Effet préventif des glycosides phényléthanoïdes Cistanche Salsa sur des rats atteints d'œdème cérébral de haute altitude

Contact : Audrey Hu Whatsapp/hp : 0086 13880143964 E-mail :audrey.hu@wecistanche.com

Résumé

Objectif Observer l'effet et le mécanisme des glycosides phényléthanoïdes de Cistamnche Salsa sur des rats souffrant d'œdème cérébral de haute altitude. Méthodes Des glycosides phényléthanoïdes ont été administrés à titre prophylactique pour établir le modèle de rat d'œdème cérébral de haute altitude en utilisant une chambre hypobare dans un environnement simulé à 5000 m d'altitude. Les changements pathologiques dans le tissu pulmonaire du rat, la teneur en eau, IL -6, TNF-a, MDA et l'activité enzymatique de SOD et GSH-Px dans l'homogénat pulmonaire ont été mesurés. Résultats Par rapport au groupe témoin, les rats à œdème cérébral de haute altitude ont montré le caractère remarquable de l'œdème cérébral et la forte teneur en eau dans les poumons. La teneur en IL-6, TNF-a et MDA dans l'homogénat pulmonaire a augmenté tandis que l'activité enzymatique de la SOD et de la GSH-Px a été significativement réduite. Les glycosides phényléthanoïdes pourraient améliorer les modifications pathologiques du tissu pulmonaire, diminuer la teneur en eau, IL -6, TNF-a et MDA, tout en augmentant l'activité enzymatique de la SOD et du GSH-Px dans l'homogénat pulmonaire, Concision Les glycosides phényléthanoïdes peuvent prévenir l'œdème cérébral de haute altitude. dont le mécanisme peut être lié au stress anti-inflammatoire et anti-oxydant dans le tissu pulmonaire.

Mots clés : Cistanche Salsa ; glycoside de phényléthanoïde; œdème cérébral de haute altitude

Glycosides phényléthanoïdes Cistanche

L'œdème cérébral de haute altitude (OCHA) survient généralement lorsque l'altitude est supérieure à 3000 m pour la première fois. Il s'agit d'une maladie grave potentiellement mortelle causée par l'inadaptation du corps à l'environnement à basse pression et à faible teneur en oxygène de l'altitude. Il est lié au mal de l'altitude. , L'œdème pulmonaire de haute altitude est les trois manifestations du mal aigu de l'altitude. Bien qu'il existe moins d'études sur l'OCHA par rapport à l'œdème pulmonaire de haute altitude, des études connexes ont montré que le stress oxydatif et l'inflammation jouent un rôle important dans la pathogenèse de l'OCHA (P-3).

Glycosides phényléthanoïdes Cistanche(glycosides phényléthanoïdes de Cistanche Salsa, PhGC) sont extraits de Cistanche cistanche du Xinjiang, et des études connexes ont réussi à isoler une variété de glycosides phényléthanoïdes, notamment l'échinacoside et le verbascoside 1. La recherche sur les effets pharmacologiques des PhGC au fil des ans a montré qu'il a des effets similaires effets pharmacologiques au salidroside, principe actif anti-mal de l'altitude. Il a des propriétés anti-hypoxie, anti-rayonnement, piégeant les radicaux libres, etc. P-7]. Dans cette expérience, un réseau modèle HACE de rat 91 a été établi dans une chambre expérimentale artificielle à environnement spécial dans la région du nord-ouest, et des PhGC ont été administrés de manière préventive pour observer son effet préventif sur l'HACE et son mécanisme d'action possible.

Herbe de Cistanche :Glycosides phényléthanoïdes Cistanche

1 matériau

1.1 Animaux

Animal expérimental Rat Wistar, grade SPF, mi-mâle et mi-mâle, poids 180-220g [Experimental Animal Center of Xinjiang Medical University, numéro de licence de production animale SCXK (nouveau) 2011-0004, numéro de licence d'utilisation animale SYXK ( nouveau) 2011- 0004].

1.2 Appareillage

Cabine d'expérimentation artificielle dans un environnement spécial du nord-ouest (Guizhou Fenglei Aviation Ordnance Co., Ltd., DY{{0}}) ; microscope optique (société japonaise Nikon, E 200); trancheuse de tissus (société allemande Mecang, HM340E); balance électronique (Mettler-Toledo Instrument Co., Ltd., AL204, précision ; 0,1 mg) ; lecteur de microplaques (Bio-RAD, XMark 7M, USA) : spectrophotomètre UV (Shanghai Lens Optical Technology Co., Ltd., SpectrumLab 22) ; four de séchage à température constante à chauffage électrique (Huangshi, Hubei) City Medical Equipment Co., Ltd., SKHG-01).

1.3 Médicament d'essai

PhGC (Professeur Tu Pengfei de l'Université de Pékin, contenu : 90,70 %, préparé avec de l'eau distillée pour faire une solution de concentration correspondante) ; Rhodiola Rosea Oral Liquid (Tibet Tibetan Medicine Group Co., Ltd., numéro de lot : 120503, spécification : 10 ml) ; kit de facteur de nécrose tumorale- (facteur de nécrose tumorale- , TNF- ) (numéro de lot : ZJAGBZAB01), kit d'interleukine-6 (interleukine-6, IL-6) (numéro de lot : ZIBIBZAB 02) (Société Shanghai Yikesai Biological Products Co., Ltd.); pentobarbital sodique (société américaine Amresco, numéro de lot : 20110612) ; paraformaldéhyde (usine de réactifs chimiques de Chengdu Kelon, numéro de lot : 20110901) ; Kit de superoxyde dismutase (SOD) (numéro de lot : 20130812), kit de malondialdéhyde (MDA) (numéro de lot : 20130812), kit de glutathion peroxydase (GSH-Px) (numéro de lot : 20130814) (Nanjing Jiancheng Institute of Bioengineering ); Poudre de tampon phosphate PBS (Fuzhou Maixin Biotechnology Development Co., Ltd., numéro de lot : 13061716).

herbe de cistanche

2 méthode

2.1 Regroupement et médication

Des rats Wistar ont été répartis au hasard en 6 groupes : groupe contrôle normal, groupe modèle, groupe Rhodiola Rosea solution buvable (1,78 mL·kg-'), groupe PhGCs faible dose (75 mg·kg-), groupe PhGCs dose moyenne (15 0mg·Kg-'), groupe à forte dose de PhGC (300mg·kg-), 12 rats dans chaque groupe. Chaque groupe a été élevé dans un environnement SPF. Le groupe témoin normal et le groupe modèle ont reçu par voie intragastrique de l'eau distillée (1,0 ml/100 g). Les autres groupes ont été administrés par voie intragastrique selon la dose correspondante pendant 10 jours consécutifs. Le 8ème jour, le reste sauf le groupe témoin normal Chaque groupe a été maintenu pendant 72 heures dans une cabine expérimentale artificielle qui simulait un environnement de plateau à une altitude de 5 000 m. La hauteur dans la cabine s'élève à une vitesse constante de 10 m·s-' jusqu'à l'altitude de 5000 m (la pression atmosphérique est de 54,1 kPa, la pression partielle d'oxygène est de 11,52 kPa), au cours de laquelle les animaux entrent librement dans l'eau et mangent, et la cabine est ouverte pendant 0,5 h toutes les 24 h. Médicament, ajouter de la nourriture et de l'eau potable.

2.2 Manipulation des animaux

Les rats de chaque groupe ont été anesthésiés par injection intrapéritonéale de pentobarbital sodique (2 %, 0.2 mL/100 g) immédiatement après avoir quitté la cabine, du sang a été prélevé de l'aorte abdominale, la cavité crânienne a été ouverte, le tissu cérébral a été prise, et la moitié supérieure du cerveau gauche a été prélevée et pesée. L'emballage est utilisé pour déterminer la teneur en eau et la moitié inférieure du cerveau gauche est fixée avec du paraformaldéhyde à 4 % pour la coloration HE. Peser le cerveau droit, ajouter une solution de PBS pour préparer un homogénat à 10 %, centrifuger à 3 000 r·min-' pendant 10 min, aliquoter le surnageant et le conserver au réfrigérateur à 80 degrés pour la détermination du TNF- a, IIL-6, SOD, MDA, GSH-Px.

2.3 Observation de la pathologie du tissu cérébral

Une fois que le tissu cérébral est entièrement fixé dans du paraformaldéhyde à 4%, déshydraté, intégré, tranché et coloré HE, les changements pathologiques sont observés au microscope optique sous différents grossissements et des photos sont prises.

2.4 Détermination de la teneur en eau du cerveau et détermination des indices associés d'inflammation de l'homogénat de tissu cérébral et de stress oxydatif

Cuire le tissu cérébral enveloppé dans du papier d'aluminium dans un four (80 degrés, 72 h) jusqu'à un poids constant, peser le poids sec et calculer la teneur en eau : teneur en eau=(poids du tissu-poids sec du tissu) / poids du tissu × 100 pour cent . Utilisez le kit d'immunoessai enzymatique pour mesurer la teneur en TNF-, IL-6, le spectrophotomètre UV pour mesurer le MDA, la SOD, le GSH-Px, les étapes spécifiques suivent les instructions.

2.5 Analyse statistique

Le logiciel SPSS 16.0 a été utilisé pour l'analyse, les données de mesure étaient toutes représentées par le plus petit s, les données ont d'abord été testées pour la normalité, le test de l'échantillon indépendant 1 a été utilisé pour la comparaison entre les groupes conformes, et la transformation logarithmique a été effectuée pour le groupe non conforme. Le niveau d'inspection est =0.05.

extrait de cistanche

3. Résultats

3.1 L'effet des PhGC sur les changements pathologiques du tissu cérébral chez les rats HACE

L'observation des tranches pathologiques des tissus cérébraux des rats de chaque groupe au microscope optique a montré que la couche moléculaire, la couche cellulaire granulaire externe, la couche cellulaire de la couche de corps vertébral, la couche cellulaire granulaire interne et la structure de la couche cellulaire à plusieurs rangées du tissu cérébral du groupe témoin normal étaient claires et aucune lésion n'a été trouvée. Dans le groupe modèle, les tissus cérébraux des rats étaient une hyperémie et un œdème des capillaires, et l'œdème des cellules de la couche moléculaire et de la couche du corps vertébral était évident. PhGC groupe de rats à faible dose tissu cérébral couche moléculaire faisant partie de la vasodilatation et de la congestion œdème, œdème cellulaire léger, œdème inférieur à celui du groupe modèle : PhGC groupe de rats à dose moyenne tissu cérébral faisant partie de la vasodilatation et de la congestion sous-méningées, occasionnellement œdème cellulaire , œdème par rapport au groupe modèle Le groupe a été significativement réduit ; la couche moléculaire du groupe à forte dose de PhGC ne présentait aucun œdème évident et il y avait un léger œdème périvasculaire, qui était significativement réduit par rapport au groupe modèle. La couche moléculaire du tissu cérébral des rats du groupe Rhodiola Rosea présentait un œdème dispersé et les vaisseaux sanguins dispersés présentaient un œdème très léger. L'œdème a été significativement réduit par rapport au groupe modèle. On peut voir que le tissu cérébral des rats du groupe modèle est évidemment un œdème, et le modèle est établi. Les PhGC et la Rhodiola Rosea peuvent réduire le degré d'œdème cérébral chez les rats modèles HACE. Les résultats sont présentés dans la figure 1.

Fig 1 Observation histopathologique du cerveau de rat dans différents groupes (HE × 400)

3.2 L'effet des PhGC sur la teneur en eau du cerveau des rats HACE

Par rapport au groupe témoin normal, la teneur en eau des tissus cérébraux du groupe modèle a augmenté et la différence était statistiquement significative (P<0.01), indicating="" that="" the="" model="" was="" established.="" the="" brain="" tissue="" water="" content="" of="" rats="" in="" the="" low,="" medium,="" and="" high="" doses="" of="" phgcs="" and="" the="" rhodiola="" rosea="" group="" was="" lower="" than="" that="" of="" the="" model="" group,="" and="" the="" difference="" was="" statistically="" significant=""><0.01). there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" in="" tissue="" water="">

3.3 L'effet des PhGC sur le TNF-a et l'IL-6 dans le tissu cérébral des rats HACE

Par rapport au groupe témoin normal, le contenu de TNF-a et IIL -6 dans l'homogénat de tissu cérébral du groupe modèle a augmenté de manière significative (P<0.01). the="" contents="" of="" tnf-α="" and="" iil-6="" in="" the="" brain="" tissue="" homogenate="" of="" phgcs="" low,="" medium,="" and="" high="" dose="" groups="" and="" rhodiola="" rosea="" group="" were="" lower="" than="" those="" of="" the="" model="" group=""><0.05), and="" the="" difference="" was="" statistically="" significant.="" there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" in="" brain="" tissue="" tnf-a="" and="" iil-6="" levels="" between="" the="" phgcs="" dose="" groups="" and="" the="" rhodiola="" rosea="">

3.4 L'effet des PhGC sur le stress oxydatif dans le tissu cérébral des rats HACE

Par rapport au groupe témoin normal, les activités enzymatiques SOD et GSH-Px dans le tissu cérébral du groupe modèle ont été significativement réduites et la teneur en MDA a été significativement augmentée (P<0.01). the="" sod="" and="" gsh-px="" enzyme="" activities="" in="" the="" brain="" tissue="" of="" the="" phgcs="" low,="" medium,="" and="" high="" dose="" groups="" and="" rhodiola="" rosea="" group="" were="" higher="" than="" the="" model="" group,="" and="" the="" mda="" content="" was="" lower="" than="" that="" of="" the="" model="" group.="" the="" difference="" was="" statistically="" significant=""><0.05). there="" was="" no="" significant="" difference="" in="" the="" content="" of="" sod,="" gsh-px,="" and="" mda="" in="" the="" brain="" tissue="" between="" the="" phgcs="" groups="" and="" the="" rhodiola="" rosea="">

supplément de cistanche : améliore l'immunité

4. Discussion

Ces dernières années, la recherche nationale sur la prévention et le traitement du mal de l'altitude avec la médecine traditionnelle chinoise a obtenu des résultats innovants majeurs, et des médicaments traditionnels chinois dotés de droits de propriété intellectuelle indépendants pour la prévention et le traitement du mal de l'altitude ont été développés avec succès. Par exemple, les capsules Rhodiola développées par la région militaire du Tibet ont obtenu le numéro d'approbation des médicaments militaires spéciaux et sont utilisées dans les forces de défense des frontières du plateau comme médicaments spéciaux pour la prévention et le traitement des maladies du plateau. Le liquide oral Rhodiola Rosea lancé par les sociétés pharmaceutiques locales du Qinghai et du Tibet a obtenu le numéro d'approbation officiel des variétés nationales de la médecine chinoise et est cliniquement adapté à la prévention et au traitement du mal aigu et chronique de l'altitude10. Les effets pharmacologiques des PhGC sont similaires à ceux du salidroside, nous avons donc choisi le liquide oral Rhodiola Rosea, qui est vendu et utilisé sur le marché et qui a une norme médicamenteuse, comme médicament témoin positif.

Un grand nombre d'études [1H12 ont prouvé que les taux de TNF- et d'IL-6 chez les patients HACE sont élevés, Zhou Qiquan et al. [3 Des études ont montré que le TNF- joue un rôle important dans la modification de la perméabilité de la barrière hémato-encéphalique. Un facteur important pour une perméabilité accrue de la barrière. La sécrétion de TNF- augmente pendant l'hypoxémie. Lorsque le TNF- augmente anormalement dans le sang, il peut endommager les cellules endothéliales vasculaires, provoquant des modifications de la morphologie des cellules endothéliales vasculaires, des dommages à la membrane cellulaire et aux organites, etc., et le TNF-a peut également être utilisé comme Le signal intracellulaire de l'apoptose induit l'apoptose des cellules endothéliales vasculaires, favorise la production d'endothéline (ET-1) et aggrave les dommages de la paroi des vaisseaux sanguins, et a pour effet de favoriser la sécrétion d'IIL-614.

L'hypoxie est considérée comme un facteur clé conduisant à l'apparition du mal aigu de l'altitude. La réponse au stress oxydatif induite par l'hypoxie joue un rôle important dans l'hypertension artérielle cérébrale et les fuites vasculaires. Les radicaux libres locaux sont impliqués dans les dommages vasculaires. Les lésions cérébrovasculaires et l'augmentation des fuites de liquide peuvent provoquer un œdème cérébral 13i4. Zhou Qiquan et al. [7 Des études ont montré que les radicaux libres d'oxygène jouent un rôle important dans la formation de l'HACE et sont un facteur important dans l'augmentation de la perméabilité de la barrière hémato-encéphalique dans les environnements de haute altitude. Dans un environnement hypoxique, les radicaux libres et le MDA seront considérablement augmentés, tandis que la fonction des enzymes antioxydantes est régulée à la baisse. Par conséquent, la faible fonction des enzymes antioxydantes et l'augmentation des dommages causés par la peroxydation lipidique peuvent avoir une importance importante dans la pathogenèse du mal aigu de l'altitude. Le MDA est produit par la dégradation des peroxydes d'acides gras et est le produit de peroxydation lipidique le plus couramment mesuré dans les systèmes biologiques. Les enzymes antioxydantes dans le corps comprennent la SOD, le GSH-Px, etc., qui soit éliminent directement les radicaux libres superoxydes et le peroxyde d'hydrogène, soit les convertissent en substances moins actives pour jouer un rôle défensif. Nous avons donc détecté SOD, MDA, GSH-Px dans l'homogénat de tissu cérébral.

Dans cette expérience, par rapport au groupe témoin normal, la quantité de TNF-a et d'IIL -6 dans l'homogénat de tissu cérébral du groupe modèle HACE a augmenté de manière significative, l'activité des enzymes SOD, GSH-Px a diminué et la la teneur en MDA a augmenté de manière significative Il montre que le dysfonctionnement du stress oxydatif induit par l'hypoxie et l'inflammation chez le rat sont impliqués dans la formation de l'OCHA. L'administration préventive de PhGC peut réduire la teneur en eau du tissu cérébral chez les rats atteints d'œdème cérébral et améliorer de manière significative les modifications pathologiques de l'œdème du tissu cérébral, indiquant qu'elle a pour effet de prévenir l'apparition de l'OCHA. Les PhGC peuvent augmenter la SOD et la GSH-Px dans le tissu cérébral du rat pendant l'hypoxie. L'activité enzymatique réduit la teneur en MDA dans le tissu cérébral causée par l'hypoxie. La teneur en TNF- et IL-6 dans le tissu cérébral des rats du groupe d'administration préventive des PhGC est significativement inférieure à celle du groupe modèle, ce qui suggère que notre stress anti-oxydant et anti-inflammatoire peut être la prévention et le traitement. des PhGC Un des mécanismes du mal de l'altitude. Sur la base des résultats de cette expérience, l'effet des PhGC dans le groupe à dose moyenne est légèrement meilleur que celui à dose élevée, mais la différence n'est pas statistiquement significative. Aucun rapport de la littérature connexe Les PhGC sont des inducteurs d'enzymes hépatiques, ce qui peut exclure la possibilité que les médicaments induisent une augmentation de l'activité enzymatique des médicaments hépatiques et accélèrent l'auto-métabolisme. On suppose que la raison possible est qu'à mesure que la concentration du médicament augmente, la concentration du médicament dans le corps dépasse la plage de la relation dose-effet. À la dose moyenne, les récepteurs du corps sont tous occupés et les récepteurs sont saturés, il n'y a donc pas d'augmentation continue de l'effet des doses élevées, et le médicament C'est un glycoside, qui peut hydrolyser le sucre dans l'estomac, et le l'augmentation de la viscosité limitera l'absorption efficace du médicament lorsque la concentration est trop élevée.

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