Métabolisme du flavonol kaempférol dans les cellules rénales

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Le métabolisme du flavonol kaempférol dans les cellules rénales libère l'anneau B pour entrer dans la biosynthèse de la coenzyme Q

Lucía Fernández-del-Río¹, et al

RésuméRésumé : La coenzyme Q (CoQ) est un composant essentiel de la chaîne de transport d'électrons mitochondriale et un antioxydant important présent dans toutes les membranes cellulaires. Les carences en CoQ sont fréquentes dans le vieillissement et dans les maladies liées à l'âge, et les traitements actuels se limitent à la supplémentation en CoQ. Les stratégies qui reposent sur la supplémentation en CoQ souffrent d'une mauvaise absorption et du trafic de cette molécule très hydrophobe. Dans une étude précédente, il a été rapporté que le flavonol alimentaire kaempférol servait de précurseur du cycle CoQ et augmentait la teneur en CoQ dansun reincellules, mais ni la partie de la molécule entrant dans la biosynthèse de CoQ ni le mécanisme n'ont été décrits. Dans cette étude, le kaempférol marqué spécifiquement dans le cycle B a été isolé à partir de plantes Arabidopsis.Un reincellulestraités avec ce composé ont incorporé le cycle B du kaempférol dans la CoQ nouvellement synthétisée, suggérant que le cycle B est métabolisé via un mécanisme décrit dans les cellules végétales. Le kaempférol est un flavonoïde naturel présent dans les fruits et légumes et possède des propriétés thérapeutiques antioxydantes, anticancéreuses et anti-inflammatoires. Une meilleure compréhension du rôle du kaempférol en tant que précurseur du cycle CoQ fait de ce composé bioactif un candidat potentiel pour la conception d'interventions visant à augmenter la biosynthèse endogène du CoQ et peut améliorer les phénotypes déficients en CoQ dans le vieillissement et la maladie.

Mots clés flavonoïdes; flavonol; kaempférol; coenzyme Q;un reincellules; précurseur

Cistanche peut améliorer la fonction rénale

1. Introduction

La coenzyme Q (CoQ ou ubiquinone) est une petite molécule lipophile présente de manière omniprésente dans les membranes cellulaires. Structurellement, il est composé d'un cycle benzoquinone et d'une queue polyisoprénoïde dont la longueur varie selon les espèces [1]. Chez les mammifères, la CoQ9 (queue à neuf isoprènes) et la CoQ10 (queue à dix isoprènes) sont présentes, la CoQ9 étant prédominante chez les rongeurs et la CoQ10 chez l'homme [1]. La synthèse de CoQ se produit dans les mitochondries en plusieurs étapes réalisées par au moins 14 protéines appelées protéines COQ [1,2]. La CoQ joue un rôle dans de multiples fonctions cellulaires [3,4]. Cependant, la fonction principale de CoQ est d'accepter les électrons et les protons des complexes respiratoires I et II et de les donner au complexe III [1,4]. Cette capacité redox permet au CoQ de passer d'un cycle à l'autre de trois états : l'ubiquinone (oxydée), la semiquinone (semi-oxydée) et l'ubiquinol (réduit) [1,5]. Sous sa forme ubiquinol, la CoQH2 joue un rôle antioxydant important et protège l'ADN, les protéines et les lipides contre le stress oxydatif [6,7].

La teneur en CoQ diminue avec l'âge dans une variété de tissus de mammifères, comme en témoigne une diminution du taux de biosynthèse [8-10]. La possibilité d'augmenter la teneur en CoQ10 grâce à la supplémentation alimentaire a été largement explorée au cours des dernières décennies [6,9]. Bien que des études plus contrôlées soient nécessaires pour déterminer l'efficacité de la CoQ10 en tant que médicament anti-âge chez l'homme [11], il a déjà été rapporté que les taux plasmatiques de CoQ chez les personnes âgées étaient corrélés à une activité physique accrue et à une diminution des dommages oxydatifs lipidiques ; et que la supplémentation en CoQ10 améliore la vitalité, les performances physiques et la qualité de vie des personnes âgées [9]. Les arguments en faveur des effets bénéfiques de la supplémentation en CoQ10 sont plus solides pour un certain nombre de maladies liées à l'âge telles que les maladies cardiovasculaires, les neuropathies, l'inflammation, le syndrome métabolique, l'arthrite, la carcinogenèse, le diabète, l'ostéoporose et l'hypercholestérolémie [3,8,11]. Il a été démontré que la supplémentation en CoQ10 réduit les marqueurs inflammatoires, qui sont couramment présents à des niveaux élevés dans les maladies liées à l'âge susmentionnées [12-14].

Cependant, la longue chaîne polyisoprénoïde rend la CoQ10 hautement lipophile et difficile à absorber. Les compléments alimentaires CoQ10 posent plusieurs défis, notamment l'absorption spécifique via le tractus gastro-intestinal [5], l'absorption cellulaire au niveau de la membrane plasmique, le transport à travers les membranes intracellulaires et l'assimilation par les mitochondries. Toutes ces étapes de trafic rendent le processus de supplémentation exogène en CoQ10 très inefficace [3,9]. À cet égard, des véhicules alternatifs pour l'administration de CoQ10 sont à l'étude (par exemple, des capsules à base d'huile, des nanoparticules) [3,15,16], ainsi que de nouvelles stratégies qui pourraient potentialiser la synthèse endogène de CoQ [2,3]. Auparavant, nous avons décrit la capacité du kaempférol, un flavonol présent dans les fruits et légumes, à augmenter la teneur en CoQ en agissant comme un nouveau précurseur de CoQ chez la souris et l'homme.un reincellules[17]. Cependant, la voie métabolique exacte par laquelle le kaempférol participe à la biosynthèse du CoQ n'a pas été identifiée. Deux hypothèses ont été proposées : (1) le kaempférol pourrait être un substrat direct de la COQ2 dans la voie de biosynthèse de la CoQ et serait ensuite métabolisé par les différentes protéines COQ jusqu'à ce qu'il atteigne la structure finale de la CoQ ; ou alternativement, (2) le kaempférol pourrait être métabolisé dans la cellule pour produire un précurseur potentiel du cycle CoQ, qui serait ensuite intégré dans la voie de biosynthèse du CoQ [17]. Dans une étude récente, Soubeyrand et ses co-auteurs [18] ont décrit que, chez les plantes, les voies de biosynthèse des flavonoïdes et du CoQ sont en effet connectées et que le kaempférol peut servir de précurseur à la synthèse du CoQ. Ils ont prouvé que le cycle B du kaempférol est soumis à un clivage peroxydatif, pour donner l'acide 4-hydroxybenzoïque (4HB), un précurseur commun du cycle benzoquinone de CoQ [18].

L'objectif du présent travail est de décrire plus en détail la relation entre le kaempférol et la CoQ dans les cellules de mammifères. Nos résultats montrent que dansun reincellules, le cycle B du kaempférol est la partie de la molécule qui entre dans la biosynthèse du CoQ, suggérant que le mécanisme décrit pour les plantes est susceptible d'être conservé chez les vertébrés.

2. Résultats

Pour mieux comprendre comment le kaempférol fonctionne en tant que précurseur du CoQ dans les cellules de mammifères, nous avons décidé de tester si le cycle B du kaempférol est la partie de la molécule qui entre dans la voie de biosynthèse du CoQ, comme cela a été rapporté chez les plantes [18]. Nos efforts pour synthétiser chimiquement le kaempférol spécifiquement marqué au 13C dans le cycle B (13C6-[B-ring]-kaempférol) ont été infructueux. Comme stratégie alternative, nous avons choisi d'isoler le 13C6-[B-ring]-kaempférol à partir de cultures de la plante Arabidopsis thaliana. Une telle synthèse in vivo de kaempférol marqué par le cycle B est possible car les plantes dérivent le cycle B du kaempférol exclusivement du fragment phényle de la phénylalanine [19]. En revanche, le cycle A et le cycle C proviennent du malonyl-CoA [19]. En alimentant en 13C6-L-phénylalanine (13C6-Phe) des plantes d'Arabidopsis cultivées dans des conditions stériles, on peut donc obtenir du kaempférol spécifiquement marqué sur l'anneau B [18]. De plus, pour stimuler l'accumulation de kaempférol, l'alimentation en 13C6-Phe a été réalisée à l'aide d'un flavonoïde-30- hydroxylase inactivé d'Arabidopsis, qui ne peut plus métaboliser le kaempférol en anthocyanes [20]. Il convient de noter que le kaempférol obtenu avec une telle méthode consiste en un mélange de 13C6-[B-ring]-kaempférol ainsi que de kaempférol non marqué, qui était présent dans les tissus végétaux avant l'alimentation en 13C{{36 }}Ph. L'enrichissement spécifique en 13C6-[B-ring]-kaempférol dans le mélange utilisé pour nos expériences était d'environ 10 % du pool total de kaempférol (c'est-à-dire non marqué plus marqué).

À l'aide de 13C6-[B-ring]-kaempférol extrait et purifié d'Arabidopsis, nous avons traité des sourisun reinCellules épithéliales du tubule proximal (TKPTS) et mesurée de novo et contenu total de CoQ (Figure 1). Le kaempférol non marqué, le kaempférol universellement marqué au 13C (13C-kaempférol) et le 4HB (13C6-4HB) marqué au 13C ont été utilisés comme traitements complémentaires (Figure 1a). Les cellules traitées avec des véhicules à l'éthanol ont été incluses comme contrôle. Nous avons observé qu'en termes de CoQ total (CoQ plus 13C6-CoQ), la teneur en CoQ9 et en CoQ10 était augmentée par le traitement au kaempférol (indépendamment de l'étiquette) et au 4HB (Figure 1b, c), comme décrit précédemment pourun reincellules [17]. 13C6-CoQ a été détecté dans des cellules traitées avec 13C-kaempférol et 13C6-4HB, ce qui est en accord avec le rôle de ces composés en tant que précurseurs du cycle CoQ [17,21]. Notamment, le traitement avec 13C6-[B-ring]-kaempférol a également conduit à la synthèse de 13C6-CoQ (Figure 1b,c), indiquant que le cycle B du kaempférol fait partie du molécule qui entre dans la biosynthèse du CoQ. Comme prévu, le marquage spécifique inférieur du cycle B dans le mélange 13C6-[B-ring]-kaempférol/kaempférol a entraîné une quantité inférieure de 13C6-CoQ (Figure 1b,c)

3. Débat

Le kaempférol est un flavonoïde naturel de type flavonol présent dans le thé ainsi que dans de nombreux légumes et fruits tels que le brocoli, les raisins, le chou frisé, les tomates et les agrumes, entre autres [22,23]. Les propriétés les plus connues du kaempférol sont ses effets anti-inflammatoires dans l'inflammation aiguë et chronique, et son rôle dans la prévention de plusieurs types de cancer [24-26]. De plus, il a été démontré qu'il protège les fonctions hépatique et cardiaque et qu'il prévient les maladies métaboliques et neurodégénératives [24,26]. On pense que le kaempférol atteint ses effets bénéfiques grâce à la régulation d'une multitude de voies cellulaires [24,26], mais sa fonction antioxydante pourrait également être importante. Le kaempférol réduit significativement le stress oxydatif et la peroxydation lipidique et peut améliorer l'activité de défense antioxydante [26]. Le groupe hydroxyle C-3 a été considéré comme particulièrement important pour cette activité antioxydante [27].

En 2015, Xie et al. [21] ont décrit que le composé alimentaire resvératrol, qui a été lié à de multiples bienfaits pour la santé [28], peut servir de précurseur de cycle dans la biosynthèse de CoQ dans Escherichia coli, Saccharomyces cerevisiae et les cellules de mammifères. Dans une étude ultérieure, le kaempférol a en outre été décrit comme agissant comme un précurseur du cycle CoQ et pour augmenter la teneur en CoQ dans les cellules de mammifères [17]. L'augmentation de CoQ induite par le kaempférol s'est avérée plus forte que l'effet exercé par d'autres polyphénols, dont le resvératrol. En fait, la quercétine, la naringénine, la lutéoline et le piceatannol n'ont montré aucun effet [17]. Ces études ont lié les produits naturels généralement présents dans l'alimentation avec la biosynthèse de CoQ, bien que le mécanisme responsable de l'incorporation n'ait pas été déterminé. Récemment, il a été décrit que la synthèse des flavonoïdes est en effet liée à la synthèse de CoQ chez les plantes [18]. De plus, les auteurs ont montré que chez les plantes, le cycle B du kaempférol est clivé par des peroxydases encore inconnues produisant du 4HB qui entre directement dans la voie de biosynthèse du CoQ[18].

Ici, nous avons confirmé que des enzymes similaires pourraient être présentes dans les cellules de mammifères, permettant à un mécanisme comparable de se produire. Bien que des études supplémentaires soient nécessaires pour déterminer si le clivage du kaempférol chez les mammifères produit du 4HB, nos résultats prouvent que le cycle B du flavonol est la partie de la molécule qui entre dans la voie de biosynthèse du CoQ (Figure 2). Ces enzymes spécifiques doivent être partagées dans les plantes et les cellules de mammifères mais semblent être absentes chez S. cerevisiae, du moins dans le fond génétique BY4741, puisque la levure a été décrite comme n'incorporant que très marginalement le 13C-kaempférol [17]. Chez les végétaux, la chimie de la réaction nécessite la présence simultanée d'une double liaison entre C-2 et C-3, et d'un groupement hydroxyle sur C-3 [18], car le dihydrokaempférol (pas Double liaison C2-C3) et la naringénine (pas de double liaison C2-C3 ni C-3 -OH) n'ont pas été des substrats du clivage peroxydatif. L'observation indépendante précédente selon laquelle l'apigénine (pas de double liaison C2-C3) et la naringénine n'ont pas réussi à améliorer la teneur en CoQ dansun reincells [17] soutient l'hypothèse que les plantes et les mammifères partagent un mécanisme similaire.

Compte tenu de la biodisponibilité limitée des suppléments de CoQ10, la stimulation de la synthèse endogène de CoQ a fait l'objet de plusieurs études [1,9]. Comprendre comment le kaempférol augmente la voie de biosynthèse de la CoQ est d'une importance capitale car sa capacité à augmenter la teneur en CoQ endogène a un fort potentiel pour améliorer les carences en CoQ associées au vieillissement ou à la maladie. De plus, les patients pourraient trouver des avantages supplémentaires puisque la consommation régulière de flavonoïdes est liée à un risque réduit de maladies liées à l'âge, comme décrit ci-dessus [24-26]. Bien que la biodisponibilité du kaempférol soit assez faible [29], l'augmentation de la CoQ dansun reincellulesa été observé à des doses pouvant être atteintes physiologiquement, par supplémentation orale ou par consommation d'aliments contenant des flavonoïdes [27], et même une légère quantité supplémentaire de précurseurs de CoQ pourrait déplacer le flux métabolique en faveur de la synthèse de CoQ.

Des recherches supplémentaires sont nécessaires pour caractériser le kaempférol comme un composé efficace pour le traitement des carences en CoQ. D'autres études in vitro et in vivo sont nécessaires pour bien comprendre la relation entre le kaempférol et la CoQ, trouver la formulation la plus appropriée du composé bioactif et identifier la ou les enzymes responsables du clivage peroxydatif.

4. Matériels et méthodes

4.1. Produits chimiques et réactifs

Le kaempférol non marqué a été obtenu auprès de Santa Cruz Biotechnology, Inc. (Dallas, TX, USA); 13C6-4HB de Cambridge Isotope Laboratories, Inc. (Tewksbury, MA, États-Unis) ; et 13C-kaempférol d'Isolife (Wageningen, Pays-Bas). Les normes CoQ9 et CoQ10 ont été obtenues auprès de Sigma-Aldrich (San Luis, MO, USA). Le dipropoxy-CoQ10 a été synthétisé essentiellement comme décrit par Edlund [30] pour le diéthoxy-Q10, sauf que le 1-propanol a été remplacé par l'éthanol tout en maintenant les autres réactifs et conditions. Le 13C6-[B-ring]-kaempférol a été préparé à partir de cultures in vitro de plantes inactivées d'Arabidopsis thaliana flavonoïde-30 -hydroxylase nourries pendant 48 h avec des doses de 250 μM de 13C6-L-Phénylalanine ( Cambridge Isotope Laboratories, Inc., Tewksbury, MA, États-Unis) [18]. Les feuilles (~ 1, 5 g) ont été homogénéisées à l'aide d'un broyeur de tissus Pyrex dans 5 × 900 µL de méthanol, et les extraits ont été centrifugés à 18, 000 × g pendant 10 min. Les surnageants (5 × ~ 800 µL) ont été regroupés et mélangés à un volume égal de HCl 2 M et incubés à 70 ◦C pendant 40 min afin d'hydrolyser les conjugués glycosyl-kaempférol. Des aliquotes d'hydrolysat (200 µL) ont été mélangées avec un volume égal de méthanol à 100 % et centrifugées à 18 000 × g pendant 15 min. Les échantillons (100 µL chacun) ont été chromatographiés sur une colonne Zorbax Eclipse Plus C18 (4,6 × 100 mm, 3,5 µm ; Agilent Technologies, Santa Clara, CA, États-Unis) maintenue à 30 ◦C à l'aide d'un gradient linéaire 25-min commençant de formiate d'ammonium 10 mM pH 3,5 à 100 % de méthanol à un débit de 0,8 mL/min. Le kaempférol (18,7 min) a été collecté en surveillant l'absorbance à 365 nm, évaporé à sec avec de l'azote gazeux, puis remis en suspension dans 100% de méthanol pour quantification à l'aide d'un coefficient d'extinction molaire de 21 242 M-1cm-1. Les analyses MS/MS ont indiqué que la préparation était composée d'environ 10 % de kaempférol marqué au 13C (M plus 6) et d'environ 90 % de kaempférol non marqué.

4.2. Conditions et traitements de culture cellulaire

Sourisun reincellules épithéliales du tubule proximal (TKPTS) [31], ont été fournies par le Dr Elsa Bello-Reuss (Texas Tech University Health Science Center, Lubbock, TX, USA) et le Dr Judit K. Magyesi (the University of Arkansas for Medical Sciences, Little Rock, AR, États-Unis). Les cellules TKPTS ont été cultivées dans du DMEM/F12 contenant 4,5 g/L de glucose et additionnées de 10 % de sérum bovin fœtal (FBS), de L-glutamine 2 mM et de gentamicine-amphotéricine B (125 µg/mL et 5 mg /mL, respectivement). Les cultures ont été maintenues à 37°C dans une atmosphère humidifiée avec 5% de CO2. Pour les déterminations de CoQ, les cellules ont été ensemencées dans des plaques 12-puits avec une quantité initiale de 60,000 cellules/puits et traitées avec 5 µM de kaempférol, 13C-kaempférol, 13C6-[B -anneau]-kaempférol, ou 1 µM 4HB pendant 48 h. Dans la publication précédente où nous décrivions le kaempférol comme un nouveau précurseur de CoQ, des expériences ont été faites avec 10 µM de 13C-kaempférol [17]. Cependant, la quantité limitée de 13C6-[B-ring]-kaempférol disponible nous a conduit à diminuer la concentration utilisée, bien que les conditions soient toujours dans la plage où il a été rapporté que le kaempférol augmentait la teneur en CoQ [17]. De l'éthanol a été ajouté au témoin car le véhicule était maintenu en dessous de 0,05 % du volume final. Les cellules ont été incubées dans des conditions de culture standard (37 °C, 5 % de CO2). Après le temps imparti, les cellules ont été lavées deux fois avec une solution saline tamponnée au phosphate (PBS) 1X, détachées des plaques de culture à l'aide de trypsine-EDTA (Fisher Scientific, Waltham, MA, États-Unis) et culottées par centrifugation à basse vitesse (environ 1000 × g). Le surnageant a été retiré et les culots cellulaires ont été stockés à -20 degrés jusqu'à utilisation.

4.3. Extraction de lipides

Les culots cellulaires ont été remis en suspension dans 100 µL de PBS 1X. Avant l'extraction des lipides, des aliquotes de 10 µL ont été conservées pour quantifier la concentration en protéines à l'aide du test de Bradford [32]. Ensuite, du dipropoxy-CoQ10 a été ajouté aux 90 µL restants comme étalon interne. Pour démarrer l'extraction, deux ml de méthanol ont été ajoutés. La suspension cellulaire a été vortexée et deux ml d'éther de pétrole ont été ajoutés. La couche supérieure d'éther de pétrole (contenant tous les lipides non saponifiables, y compris la CoQ) a été transférée dans un tube propre. Deux autres ml d'éther de pétrole ont été ajoutés à la couche de méthanol d'origine et les échantillons ont de nouveau été vortexés. La couche supérieure a été retirée, combinée avec la précédente, et la phase organique combinée a été séchée sous un courant d'azote gazeux. Une série de normes CoQ9 et CoQ10 contenant de l'isopropoxy-CoQ10 ont été préparées et les lipides extraits en même temps que les échantillons de cellules pour construire des courbes standard CoQ9 et CoQ10.

4.4. Analyse CoQ

La teneur en CoQ9 et CoQ10 marquées et non marquées des extraits lipidiques a été analysée par HPLC-MS/MS comme décrit précédemment [17]. En bref, les échantillons ont été remis en suspension dans 200 µL d'éthanol contenant 1 mg/mL de benzoquinone afin d'oxyder tous les lipides avant l'analyse. Un spectromètre MS/MS linéaire 4000 QTRAP d'Applied Biosystems (Foster City, CA, USA) a été utilisé. Le logiciel Applied Biosystem, Analyst version 1.4.2, a été utilisé pour l'acquisition et le traitement des données. La séparation chromatographique a été réalisée sur une colonne Luna 5 µm PFP(2) 100A (100 × 4,6 mm, 5 µm ; Phenomenex, Torrance, CA, USA) en utilisant une phase mobile composée à 90 % de solvant A (mélange 95:5 de méthanol : isopropanol contenant 2,5 mM de formiate d'ammonium) et 10 % de solvant B (isopropanol contenant 2,5 mM de formiate d'ammonium) à un débit constant de 1 mL/min. Tous les échantillons ont été analysés dans plusieurs modes de surveillance de réaction. Les transitions utilisées étaient : m/z 795,6/197,08 (CoQ9 plus H), m/z 812,6/197,08 (CoQ9 plus NH3), m/z 801,6/203,08 (13C-CoQ9 plus H), m/z 818,6/203,08 (13C -CoQ9 plus NH3), m/z 863.6/197.08 (CoQ10 plus H), m/z 880.6/197.08 (CoQ10 plus NH3), m/z 869.6/203.08 (13C -CoQ10 plus H), m/z 886,6/203,08 (13C-CoQ10 plus NH3), m/z 919,7/253,1 (dipropoxy-CoQ10 plus H), m/z 936,7/253,1 (dipropoxy-CoQ10 plus NH3). L'aire de chaque pic, normalisée avec la courbe standard correspondante et l'étalon interne, était appelée quantité initiale de protéine.

4.5. Analyses statistiques

Les données présentées dans ce travail représentent la moyenne ± l'écart type (SD). Les analyses statistiques et les graphiques ont été réalisés avec Graphpad Prism 8 (Graphpad Software Inc., San Diego, CA, USA). Les différences de teneur en CoQ par rapport au témoin ont été analysées à l'aide d'une ANOVA paramétrique unidirectionnelle, en corrigeant les comparaisons multiples avec le post-test de Dunnett. Les différences significatives ont été désignées par * p < 0.05,="" **="" p="">< 0.01,="" ***="" p="">< 0,001="" et="" ****="" p=""><>

5. Conclusions

Nos résultats montrent quecellules rénalespeut cliver le cycle B du flavonol alimentaire kaempférol pour produire des précurseurs potentiels du cycle de la biosynthèse de CoQ, très probablement 4HB. Ce métabolisme du kaempférol augmente la biosynthèse de CoQ et augmente la teneur en CoQ. Cette capacité du kaempférol pourrait potentiellement être utilisée dans la conception de suppléments plus efficaces pour atténuer les symptômes des carences en CoQ liées au vieillissement et à la maladie. Des études physiologiques supplémentaires seront nécessaires pour confirmer l'efficacité de la supplémentation en kaempférol pour potentialiser la biosynthèse de l'ubiquinone au niveau de l'organisme entier.

Les contributions de l'auteur:Conceptualisation, LF-d.-R., ES, GJB et CFC ; méthodologie, LF-d.-R., ES, GJB et CFC ; logiciel, LF-d.-R. ; validation, LF-d.-R., ES, GJB et CFC ; analyse formelle, LF-d.-R. ; enquête, LF-d.-R., et ES ; ressources, LF-d.-R., ES, GJB et CFC ; conservation des données, LF-d.-R., ES, GJB et CFC ; rédaction—préparation du projet original, LF-d.-R. ; rédaction—révision et édition, LF-d.-R., GJB et CFC; visualisation, LF-d.-R., ES, GJB et CFC ; supervision, GJB et CFC ; administration du projet, GJB et CFC ; acquisition de financement, GJB et CFC Tous les auteurs ont lu et accepté la version publiée du manuscrit.

Financement:Ce travail a été soutenu par la National Science Foundation Grant MCB-1330803 (CFC) et MCB-1712608 (GJB).

Remerciements :Nous remercions Anish Nag pour la synthèse de dipropoxy-CoQ10. Elsa Bello-Reuss (Texas Tech University Health Science Center, Lubbock, TX, USA) et Judit K. Magyesi (the University of Arkansas for Medical Sciences, Little Rock, AR, USA) ont aimablement fourni la sourisun reincellules épithéliales du tubule proximal (TKPTS). Nous remercions Jorge Torres d'avoir mis à disposition des installations de culture cellulaire. Nous remercions l'installation de protéomique UCLA Molecular Instrumentation Core ; Yu Chen, pour l'utilisation du QTRAP4000 pour l'analyse des lipides ; et Anna Block de l'USDA-ARS-CMAVE pour les analyses MS/MS.

Les conflits d'intérêts: Les auteurs ne déclarent aucun conflit d'intérêt.

---Journal Molecules (Bâle, Suisse), 25(13) ISSN 1420-3049 Auteurs : Fernández-Del-Río et al.
DOI 10.3390/molecules25132955

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