Partie 2 : Des extraits de Cistanche Deserticola peuvent antagoniser l'immunosénescence et prolonger la durée de vie des souris Senescence-Accelerated Mouse Prone 8 (SAM-P8)
Mar 12, 2022
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3.5. Extraits dfCistanche désertique(DPE) Promouvoir.
Apoptose et inhibition de la nécrose des lymphocytes chez les souris SAM-P8. Les niveaux de nécrose et d'apoptose dans les populations de lymphocytes sanguins ont été analysés par double coloration avec l'annexine V-FITC V/PI. Cela a révélé que la proportion de lymphocytes nécrotiques dans SAM-P8mic était significativement plus élevée que chez les animaux témoins SAM-R1, tandis que la proportion de lymphocytes apoptotiques était plus faible (figure 7). La supplémentation du régime alimentaire des souris SAM-P8 avec trois doses différentes d'ECD a pu inhiber les niveaux de nécrose observés dans les populations de lymphocytes périphériques, tandis que seuls les deux niveaux supérieurs de supplémentation en ECD ont produit un changement significatif du niveau de lymphocytes apoptotiques (Figure 7).
3.6.Extraits deCistanche désertique(ECD) Diminue la cytokine pro-inflammatoire IL -6 chez les souris SAM-P8.
En tant qu'indicateur supplémentaire de la capacité de l'ECD à influencer les changements liés à l'âge dans le système immunitaire, l'effet de la supplémentation alimentaire ECD sur le niveau d'un certain nombre de cytokines (IFN-, TNF-, IL-2.IL{{4 }}.IL-10, GM-CSF et IL-3) ont été analysés à l'aide d'une analyse par réseau de billes cytométriques (CBA) qui implique une coloration avec des anticorps marqués par un colorant fluorescent couplés à des billes cytométriques de capture. Les résultats (Figure 8) ont montré que la cytokine inflammatoire IL -6 n'était pas augmentée chez les souris SAM-P8 âgées de 8- mois par rapport aux souris SAM-R1 témoins du même âge, mais elle était significativement augmentée lorsque par rapport à6-des souris SAM-R1 âgées d'un mois (résultats non affichés). Cependant, la supplémentation alimentaire avec des doses élevées et moyennes d'ECD a pu produire une diminution statistiquement significative du niveau plasmatique d'IL -6 (Figures 8 (a) et 8 (b),<>
(IFN-,TNF-,IL-2,IL-10, GM-CSF et IL-3) n'ont montré aucune variation significative entre les groupes de souris traités par SAM-P8, SAM-R1 et ECD (données pas montré).
4. Discussion
La défense immunitaire contre les micro-organismes nouvellement invasifs ou les cellules tumorales endogènes dépend de la diversité du répertoire des cellules T, qui à son tour repose sur la génération et le maintien de cellules T naïves [19]. Au cours du processus de vieillissement, il a été démontré que la diversité du répertoire des lymphocytes T diminue considérablement en raison de l'épuisement progressif des lymphocytes T naïfs dans le pool de réserve périphérique. C'est cette pénurie de lymphocytes T naïfs réactifs qui serait responsable de la sensibilité des personnes âgées aux infections, au cancer et aux mauvais résultats après la vaccination [20]. Diverses interventions, y compris la restriction calorique [7], l'exercice [21] et la supplémentation en vitamine E [8], ont toutes été utilisées pour reconstituer avec succès les cellules T naïves et ainsi prolonger la durée de vie et réduire l'apparition d'infections et de cancers chez les personnes âgées. Dans cette étude, nous avons démontré que l'ECD est capable d'augmenter le niveau de lymphocytes T naïfs dans le pool périphérique et qu'il y avait une prolongation concomitante de la durée de vie et une réduction de la fréquence de formation de tumeurs chez les souris à sénescence accélérée (groupe thérapeutique ECD versus SAM-P8 ,0 contre 1/6). Par conséquent, il semble raisonnable de conclure que la capacité de l'ECD à inverser l'épuisement lié à l'âge des lymphocytes T périphériques naïfs peut contribuer à ses effets connus sur la réduction des maladies liées à l'âge qui découlent d'observations cliniques à long terme.
5. Matériels et méthodes
5.1.Matériaux.
Dans la réponse immunitaire normale, suite au confinement et à l'élimination d'un antigène étranger, la plupart des lymphocytes T à expansion clonale subissent une apoptose, seule une petite fraction étant retenue comme lymphocytes T mémoire. Par conséquent, à mesure que l'organisme immunocompétent vieillit, les lymphocytes T mémoire périphériques s'accumulent à la suite d'une exposition à vie à des antigènes étrangers convertissant les lymphocytes T naïfs en cellules mémoire [22,23]. Un certain nombre d'études ont suggéré que les défauts d'apoptose des lymphocytes chez les animaux plus âgés et les humains contribuent également à l'élargissement du compartiment des lymphocytes T mémoire [24,25]. De plus, une étude récente a montré qu'une surabondance de cellules T mémoires périphériques peut inhiber la prolifération homéostatique des cellules T naïves [26]. Ces études récentes ont également suggéré que les lymphocytes T mémoire peuvent sécréter des niveaux élevés de cytokines pro-inflammatoires qui peuvent contribuer à des inflammations persistantes dans divers tissus des personnes âgées. Par conséquent, la réduction du niveau de lymphocytes T mémoire devrait être bénéfique à la fois pour la prolifération homéostatique des lymphocytes T naïfs et également pour atténuer l'état inflammatoire excessif observé chez les organismes plus âgés. Dans cette étude, la supplémentation alimentaire avec ECD s'est avérée capable de réduire le niveau de cellules T mémoire périphériques et d'augmenter les niveaux de cellules T naïves. De plus, la supplémentation en ECD a augmenté l'espace d'apoptose pour les nouveaux lymphocytes naïfs. La nécrose des lymphocytes périphériques, qui est principalement induite par le stress oxydatif chez les animaux séniles, a également été inhibée.
Il existe de nombreuses preuves indiquant que le vieillissement d'un organisme n'est pas seulement caractérisé par une déficience immunitaire, mais également par une augmentation de l'inflammation chronique[27. L'état pro-inflammatoire se manifeste le plus clairement par une augmentation et une IL-1 dans la circulation associée à une fréquence accrue de maladies inflammatoires chroniques associées au vieillissement telles que la maladie d'Alzheimer, la maladie de Parkinson et l'athérosclérose. L'IL-6 est l'une des cytokinèses inflammatoires les plus importantes et sa concentration plasmatique augmente avec le vieillissement et les maladies liées à l'âge [18,28,29], et des études épidémiologiques suggèrent que l'IL-6 est un bon biomarqueur de la longévité. car elle est étroitement liée à la mortalité dans les cohortes de patients âgés [30,31]. Conformément à cela, un certain nombre d'interventions thérapeutiques qui diminuent la concentration d'IL-6 sont capables de
Figure 6 :Les effets de la supplémentation alimentaire ECD sur l'antigène des cellules souches-1 (Sca-1) dans les lymphocytes du sang périphérique des souris SAM-P8. Des souris maleSAM-P8 et contrôle SAM-RI âgées de huit mois ont été divisées en 5 groupes. Les 3 groupes de traitement d'animaux SAM-P8 ont été nourris pendant quatre semaines avec des régimes complétés par des doses faibles (100 mg/kg), moyennes de 500 mg/kg) et élevées de 250 mg/kg) d'ECD et les deux groupes d'animaux témoins ont été nourris sur le même régime sans supplémentation. Après un jeûne de 12 heures, du sang périphérique a été prélevé sur des animaux anesthésiés et soumis à une analyse FACS, comme décrit à la section 5. (a) FACSplots représentatifs des différents groupes de souris générés par gating sur l'antigène des cellules souches-1 (Sca{{ 20}})cellules positives.(b) Histogramme indiquant le pourcentage de cellules positives à l'antigène de cellule souche-1 (Sca-1) dans le sang périphérique des différents groupes d'animaux.Les barres représentent l'écart type de la viande (dans chaque groupe,{ {23}}).w*<0.01 sam-p8="" versus="" sam-r1;**=""><0.01 each="" treated="" group="" versus="" sam-p8="" group="" (by="" one-way="" anova="" with="" post="" hoc="">
Figure 7 : Les effets de la supplémentation alimentaire ECD sur l'apoptose et la nécrose des lymphocytes chez les souris SAM-P8 âgées. Des souris maleSAM-P8 et contrôle SAM-RI âgées de huit mois ont été divisées en 5 groupes. Les 3 groupes de traitement d'animaux SAM-P8 ont été nourris pendant quatre semaines avec des régimes complétés par des doses faibles (100 mg/kg), moyennes (500 mg/kg) et élevées (2500 mg/kg) d'ECD et les deux groupes d'animaux témoins ont été nourris avec le même régime sans supplémentation. Après un jeûne de 12 heures, du sang périphérique a été prélevé sur des animaux anesthésiés et soumis à une analyse FACS, comme décrit à la section 5. (a) FACSplots représentatifs des différents groupes de souris générés par gating sur des lymphocytes sanguins à double coloration avec l'annexine V-FITC /PI. (b) Histogramme montrant le pourcentage de lymphocytes apoptotiques (cellules positives à l'annexine V-FITC) dans le sang périphérique des différents groupes d'animaux. ( c ) Histogramme montrant le pourcentage de lymphocytes nécrotiques (cellules PI-positives) dans le sang périphérique des différents groupes d'animaux. Les barres représentent la moyenne SD (dans chaque groupe,=10)."<0.05 sam-p8=""><0.05each treated="" groupversussam-p8group(by="" one-way="" anova="" with="" post="" hoc="">
Figure 8 : Effets de la supplémentation alimentaire ECD sur le taux sérique de cytokine pro-inflammatoire L6 de souris SAM-P8. Des souris SAM-P8 mâles de huit mois et des souris SAM-RI témoins ont été divisées en 5 groupes. kg), et des doses élevées (2500 mg/kg) d'ECD, et les deux groupes d'animaux témoins ont été nourris avec le même régime sans supplémentation. Après un jeûne de 12 heures, les plasmas ont été collectés et les cytokines plasmatiques dans les différents groupes d'animaux ont été déterminées par immunodosage cytométrique à billes, comme décrit à la section 5. (a) Parcelles EACS représentatives des différents groupes de souris générés par gatingonIL-6 réseau de billes cytométriques. (b) Histogramme montrant les concentrations de cytokine IL6 dans le plasma des différents groupes d'animaux. Les barres représentent la moyenne ± SD (dans chaque groupe,=10).<0.001each treated="" group="" versus="" sam-p8="" group="" (by="" one-way="" anova="" with="" post="" hoc="">
soulager les maladies liées à l'âge [18]. Dans ce contexte, il était significatif que dans cette étude, la supplémentation alimentaire avec ECD soit capable de réduire les concentrations périphériques d'IL -6, avec l'implication que cet effet peut contribuer aux mécanismes sous-jacents de réduction de la fréquence des maladies liées à l'âge qui ont été obtenus grâce à l'utilisation à long terme de l'ECD dans la pratique clinique.
Parallèlement aux changements dans la réponse immunitaire adaptative qui se produisent avec l'âge, il existe également des changements majeurs dans l'immunité innée à mesure que l'organisme vieillit. Parmi ceux-ci, les changements dans les cellules tueuses naturelles [18], la première ligne de composants cellulaires à fournir une lyse cytotoxique directe des cellules tumorales et des cellules infectées par le virus, ont été considérables puisque les personnes âgées présentent une sensibilité accrue à la fois au développement de tumeurs et aux infections virales [32 ]. Cette étude a indiqué que les cellules CD3 plus Ly49 plus NK étaient présentes à des niveaux significativement plus faibles chez les souris séniles SAM-P8 par rapport aux animaux témoins SAM-R1, ce qui pourrait être un autre facteur sous-jacent expliquant la sensibilité accrue des souris âgées au cancer et à l'infection virale. L'augmentation du niveau de cellules NK observée dans cette étude suite à une supplémentation alimentaire en ECD pourrait donc être bénéfique pour les organismes âgés en termes de résistance accrue au développement tumoral et à l'infection virale. Cependant, d'autres études sont nécessaires pour clarifier le rôle de l'effet de l'ECD sur les cellules NK chez les organismes âgés.
En conclusion, cette étude a montré que le traitement de la sous-souche sujette à la sénescence accélérée de la souris, SAM-P8, avec ECD peut induire une inversion significative des altérations de l'immunosénescence liées à l'âge. Les carences dans les populations de cellules périphériques et spléniques de cellules T naïves et de cellules NK ont été réduites, tandis que les niveaux de cellules mémoire redondantes ont également été réduits. De plus, une supplémentation alimentaire avec ECD a pu supprimer à la fois les nécroses dans les lymphocytes périphériques et les niveaux de la cytokine pro-inflammatoire, IL-6. Enfin, en plus d'apporter des modifications au système immunitaire sénile, la supplémentation alimentaire ECD a considérablement prolongé la durée de vie du micro senileSAM-P8.
Références
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