H, d, J=16Hz, Ar-CH=CH-), 6.65-7.1 (6H, aryl H), 7,60 (1H, d , J=16Hz, Ar-CH=CH-). Voir le tableau 1 pour les données C-NMR, les données spectrales ci-dessus sont cohérentes avec la valeur de la littérature du castanoside A. Par conséquent, le composé II a été identifié comme le castanoside ACompound III : poudre amorphe jaune clair, chromatographie sur couche mince de gel de silice La valeur Rf est de 0,40 (développement et les conditions de détection sont les mêmes que ci-dessus). Ses spectres UV et IR sont également similaires à ceux de l'échinacoside. Il y a un proton terminal de glucose de moins dans la RMN-H et un signal de glucose de moins dans la RMN-C, ce qui suggère qu'il s'agit d'un disaccharide. UV λ (MeOH/nm) : 247, 292, 334. IR (KBr/MAX) : 3350, 1690, 1625, 1600, 1515. RMN-H (méthanol-d1) δ : 1,10 (3H, d, J{{ 83}}Hz, rhamnose méthyl), 2,79 (2H, t, J=7Hz, Ar-CH2-CH2-), 4,38 (1H, d, J{{94} }Hz, proton terminal du glucose), 5,19 (1H, d, J=1Hz, proton terminal du rhamnose), 6,28 (1H, d, J=16Hz, Ar-CH=CH -), 6.5-7.1 (6H, aryle H), 7.59 (1H, d, J=16Hz, Ar-CH=CH-). Les données C-NMR sont présentées dans le tableau 1. Les données spectrales ci-dessus sont compatibles avec les valeurs de la littérature deactéoside, donc le composé LII est déterminé comme étantactéoside.

Composé IV : poudre amorphe jaune clair. La valeur Rf de la chromatographie sur couche mince de gel de silice est 0.42 (les conditions de développement et de détection sont les mêmes que ci-dessus). Ses données spectrales sont très similaires àactéoside. Il y a un autre pic d'absorption de 1735 cm -1 dans le spectre infrarouge, et la RMN-H a montré des signaux de la matrice acétyle de δ1,98 (3H.S), et la RMN-C a montré des signaux des groupes carbone et méthyle de δ171,5 et 20,9. Selon la loi de déplacement de la glucosylation, l'acétylation se situe sur le groupe hydroxyle du sucre en 2'. λ (MeOH/nm) : 247, 292, 333. IR (KBr/MAX) : 3430, 1725, 1700, 1630, 1605. 1525. H-RMN(méthanol-d1) δ : 1,08 (3H, d, J{ {27}}Hz, rhamnose méthyl), 1,98 (3H, s. OAc), 2,70 (2H, t, J=7Hz, Ar-CH2-CH2-), 4,50 (1H, d=8Hz, proton terminal glucose), 5,19 (1H, d, proton terminal rhamnose), 6,28 (1H, d, J=16Hz, Ar-CH=CH -), 6.5-7.1 (6H, aryle H), 7.60 (1H, d, J=16Hz, Ar-CH=CH-). Les données C-NMR sont présentées dans le tableau 1. Les données spectrales ci-dessus sont cohérentes avec la valeur de la littérature du 2'-acétylactéoside, de sorte que le composé IV est confirmé comme étant le 2'-acétylactéoside.