Effets rénoprotecteurs d'une formule Bushen Kaixuan Tongluo à base de Cistanche chez des souris Db/db via l'activation de la voie de signalisation CAMP/PKA/CREB

3. Résultats

3.1 Effets de la formule Bushen Kaixuan Tongluo basée sur Cistanche sur l’état général des souris db/db

Les souris du groupe vierge étaient actives et avaient une fourrure brillante. En revanche, les souris du groupe modèle semblaient obèses, léthargiques et nettement moins actives. Les souris des groupes de traitement ont montré divers degrés d’amélioration de leur état général par rapport au groupe modèle.

 

 

 

Formule Bushen Kaixuan Tongluo à base de Cistanche pour la santé des reins et du foie

 

3.2 Effets de la formule sur le poids corporel des souris db/db

Tout au long de la période expérimentale, le poids corporel des souris du groupe modèle a augmenté de manière significative par rapport au groupe blanc (P<0.01). Compared with the model group, mice in all treatment groups showed a downward trend in body weight, with differences appearing from week 8 onward. The high-dose Formule à base de cistancheLe groupe a montré l’effet le plus prononcé. (Voir tableau 2)

3.3 Effets sur la fonction rénale

Par rapport au groupe témoin, la créatinine sérique (Scr) dans le groupe modèle a montré une tendance à la hausse, bien que non statistiquement significative, tandis que l'azote uréique du sang (BUN), l'albumine urinaire (uALB) et le rapport albumine/créatinine (ACR) étaient significativement élevés (P<0.05). Compared with the model group, mice in the formula-treated groups showed a decreasing trend in Scr (not significant), and significantly reduced levels of BUN, uALB, and ACR (P<0.05), with the medium-dose group showing the best results. In the irbesartan group, Scr and BUN showed a downward trend (not significant), while uALB and ACR were significantly reduced (P<0.01). (See Table 3)

3.4 Effets sur la fonction hépatique et le métabolisme lipidique

Par rapport au groupe témoin, l'ALT, l'AST, le cholestérol total (TC) et les triglycérides (TG) ont augmenté de manière significative dans le groupe modèle (P<0.05). Compared with the model group, the treatment groups showed a decreasing trend in AST and ALT (not significant), and a significant decrease in TC (P<0.01). TG levels were significantly reduced in the medium-dose formula group (P<0.05), while other formula groups showed a downward trend (not significant). In the irbesartan group, TC showed a decreasing trend (not significant), and TG was significantly reduced (P<0.01). (See Table 4)

3.5 Effets sur le métabolisme du glucose

Par rapport au groupe témoin, les taux de glycémie à jeun (FBG), de leptine (LEP), de protéines sériques glycosylées (GSP) et d'insuline (INS) étaient significativement élevés dans le groupe modèle (P<0.05). Compared with the model group, FBG showed no significant downward trend in any group; LEP levels decreased (not significant) in the formula groups, whereas irbesartan significantly reduced LEP (P<0.05). All treatment groups showed significantly reduced GSP and INS levels (P<0.05), with the high-dose Formule à base de cistanchegroupe montrant le meilleur effet. (Voir tableau 5)

 

3.6 Effets sur l'histopathologie rénale

Coloration HE: Le groupe vierge présentait une architecture rénale normale avec une morphologie glomérulaire régulière et des cellules épithéliales tubulaires intactes. Le groupe modèle présentait des glomérules irréguliers, une prolifération modérée de cellules mésangiales, une infiltration inflammatoire et une dégénérescence vacuolaire des cellules épithéliales tubulaires. Ces caractéristiques pathologiques ont été atténuées dans les groupes recevant les préparations à faible, moyenne et forte dose et l'irbésartan. (Voir la figure 1)

Coloration PAS: Le groupe vierge présentait un dépôt minimal de matrice extracellulaire (ECM). Le groupe modèle présentait une accumulation marquée de MEC et des membranes basales épaissies. Les groupes de traitement ont montré divers degrés d'amélioration. (Voir Figure 2)

Coloration de Masson: Le groupe vierge a révélé une structure glomérulaire normale avec un dépôt minimal de collagène. Le groupe modèle présentait une vaste quantité de collagène coloré en bleu dans les glomérules et l'interstitium rénal. Les changements pathologiques ont été atténués dans tous les groupes de traitement. (Voir Figure 3)

 

3.7 Effets sur l'expression de p-PKA et de p-CREB dans le tissu rénal

Par rapport au groupe blanc, la coloration p-PKA et p-CREB dans les tissus rénaux du groupe modèle était significativement réduite (P<0.01). Compared with the model group, the medium-dose formula group had significantly increased p-PKA expression (P<0.01), and p-CREB showed an upward trend (not statistically significant). (See Figure 4, Table 6)

 

3.8 Effets sur l'expression des protéines p-PKA, PKA, p-CREB, CREB et Bcl-2

Comparé au groupe vierge, le groupe modèle a montré une expression significativement diminuée de p-PKA/PKA, p-CREB/CREB et Bcl-2 (P<0.05). These levels were significantly elevated in the medium-dose Formule à base de cistanchegroupe (P<0.01). (See Figure 5, Table 7)

 

4. Discussion

Bien que la littérature sur la médecine traditionnelle chinoise (MTC) ne décrit pas explicitement la maladie rénale diabétique (DKD), des symptômes tels que l'urine mousseuse correspondent aux conditions de la MTC telles que la « turbidité de l'urine » et le « guan ge ». S'appuyant sur des décennies d'expérience clinique, le professeur Lü Cuiyan a développé leFormule Bushen Kaixuan Tongluo, en utilisantCistancheà la place de l'astragale comme herbe monarque pour tonifier le Qi et le Yang, associée à l'aconit pour réchauffer les reins et transformer la turbidité.

La Salvia et l'Hirudo agissent comme des herbes ministérielles pour activer le sang et débloquer les collatéraux, tandis que Saposhnikovia, Bombyx batryticatus et la mue des cigales expulsent le vent et les agents pathogènes. Rehmannia et Cornus nourrissent l'essence des reins ; Achyranthes guide les herbes vers le bas ; Rosa laevigata, Euryale, Rubus et Cnidium consolident l'essence ; Dioscorea renforce la rate et les reins. La combinaison permet une tonification rate-rein, une élimination de la turbidité et une résolution de la stase, démontrant ainsi une efficacité clinique prometteuse.

Des études pharmacologiques modernes indiquent que les composants de la formule agissent sur plusieurs cibles pour améliorer la fonction rénale :

Tanshinone IIAethirudineinhibe la signalisation TGF-/Smad, réduisant ainsi la fibrose et les troubles microcirculatoires

Polysaccharides de Saposhnikoviaréguler négativement l'inflammation médiée par NF-κB

Glycosides iridoïdes de Cornusactiver la voie Nrf2/ARE pour améliorer les enzymes antioxydantes

Stérols d'Achyranthesmoduler la voie PI3K/Akt, inhibant l'apoptose des podocytes

Dioscineactive l'AMPK/mTOR pour réguler l'autophagie et le métabolisme des cellules épithéliales

LeVoie de signalisation AMPc, au cœur du métabolisme énergétique cellulaire et de l’expression des gènes, est vital pour l’homéostasie rénale. L'adénylate cyclase (AC) génère de l'AMPc, qui active de manière allostérique la PKA ; La PKA activée phosphoryle CREB pour former p-CREB, qui se déplace vers le noyau et initie la transcription de gènes cibles commeBcl-2, favorisant les effets anti-apoptotiques et réduisant les lésions rénales.

Dans le DKD, une hyperglycémie soutenue perturbe l'équilibre de l'AMPc en inhibant la fonction AC et en améliorant la dégradation médiée par la PDE, entraînant une diminution des niveaux d'AMPc. Cela altère la signalisation PKA/CREB, compromet la fonction mitochondriale, la défense antioxydante et l’expression des gènes anti-apoptotiques, accélérant ainsi la sclérose glomérulaire et la fibrose interstitielle.

La recherche montre queactiver la voie AMPc/PKAaide à maintenir l’intégrité du diaphragme à fente des podocytes et à réduire la protéinurie. De plus,CREBinduit transcriptionnellement des enzymes antioxydantes commeSOD2, atténuant le stress oxydatif tubulaire.Bcl-2réduit également les fuites de ROS mitochondriales, protégeant les podocytes et les cellules tubulaires en cas d'hyperglycémie.

Le rétablissement de niveaux de glucose normaux réduit l’accumulation d’AGE, atténuant ainsi l’épaississement de la membrane basale et les lésions des podocytes. L'amélioration des profils lipidiques réduit les dépôts lipidiques rénaux et l'infiltration des macrophages, retardant ainsi la progression de la fibrose.

Cependant,la recherche sur la façon dont la formule Bushen Kaixuan Tongluo affecte la DKD via la voie de l'AMPc reste limitée.

Dans cette étude, des souris db/db ont été utilisées pour simuler la DKD humaine. LeFormule à base de cistancheamélioration significative de la fonction rénale, de l'état général et des troubles métaboliques chez la souris, avec des profils de sécurité hépatique favorables. L'histopathologie a montré une réduction de l'épaississement de la membrane basale glomérulaire, de l'expansion mésangiale et du dépôt de collagène interstitiel - lésions caractéristiques de la DKD.

Au niveau moléculaire, la formuleexpression régulée positivement de l'ARNm et des protéines de PKA, CREB et Bcl-2, améliorant ainsi la phosphorylation de la PKA et du CREB,activer la voie AMPc, améliorant la capacité antioxydante et rétablissant la fonction de barrière de filtration.

Conclusion

LeFormule Bushen Kaixuan Tongluo à base de Cistanche:

Améliore la fonction hépatique et rénale

Corrige les troubles du métabolisme du glucose et des lipides

Active leVoie de signalisation AMPc/PKA/CREB

Réduit la fibrose rénale et le stress oxydatif

Fournit une protection rénale en cas de DKD

Ces résultats fournissent une base pharmacologique pour son application clinique et soutiennent le ciblage de la voie de l'AMPc en tant que stratégie potentielle pour le traitement de la DKD. Les recherches futures devraient explorer des molécules en aval telles que le BDNF pour élucider davantage le mécanisme.