Partie 2 : Pourquoi les extraits de plantes peuvent être des ingrédients cosméceutiques potentiels antioxydant, anti-âge, anti-inflammatoire et blanchissant

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conclusion

Extraits de plantesprovenant de différentes matières végétales dont l'aspect extérieur varie, y compris la couleur et la saveur. Parmi 16 extraits de plantes, le SR contenait le niveau le plus important de phénols et de flavonoïdes, de sorte que le SR possédait les activités antioxydantes les plus importantes dans les dosages DPPH et FRAP (p <0.05). de="" plus,="" rd="" et="" pe="" possédaient="">antioxydant activities comparable to those of SR (p >0.05). De plus, SR, RD et PE ont montré une croissance prometteuseblanchimenteffet avec les activités anti-tyrosinase les plus significatives par rapport aux autres (p < 0.05).="" cependant,="" l'extrait="" de="" plantes="" avec="" les="" activités="" anti-âge="" les="" plus="" importantes="" était="" l'ep,="" qui="" inhibait="" l'activité="" de="" la="" collagénase,="" de="" l'élastase="" et="" de="" l'hyaluronidase="" de="" 78,5="" ±="" 0.0="" %,="" 69.0="" ±="" 1,4="" pour="" cent="" ,="" et="" 64,2="" ±="" 0.3="" pour="" cent="" ,="" respectivement.="" de="" plus,="" ma="" et="" ms="" possédaient="" l'activité="" anti-inflammatoire="" la="" plus="" importante,="" car="" ils="" inhibaient="" la="" sécrétion="" d'il-6="" et="" de="" tnf-="" (p="">< 0,05).="" par="" conséquent,="" les="">extraits de plantesmentionnés ci-dessus ont des effets bénéfiques prometteurs sur la peau et pourraient potentiellement être utilisés en cosmétique/cosméceutiquedes produits. Les extraits de plantes sous forme de solutions aqueuses peuvent être appliqués directement sur la peau sous plusieurs formes de produits cosmétiques, tels que le toner, la brume faciale et le sérum facial. Ils pourraient également être développés sous plusieurs formes de produits cosmétiques, y compris la crème, la lotion et le gel. Cependant, des systèmes de nano-livraison sont proposés pour la livraison de cesextraits de plantesdans une couche de peau plus profonde afin de remplir leurcosméceutiquePropriétés. En outre, la lyophilisation ou l'élimination du solvant est suggérée comme un autre processus de production d'un extrait sec qui non seulement donne plus de détails sur la quantité de matière extraite, mais peut également être conservé pendant une période de temps plus longue.

cistanchecomprimés

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Section expérimentale

Matières végétales

Les feuilles de G. extension et de M. alba ont été collectées dans une ferme locale du district de Mae Rim, Chiang Mai, Thaïlande, en octobre 2018. Les feuilles fraîches ont été lavées à l'eau du robinet et laissées sécher à température ambiante. Les feuilles ont été coupées en petits morceaux et cuites à la vapeur pendant environ 5-10 min. Par la suite, les feuilles coulées ont été torréfiées à basse température pendant 15 min et finalement séchées dans un four (UF110, Memert, Allemagne) réglé à une température de 45 oC pendant 3 jours. De plus, les feuilles séchées de M. alba ont été préparées sans processus de cuisson à la vapeur ou de torréfaction. Des fleurs séchées d'E. purpurea ont été achetées dans une ferme locale de Chiang Mai, en Thaïlande. Des feuilles séchées d'A. elatior et de G. pentaphyllum ont été achetées à la boutique de la Royal Project Foundation à Chiang Mai, en Thaïlande. Fleurs séchées de C. tinctorius, C. morifolium, C. ternatea, H. sabdarifa et J.sambac, feuilles séchées de P. amaryllifolius, fleurs séchées de R. Damascena, feuilles séchées de S. rebaudiana, poudre d'écorce de C. verum séchée et séchée La poudre de fruit de P.emblica a été achetée sur un marché local à Chiang Mai, en Thaïlande. Tous les matériaux végétaux séchés ont été broyés en une poudre fine avec un mélangeur Moulinex (Moulinex, Paris, France) et conservés dans des récipients scellés comme indiqué sur la figure 10 jusqu'à une utilisation ultérieure.

Figure 10. Herbes séchées (a) et poudres séchées (b) de diverses matières végétales

Analyse microscopique de matières végétales séchées

Les échantillons de plantes ont été identifiés et authentifiés par Mme Wannaree Charoensup, botaniste à l'Herbier, Département des sciences pharmaceutiques, Faculté de pharmacie, Université de Chiang Mai. La poudre séchée de chaque matière végétale a été analysée à l'aide d'un microscope Nikon ECLIPSE E200 (Nikon Solutions Co., Ltd., Konan, Japon) connecté à un appareil photo Canon EOS750D (Canon Inc., Tochigi, Japon).[54] Le montage des échantillons dans du glycérol dilué a été utilisé pour préparer les lames. Les caractéristiques microscopiques et les composants cellulaires de chaque échantillon ont été examinés et photographiés à l'aide d'un microscope avec des grossissements d'objectif de 400x.

plante de cistancheblanchimenteffetsur la peau pouranti-oxydation

Matériaux chimiques

Acide L-ascorbique, acide kojique, acide gallique, quercétine, acide oléanolique, acide hyaluronique, réactif de Folin-Ciocalteu, lipopolysaccharide (LPS), albumine de sérum bovin (BSA), 2,4,6-Tris({{4 }}pyridyl)-s-triazine (TPTZ), 2,2'-diphényl-1-picrylhydrazyl (DPPH), 3-(4,5-diméthyl thiazolyl-2) { {15}},5-bromure de diphényltétrazolium (MTT), collagénase de Clostridium histolyticum (EC 3.4.24.3), élastase de pancréas porcin (EC 3.4.4.7), hyaluronidase de testicule bovin (EC 3.2.1.3.5 ), N-[3-(2-Furyl)acryloyl]-Leu-Gly-Pro-Ala (FALGPA), N-Succinyl-Ala-Ala-Ala-p-nitroanilide (AAAPVN), dichlorhydrate la tyrosinase de champignon (EC 1.14.18.1), la L-3, la 4 dihydroxyphénylalanine (L-DOPA) et la L-tyrosine ont été achetées chez Sigma Aldrich (St. Louis, MO, USA). La base Tricine et Tris a été achetée chez Fisher Chem Alert (Fair Lawn, NJ, USA). Le milieu d'aigle modifié par Dulbecco (DMEM), la L-glutamine, le RPMI-1640, la pénicilline/streptomycine et le bleu Trypan ont été achetés chez Invitrogen™ (Grand Island, NY, USA). L'acide chlorhydrique et l'acide acétique de qualité AR ont été achetés chez Merck (Darmstadt, Allemagne). Chlorure d'aluminium (AlCl3), chlorure de calcium (CaCl2), chlorure ferreux (FeCl2), chlorure ferrique (FeCl3), sulfate ferreux (FeSO4), acétate de potassium (CH3CO2K), chlorure de potassium (KCl), phosphate monopotassique (KH2PO4), potassium le persulfate (K2S2O8), l'acétate de sodium (C2H3NaO2), le carbonate de sodium (Na2CO3), le chlorure de sodium (NaCl), l'hydroxyde de sodium (NaOH), le phosphate monosodique (NaH2PO4) et le phosphate disodique (Na2HPO4) ont été achetés auprès de Fisher Chemicals (Loughborough, Royaume-Uni ). L'éthanol et le diméthylsulfoxyde (DMSO) de qualité AR ont été achetés chez Labscan (Dublin, Irlande).

Extraction de plantes

Les matières végétales à base de plantes ont été extraites par infusion dans de l'eau bouillie. En bref, 1 g de chaque poudre de plante à base de plantes séchées a été emballé dans un sachet de thé et immergé dans 50 ml d'eau DI bouillie. Le sachet de thé a ensuite été retiré après 1, 3, 5, 10 et 15 minutes d'infusion. L'extrait infusé a été laissé refroidir à température ambiante et utilisé dans d'autres investigations.

cistanche herbeextrait

Détermination de la teneur phénolique totale par la méthode Folin–Ciocalteu

Le contenu phénolique total de chaque extrait de plante a été évalué par la méthode Folin-Ciocalteu basée sur une méthode de Chaiyana et al., [55] qui avait été modifiée à partir de la méthode de Li et al. [56] L'acide gallique a été utilisé pour établir une courbe standard. Les niveaux de composé phénolique sont présentés en termes de milligrammes d'équivalent acide gallique (GAE) par millilitre deextraits de plantes. Toutes les expériences ont été faites en triple.

Détermination de la teneur totale en flavonoïdes par la méthode au chlorure d'aluminium

La teneur totale en flavonoïdes de chaque extrait de plante a été évaluée par la méthode du chlorure d'aluminium basée sur une méthode de Do et al. [57] La ​​quercétine a été utilisée pour établir une courbe standard. Les niveaux de flavonoïdes sont présentés en termes de milligrammes d'équivalent de quercétine (QE) par millilitre deextraits de plantes. Toutes les expériences ont été faites en triple.

Dosage du réactif 2,2'-diphényl-1-picrylhydrazyle (DPPH)

L'activité de piégeage contre les radicaux DPPH (DPPH) de chaque extrait de plante a été évaluée à l'aide du test DPPH basé sur une méthode de Chaiyana et al.,[55] qui avait été modifiée à partir de la méthode de Blois.[58] L'activité de récupération a été calculée à l'aide de l'équation

pourcentage d'activité de récupération={((AB)-(CD))/(AB)} x 100 (1)

où A est l'absorbance UV de la solution DPPH, B est l'absorbance UV des solvants, C est l'absorbance UV du mélange deextraits de planteset la solution DPPH, et D est l'absorbance UV de la solution d'extrait de plantes. Le témoin positif était l'acide L-ascorbique. Toutes les expériences ont été faites en triple.

Dosage du pouvoir antioxydant réducteur ferrique (FRAP)

La réduction ferriqueantioxydantLa puissance de chaque extrait de plantes a été évaluée à l'aide du test FRAP basé sur une méthode de Chaiyana et al., [55] qui avait été modifiée par rapport à la méthode de Saeio et al. [59] FeSO4 a été utilisé pour établir une courbe standard. Le pouvoir réducteur ferrique est présenté en termes de capacité équivalente (EC1), qui était la quantité d'équivalents FeSO4 par millilitre d'échantillon. Le témoin positif était l'acide L-ascorbique. Toutes les expériences ont été faites en triple.

Détermination de l'activité anti-tyrosinase

L'activité inhibitrice contre l'enzyme tyrosinase de chaque extrait de plante a été évaluée à l'aide d'un test spectrophotométrique basé sur une méthode de Laosirisathian et al.,[60] qui avait été modifiée à partir de la méthode de Pomerantz.[61] Les activités anti-tyrosinase ont été calculées à l'aide de l'équation

pourcentage d'activité anti-tyrosinase={((AB)-(CD))/(AB)} x 100 (2)

où A est l'absorbance UV d'une enzyme tyrosinase combinée avec le substrat, B est l'absorbance UV du solvant, C est l'absorbance UV duextraits de plantescombiné avec une enzyme tyrosinase et le substrat, D est l'absorbance UV de la solution d'extrait de plantes. Le contrôle positif était l'acide kojique. Toutes les expériences ont été faites en triple.

Cistancheest uninhibiteur de la tyrosinase

Détermination de l'activité inhibitrice de la collagénase par méthode spectrophotométrique

L'activité inhibitrice de la collagénase de chaque extrait de plante a été évaluée à l'aide d'un test spectrophotométrique basé sur une méthode de Chaiyana et al.[44] avec de légères modifications. Premièrement, 0.16 unités/mL de solution de collagénase était une combinaison de collagénase de Clostridium histolyticum, 80 mM de NaCl, 2 mM de CaCl2 et 50 mM de tampon Tricine, pH 7,5. Par la suite, 200 µL de la solution de collagénase résultante ont été appliqués à 20 µL de chaque extrait de plantes dans une plaque à puits à fond plat (Costar, Corning Ltd., Sunderland, Royaume-Uni) et laissés pendant 15 min. Par la suite, 80 µL de 1 mg/mL de FALGPA dans le tampon Tricine, pH 7,5, ont été appliqués comme substrat à la réaction enzymatique et encore laissés pendant 20 min. L'absorbance UV du mélange résultant a été mesurée à 340 nm à l'aide d'un détecteur multimode (Beckman CoulterDTX880, Fullerton, CA, USA). Les activités inhibitrices de la collagénase ont été calculées à l'aide de l'équation

pourcentage d'activité anticollagénase={((AB)-(CD))/(AB)} x 100 (3)

où A est l'absorbance UV de la solution de collagénase combinée à la solution FALGPA, B est l'absorbance UV des solvants, C est l'absorbance UV de laextraits de plantescombiné avec la solution de collagénase et de FALGPA, et D est l'absorbance UV de la solution d'extrait de plantes. Le témoin positif était l'EGCG. Toutes les expériences ont été faites en triple.

Détermination de l'activité inhibitrice de l'élastase par la méthode spectrophotométrique

L'activité inhibitrice de l'élastase de chaque extrait de plante a été évaluée à l'aide d'un test spectrophotométrique basé sur une méthode de Chaiyana et al.[44] Les activités inhibitrices de l'élastase ont été calculées à l'aide de l'équation

pourcentage d'activité antiélastase={((AB)-(CD))/(AB)} x 100, (4)

où A est l'absorbance UV de la solution d'élastase et de la solution AAAPVN, B est l'absorbance UV des solvants, C est l'absorbance UV de laextraits de plantescombiné avec l'élastase et la solution AAAPVN, et D est l'absorbance UV de la solution d'extrait de plantes. L'EGCG a été utilisé comme témoin positif. Le témoin positif était l'EGCG. Toutes les expériences ont été faites en triple.

Détermination de l'activité inhibitrice de la hyaluronidase par méthode spectrophotométrique

L'activité inhibitrice de la hyaluronidase de chaque extrait de plante a été évaluée à l'aide d'un test spectrophotométrique basé sur une méthode de Chaiyana et al.[44] Les activités inhibitrices de la hyaluronidase ont été calculées à l'aide de l'équation

pourcentage d'activité hyaluronidase={((AB)-(CD))/(AB)} x 100 (5)

où A est l'absorbance UV de la solution d'hyaluronidase combinée à la solution d'acide hyaluronique, B est l'absorbance UV des solvants, C est l'absorbance UV de laextraits de plantescombiné avec la solution de hyaluronidase et la solution d'acide hyaluronique, et D est l'absorbance UV de la solution d'extrait de plantes. Le témoin positif était l'acide oléanolique. Toutes les expériences ont été faites en triple.

Détermination de l'activité anti-inflammatoire par le dosage immuno-enzymatique (ELISA)

L'activité anti-inflammatoire de chaque extrait de plantes a été évaluée au moyen d'activités inhibitrices contre la sécrétion d'IL-6 et de TNF sur la base d'une méthode de Chaiyana et al., [44] qui avait été modifiée à partir de la méthode de Mueller et al.[62]Le LPS a été utilisé pour stimuler le processus inflammatoire dans les cellules RAW 264.7 de macrophages monocytes de souris (American Type Culture Collection, ATCCTIB-71). La cellule incubée avec le LPS a servi de véhicule témoin, avec 100 % des cytokines sécrétées, tandis que les cellules RAW 264.7 non traitées ont servi de témoin négatif. Le test MTT a été utilisé pour évaluer la viabilité des cellules RAW 264.7 en conjonction avec l'ELISA. [62] L'inhibition de la sécrétion d'IL -6 et de TNF a été calculée à l'aide de l'équation

pourcentage d'inhibition des cytokines={((AB)-(CD))/(AB)} x 100 (6)

où A est la densité optique duextraits de plantesdu test MTT, B est la densité optique du contrôle négatif du test MTT, C est la densité optique des extraits de plantes de l'ELISA et D est la densité optique du contrôle du véhicule de l'ELISA. Le témoin positif était la dexaméthasone. Toutes les expériences ont été faites en triple.

analyses statistiques

Tous les résultats sont présentés sous forme de moyenne ± écart type (SD). L'analyse de variance unidirectionnelle (ANOVA) a été utilisée pour déterminer la signification statistique, suivie des tests post-hoc de la Turquie, à l'aide de SPSS 17.0 pour Windows (SPSS Inc., Chicago, Illinois, États-Unis). P <0.05 a="" été="" considéré="" comme="" statistiquement="">

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