La déficience en klotho intensifie l'expression induite par l'hypoxie de l'IFN- / par la régulation à la hausse de RIG-I dans les reins
Mar 25, 2022
Résumé L'hypoxie est une voie courante vers la progression de la phase terminalemaladie du rein.Le gène I (RIG-I) inductible par l'acide rétinoïque code pour une hélicase à ARN qui reconnaît les virus, y compris le SRAS-CoV2, qui est responsable de la production d'interféron (IFN)-a/ pour prévenir la propagation de l'infection virale. Récemment, l'activation de RIG-1 a été découverte dans des conditions hypoxiques et il a été démontré que la déficience en klotho intensifie l'activation de RIG-I dans le cerveau de souris. Cependant, les rôles de ces fonctions dans l'inflammation rénale restent insaisissables. Ici, pour l'étude in vitro, l'expression de RIG-I et IFN-a/ a été examinée chez le rat normalun rein(NRK)-52Cellules E incubées dans des conditions hypoxiques (1 % d'O2). Ensuite, des siARN ciblant RIG-I ou des siARN brouillés ont été transfectés dans des cellules NRK52E pour examiner l'expression de RIG-I et d'IFN-a/ß dans des conditions hypoxiques. Nous avons également étudié les niveaux d'expression de RIG-I et d'IFN-a/ chez 33 humainsun reinéchantillons de biopsie diagnostiqués avec une néphropathie à IgA. Pour l'étude in vivo, nous avons induit une hypoxie rénale en clampant l'artère rénale pendant 10 min chez des souris de type sauvage (souris WT) et des souris Klotho-knockout (KIT/souris). L'incubation dans des conditions hypoxiques a augmenté l'expression de RIG-II et d'IFN-a/ dans les cellules NRK52E. Leur régulation à la hausse a été inhibée dans les cellules NRK52E transfectées avec des siARN ciblant RIG-I. Chez les patients atteints de néphropathie à IgA, la coloration immunohistochimique des échantillons de biopsie rénale a révélé que l'expression de RIG-I était corrélée à celle de l'IFN-a/ (r=0.57,P<0.001, and="" r=""><0.001, respectively).="" the="" expression="" levels="" of="" rig-i="" and="" ifn-a/β="" were="" upregulated="" in="">reinsde souris WT hypoxiques et une régulation à la hausse supplémentaire a été observée chez les souris hypoxiques. Ces résultats suggèrent que l'hypoxie induit l'expression de l'IFN-a/ par la régulation à la hausse de RIG-I et que le déficit en klotho intensifie cette expression induite par l'hypoxie chezreins.
Mots clés:maladie du rein; cellules rénales; remplacement rénal; dommages rénaux; un rein
CISTANCHE AMÉLIORE LA FONCTION RÉNALE/RÉNALE
IntroductionChroniquemaladie du rein(CKD) a touché 697,5 millions de personnes dans le monde en 2017 [1], il est donc bien reconnu comme un problème de santé majeur. Pour retarder la progression de l'IRC, des inhibiteurs de la voie du système rénine-angiotensine-aldostérone (RAAS) sont utilisés en clinique [2,3]. Cependant, leurs effets bénéfiques sont limités et de nombreux patients nécessitent éventuellement une thérapie de remplacement rénal [4]. Pathologiquement, l'inflammation chronique et la fibrose interstitielle sont les caractéristiques communes de la MRC, quelle que soit la maladie primaire [5]. Bien que le facteur de croissance transformant (TGF)- 1 joue un rôle central dans le développement de la fibrose interstitielle [6-8], des études antérieures ont démontré que l'infiltration de cellules inflammatoires est responsable de la production de TGF{{12} } [9]. Ces résultats suggèrent que l'inflammation est l'événement en amont de la fibrose interstitielle et que l'inflammation est une cible thérapeutique candidate pour l'IRC.
L'hypoxie est une condition dans laquelle un manque d'oxygène pénètre dans les tissus. En tant que réponse cellulaire à l'hypoxie, les facteurs inductibles par l'hypoxie (HIF) jouent un rôle important dans la prévention des lésions tissulaires [10-12]. Cependant, une hypoxie sévère entraîne des maladies vasculaires aiguës, telles que les accidents vasculaires cérébraux [13], l'angine de poitrine [14] et la maladie artérielle périphérique [15]. Récemment, il a été rapporté que l'hypoxie chronique, telle que l'apnée du sommeil, contribue également au développement de diverses maladies [16]. En ce qui concerne laun rein, l'hypoxie s'intensifierait avec la progression du stade CKD et elle est actuellement considérée comme une physiopathologie courante conduisant au stade terminalmaladie du rein[17]. Comme mentionné ci-dessus, l'inflammation est considérée comme un événement en amont, de sorte que le mécanisme par lequel l'hypoxie induit l'inflammation doit être clarifié au niveau moléculaire. L'inflammation se caractérise par la douleur, la chaleur, la rougeur, l'enflure et la perte de fonction[18]. Cependant, il fonctionne essentiellement pour éliminer la cause initiale de la lésion cellulaire et pour éliminer les cellules nécrotiques et les tissus endommagés. Dans tous les cas, l'inflammation n'est pas une réponse spécifique et l'immunité innée est considérée comme participant principalement au processus initial de l'inflammation par la production d'interféron (IFN)- / [19]. Parmi les facteurs impliqués dans l'immunité innée, un gène I inductible par l'acide rétinoïque (RIG-I) est responsable des réponses immunitaires aux infections virales[20. Notamment, des études récentes ont démontré que l'hypoxie régule à la hausse l'expression de RIG-I dans le cerveau et le foie, entraînant la production d'IFN-/ [21,22]. Cependant, le rôle de l'hypoxie dans l'expression médiée par RIG-I de l'IFN-/B dans leun reinreste insaisissable.
Klotho a été signalé pour la première fois comme une protéine anti-âge [23]. En effet, les souris déficientes en klotho présentent une durée de vie raccourcie accompagnée de phénotypes ressemblant au vieillissement humain. En revanche, les souris transgéniques klotho présentent une durée de vie prolongée [24]. En termes d'effets rénoprotecteurs, il a été démontré que la carence en klotho intensifie les lésions rénales dans des modèles expérimentaux de maladies rénales, alors que la surexpression de klotho ou l'administration de protéines klotho les améliore [25]. La protéine Klotho existe sous trois formes : membranaire, sécrétée et koto intracellulaire. Parmi ceux-ci, on rapporte que le klotho intracellulaire supprime l'expression de RIG-I avec l'inflammation [26], ce qui soulève la possibilité que la déficience en klotho exacerbe la régulation à la hausse induite par l'hypoxie de RIG-I et d'IFN-/in.reins.Ces résultats nous ont amenés à émettre l'hypothèse que l'expression de RIG-I et d'IFN-/ augmentait dans des conditions hypoxiques dans une lignée cellulaire de cellules tubulaires rénales et que leur régulation positive induite par l'hypoxie était intensifiée chez les souris klotho-knockout (KI-7 souris). Dans cette étude, nous montrons que l'hypoxie régule à la hausse RIG-I ainsi que l'IFN-a/ chez le rat normalun reincellules (NRK-52E) et reins de souris. Nous montrons également que RIG-I est responsable de la régulation positive de l'IFN-c/B induite par l'hypoxie.un reinéchantillons provenant de patients diagnostiqués avec une néphropathie à IgA, l'expression de RIG-I s'est avérée positivement corrélée avec l'IFN-/. Enfin, la régulation à la hausse induite par l'hypoxie de RIG-Iand IFN-/ a été intensifiée chez les souris KI-/-. Ces résultats suggèrent que le déficit en klotho intensifie l'expression induite par l'hypoxie de l'IFN-/ par la régulation à la hausse de RIG-I chezreins.
CISTANCHE AMÉLIORE L'INSUFFISANCE RÉNALE/RÉNALE
Matériels et méthodes AnimauxDes souris mâles C57BL/6J de type sauvage (WT) (âgées de 8 semaines et pesant20-25 g) ont été obtenues auprès de Charles River Laboratories Japan (Yokohama, Japon). Des souris mâles (âgées de 6 semaines et pesant environ 15 g) ont été achetées auprès de CLEA Japan, Inc. Les souris ont été hébergées à l'Institute of Laboratory Animal Science de l'Université d'Hiroshima (Hiroshima, Japon), comme décrit précédemment [27]. Toutes les expériences ont été approuvées par l'Institutional Animal Care and Use Committee de l'Université d'Hiroshima (numéros de permis : A19-158 et 2019-156) et ont été réalisées conformément aux directives des National Institutes of Health (NIH) sur l'utilisation des animaux de laboratoire. Les souris WT et KI-' ont été divisées en un groupe témoin ou un groupe hypoxique (n=5 dans chaque groupe). Des conditions hypoxiques ont été induites par le clampage de l'artère rénale gauche pendant 1 0 min sous anesthésie générale (0,3 mg/kg de médétomidine, 4 mg/kg de midazolam et 5 mg/kg de butorphanol) [28]. Les souris du groupe témoin ont subi une opération simulée qui était la même procédure que celle des souris du groupe hypoxie, à l'exception de l'absence de ligature des artères. Après 10 min d'hypoxie, les souris ont été euthanasiées par ponction cardiaque et leurreinsont été récoltés. Hypoxie duun reina été confirmé par Western blot pour l'expression de l'érythropoïétine (S1 Fig).
Culture de cellulesLe rat normalun rein(NRK)-52Les cellules E ont été achetées auprès de l'American Type Culture Collection (Manassas, VA, USA). Les cellules NRK-52E ont été cultivées dans du milieu RPMI-1640 contenant 10 % de fœtus sérum bovin (FBS) (Nichirei Bioscience, Tokyo, Japon) et pénicilline/streptomy-cine (Nacalai Tesque, Kyoto, Japon). Ces cellules ont été ensemencées dans des boîtes de culture de 10 cm. Après avoir poussé jusqu'à la sous-confluence, les cellules ont été incubées dans une chambre d'incubateur modulaire à 1 % d'O2 (MIC 101 ; Billups-Rothenberg, San Diego, Californie, États-Unis) pendant 30, 60, 90 et 120 min. Des lysats de cellules entières ont été préparés et soumis. à l'analyse western blot. L'hypoxie des cellules NRK-52E a été confirmée par Western blot pour l'expression de HIF-1 (S2 Fig).
Transfection d'ARNsi RIG-ILes cellules NRK52E ont été transfectées avec 20 nM d'ARNsi ciblant RIG-I (RSS311418 : Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, États-Unis) ou un ARNsi de contrôle négatif (4390843 ; Applied Biosystems, Waltham, MA, États-Unis) à l'aide du réactif de transfection Lipofectamine 2000 (Thermo Fisher Scientific) , conformément aux instructions du fabricant. Après 43-45 h, certaines de ces cellules ont été incubées dans des conditions hypoxiques (1 % O,) pendant 30 min pour évaluer RIG-I. Les autres cellules ont été remplacées par un milieu frais. Après 24 h, ces cellules ont été incubées sous des conditions hypoxiques (1 pour cent d'O2) pendant 60 et 120 min pour confirmer la suppression de l'IFN-a/. Des lysats de cellules entières ont été préparés et soumis à une analyse Western blot.
Analyse Western blotLa collecte d'échantillons et le transfert Western ont été effectués conformément aux méthodes décrites précédemment [29]. Anticorps monoclonal de lapin anti-RIG-I (#3743S ; Cell Signaling Technology, Danvers, MA, États-Unis), anticorps polyclonal de lapin anti-IFN- 11 (bs-7023R ; Bioss Anti-bodies, Woburn, MA, USA), anticorps polyclonal de lapin anti-IFN- (GTX37658 ; GeneTex, Irvine, CA, USA), anticorps monoclonal de lapin anti-RIG-I (=700366 ; Invitrogen, Carlsbad, CA, USA), anticorps polyclonal de lapin anticorps anti-IFN- 2 (ab193055 ; Abcam, Cambridge, Royaume-Uni), anticorps polyclonal de lapin anti-IFN (PA5-20390 ; Invitrogen), anticorps monoclonal anti-klotho humain de rat (KO603 ; TransGenic, Fukuoka , Japon), un anticorps monoclonal de souris anti- -actine (A5316 ; Sigma-Aldrich, St.Louis, MO, USA) et un anticorps monoclonal de souris anti- -tubuline (T9026 ; Sigma-Aldrich) ont été utilisés comme anticorps primaires. L'immunoglobuline G anti-lapin de chèvre conjuguée à la peroxydase de raifort (Dako, Glostrup, Danemark) et l'immunoglobuline G anti-souris de chèvre (Dako) ont été utilisées comme anticorps secondaires. SuperSignal West Dura et le système Pico (Thermo Fisher Scientific) ont été utilisés pour détecter les signaux. L'intensité de chaque bande a été mesurée par le logiciel ImageJ (version 1.47y; National Institutes of Health, Bethesda, MD, USA) et normalisée au niveau de -actine ou -tubuline.
CISTANCHE AMÉLIORERA LES MALADIES RÉNALES/RÉNALES
Analyse immunohistochimique du tissu rénal de sourisLa coloration immunohistochimique a été réalisée conformément aux méthodes décrites précédemment [27]. Comme anticorps primaires, les produits suivants ont été appliqués : anticorps monoclonal de lapin anti-RIG-I (#700366 ; Invitrogen), anticorps polyclonal de lapin anti-IFN- 2 (ab193055 ; Abcam), anticorps polyclonal de lapin anti-IFN- ( PA5-20390 ; Invitrogen) et l'anticorps monoclonal anti-klotho humain de rat (KO603 ; TransGenic). Les zones RIG-I-, IFN-a/ - et klotho-positives ont été quantifiées comme la moyenne de 20 champs sélectionnés au hasard avec Logiciel Image J.
Collecte d'échantillons cliniques et déclaration d'éthiqueDes échantillons de rein ont été obtenus par biopsie rénale à l'hôpital universitaire d'Hiroshima entre août 2014 et novembre 2016 chez 33 patients chez qui une néphropathie à IgA a été diagnostiquée. Cette étude a adhéré aux principes énoncés dans la Déclaration d'Helsinki et a été approuvée par le Comité d'éthique de l'Université d'Hiroshima (E-1718), Le consentement éclairé a été obtenu sous forme d'opt-out sur un site Web (httns:/inzounaika Hiroshima-uaciplresearchl opt out.html).
Analyse immunohistochimique du tissu rénal humainL'immunomarquage a été réalisé conformément aux méthodes décrites précédemment [27]. Les anticorps primaires suivants ont été utilisés : anticorps monodonal de lapin anti-RIG-I (#700366 ; Invitrogen), anticorps monoclonal de souris anti-IFN-(sc-373757 ; Santa Cruz Biotechnology, Dallas, TX, États-Unis) et anticorps de lapin Les anticorps polyclonaux anti-IFN (PA5-20390 ; Invitrogen), les zones positives pour RIG-I et IFN-a/ ont été quantifiées comme la moyenne de cinq champs sélectionnés au hasard avec le logiciel Image].
analyses statistiquesLes résultats sont présentés sous forme de moyenne ± écart-type (SD). Les corrélations ont été calculées à l'aide d'une analyse de régression univariée. Pour les comparaisons multiples, nous avons utilisé une analyse de variance unidirectionnelle (ANOVA) suivie du test t de Student avec correction de Bonferroni. Les différences entre les deux groupes ont été analysées par le test t de Student.P<0.05 was="" considered="" as="" statistically="">
Résultats:L'hypoxie régule à la hausse RIG-I et IFN-a / dans une lignée cellulaire de rat de cellule épithéliale rénalePour identifier l'effet de l'hypoxie sur l'expression de RIG-I et IFN-a/ in vitro, nous avons effectué une analyse Western blot pour ces protéines dans des cellules NRK-52E cultivées dans des conditions hypoxiques. Le niveau de protéine de RIG-I a culminé à 30 min, puis a progressivement diminué dans les cellules NRK-52E sous stimulation hypoxique (Fig 1A). Les niveaux d'IFN-/ß ont augmenté et ont culminé à 120 et 60 min, respectivement, dans NRK. -52Cellules E avec stimulation hypoxique (Eig 1Band1C). Le knockdown de RIG-I réduit l'expression de l'IFN-a/ dans les cellules NRK52E avec hypoxie siRNA RIG-I ou négatif
ARNsi de contrôle. Tout d'abord, nous avons confirmé l'effet knock-down du RIG-siARN dans les cellules NRK-52E. Western blot pour RIG-I a révélé que l'expression de RIG-I siRNA RIG-I dans les cellules NRK-52E, avec ou sans stimulation hypoxique (Eig 2A). -I dans l'expression de l'IFN-/B dans les cellules NRK-52E à l'aide d'ARNsi RIG-I ou d'un contrôle négatif. RIG-siRNA a supprimé l'expression de l'IFN-/ dans les cellules NRK-52E (Eig2Band2C).
RIG-I est en corrélation avec les niveaux d'expression d'IFN- / dans des échantillons de rein humain de néphropathie à IgANous avons examiné si le niveau d'expression de RIG-I est associé à l'IFN-a/ dans des échantillons de biopsie rénale obtenus de patients atteints de néphropathie à IgA (n=33). Les caractéristiques cliniques détaillées de ces patients sont présentées dans le tableau S1. La coloration immunohistochimique pour RIG-I et IFN-/ a révélé leur expression dans les glomérules et les tubules rénaux (Fig 3A) et a montré que RIG-I est positivement corrélé avec IFN-o/ (r=0.57,P<0.001, and="" r=""><0.001, respectively)(eig="">
L'hypoxie ne modifie pas le niveau d'expression de klotho chez les souris WT et K1-/Pour déterminer l'effet de la stimulation hypoxique sur l'expression de klotho in vivo, nous avons étudié son expression chez les souris WT et K-/ avec ou sans 10 min de stimulation hypoxique. Le transfert Western et la coloration immunohistochimique ont révélé que l'expression de klotho ne différait pas entre les souris WT avec et sans hypoxie et que l'expression de klotho n'était pas observée chez les souris KIT/souris indépendamment de la présence ou de l'absence de stimulation hypoxique (Eig 4A et 4B). Chez les souris WT, klotho la protéine a été colorée dans le cytoplasme des cellules tubulaires (Fig 4B).L'expression de RIG-I est intensifiée dans des conditions hypoxiques chez les souris K~.Le klotho intracellulaire conférerait la capacité de supprimer l'inflammation médiée par RIG-I, nous avons donc examiné le niveau d'expression et la localisation de RIG-I dans l'hypoxie.reinsde souris WT et Kl−/−. Le Western blot a révélé que l'expression de RIG-I augmentait chez les souris WT avec une stimulation hypoxique et qu'elle était intensifiée chez les souris Kl-/- (Fig 5A). L'immunohistochimie a montré que la zone RIG-I-positive augmentait chez les souris Kl-/-, ce qui était similaire aux résultats obtenus par Western blot (Fig 5B).
L'IFN- est régulé positivement dans des conditions hypoxiques chez les souris KI--Pour identifier les effets de l'hypoxie sur l'expression de -a chez wvo, nous avons examiné son niveau d'expression et sa localisation chez les souris hypoxiques WT et KI. Le transfert Western a révélé que l'expression de l'IFN augmentait chez les souris WT avec une stimulation hypoxique et qu'elle était en outre régulée positivement chez les souris (Fig 6A). La coloration immunohistochimique a également révélé que la zone positive à l'IFN - - était principalement observée dans les cellules tubulaires et que le niveau d'expression de l'IFN- présentait la même tendance que dans le Western blot (Fig 6B).
L'IFN- est augmenté dans des conditions hypoxiques chez les souris K1T-En plus de l'IFN-c, nous avons examiné le niveau d'expression et la localisation de l'IFN-Bin WT hypoxique et des souris. D'après les résultats du transfert Western, l'expression de l'IFN-a augmenté chez les souris WT avec une stimulation hypoxique, tandis qu'une nouvelle augmentation a été observée chez les souris KIT/(figure 7A). Lors de la quantification de la zone positive à l'IFN- -, le niveau d'expression de l'IFN- a augmenté chez les souris KI-/-par rapport à celui des souris WT' (Fig 7B).
observée chez les souris Kl-/- indépendamment de la présence de stimulation hypoxique. Nous avons montré que l'hypoxie rénale augmentait l'expression de RIG-I et d'IFN-/ et que leur expression était encore intensifiée chez les souris Kl-/-. Ces résultats suggèrent que la déficience en klotho intensifie l'expression induite par l'hypoxie de RIG-I, entraînant une régulation positive de l'IFN-/. Nous avons identifié que l'hypoxie induit l'expression de RIG-I et IFN-/ dans des études in vitro et in vivo. Pour s'adapter aux conditions hypoxiques, le HIF est stabilisé et fonctionne comme un facteur de transcription [30]. Dans une étude précédente, il a été rapporté que RIG-I est impliqué dans des molécules inductibles par HIF. Cependant, nous n'avons pas pu identifier que RIG-I est un effecteur en aval de HIF. En plus de l'infection virale, l'expression de RIG-I augmente dans des conditions hypoxiques [31]. Bien que des études antérieures aient rapporté que l'hypoxie affecte les cellules épithéliales tubulaires, les cellules endothéliales, les péricytes, les fibroblastes, les cellules inflammatoires et les cellules progénitrices dans les reins [32,33], nous montrons que la régulation positive de RIG-I a été principalement observée dans les cellules épithéliales tubulaires chez la souris. avec stimulation hypoxique, ainsi que chez les patients atteints de néphropathie à IgA. Parce que les tubules rénaux sont considérés comme un site d'entrée des agents pathogènes transurétraux [34], RIG-I peut jouer un rôle central dans la réponse immunitaire des cellules épithéliales tubulaires dans des conditions hypoxiques. La réponse immunitaire innée est activée non seulement par des micro-organismes, mais également par des signaux d'alarme provenant de cellules endommagées, blessées ou stressées [35]. Dans cette étude, nous avons montré que l'expression induite par l'hypoxie de RIG-I participait à la production d'IFN-/ dans une lignée cellulaire de tubules rénaux de rat. Les données présentées suggèrent que l'expression de RIG-I fonctionne comme le système immunitaire inné du cytosol en réponse au stress hypoxique ainsi qu'à l'infection virale. Des études antérieures ont décrit que l'hypoxie augmente au cours du développement de l'IRC quelle que soit la maladie primaire et que l'hypoxie contribue à la progression des lésions rénales [17]. Dans une étude clinique utilisant l'imagerie par résonance magnétique dépendante du niveau d'oxygénation sanguine, l'hypoxie rénale s'est non seulement intensifiée au cours de la progression de l'IRC, mais a également prédit cette progression [36]. Ainsi, l'hypoxie est actuellement considérée comme la voie commune à la progression de la phase terminalemaladie du rein, l'inflammation induite par l'hypoxie devrait donc être une cible thérapeutique pour supprimer la progression de la MRC.
Nous avons montré que l'hypoxie induit la production d'IFN-/, qui sont classés comme interférons de type 1. Les interférons de type 1 fonctionnent essentiellement pour inhiber la réplication virale [37] et pour résister à l'immunosuppression induite par l'hypoxie [21,22]. Cependant, des études réalisées à ce jour ont rapporté que les interférons de type 1 conduisent à l'activation de cellules tueuses naturelles, jouant un rôle important non seulement dans l'élimination des cellules infectées par le virus, mais également dans les lésions tissulaires [38]. En fait, des études antérieures ont rapporté que RIG-I contribue à l'inflammation dans divers organes, tels que le poumon [39],un rein[40], et le système nerveux [21]. Dans cette étude, nous avons également montré que la régulation à la hausse induite par l'hypoxie de RIG-I est responsable de la production d'IFN-/. Ainsi, les interférons de type 1 peuvent fonctionner pour protéger contre l'infection dans un état d'hypoxie, mais ils seraient nocifs dans des conditions non infectées. De plus, une étude précédente a rapporté qu'en plus des interférons de type 1, RIG-I est impliqué dans la production de diverses cytokines, telles que IL-1, IL- 6 et TNF- [41]. Étant donné que ces cytokines causent des lésions tissulaires, la régulation à la hausse induite par l'hypoxie de RIG-I peut participer à la progression de l'IRC. Nous avons montré que le déficit en klotho améliore l'expression de RIG-I induite par l'hypoxie, qui s'accompagne d'une régulation positive de l'IFN-/. L'expression de Klotho diminuerait avec le vieillissement et la progression de l'IRC [42,43]. Par conséquent, l'expression de RIG-I peut être régulée davantage chez les personnes âgées et les patients atteints d'IRC dans des conditions hypoxiques, conduisant à la production d'IFN-/. Comme mentionné ci-dessus, le klotho existe sous trois formes - klotho membranaire, sécrété et intracellulaire - ce dernier étant responsable de la suppression de la production médiée par RIG-I de cytokines inflammatoires [26]. En termes de localisation, nous avons montré que l'expression de klotho se produit principalement au niveau des cellules tubulaires rénales, avec des preuves que l'expression de RIG-I est principalement intensifiée au niveau des cellules tubulaires rénales dans des conditions hypoxiques. Ces résultats suggèrent qu'une diminution du niveau d'expression de klotho contribue à une production accrue médiée par RIG-I d'interférons de type 1 dans des conditions hypoxiques.
CISTANCHE AMÉLIORE LA DOULEUR RÉNALE/RÉNALE
En résumé, nous avons montré que la stimulation hypoxique induit RIG-I et IFN-/ dans les reins de souris et une lignée cellulaire de rat de cellules tubulaires rénales, et que RIG-I était impliqué dans la régulation à la hausse induite par l'hypoxie de l'IFN-/expériences in vitro. Dans des échantillons de biopsie rénale de patients atteints de néphropathie à IgA, l'expression de RIG-I était corrélée à la régulation positive d'IFN-/. Enfin, l'expression induite par l'hypoxie de RIG-I a été intensifiée chez les souris klotho-knockout, ainsi que la régulation à la hausse de l'IFN-/. L'expression médiée par RIG-I de l'interféron de type 1 a augmenté dans des conditions hypoxiques, et une régulation à la hausse supplémentaire a été observée dans un état de régulation à la baisse de klotho. Selon les études cliniques, l'hypoxie est exacerbée avec le stade avancé d'IRC [36] et est prédictive de la progression à long terme de l'IRC [36]. De plus, l'expression de klotho diminue avec le déclin de la fonction rénale, et la réduction de l'expression de klotho est associée à des lésions rénales [44]. Dans cette étude, nous montrons que le déficit en klotho intensifie l'expression induite par l'hypoxie de l'IFN-/ par la régulation à la hausse de RIG-I dans les reins et que l'expression de RIG-I est associée à celle de l'IFN-/ chez les patients réels atteints de néphropathie à IgA. En prenant ces résultats ensemble, l'hypoxie et la réduction du klotho sont favorisées au cours de la progression de l'IRC et, par conséquent, l'activation de l'immunité innée est renforcée chez les patients atteints d'IRC.