Étude sur la spécification optimale des pièces Herba Cistanches Fuju

Cistanche deserticola a été enregistrée pour la première fois dans le Herbal Classic de Shennong. Cela a pour effet deyang nourrissant des reins, reconstituant l'essence et le sang, et humidifiant les intestins etsoulager la constipation. Il a été utilisé dans la pratique clinique commemédecine chinoise tonique. L'édition 2020 de la Pharmacopée de la République populaire de Chine (ci-après dénommée la « Pharmacopée chinoise ») stipule que le Cistanche deserticola est issu des tiges charnues séchées à feuilles écailleuses de Cistanche deserticola ou Cistanche tubulosa, plantes de la famille des Orobanchaceae. Les spécifications des matières médicinales Cistanche deserticola sont généralement de 2 à 8 cm de diamètre et de 3 à 15 cm de longueur.

Selon les « Règles générales de transformation 0213 » de la Pharmacopée chinoise, la Cistanche deserticola est formée en tranches épaisses et irrégulières au cours du processus de transformation, d'une épaisseur de 2 à 4 mm. La plupart des tranches coupées de Cistanche deserticola sont de grosses tranches épaisses d'un diamètre de 2 à 8 cm et d'une épaisseur de 2 à 4 mm [1].

EXTRAIT DE CISTANCHE TUBULOSA DE HAUTE QUALITÉ À VENDRE

Ce morceau de décoction traditionnelle est de taille inégale et présente une grande différence de qualité. Il est difficile de le contrôler lors de l'ajustement clinique. De plus, les ingrédients efficaces sont difficiles à dissoudre uniformément pendant la décoction, ce qui entraîne une grande différence dans la qualité de chaque décoction.

En outre, des études pertinentes ont rapporté que la composition chimique des différentes parties de Cistanche deserticola est très différente et que la capacité des différentes parties à piéger les radicaux libres 1,1-diphényl-2-trinitrophénylhydrazine (DPPH) dans in vitro est également différent [2], ce qui rend difficile la garantie de l'efficacité clinique des tranches traditionnelles de Cistanche deserticola. Parmi les méthodes visant à améliorer l'efficacité clinique, les tranches de médecine chinoise sont une sorte de tranches héritées et innovantes qui suivent la théorie de la médecine traditionnelle chinoise et les méthodes de traitement de la médecine traditionnelle chinoise, sélectionnent des matières médicinales de haute qualité à la source et sont traitées et traitées avec fonctionnalités spéciales. Ils ont un taux d'utilisation élevé, une qualité uniforme, une efficacité stable et sont faciles à ajuster et à préparer. Elles conservent les caractéristiques d'identification des tranches traditionnelles.

La taille des tranches de médecine chinoise est principalement classée en fonction de la partie médicinale du matériau médicinal, des caractéristiques de texture et de l'application clinique [3]. Par exemple, les spécifications des tranches traditionnelles sont décrites comme « comme le soja », « comme le haricot ma », « poudre grossière », etc. [4].

La Cistanche deserticola est une matière médicinale spéciale à tige charnue. Après séchage, la matière médicinale est volumineuse et longue. Il peut être coupé en lambeaux ou en dés à l'aide d'une technologie de coupe moderne, ce qui peut non seulement améliorer le taux d'utilisation de Cistanche deserticola et uniformiser sa qualité, mais également conserver les caractéristiques d'identification des morceaux médicinaux traditionnels. Cette étude utilise des morceaux médicinaux traditionnels de Cistanche deserticola comme pont et mâche Cistanche deserticola en lambeaux et en blocs de spécifications différentes. Les meilleures spécifications des morceaux médicinaux mâchés de Cistanche deserticola sont optimisées en fonction des propriétés des morceaux médicinaux, de l'angle de repos, du taux de décoction et du taux de transfert du verbascoside et de l'échinacoside comme indicateurs d'évaluation. Dans le même temps, l'uniformité et la cohérence des attributs de qualité des morceaux médicinaux traditionnels et des morceaux médicinaux mâchés sont comparées, afin de fournir une référence pour la sélection des spécifications, le traitement et la production de morceaux médicinaux mâchés de Cistanche deserticola.

1 Matériel

1.1 Instruments

Thermo U3000 HPLC ; Colonne chromatographique XBridge C18 (250,0 mm × 4,6 mm, 5 μm) ; Coupeur de médicaments alternatif CNC série SQW (Kanghua Pharmaceutical Machinery Co., Ltd.); Broyeur de découpe de type AM300S (Ant Source Scientific Instrument Co., Ltd.) ; Nettoyeur à ultrasons intelligent de type DL-60J (Shanghai May Instrument Co., Ltd.) ; Cuiseur vapeur électrique de type QM-Q5-H30DW (Changsha Quanmin Electric Co., Ltd.) ; Balance d'analyse électronique MS204S type un dix millième (Mettler Toledo) ; Balance électronique du millionième de type XPE26 (Mettler Toledo).

1.2 Tests de médicaments

Substance de référence échinacoside (Institut chinois d'inspection des aliments et des médicaments, numéro de lot 111670-201907, pureté 91,80 %), substance de référence verbascoside (Institut chinois d'inspection des aliments et des médicaments, numéro de lot 111530-201914, pureté 95,2 %), méthanol ( qualité chromatographique); Eau purifiée Wahaha ; les autres réactifs sont de qualité analytique.

Les matières médicinales de Cistanche deserticola ont été collectées par l'équipe de recherche d'Alxa, Mongolie intérieure, Bayannur, Mongolie intérieure et Jiuquan, Gansu, et ont été identifiées comme étant les tiges charnues séchées avec des feuilles d'écailles de Cistanche deserticola par le professeur Liu Shoujin de l'Université de chinois traditionnel d'Anhui. Médecine.

2 méthodes

2.1 Méthode de préparation des échantillons

La Cistanche deserticola a été divisée en 7 portions pesant chacune environ 500 g. Les impuretés ont été éliminées, les tranches ont été lavées et le mélange a été trempé. Les tranches ont été découpées en tranches traditionnelles et en tranches de 2- à 4- mm d'épaisseur. Les tranches de 2- à 4- mm d'épaisseur ont été coupées en fils d'une largeur de 2 mm × 2 mm, 2 mm × 4 mm et 4 mm × 4 mm, et en cubes d'une longueur de côté de 5 mm. , 8 mm et 10 mm, respectivement.

2.2 Détermination des composantes principales

Selon la pharmacopée chinoise, les deux composants des glycosides représentatifs du phényléthanol, le verbascoside et l'échinacoside, ont été utilisés comme indicateurs pour la détermination [1].

2.2.1 Conditions chromatographiques et test d'adéquation du système

Du gel de silice lié à l'octadécylsilane a été utilisé comme charge ; du méthanol a été utilisé comme phase mobile A et une solution d'acide formique à 0, 1 % comme phase mobile B. L'élution par gradient a été réalisée conformément aux exigences du tableau 1 ; la longueur d'onde de détection était de 330 nm. Le nombre de plaques théoriques calculé sur la base du pic de l'échinacoside ne doit pas être inférieur à 3 000. Le spectre HPLC est illustré à la figure 1.

2 méthodes

2.1 Méthode de préparation des échantillons

La matière médicinale Cistanche deserticola a été divisée en 7 portions d'environ 500 g chacune, et les impuretés ont été éliminées. Le matériau a été lavé et humidifié, puis coupé en tranches traditionnelles et en tranches. Les tranches traditionnelles étaient principalement des tranches de 2-4 mm d'épaisseur, et les tranches tranchées étaient coupées en filaments d'une largeur × épaisseur de 2 mm × 2 mm, 2 mm × 4 mm et 4 mm × 4 mm, et en cubes avec longueurs de côté de 5 mm, 8 mm et 10 mm, respectivement.

2.2 Détermination des composantes principales

Il a été fait référence à la Pharmacopée chinoise et les deux composants, le verbascoside et l'échinacoside, qui étaient des composants représentatifs des glycosides de phényléthanol, ont été utilisés comme indicateurs pour la détermination [1].

2.2.1 Conditions chromatographiques et test d'adéquation du système

Du gel de silice lié à l'octadécylsilane a été utilisé comme charge ; du méthanol a été utilisé comme phase mobile A et une solution d'acide formique à 0, 1 % comme phase mobile B. L'élution par gradient a été réalisée conformément aux dispositions du tableau 1 ; la longueur d'onde de détection était de 330 nm. Le nombre de plaques théorique calculé sur la base du pic de l’échinacoside ne doit pas être inférieur à 3 000. Le spectre HPLC est illustré à la figure 1.

Figure 1 Chromatogrammes HPLC d'échantillons de référence et d'essai d'échinacoside et de verbascoside

2.2.2 Préparation de la solution de référence

Prenez des quantités appropriées de référence d'échinacoside et de verbascoside, pesez avec précision et ajoutez une solution de méthanol à 5 0 % pour obtenir une solution mélangée de 1 ml contenant respectivement 0,2 mg d'échinacoside et de verbascoside.

2.2.3 Préparation de la solution d'essai

Prélever environ 1 g de la poudre de ce produit (passée au tamis n°4), la peser avec précision, la mettre dans une fiole jaugée brune de 100 mL, ajouter avec précision 50 mL de solution méthanolique à 50 %, boucher, bien agiter, pesez-le, laissez-le tremper 30 min, traitez-le aux ultrasons pendant 40 min (puissance : 250 W, fréquence : 35 kHz), laissez-le refroidir, pesez-le à nouveau, ajoutez une solution de méthanol à 50% pour rattraper le poids perdu, secouez-le eh bien, laissez reposer, prenez le surnageant, filtrez-le et prenez le filtrat pour l'obtenir.

2.2.4 Enquête sur les relations linéaires

Aspirer avec précision {{0}}.1, 0.2, 0.5, 1.0, 2.0 mL de solution de référence de verbascoside , placer dans des fioles jaugées de {{10}} mL et ajouter du méthanol à la balance. Aspirer avec précision 0,1, 0,2, 0,5, 1,0, 2,0 mL de solution de référence d'échinacoside, placer dans des fioles jaugées de 5 10 mL et ajouter 50 % solution de méthanol à l'échelle, mesurez selon la méthode « 2.2.1 » et enregistrez la surface du pic correspondant.

2.2.5 Test de précision

Aspirez avec précision les solutions de référence de verbascoside et d'échinacoside, injectez 6 fois en continu et mesurez la RSD des zones de pic de verbascoside et d'échinacoside.

2.2.6 Essai de stabilité

Aspirez avec précision la même solution d'essai et mesurez-la selon la méthode "2.2.1". Mesurez-le une fois toutes les 4 heures et testez-le pendant 24 heures. Calculez le RSD de la zone de pic du verbascoside et de l’échinacoside.

2.2.7 Test de répétabilité

Selon la méthode de préparation de la solution d'essai, préparez respectivement 6 solutions d'essai, mesurez-les selon la méthode de « 2.2.1 » et calculez leur RSD en fonction de la surface maximale du verbascoside et de l'échinacoside.

2.2.8 Test de récupération des échantillons

Pesez avec précision 6 solutions de test avec une teneur connue en verbascoside et en échinacoside, ajoutez respectivement 1 ml de solution de référence de verbascoside et de solution de référence d'échinacoside, mesurez selon la méthode « 2.2.1 » et calculez le taux de récupération.

2.2.9 Détermination de l'angle de repos

Utilisez la méthode d'inclinaison. Remplissez une boîte rectangulaire avec le médicament jusqu'à un degré modéré de jeu et inclinez progressivement la boîte jusqu'à ce que la poudre commence à s'écouler. L'angle d'inclinaison est l'angle de repos. Soit la hauteur de l'angle d'inclinaison H et le bas L. La formule de calcul de l'angle de repos θ est :

bronzageθ=H/L

2.2.10 Détermination du taux de décoction

Prendre 50 g de tranches de Cistanche deserticola, les placer dans un ballon rond de 1000 mL, ajouter 10 fois la quantité d'eau, laisser tremper 30 min, décoter 45 min, filtrer à chaud avec un tissu filtrant 200 mesh, ajouter 8 fois la quantité. d'eau sur le résidu, décoctionner pendant 30 min, filtrer avec un tissu filtrant de 200 mesh pendant qu'il est chaud, mélanger le filtrat ; concentrer sous pression réduite (60 degrés) pour extraire, lyophiliser pour obtenir la poudre lyophilisée de Cistanche deserticola, et calculer le taux de décoction selon la formule suivante [5] :

Où Y est le taux de décoction ; Wa est le poids de la poudre lyophilisée ; Wb est le poids des tranches.

2.2.11 Détermination du taux de transfert

Selon les conditions chromatographiques sous « 2.1.1 », les fractions massiques de verbascoside et d'échinacoside dans les tranches et la poudre lyophilisée de Cistanche deserticola ont été déterminées, et le taux de transfert a été calculé selon la formule suivante :

Où Z est le taux de transfert ; Wc est la fraction massique de verbascoside et d'échinacoside dans la poudre lyophilisée ; Wd est la fraction massique de verbascoside et d'échinacoside dans les tranches.

2.2.12 Indicateurs d'observation

Le rendement de l'extrait, le taux de transfert total du verbascoside et de l'échinacoside de différentes spécifications de tranches de 㕮 抽 et de tranches traditionnelles ont été enregistrés, et le taux de décoction, le taux de transfert total du verbascoside et de l'échinacoside ont été évalués par une méthode de notation pondérée. Le coefficient pondéral de détermination du taux de décoction était de {{0}},5, et le coefficient pondéral du taux de transfert total du verbascoside et de l'échinacoside était de 0,5.

3 Résultats et analyse

3.1 Résultats de l'enquête méthodologique sur la détermination des composants principaux

En utilisant les conditions chromatographiques de « 2.2.1 », la séparation chromatographique du verbascoside et de l'échinacoside était supérieure à 1,5. Les résultats de l'enquête méthodologique sont présentés dans le tableau 2. Cette méthode présente une bonne précision, stabilité, répétabilité, taux de récupération et effet de séparation, et peut être utilisée pour déterminer la teneur en échinacoside et en verbascoside dans les tranches de Cistanche deserticola et la poudre lyophilisée.

Tableau 3 Résultats des tests des propriétés des différentes spécifications des tranches de Cistanche deserticola (Cistanche deserticola)

3.3 Analyse des résultats des différentes spécifications des morceaux de décoction traditionnelle et des morceaux de décoction Yuzui et sélection des spécifications Yuzui

Il ressort du tableau 4 que les angles de repos des morceaux mâchés de différentes tailles sont inférieurs à ceux des morceaux traditionnels. Plus la taille des morceaux mâchés est petite, plus l'angle de repos est petit. Le cube de 5 mm a le plus petit angle de repos à 30 degrés, suivi du cube de 8 mm à 31,2 degrés, et les autres spécifications sont supérieures à 35 degrés.

Par rapport aux morceaux traditionnels, plus la taille des morceaux est petite, plus le taux de décoction est élevé. Lorsque la taille est de 2 mm × 2 mm, le taux de décoction est le plus élevé, 63,61 %, 2 mm × 4 mm, 60,33 %, suivi des cubes de 5 mm. Pour les pièces, elle est de 60,18 %, et les autres spécifications sont inférieures à 60 %. Lorsque la taille des cubes à mâcher est de 8 mm, c'est fondamentalement la même chose que les morceaux traditionnels. Il n'y avait aucune tendance significative dans la teneur totale en verbascoside et en échinacée des morceaux de décoction, dans la teneur totale en verbascoside et en échinacée dans la poudre lyophilisée et dans le taux de transfert.

Différent de la recherche d'un taux de pâte sèche et d'une quantité de décoction plus élevés d'ingrédients actifs dans les morceaux de décoction bouillis et en poudre [6], le principe de maintien du taux de décoction et du taux de transfert des morceaux de décoction d'Erzui est cohérent avec celui des morceaux de décoction traditionnels. La méthode de notation pondérée a été utilisée pour comparer le taux de décoction et le taux de transfert total du verbascoside et de l'échinacée entre différentes spécifications. Les résultats ont montré que le score total des pièces de la taille d'un cube de 8 mm était cohérent avec celui des pièces traditionnelles. Par conséquent, cette spécification peut être utilisée comme la meilleure spécification pour les pièces de Cistanche deserticola nuzui.

3.4 Analyse comparative de l'uniformité de la qualité des tranches traditionnelles et 㕮嘴

Le même lot de tranches traditionnelles et 㕮嘴 a été échantillonné au hasard 7 fois selon l'ajustement clinique de 7 ensembles au cours du traitement, et l'humidité, le taux de décoction, la teneur totale en verbascoside et en échinacoside et le taux de transfert des 7 tranches ont été comparés. . Comme le montre le tableau 5, les valeurs RSD de l'humidité, du taux de décoction, de la teneur totale en verbascoside et en échinacoside et du taux de transfert des 7 tranches traditionnelles étaient supérieures à celles des tranches 㕮嘴, et les valeurs RSD des tranches 㕮嘴 étaient le tout à moins de 2%. On constate que l'uniformité des morceaux cubes de 8 mm de tranches de Cistanche deserticola 㕮嘴 est meilleure que celle des tranches traditionnelles.

3.5 Comparaison de l'évaluation de la cohérence de la qualité des tranches traditionnelles et des tranches 㕮嘴

Afin de permettre aux tranches de 㕮嘴 ​​de présenter les attributs de qualité des tranches de médecine chinoise telles que la sécurité et l'efficacité, la décoction standard préparée par les tranches traditionnelles a été utilisée comme pont pour effectuer l'évaluation de la cohérence de la qualité des tranches de 㕮嘴 ​​et des tranches traditionnelles. Grâce à des recherches textuelles sur les plantes médicinales, à des recherches documentaires, à la zone de production et à une étude de marché, la zone de production authentique et la zone de production principale de Cistanche deserticola ont été déterminées, puis des échantillons ont été collectés. Pas moins de 3 lots d'échantillons ont été collectés dans chaque zone de production, et un total de 15 lots ont été collectés. Différents lots de Cistanche deserticola ont été transformés en tranches traditionnelles et en tranches de 㕮 jiu, et le rendement des tranches, le taux de décoction et le taux de transfert du verbascoside et de l'échinacoside ont été déterminés.

Comme le montre le tableau 6, le rendement de 15 lots de tranches traditionnelles était compris entre 95,1 % et 98,00 %, avec une moyenne de 96,54 %, le taux de décoction était compris entre 48,34 % et 61,88 %, avec une moyenne de 55,93%, et le taux de transfert était compris entre 43,5% et 84,30%, avec une moyenne de 65,88%. Le rendement de 15 lots de tranches décoquées variait de 81,80% à 97,70%, avec une moyenne de 91,40%, le taux de décoction variait de 52,20% à 59,39%, avec une moyenne de 58,46%, et le taux de transfert variait de 60,5% à 72,80%, avec une moyenne de 8,15%. On constate que les attributs qualitatifs des morceaux cubes de 8 mm de tranches de Cistanche deserticola décoquées sont relativement conformes à ceux des tranches traditionnelles.

3.4 Analyse comparative de l'uniformité de la qualité des tranches traditionnelles et 㕮嘴

Le même lot de tranches traditionnelles et 㕮嘴 a été échantillonné au hasard 7 fois selon l'ajustement clinique de 7 ensembles au cours du traitement, et l'humidité, le taux de décoction, la teneur totale en verbascoside et en échinacoside et le taux de transfert des 7 tranches ont été comparés. . Comme le montre le tableau 5, les valeurs RSD de l'humidité, du taux de décoction, de la teneur totale en verbascoside et en échinacoside et du taux de transfert des 7 tranches traditionnelles étaient supérieures à celles des tranches 㕮嘴, et les valeurs RSD des tranches 㕮嘴 étaient le tout à moins de 2%. On constate que l'uniformité des morceaux cubes de 8 mm de tranches de Cistanche deserticola 㕮嘴 est meilleure que celle des tranches traditionnelles.

3.5 Comparaison de l'évaluation de la cohérence de la qualité des tranches traditionnelles et des tranches 㕮嘴

Afin de permettre aux tranches de 㕮嘴 ​​de présenter les attributs de qualité des tranches de médecine chinoise telles que la sécurité et l'efficacité, la décoction standard préparée par les tranches traditionnelles a été utilisée comme pont pour effectuer l'évaluation de la cohérence de la qualité des tranches de 㕮嘴 ​​et des tranches traditionnelles. Grâce à des recherches textuelles sur les plantes médicinales, à des recherches documentaires, à la zone de production et à une étude de marché, la zone de production authentique et la zone de production principale de Cistanche deserticola ont été déterminées, puis des échantillons ont été collectés. Pas moins de 3 lots d'échantillons ont été collectés dans chaque zone de production, et un total de 15 lots ont été collectés. Différents lots de Cistanche deserticola ont été transformés en tranches traditionnelles et en tranches de 㕮 jiu, et le rendement des tranches, le taux de décoction et le taux de transfert du verbascoside et de l'échinacoside ont été déterminés.

Comme le montre le tableau 6, le rendement de 15 lots de tranches traditionnelles était compris entre 95,1 % et 98,00 %, avec une moyenne de 96,54 %, le taux de décoction était compris entre 48,34 % et 61,88 %, avec une moyenne de 55,93%, et le taux de transfert était compris entre 43,5% et 84,30%, avec une moyenne de 65,88%. Le rendement de 15 lots de tranches décoquées variait de 81,80% à 97,70%, avec une moyenne de 91,40%, le taux de décoction variait de 52,20% à 59,39%, avec une moyenne de 58,46%, et le taux de transfert variait de 60,5% à 72,80%, avec une moyenne de 8,15%. On constate que les attributs qualitatifs des morceaux cubes de 8 mm de tranches de Cistanche deserticola décoquées sont relativement conformes à ceux des tranches traditionnelles.