Plantes thaïlandaises avec des niveaux élevés d'antioxydants, une activité de piégeage des radicaux libres, une activité anti-tyrosinase et anti-collagénase

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Moragot Chatatikun1 et Anchalee Chiabchalard2

Résumé

Arrière plan:Le rayonnement ultraviolet de la lumière du soleil induit une surproduction d'espèces réactives de l'oxygène (ROS) entraînant un photovieillissement cutané et des troubles d'hyperpigmentation. Les nouveaux composés blanchissants et anti-rides issus de produits naturels suscitent depuis peu un intérêt croissant. Le but de cette étude était de trouver des produits qui réduisent les ROS dans 14 extraits de plantes thaïlandaises.

Méthodes :Pour déterminer les composés phénoliques totaux etflavonoïdecontenu,antioxydantactivité,anti-tyrosinaseet anti-collagénase, nous avons comparé des extraits de 14 plantes thaïlandaises préparés à l'aide de différents solvants (éther de pétrole, dichlorométhane et éthanol).Antioxydantles activités ont été déterminées par les dosages DPPH et ABTS.

Résultats:Le contenu phénolique total des 14 extraits de plantes thaïlandaises a été trouvé aux niveaux les plus élevés dans l'éthanol suivi des extraits de dichlorométhane et d'éther de pétrole, respectivement, tandis queflavonoïdecontenu a été normalement trouvé dans la fraction de dichlorométhane. L'activité de piégeage variait de 7 à 99 % de piégeage, telle qu'évaluée par les tests DPPH et ABTS. L'extrait de feuille à l'éthanol d'Ardisia elliptica Thunb. avait la teneur en composés phénoliques, l'activité antioxydante et l'inhibition de la collagénase les plus élevées, tandis que Cassia alata (L.) Roxb. l'extrait avait le plus richeflavonoïdecontenu. Fait intéressant, trois extraits de plantes, qui étaient les fractions éthanoliques d'Annona squamosa L., Ardisia elliptica Thunb. et Senna alata (L.) Roxb. avait élevéantioxydantcontenu et l'activité et inhibé de manière significative à la foistyrosinaseet la collagénase.

Conclusion:Nos résultats montrent que les fractions d'éthanol d'Annona squamosa L., Ardisia elliptica Thunb. et Senna alata(L.) Roxb. sont prometteurs en tant qu'ingrédients potentiels pour des produits cosmétiques tels que des agents anti-rides et des produits de blanchiment de la peau.

Mots clés:Ardisia elliptica Thunb.,Antioxydantcontenu, activité de récupération,Anti-tyrosinaseactivité, activité anti-collagénase

Le flavonoïde est l'un des éléments decistanche

Arrière plan

Le rayonnement ultraviolet (UV) de la lumière du soleil est le facteur de risque le plus important pour les cancers de la peau autres que les mélanomes et les mélanomes [1]. La surexposition au soleil, en particulier aux UVA et aux UVB, induit la surexpression d'espèces réactives de l'oxygène (ROS) qui endommagent les lipides, les protéines et les acides désoxyribonucléiques. Le collagène est le fondement majeur de la matrice extracellulaire dans la couche de derme de la peau. Un excès de ROS augmente l'expression de la collagénase, une protéase qui dégrade le collagène, ce qui peut entraîner un photovieillissement et des rides de la peau [2]. De plus, l'exposition aux UV induit la production de mélanine entraînant une hyperpigmentation.Tyrosinaseest l'enzyme clé initiant la pigmentation de la peau. Tout d'abord, la L-tyrosine est hydroxylée pour former la 3,4-dihydroxyphénylalanine (L-DOPA) par la tyrosinase. Ensuite, la L-DOPA est oxydée en DOPA quinone par la tyrosinase. La quinone DOPA est ensuite convertie en DOPAchrome qui peut être converti en 5,6-dihydroxyindole (DHI) ou 5,6-dihydroxyindole-2-acide carboxylique (DHICA)[3]. Les traitements actuels du vieillissement cutané impliquent de l'hydroxyacide pour peler la couche épidermique, des rétinoïdes pour réduire la peau rugueuse et un produit de comblement administré par injection de collagène dans la peau. Cependant, ces traitements ont des effets indésirables, tels que l'hyperpigmentation, l'inflammation, la cytotoxicité, l'irritation et l'infection bactérienne [4]. L'agent de blanchiment de la peau le plus populaire est l'hydroquinone, qui inhibetyrosinase, mais ses effets secondaires comprennent la dermatite, l'œdème, les réactions allergiques et l'ochronose [5]. Récemment, les chercheurs se sont concentrés sur des produits naturels qui inhibent les ROS induits par les UV, suppriment les enzymes et réduisent la formation de mélanine comme alternatives aux traitements actuels. Par exemple, les phytocomposés actifs, tels que l'arbutine, l'aloésine, l'acide gentisique,flavonoïdes, hespéridine, réglisse, niacinamide, dérivés de levure et polyphénols, inhibent la mélanogénèse sans cytotoxicité des tomélanocytes [6]. Ainsi, les plantes peuvent réduire la formation de rides et l'hyperpigmentation causées par l'exposition au soleil.

Le but de cette étude était d'analyser 14 plantes thaïlandaises extraites avec trois solvants différents pour leur potentiel en tant qu'ingrédients anti-rides et blanchissants pour la peau. Le nombre deantioxydantles phénols etflavonoïdesa été évalué pour une corrélation avec les activités de piégeage des radicaux libres, et anti-collagénase etanti-tyrosinaseActivités. Les extraits avaientantioxydantsqui piégeait les radicaux libres et inhibait les enzymes impliquées dans la formation des rides et des pigments. Nous identifions Ardisia elliptica Thunb., Annona squamosa L., et Senna alata (L.) Roxb est un candidat très prometteur pour une utilisation dans les produits cosmétiques.

musculation cistanche

Méthodes

produits chimiques et réactifs

Réactif phénol de Folin Ciocalteu, carbonate de sodium (Na2CO3), acide gallique, quercétine, chlorure d'aluminium à 10 %, éthanol, 2, 2-diphényl-1-picrylhydrazyl (DPPH), acide ascorbique, 2,2′-Azino- bis(3-éthylbenzthiazoline-6-acide sulfonique)(ABTS), persulfate de potassium, acide kojique, champignon tyrosinase (EC 1.14.18.1), 3,4-dihydroxy-L-phénylalanine(L- DOPA), N-[3-(2-furyl) acryloyl]-Leu-Gly-Pro-Ala (FALGPA), collagénase de Clostridium histolyticum (EC3.4.24.3), gallate d'épigallocatéchine (EGCG) , le chlorure de sodium, le chlorure de calcium et le diméthylsulfoxyde (DMSO) ont été achetés auprès de Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, MO, USA). L'éther de pétrole, le dichlorométhane, l'éthanol absolu, le méthanol, l'hydrogénophosphate disodique et le dihydrogénophosphate de sodium ont été achetés chez Merck (Darmstadt, Allemagne). Tous les produits chimiques et réactifs étaient de qualité analytique.

Matières végétales et extraction

Treize espèces de feuilles de thaï ont été récoltées dans le HRH Princess Sirindhorn Herb Garden, province de Rayong, Thaïlande. Les mangoustans provenaient de la province de Chanthaburi, en Thaïlande. Ces plantes ont été authentifiées et déposées à l'Herbier, Departmentof Botany, Faculty of Science, Chulalongkorn University, Thailand. Les noms scientifiques, les numéros de bons et les parties de plantes sont présentés dans le tableau 1. Les plantes ont été extraites à l'aide de l'appareil Soxhlet. En bref, 10 g de la plante séchée ont été extraits séparément avec de l'éther de pétrole, du dichlorométhane et de l'éthanol. Les solvants ont été éliminés en utilisant un évaporateur rotatif sous vide sous pression réduite en utilisant le concentrateur MiVac Quattro. Les échantillons concentrés ont été dissous dans du DMSO à 100 mg/ml et stockés à -20 degré jusqu'à leur utilisation. Les rendements des extraits secs sont présentés dans le tableau 1 en pourcentage p/p de matières végétales sèches.

Détermination de la teneur phénolique totale

Le contenu phénolique total des extraits végétaux a été évalué selon la méthode de Folin-Ciocalteu [7]. En bref, 50 ul d'extraits à 1 mg/ml dans de l'eau distillée ont été mélangés avec 50 ul de réactif Folin-Ciocalteu à 10 % et 50 ul de Na2CO3 0,1 M. Le mélange réactionnel a été incubé pendant 1 h à température ambiante dans l'obscurité. L'absorbance à 750 nm a été mesurée avec un lecteur de microplaques (Biotek, USA.). De l'acide gallique de 1,56 à 100 ug/ml a été utilisé comme standard. La teneur phénolique totale des extraits est exprimée en mg d'équivalent acide gallique (GAE) par g de matière végétale sèche. Tous les échantillons ont été analysés en triple.

Détermination de la teneur en flavonoïdes

Totalflavonoïde(TFC) a été déterminée en utilisant le dosage colorimétrique du chlorure d'aluminium (AlCl3) [7]. En bref, 50 ul des extraits à 1 mg/ml dans de l'éthanol à 80 % ont été mélangés avec 50 ul d'une solution d'AlCl3 à 2 % dans le puits d'une plaque murale 96. La plaque a été incubée pendant 15 min à température ambiante. L'absorbance à 435 nm a été mesurée à l'aide d'un lecteur de microplaques. La quercétine de 1,56 à 100 ug/ml a servi d'étalon. La teneur totale en flavonoïdes est exprimée en mg d'équivalents de quercétine (QE) par g de matière végétale sèche. Les échantillons ont été analysés en trois exemplaires.

Activité de récupération du DPPH

Le dosage de l'activité de piégeage du DPPH a été réalisé comme décrit par Yamasaki et al. [8]. La solution de DPPH a été fraîchement préparée pour chaque dosage. En bref, 100 extraits ug/ml ou 1,56 à 100 ug/ml d'acide ascorbique standard dans du méthanol absolu ont été mélangés avec 180 ul de réactif DPPH dans une plaque à 96 puits. Le mélange réactionnel a été incubé pendant 30 minutes à température ambiante dans l'obscurité. Ensuite, l'absorbance à 517 nm a été mesurée avec un lecteur de microplaques. Les expériences ont été entreprises en triple exemplaire. L'absorbance à 517 nm de DPPH était de 0,70 ± 0,02 et une diminution de l'activité de piégeage mesurée par absorbance. La capacité de piégeage a été calculée comme activité de piégeage (pourcentage)=100 pourcent × [(훥A517 du témoin - 훥A517 de l'échantillon)/ 훥A517 du témoin]. Les pourcentages d'activité de piégeage du DPPH des extraits ont été comparés à ceux de l'acide ascorbique et sont exprimés en mg d'équivalent vitamine Cantioxydant(VCEAC) par g de matière végétale sèche. La CI50 a été déterminée à partir d'un graphique du pourcentage d'inhibition par rapport à la concentration (de 0,78 à 100 ug/ml de chaque extrait).

Activité de récupération ABTS

L'activité de piégeage des radicaux libres de l'ABTS a été réalisée comme décrit précédemment [9]. Le réactif de travail ABTS• plus a été préparé en mélangeant 7 mM d'ABTS• et 2,45 mM de persulfate de potassium à un rapport volume/volume de 8:12. La solution de travail a été conservée pendant 16 à 18 h à température ambiante dans l'obscurité. La solution ABTS• plus a été diluée avec de l'éthanol absolu pour donner une absorbance à 734 nm de 0.70 ± 0,02. Ensuite, 100 ug/ml d'extraits ou 1,56 à 100 ug/ml d'étalon d'acide ascorbique dans de l'éthanol absolu ont été ajoutés à 180 ul d'ABTS+ plus réactif de travail dans les puits d'une plaque à 96 puits. La plaque a été incubée pendant 45 min à température ambiante et l'absorbance a été mesurée à 734 nm. Les expériences ont été menées en triple. La capacité de piégeage a été calculée en tant qu'activité de piégeage (pourcentage)=100 × [(훥A734 du contrôle - 훥A734 de l'échantillon)/ 훥A734 du contrôle]. Les pourcentages d'activité de piégeage de l'ABTS des extraits ont été comparés à ceux de l'acide ascorbique et sont présentés en mg d'équivalent vitamine Cantioxydantcapacité (VCEAC) par g de matière végétale sèche. La CI50 a été déterminée à partir d'un graphique du pourcentage d'inhibition par rapport à la concentration (de 15,62 à 1000 ug/ml de chaque extrait).

Détermination de l'inhibition de la tyrosinase de champignon

La méthode dopachrome a été réalisée avec une légère modification [10]. En bref, 20 ul d'extraits de plantes ou de DMSO (comme contrôle), 20 ul de 203,3 unités/ml de tyrosinase de champignon et 140 ul de tampon phosphate 20 mM à pH 6,8 ont été pré-incubés pendant 10 min à 25 degrés. Après la pré-incubation, 20 ul de L-DOPA 2,5 mM ont été ajoutés et les échantillons ont ensuite été incubés pendant 20 minutes supplémentaires à 25 degrés. La quantité de dopachrome a été mesurée à 492 nm avec un lecteur de microplaques. L'acide kojique (KA) a servi de témoin positif pour l'inhibition. Le pourcentage d'inhibition de l'activité de la tyrosinase ( pourcentage ) a été exprimé en pourcentagetyrosinaseinhibition {{0}} × [(훥A492 du contrôle –훥A492 de l'échantillon)/ 훥A492 du contrôle]. Les concentrations finales des extraits et de l'acide kojique étaient respectivement de 1 et 0,1 mg/ml. La CI50 a été déterminée à partir d'un graphique de pourcentagetyrosinaseinhibition contre la concentration (de 15,62 à 1000 ug/ml de chaque extrait).

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Détermination de l'inhibition de la collagénase

L'inhibition de la collagénase a été déterminée par une méthode décrite précédemment [11]. En bref, 40 ul de collagénase de Clostridium histolyticum à 0.25 unités/ml dans du tampon Tricine 50 mM contenant du CaCl2 10 mM et du NaCl 400 mM et 10 ul de tampon Tricine 50 mM ont été mélangés avec 10 ul des extraits ou du DMSO (comme contrôle). L'épigallocatéchine gallate (EGCG) a été utilisée comme contrôle positif. Après une incubation de 15- min à température ambiante, 50 ul de N-[3-(2-furyl)acryloyl]-Leu-Gly-Pro-Ala (FALGPA) ont été ajoutés. L'absorbance a été mesurée à 340 nm immédiatement et en continu pendant 20 min. L'activité enzymatique a été évaluée par une diminution de l'absorbance pendant l'intervalle de temps. Le pourcentage d'inhibition de l'activité de la collagénase a été calculé comme 100 × [(Activité du contrôle - Activité de l'échantillon) / Activité du contrôle]. Les concentrations finales des extraits et du gallate d'épigallocatéchine étaient respectivement de 1 et 0,1 mg/ml. La CI50 a été déterminée à partir d'un graphique du pourcentage d'inhibition de la collagénase par rapport à la concentration (de 15,62 à 1000 ug/ml de chaque extrait).

analyses statistiques

Toutes les expériences ont été réalisées en triple et les résultats sont exprimés en moyenne ± erreur standard. Le coefficient de corrélation (R2) entreantioxydantle contenu et les activités antioxydantes ont été déterminés à l'aide du logiciel SigmaPlot version 12.2. La différence entre les deux moyennes a été évaluée à l'aide du test t de Student. Les différences étaient considérées comme significatives lorsque la valeur P était inférieure à 0.05.

Résultats

Rendements d'extraction

Le tableau 1 montre les noms scientifiques, les numéros de bons et les parties de plantes des 14 plantes thaïlandaises utilisées dans cette étude. Ardisia elliptica Thunb. avait le rendement le plus élevé dans les extraits d'éther de pétrole (19,89 pour cent) et d'éthanol (31,11 pour cent), tandis que Garcinia mangostana L. avait le rendement en pourcentage le plus élevé de l'extraction au dichlorométhane (11,07 pour cent).

Contenu phénolique de 14 plantes thaïlandaises

Par conséquent, le contenu phénolique total des plantes a été déterminé par la méthode de Folin-Ciocalteu. Les extraits présentaient une large gamme de nombre de phénols, comme indiqué dans le tableau 2, et les valeurs variaient de 33- fois parmi les extraits. Ardisiaelliptica Thunb. avait la teneur en phénol la plus élevée dans les trois types d'extraits, tandis que la teneur en phénol la plus faible était présente dans le Stemona curtissi Hook. F. extrait d'éther de pétrole.

Teneur en flavonoïdes de 14 plantes thaïlandaises

Similaire aux phénols, totalflavonoïdela teneur variait considérablement selon les espèces végétales, allant de 2,04 ± 0.16 à 31,38 ± 0,81 mg QE par g de matière sèche (tableau 2). En général, l'extraction au dichlorométhane a donné les taux les plus élevésflavonoïdeniveau par rapport aux autres solvants. De tous les extraits, la plus grande quantité de flavonoïdes a été trouvée dans l'extrait à l'éthanol des feuilles de Senna alata (L.) Roxb (31,38 ± 0.81 mg QE par matière sèche). D'autre part Ardisia elliptica Thunb.(23,14 ± 1,10 mg QE par g de matière sèche). avait la teneur en flavonoïdes la plus riche dans la fraction de dichlorométhane. De plus, Ipomoea pes-caprae (L.) R.br. avait la teneur en flavonoïdes la plus élevée parmi les extraits d'éther de pétrole (27,48 ± 2,59 mg QE par g de matière sèche). Le niveau de flavonoïdes détectable le plus bas était dans l'extrait d'éthanol de Daturametel L. Par contraste,flavonoïdesn'ont pas été trouvés dans les extraits d'éther de pétrole et de dichlorométhane de Stemona curtisii Hook.f., et les extraits d'éther de pétrole de Streblus asper Lour. et Phyllanthus acidus (L.) Skeels. La teneur totale en flavonoïdes n'était pas corrélée à la teneur totale en composés phénoliques (R2=0.0284, Fig. 1a).

Activité de piégeage des radicaux DPPH dans différents extraits de 14 plantes thaïlandaises

L'activité de piégeage des radicaux libres utilisant le DPPH comme indicateur est une baseantioxydantdosage [12]. Comme le montre le tableau 3, les activités de piégeage des extraits variaient considérablement, allant de 7,11 ± 0,59 % à 96,17 ± 0,05 %. L'extrait à l'éthanol d'Ardisia ellipticaThunb avait l'activité de piégeage la plus élevée à 96 %. De plus, le prochain plus fortantioxydant activities (>90 pour cent) ont été observés dans les fractions d'éthanol de Stemonacurtisii Hook.f., Annona squamosa L., Phyllanthus acidus(L.) Skeels. et Garcinia mangostana Linn. En ce qui concerne les autres solvants, Ardisia elliptica Thunb avait également l'activité de piégeage la plus riche parmi les fractions d'éther de pétrole, et Garcinia mangostana L. avait l'activité antioxydante la plus élevée dans les fractions de dichlorométhane. La capacité de piégeage la plus faible a été détectée chez Croton sublyratus Kurz dans la fraction d'éther de pétrole. Aucune activité de piégeage n'a été détectée dans 7 extraits d'éther de pétrole et 2 extraits de dichlorométhane.

Activité de piégeage des radicaux ABTS dans différents extraits de 14 plantes thaïlandaises

AntioxydantL'activité des phases aqueuse et lipidique dans les plantes a également été évaluée par un test de décoloration à l'ABTS [13]. Encore une fois, l'acide ascorbique a servi de thestandardantioxydant. As with the DPPH assay, scavenging activity in the ABTS assay varied greatly among the plant preparations with a similarly broad range from 8.03 ± 0.54% to 99.84 ± 0.07% (Table 4). Furthermore, the next strongest scavenging activities (> 90%) were observed in the same 4 ethanol fractions as shown by the DPPH assay. In addition, no scavenging activity was found in the same 5 petroleum ether extracts. In general, the values obtained with the ABTS assay were higher than the DPPH values. Hence, activity in the ethanol extract from Senna alata (L.) Roxb. was now observed as >90 pour cent, et une activité piégeuse a été détectée dans tous les extraits de dichlorométhane, et les extraits d'éther de pétrole d'Annona squamosa L. et d'Ipomoea pes-caprae(L.) R.br. qui n'a pas été détecté par le test DPPH.

Inhibition de l'activité de la tyrosinase par les extraits de plantes

La capacité des composés des plantes thaïlandaises à inhiber les champignonstyrosinasel'activité a été évaluée à l'aide d'un test in vitro avec L-DOPA comme substrat. L'acide kojique servait d'inhibiteur connu et provoquait une inhibition enzymatique maximale de 93,38 ± 1,63 %. Comme le montre le tableau 5, seuls les extraits à l'éthanol ont significativement inhibé l'activité de la tyrosinase, avec Ardisia elliptica Thunb. les préparations étant l'exception. Les fractions d'éther de pétrole et de dichlorométhane d'Ardisia elliptica Thunb. a inhibé l'activité de la tyrosinase d'environ 20 %. La fraction d'éthanol de Rhinacanthus nasutus (L.) Kurz (valeur IC 50 de 271,50 ug/ml) était l'inhibiteur de tyrosinase le plus puissant, suivi par les extraits d'éthanol d'Ardisia ellipticaThunb. et Phyllanthus acidus (L.) Skeels. D'autres fractions d'éthanol ont significativement diminué l'activité enzymatique de plus de 20 % (tableau 5), tandis que les extraits restants n'avaient pas d'activité inhibitrice détectable (données non présentées).

Inhibition de l'activité collagénase par 14 plantes

Les extraits ont été testés pour l'activité anti-collagénase à l'aide de la collagénase de Clostridium histolyticum et de N-[3-(2-furyl)acryloyl]-Leu-Gly-Pro-Ala (FALGPA) comme substrat. Le gallate d'épigallatecatéchine est un inhibiteur connu de la collagénase et diminution de l'activité enzymatique de 90,51 ± 2,79 % . Comme le montre le tableau 5, seuls 4 extraits à l'éthanol contenaient une activité inhibitrice détectable de la collagénase. Parmi ceux qui causent l'inhibition, Ardisia elliptica Thunb. (valeur IC 50 de 157,78 ug/ml) a présenté le niveau le plus élevé d'inhibition de la collagénase, suivi par Annona squamosa L. (valeur IC 50 de 426,67 ug/ml), Senna alata (L.) Roxb., et Croton sublyratusKurz dans le rang ordre. D'autres extraits de plantes n'ont pas inhibé de manière significative l'activité de la collagénase dans les conditions de réaction utilisées dans cette étude (données non présentées).

Discussion

Le rayonnement solaire est un facteur environnemental important dans les lésions cutanées et peut induire un cancer de la peau [14]. Le rayonnement UV provoque une réponse pro-inflammatoire, une dégradation de la matrice extracellulaire etantioxydantdéplétion [15, 16]. Les UV provoquent la formation d'espèces réactives de l'oxygène (ROS) qui induisent l'hyperpigmentation et l'expression de la collagénase [17, 18]. Notre étude a porté sur 14 plantes thaïlandaises extraites avec trois solvants différents pour leur potentiel en tant qu'ingrédients anti-rides et blanchissants pour la peau. Dans cette étude, nous avons utilisé de l'éther de pétrole, du dichlorométhane et de l'éthanol pour l'extraction des plantes à l'aide de l'appareil Soxhlet. Ardisia elliptica Thunb. avait le rendement le plus élevé dans les extraits d'éther de pétrole et d'éthanol, tandis que Garcinia mangostana L. avait le rendement en pourcentage le plus élevé de l'extraction au dichlorométhane. Ces solvants sont une série de solvants organiques de polarités croissantes. La variation entre les rendements en pourcentage dépendait de l'espèce végétale et reflétait probablement des différences dans la composition chimique des plantes.

Les composés phénoliques sont le plus grand groupe de composés phytochimiques trouvés dans les plantes et ils ont diverses activités biologiques chez les animaux, y compris les humains [19]. Le contenu phénolique total des plantes a été déterminé par la méthode de Folin Ciocalteu. Dans l'ensemble, la fraction éthanol avait la teneur phénolique la plus riche, suivie du dichlorométhane, tandis que l'éther de pétrole à faible polarité avait la teneur phénolique la plus faible par rapport aux autres solvants. Dans cette étude, Ardisia elliptica Thunb. avait la teneur phénolique la plus élevée dans les trois types d'extraits. Dans des études antérieures, des extraits de feuilles au dichlorométhane d'Ardisia elliptica Thunb.ont une teneur en phénols de 101 ± 1,3 mg de GAE par g de matière végétale sèche, ce qui est supérieur à la teneur d'un extrait de brindille [20]. De plus, un extrait au méthanol de fruit mûr d'Ardisia contenait 5,64 ± 0,37 g de GAE pour 100 g d'extrait [21]. Par conséquent, les feuilles et les fruits d'Ardisia ellipticaThunb. ont une teneur phénolique élevée qui peut être facilement extraite avec du méthanol, du dichlorométhane et de l'éthanol.

Flavonoïdessont des pigments dans les fleurs, les feuilles, les fruits et les graines. Ces composés sont des métabolites secondaires des plantes et sont largement distribués parmi les espèces végétales [22]. Ensuite, la teneur en flavonoïdes des plantes thaïlandaises a été évaluée à l'aide du dosage colorimétrique du chlorure d'aluminium. Nos résultats ont montré que la plus grande quantité de flavonoïdes a été trouvée dans l'extrait à l'éthanol de Senna alata (L.) Roxbleaves. Dans une étude précédente, une teneur élevée en flavonoïdes a été trouvée dans l'eau (4,25 mg QE pour 100 g) et les fractions de méthanol (3,97 mg QE pour 100 g) de Senna alata (L.) Roxb.[23]. Ainsi, les préparations de Senna alata (L.) Roxb ont une teneur élevée en flavonoïdes lorsqu'elles sont extraites avec des solvants de haute polarité comprenant l'éthanol, le méthanol et l'eau. Ardisiaelliptica Thunb. avait la teneur en flavonoïdes la plus riche dans la fraction dichlorométhane. Le fruit de cette plante a également une teneur élevée en flavonoïdes de 36,91 ± 2,37 mg QE par g d'extrait [24]. Ainsi, le fruit et les feuilles d'Ardisia elliptica Thunb. sont riches en flavonoïdes. La teneur totale en flavonoïdes n'était pas corrélée avec la teneur totale en composés phénoliques. Cependant,flavonoïdesont de nombreuses activités biologiques telles que la protection UVB [25], anti-inflammatoire [26], anti-hépatotoxicité [27] et anticancéreuse [28].

Activité de piégeage des radicaux libres en utilisant DPPH et ABTSassay. Dans le test DPPH, le DPPH reçoit un atome d'hydrogène d'unantioxydant[29]. Nous avons constaté que l'extrait d'éthanol d'Ardisiaelliptica Thunb avait l'activité de piégeage la plus élevée. D'autres chercheurs ont également signalé des fractions de dichlorométhane d'Ardisia elliptica Thunb. les feuilles et les tiges ont des niveaux élevés deantioxydantactivité déterminée par le test DPPH, et, par conséquent, cette plante est très intéressante à étudier plus avant en tant que traitement à base de plantes [20]. Les extraits de la fraction éthanol à haute polarité ont clairement montré une meilleureantioxydantplus active que les fractions de plus faibles polarités contenant du dichlorométhane et de l'éther de pétrole. Les extraits à l'éthanol contenaient les niveaux les plus élevés d'activité de piégeage des radicaux libres par rapport aux autres extraits, et tous les extraits à l'éthanol étaient actifs. Dans le test ABTS, l'ABTS est converti en son radicalcation par l'ajout de persulfate de potassium. En présence d'un antioxydant, le cation ABTS réactif (ou ABTS• plus ) est converti en sa forme naturelle incolore [9]. En accord avec le test DPPH, les extraits à l'éthanol contenaient les niveaux les plus élevés d'activité piégeuse par rapport aux autres extraits. Encore une fois, les activités de piégeage les plus élevées dans les extraits d'éthanol, de dichlorométhane et d'éther de pétrole provenaient des mêmes plantes, comme le montre le test DPPH. Les résultats des tests DPPH et ABTS étaient fortement corrélés comme prévu (Fig. 1f).

Cependant, le totalflavonoïdela teneur en extraits de plantes n'était pas corrélée à l'activité anti-radicalaire détectée par le test DPPH (Fig. 1c) ou par le test ABTS (Fig. 1e). Nos constatations d'absence de relation significative entreflavonoïdele contenu et l'activité piégeuse utilisant le test ABTS sont cohérents avec les résultats d'autres chercheurs [30]. En revanche, la teneur totale en phénols de la préparation végétale était positivement corrélée à l'activité de piégeur mesurée par les deux tests (Fig. 1b et d) en accord avec une étude précédente [31]. De manière notable, l'activité de piégeage dépendait de la teneur totale en composés phénoliques et des solvants à polarités élevées, tels que l'éthanol et le dichlorométhane. Ces résultats suggèrent que le contenu phénolique est le constituant majeur avecantioxydantactivité dans les 14 usines thaïlandaises.

La mélanine, principal pigment de la couleur de la peau et des cheveux, est synthétisée par les mélanocytes au sein des mélanosomes. La surproduction et l'accumulation de mélanine dans la peau peuvent entraîner des troubles pigmentaires et des problèmes esthétiques. L'hyperpigmentation se produit dans les zones de la peau exposées au soleil [32]. Dans la mélanogénèse,tyrosinaseest l'enzyme clé dans l'étape de limitation de vitesse dans laquelle la L-tyrosine est hydroxylée en L-DOPA, qui est ensuite oxydée en DOPAquinone. Après cela, il est converti en DOPAchrome qui est un substrat pour la synthèse de mélanine [3]. Régulation à la baisse detyrosinaseil a été proposé que l'activité soit responsable de la diminution de la production de mélanine. Le développement de nouveaux composés phytochimiques blanchissants à partir de produits naturels est récemment devenu une tendance croissante. Notre découverte a montré que la fraction d'éthanol de Rhinacanthus nasutus (L.) Kurz était l'inhibiteur de tyrosinase le plus puissant, suivi des extraits d'éthanol d'Ardisia elliptica Thunb. et Phyllanthus acidus (L.) Skeels. De toute évidence, 7 plantes sur 14 plantes avaient une forte teneur en phénols, en particulier Ardisiaelliptica Thunb. et Annona squamosa L. De plus, Senna alata (L.) Roxb. avait le plus richeflavonoïdecontenu qui peut inhiber l'activité de la tyrosinase. Les composés actifs des plantes tels que l'arbutine, l'aloésine, l'acide gentisique, les flavonoïdes, l'hespéridine, la réglisse, la niacinamide, les dérivés de levure et les polyphénols, peuvent inhiber la mélanogénèse sans cytotoxicité pour les mélanocytes [6].

La collagénase est une peptidase de zinc transmembranaire qui clive la liaison X-Gly du collagène. Le collagène est une protéine structurelle abondante et un composant de la matrice extracellulaire [33]. La diminution des fibres de collagène et d'élastine augmente avec l'âge et les dommages causés par les rayons UV induisant une peau ridée [34]. L'inhibition de la collagénase a été proposée pour prévenir le vieillissement cutané. Parmi ceux qui provoquent une inhibition dans notre étude, Ardisiaelliptica Thunb. présentaient le niveau le plus élevé d'inhibition de la collagénase, suivis par Annona squamosa L., Senna alata(L.) Roxb. et Croton sublyratus Kurz par ordre de classement. Dans une étude précédente, l'extrait de cabosse de cacao contenait de l'acide phénolique etflavonoïdesqui inhibe l'activité de l'élastase et de la collagénase [35]. Notamment, trois extraits à l'éthanol (Ardisia elliptica Thunb., Annona squamosa L. et Senna alata (L.) Roxb. inhibent à la foistyrosinaseet la collagénase. Ces plantes avaient également des niveaux élevés de phénols et de flavonoïdes, etantioxydantactivité. Il est intéressant de noter que ces extraits ont des utilisations possibles comme ingrédients pour les produits cosmétiques.

Conclusion

Nos résultats démontrent que les extraits de 14 plantes thaïlandaises avaient des degrés variables de composés phénoliques totaux etflavonoïdeainsi que les activités de piégeage des radicaux libres, en fonction des solvants d'extraction. Il y avait une forte corrélation entre le contenu phénolique total et l'activité de piégeage des radicaux libres évaluée par les dosages DPPH et ABTS. La fraction éthanol d'Ardisia ellipticaThunb. avait la teneur phénolique la plus élevée, suivie par Annona squamosa L. Les deux plantes inhibaient significativement les activités de la tyrosinase et de la collagénase, tandis que Rhinacanthusnasutus (L.) Kurz présentait la plus forte inhibition de la tyrosinase. De plus, Senna alata (L.) Roxb. était le plus riche en teneur en flavonoïdes, et présentait égalementtyrosinaseet comportement inhibiteur de la collagénase. La fraction éthanol de trois plantes, à savoir Annona squamosa L., Ardisia elliptica Thunb et Senna alata (L.) Roxb., ont le potentiel d'être des ingrédients dans des produits cosmétiques pour l'anti-rides ainsi que le blanchiment de la peau. D'autres études sont nécessaires pour étudier les composants actifs et la sécurité de ces extraits.

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