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YANG Jian-hua1' 2 , HU Jun-ping2, RENA • Kasimu2 ,〔DU Nian-sheng

(1. Hôpital affilié aux tumeurs, Université médicale du Xinjiang, Urumqi 830011, Chine ; 2. Collège de pharmacie, Université médicale du Xinjiang, Urumqi 830054, Chine)

Résumé:Objectif : Étudier les relations structure-activité des glycosides phényléthanoïdes dans les plantes de Cistanche salsa sur l'activité antioxydante. Méthodes : Par les systèmes de dosage du DPPH •, l'activité antioxydante de six glycosides phényléthanoïdes de plantes deCistanchesalsa a été déterminée pour étudier la relation entre les activités antioxydantes et les caractéristiques structurelles des glycosides phényléthanoïdes zs. Résultats : L'activité antioxydante des glycosides phényléthanoïdes était variable avec un effet dose-dépendant. La séquence de la force de l'activité antioxydante des six composants s'est avérée être2 ^Acétylactéoside > Actéoside Tubuloside BN Isoactéoside > Échinacoside > Cistanoside A. Conclusion : L'activité antioxydante des glycosides phényléthanoïdes est liée au nombre d'hydroxyles phénoliques, à l'encombrement stérique, à l'2-acétyle sur le glucopyranose moyen et à l'emplacement de l'hydroxyle phénolique. De plus, il peut être lié à la j3-cétone insaturée du phénol-2-propényle.

Mots clés : Cistanche salsa ( CA Mey. ) G, Beck ; glycosides phényléthanoïdes; Activité antioxydante; Structure-activité ; DPPH

Échinacoside

La médecine traditionnelle chinoiseCistancheest Cistanche salsa (CA Mey.) G. Beck, une tige charnue séchée avec des écailles et des feuilles. Il a été publié pour la première fois dans "Shen Nong's Materia Medica". La fréquence d'occurrence est la plus élevée, juste derrière le ginseng dans les prescriptions de la médecine chinoise anti-âge et anti-âge, et il a la réputation de "ginseng du désert". Les glycosides de phényléthanoil sont des composants caractéristiques deCistancheplantes du genre. À l'heure actuelle, plus de 30 de ces composés ont été isolés de ce genre. Les études pharmacologiques ont essentiellement montré que ces composés sont la principale base matérielle pourCistancheexercer des activités pharmacologiques).

Le radical dibenzopicryle (DPPH •) est un radical libre relativement stable avec un électron libre sur son N. La solution de méthanol de DPPH est violette avec un pic d'absorption maximum à 517 nm. Lorsqu'il y a un piégeur de radicaux libres, son absorption disparaît progressivement en raison de son appariement à un électron. Son degré de décoloration est quantitativement lié au nombre d'électrons qu'il accepte. Par conséquent, l'utilisation de la spectrophotométrie pour détecter le changement d'absorbance du DPPH après réaction avec la solution d'échantillon peut être utilisée pour tester la capacité de l'échantillon à éliminer les radicaux libres et à résister à l'oxydation (3). À l'heure actuelle, il y a eu des rapports sur la recherche antioxydante des glycosides d'alcool phénéthylique dans la purée d'aubergine pour piéger les radicaux libres, mais il n'y a pas d'analyse de la relation structure-activité entre ses propriétés antioxydantes et ses substances actives. Dans cet article, la méthode d'analyse des radicaux libres DPPH • est utilisée pour la première fois pour tester l'activité antioxydante de 6 monomères glycosides d'alcool phénéthylique à Rouhuanrong. Sur la base des caractéristiques structurelles et des résultats de la détermination de l'activité de ces composés, les composants glycosides d'alcool phénéthylique sont déduits de manière préliminaire. Relation structure-activité de l'activité antioxydante.

1 Appareils et matériaux

Échinacoside, glycoside de cistanche A,verbascoside, isoverbasin glycoside, 2,-acetyl verbascoside, tube anthocyanin B substance de référence (isolée et préparée à partir de Cistanche salsa, UV, IR, EI-ms/h -nmrJ3c-nmr les données sont conformes à la valeur de la littérature, la teneur est déterminée par la zone HPLC méthode de normalisation, la pureté est supérieure à 95 %, la formule structurale est illustrée à la figure 1 et au tableau 1) ; Le radical diphényl picryle (DPPH •) a été acheté chez Sigma ; autres réactifs Tous sont purs au niveau domestique.

Détecteur d'activité biologique pleine longueur d'onde multifonctionnel SpectraMax M5 (Anthos Co. Autriche), 96-plaque de culture à puits (Costar), balance électronique AB104-N]Mettler-Toledo Instr. (Shang Hai) Ltd.]

Figure 1 Les formules structurelles de six glycosides de phénéthanoïl dans Cistanche

Tableau 1 Substituants dans 6 composés glycosides de phénéthanol dans Cistanche

Remarque : Ac est l'acétyle, Cf est le trans-caféoyle, Glc * pD-gluviolanose et Rha est l'aL-rhamnose

2 Préparation de la solution d'essai

DPPH • Préparez une solution mère avec une concentration de 1. 3 x 10'2mol/L avec de l'éthanol, conservez-la au réfrigérateur, diluez la solution mère avec de l'éthanol à 1-3 xl{{7} }^mol/L immédiatement avant utilisation ; 6 types de glycosides d'alcool phénéthylique La substance de référence et la vitamine C sont formulées dans une solution à une concentration de 0.05-50.0 ptg/mL avec de l'éthanol.

Actéoside

3 méthodes et résultats

3. 1 Méthode Ajoutez d'abord 10 |xL d'échantillon dans les puits d'échantillon, ajoutez 10|jlL d'éthanol dans les puits de blanc, puis ajoutez 190 jiL de DPPH • avec une concentration de 1,3 xlO^mol/L, et placez-les dans l'obscurité à température ambiante pendant 30 minutes. Utilisez le détecteur d'activité biologique pleine longueur d'onde multifonction SpectraMax M5 pour mesurer l'absorbance (A) à 517 nm. Chaque absorbance a été mesurée 3 fois en parallèle, et la valeur moyenne a été prise. Le taux de dédouanement est calculé comme suit : taux de dédouanement (pourcentage)=(Un blanc-Un échantillon)/Un blanc x 100 %

3.2 Résultats Les résultats de la détermination sont présentés dans le tableau 2. On peut voir d'après le tableau 2 que les six glycosides d'alcool phénéthylique à différentes concentrations ont différents degrés d'effets de piégeage sur le DPPH •, et leur capacité de piégeage des radicaux libres a une dose significative- relation d'effet avec la concentration. Glycoside sur DP PH • L'ampleur de l'effet de piégeage augmente avec l'augmentation de la concentration.

Tableau 2 Le taux de clairance des échantillons avec différentes concentrations sur DPPH • ("=3)

Remarque : Le contrôle positif est l'acide ascorbique (Vitamine C), le numéro d'échantillon est 7

According to the IC5 of each sample. According to the value, the scavenging ability of 6 kinds of phenylethanoid glycosides on DPPH • is in order: 2'-acetyl verbascoside> verbascoside BN isophorbasin glycoside> echinacoside>cistanche glycoside A. Les effets des six glycosides d'alcool phénéthylique à la même concentration que la vitamine C témoin positif sont légèrement inférieurs à ceux de la vitamine C.

verbascoside

4. Discussion

Les résultats de cette étude ont en outre confirmé que les glycosides d'alcool phénéthylique ont généralement une activité antioxydante. En analysant et en comparant leurs structures chimiques, le verbascoside, l'iso-verbasin glycoside, le 2'-acetyl verbasin glycoside et le tube anorthosite B sont tous des glycosides, tandis que l'échinacoside etcistancheA sont des triglycérides, à fort encombrement stérique. L'effet d'encombrement stérique accru rend l'échinacoside et le solanacoside A difficiles à approcher des radicaux libres, de sorte que leur capacité antioxydante est relativement faible ; la différence structurelle entre l'échinacoside et le striata : l'échinacoside A est uniquement Le R5 du premier est un groupe hydroxyle phénolique et le second est un groupe méthoxy. Le groupe hydroxyle o-phénolique est considéré comme un groupe fonctionnel important pour l'activité antioxydante. Le groupe hydroxyle du diphénol disparaît et l'effet antioxydant est considérablement réduit. En analysant la structure du composé et en combinant les résultats de mesure, on en déduit que l'activité antioxydante des glycosides de phénéthyle dans la pâte d'aubergine est liée au nombre d'aglycones et de groupes hydroxyles phénoliques sur le groupe phénylacryloyle, la position de connexion des composés phénoliques groupe hydroxyle, la taille de l'encombrement stérique du composé et le glucose central 2 Il existe une certaine relation entre la substitution du groupe acétyle à la position, qui peut également être liée au fragment de structure cétone insaturée a,/3 sur le groupe styrène acyle, mais il a peu de relation avec la position de substitution du groupe phénylacryloyle.

Le DPPH • est un radical libre relativement stable centré sur N, avec une forte absorption à 517nm. Après avoir ajouté la substance d'essai, en détectant le changement d'absorbance à 517 nm après la réaction des radicaux DPPH • avec la solution d'échantillon, la capacité de l'échantillon à piéger les radicaux libres et l'anti-oxydation peut être vérifiée. Les expériences montrent que l'utilisation du DPPH • pour établir un modèle in vitro de dommages causés par les radicaux libres ne nécessite pas d'équipement compliqué et de réactifs coûteux. Il est simple et facile à utiliser, sensible, fiable et reproductible. C'est une bonne méthode pour filtrer les piégeurs de radicaux libres.

La vitamine C est actuellement reconnue comme un antioxydant très actif et largement utilisé. Par conséquent, cette expérience a choisi la vitamine C comme témoin positif pour la capacité antioxydante des glycosides d'alcool phénéthylique à piéger les radicaux libres.

références

[1] Lei Li, Song Zhihong, Tu Pengfei. Recherche sur les constituants chimiques de Cistanche Research progress[J].Chinese Herbal Medicine, 2003,34(5):473476.

[2] Song Zhihong, Lei Li, Tu Pengfei. Progrès des recherches sur les activités pharmacologiques des plantes Cistanche[J]. Phytothérapie chinoise, 2003, 34(9) : Attaché 16-18.

[3] Xu Shenhong, Hang Hu. Une méthode simple pour le dépistage des piégeurs de radicaux libres [J]. Phytothérapie chinoise, 2000, 31(2) : 96-97.

[4] Fu Rong, Zhu Jiuwei. Détermination de l'activité antioxydante de Chuanling, Rhodiola Rosea et Huang Zhi par spectrophotométrie radicalaire de piratage de diphényle [J]. Journal de l'Université de l'industrie légère de Dalian, 2004, 23 (2) : 114-117.