Effets anti-peroxydation lipidique et anti-radiation du Glycoside Total de Cistanche
Mar 15, 2022
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Li Linlin, Wang Xiaowen, Wang Xuefei, Mu Hu Yati, Du Niansheng
[Résumé]:Glycoside total de Cistanche(GC) peuvent améliorer de manière significative l'activité SOD des globules rouges de souris, réduire la teneur en MDA sérique, augmenter la teneur en ADN et en ARN dans les tissus hépatiques et rénaux et peuvent favoriser de manière significative les dommages causés par60Coirradiation. La restauration de l'activité SOD dans les globules rouges de souris et la teneur en acide nucléique de la rate réduisent la teneur en MDA du foie, suggérant que l'effet protecteur des GC (Glycosides totaux deCistanche) sur les acides nucléiques etradioprotectionest étroitement liée à saperoxydation anti-lipidiqueeffet.
Mots clés:Glycoside total de Cistanche, ADN, ARN, peroxydation anti-lipidique, radiationprotection
Cistanchea pour effet de nourrir l'énergie vitale, de nourrir l'essence et de renforcer le yang. Dans les anciennes prescriptions anti-âge et prolongatrices du passé, la probabilité d'apparition est juste derrière le ginseng. La littérature récente rapporte queCistanchepeut améliorer la fonction immunitaire du corps (1); promouvoir la mémoire et améliorer l'intelligence; réguler le système nerveux, améliorer la fonction sexuelle et anti-vieillissement (2). La préparation brute deCistanchepeut améliorer l'activité SOD des globules rouges de souris ; réduire considérablement le contenu de la lipofuscine myocardique (3); améliorer la capacité de synthèse d'ADN des animaux présentant une déficience en yang et prolonger considérablement la durée de vie des mouches des fruits (4). Cependant, il n'existe aucun rapport sur les effets pharmacologiques des GC (Glycoside total de Cistanche) à la maison et à l'étranger. Cette étude vise à explorer l'effet protecteur des GC (Glycoside total de Cistanche) sur les acides nucléiques,radiationprotection, etanti-lipidiqueperoxydation.
Glycoside total de Cistancheperoxydation anti-lipidique
1 Matériel et méthodes
1.1 Médicaments et réactifs
Glycoside total de Cistanche, extrait deCistanche salsa(Cistanche salsa CAMey) du nord du Xinjiang, l'ingrédient principal estPhnyléthanoildGlycosidedeCistanche, et la méthode d'extraction est basée sur la littérature japonaise (Publication brevetée (A) Sho 63-198627) Procédure, fournie par le professeur Du Niansheng, Département de chimie végétale, Département de pharmacie. Acide thiobarbiturique, produit par Shanghai Reagent No. 1 Factory ; Les produits standard d'ADN et d'ARN ont été fournis par Shanghai Milk Company et l'Institut de biochimie de l'Académie chinoise des sciences, et les deux ont été testés pour la pureté selon la méthode de détermination du phosphore [5].
1.2 Effet anti-peroxydation lipidique des GC (Glycoside total de Cistanche)
110 souris NIH, pesant (22,5 ± 2,1) g, mâles et femelles, ont été réparties au hasard en 4 groupes : le groupe témoin a reçu une solution saline normale (NS) 20 ml·kg -1·d-1 gavage (ig); GC (Glycoside total de Cistanche) groupe, GC (Glycoside total de Cistanche) 62,5, 125, 250 mg·kg -1 jour -1, ig ont été administrés pendant 18 jours chacun, après la dernière administration pendant 2 heures, les globes oculaires ont été retirés et 50 ul de sang ont été prélevés pour tester la SOD dans les globules rouges Vitalité ; le sang restant pour préparer le sérum, mesurer la teneur en MDA sérique ; prendre rapidement le cœur, le foie, le cerveau, les reins et d'autres organes, rincer avec une solution saline normale de glace, préparer chaque homogénat de tissu, l'extrait de SOD de globules rouges est préparé selon la littérature (6). Préparation d'extrait d'ADN et d'ARN : prenez le cœur, pesez le foie, le cerveau et les organes rénaux, coupez-les dans un broyeur, ajoutez 2 ml d'acide trichloroacétique à 15 %, broyez-le dans un homogénat dans un bain d'eau glacée et transférez-le dans un tube de centrifugation , rincez le bol du broyeur avec 2 ml d'acide trichloracétique à 15 % pour un total de 3 fois, transférez tout le liquide de lavage dans le tube à centrifuger, centrifugez à 4 000 r·min-1 pendant 10 min, jetez le surnageant. Après avoir ajouté 2 ml d'éthanol absolu à la précipitation et au mélange, placez-le dans un bain-marie à 90 degrés et chauffez-le pendant 2 min. Après refroidissement, il est centrifugé à 4000 tr·min-1 pendant 10 min, et le surnageant est jeté. Ajouter 8 ml d'acide trichloroacétique à 5 % à la précipitation et bien mélanger, mettre dans un bain-marie à 90 degrés pendant 15 min, centrifuger après refroidissement, 4 000 r·min-1 pendant 10 min, verser le surnageant dans une fiole jaugée de 10 ml et ajouter 1 ml à la précipitation d'acide trichloroacétique à 5 %, bien mélanger, centrifuger, 4 000 r·min-1, 5 min, puis verser le surnageant dans une fiole jaugée de 10 ml, diluer le volume avec de l'eau distillée et bien mélanger. Les extraits d'ADN et d'ARN ont été préparés. Détermination des indicateurs biochimiques : l'activité SOD des globules rouges a été mesurée par la méthode d'auto-oxydation au pyrogallol [7] ; la teneur sérique en M DA a été mesurée par la méthode de coloration TBA [8] ; Les extraits d'ADN et d'ARN ont été mesurés par la méthode de coloration à la diphénylamine et à l'orcinol respectivement La teneur en ADN et en ARN dans chaque tissu a été mesurée par colorimétrie (5).
Effet protecteur des GC (Glycoside total de Cistanche) surradiationprotection
1.3 L'effet anti-radiation des GC (Glycoside total de Cistanche)
120 souris NIH pesant (21,0 ± 2,2) g, mâles et femelles, ont été réparties au hasard en 4 groupes : groupe normal, NS 20 ml kg -1 jour-1 pendant 18 jours ; les 90 souris restantes ont reçu60Co rayons gamma une fois Corps entierirradiation, la dose d'exposition est de 6 Gy, puis divisée en groupes de blessures : NS 20 ml·kg -1·jour-1 immédiatement aprèsirradiation; GC (Glycoside total de Cistanche) groupe de traitement : 125 et 250 mg·kg respectivement aprèsirradiation-1·j-1, 18 jours chacun, 2 heures après la dernière administration de chaque groupe, l'activité de la SOD dans les globules rouges, la teneur en MDA du foie, la teneur en ADN et en ARN dans les tissus du foie et de la rate, et le foie et la rate ont été déterminés selon les méthodes expérimentales susmentionnées. Observation de la morphologie des tissus. Toutes les données sont exprimées en x ± s et le traitement du test t est effectué entre les groupes.
2 Résultats
2.1 Effet anti-peroxydation lipidique des GC (Total Glycoside of Cistanche)
2.1.1 L'effet des GC (Total Glycoside of Cistanche) sur l'activité SOD dans les érythrocytes et la teneur sérique en MDA chez des souris normales :Comme le montre le tableau 1, les GC (Glycoside total de Cistanche) 62.5 mg·kg -1 group is compared with the control group There was no difference (P>0.05). GC (TGlycoside total de Cistanche) 125, 250mg·kg -1 groupe peut augmenter significativement l'activité SOD dans les globules rouges (P<0.01) and="" reduce="" the="" serum="" mda="" content="" (p=""><>
Tableau 1 : Effet des GC (Total Glycoside of Cistanche) sur l'activité SOD dans les érythrocytes et la teneur sérique en M DA chez des souris normales
2.1.2 L'effet des GC (Total Glycoside of Cistanche) sur le contenu en ADN de divers organes chez la souris normale :Comme on peut le voir dans le tableau 2, par rapport au groupe témoin, il n'y avait pas de différence significative dans laADNcontent of the heart and brain in each administration group (P>0.05) ). GC (Glycoside total de Cistanche) le groupe -1 62,5 mg·kg n'a eu aucun effet sur la teneur en ADN du foie et des reins ; GC (Glycoside total de Cistanche) Le groupe de 125 mg·kg -1 et le groupe de 250 mg·kg -1 avaient une teneur en ADN hépatique par rapport au groupe témoin augmentée de 9,6 % (P<0.05), 14.2%="" (p=""><0.01); the="" content="" of="" dna="" in="" the="" kidney="" increased="" by="" 15.4%,="" 16.0%,="" respectively,="" compared="" with="" the="" control="" group="" (p=""><>
Tableau 2 Effets des GC (Total Glycoside of Cistanche) sur le contenu en ADN de divers organes chez la souris normale
2.1.3 L'effet des GC (Total Glycoside of Cistanche) sur le contenu en ARN de divers organes chez la souris normale :As can be seen from Table 3, compared with the control group, there was no significant difference in the RNA content of the heart and brain in each administration group (P>0.05) ). Les GC (Glycoside total de Cistanche) 62,5 mg·kg -1 n'ont eu aucun effet sur la teneur en ARN du foie et des reins ; la teneur en ARN hépatique des GC (Glycoside total de Cistanche) 125 et 250 mg·kg -1 ont augmenté respectivement de 18,1 % et 26,2 % par rapport au groupe témoin. pour cent (Tout P<0.01); compared="" with="" the="" control="" group,="" the="" rna="" content="" of="" the="" kidney="" increased="" by="" 20.9%="" and="" 25.4%="" respectively="" (all=""><>
Tableau 3 Effets des GC (Total Glycoside of Cistanche) sur le contenu en ARN de divers organes chez la souris normale
2.2 Effet anti-radiation des GC (Total Glycoside of Cistanche)
2.2.1 L'effet des GC (Total Glycoside of Cistanche) sur l'activité SOD dans les érythrocytes et la teneur en M DA dans le foie de souris irradiées :Comme on peut le voir dans le tableau 4, l'activité SOD dans les érythrocytes du groupe blessé était de 46,8 % inférieure à celle du groupe normal (P<0.01), compared="" with="" the="" injury="" group,="" the="" gcs="">Glycoside total de Cistanche) 125 et 250 mg·kg -1 groupe de traitement ont augmenté respectivement de 52,1 % et 52,4 % (P<0.01). compared="" with="" the="" normal="" group,="" the="" liver="" mda="" content="" of="" the="" injury="" group="" was="" significantly="" increased="" by="" 24.3%="" (p=""><0.01), and="" the="" liver="" mda="" content="" of="" each="" treatment="" group="" was="" significantly="" lower="" than="" that="" of="" the="" injury="" group="" by="" 18.4%,="" 17.9%=""><0.01), slightly="" higher="" than="" that="" of="" the="" normal="" group="" (p=""> 0.05).
2.2.2 L'effet des GC (Total Glycoside of Cistanche) sur le foieADNet teneur en ARN des souris irradiées : The liver DNA and RNA content of the injured group was lower than that of the normal group, but there was no significant difference (P>0.05); the liver DNA of the treatment group Although the RNA content increased slightly compared with the injury group, the difference was not significant (P>0.05).
Tableau 4 Effet des GC (Total Glycoside of Cistanche) sur l'activité SOD dans les globules rouges et la teneur en MDA dans le foie de souris irradiées
2.2.3 L'effet des GC (Total Glycoside of Cistanche) sur le contenu en ADN et ARN de la rate de souris irradiées :Le tableau 5 montre que la teneur en ADN de la rate du groupe blessé était inférieure à celle du groupe normal de 15,5 % (P<0.01), and="" each="" treatment="" group="" was="" more="" damaged="" the="" group="" increased="" by="" 14.9%="" and="" 15.2%="" respectively=""><0.01), which="" were="" close="" to="" the="" normal="" group="" (p="">0.05). La teneur en ARN de la rate dans le groupe blessé était de 18,6 % inférieure à celle du groupe normal (P<0.05). compared="" with="" the="" injured="" group,="" each="" treatment="" group="" increased="" by="" 15.0%="" and="" 20.3%="" (p=""><0.01), which="" were="" close="" to="" the="" normal="" group="" (p=""> 0.05).
Tableau 5 Effets des GC (Total Glycoside of Cistanche) sur le contenu en ADN et ARN de la rate de souris irradiées
2.2.4 L'effet des GC (Total Glycoside of Cistanche) sur la morphologie de la rate de souris irradiées :La figure 1 ci-dessous montre que dans le groupe blessé et le groupe normal, la coloration du noyau dans la pulpe blanche splénique et les corpuscules de la rate est plus légère, la teneur en ADN est réduite, la coloration du cytoplasme est plus légère et la teneur en ARN est significativement plus faible. Par rapport au groupe GCs (Total Glycoside of Cistanche) 125mg·kg -1 et au groupe blessé, la structure globale de la rate était proche de la normale. Le noyau du corpuscule splénique a été coloré avec du violet foncé, la teneur en ADN a été significativement augmentée, le cytoplasme a été coloré en rouge foncé et la teneur en ARN a été significativement augmentée.
Figure 1 Effet des GC (Total Glycoside of Cistanche) sur la morphologie de la rate de souris irradiées
2.2.5 L'effet des GC (Total Glycoside of Cistanche) sur la morphologie des tissus hépatiques de souris irradiées :La figure 2 montre que le groupe blessé a une coloration plus légère des noyaux d'hépatocytes autour de la zone porte du lobule hépatique que le groupe normal, la teneur en ADN est considérablement réduite et le cytoplasme est coloré. Les cellules hépatiques deviennent plus légères et les particules d'ARN des cellules hépatiques sont réduit significativement. Les GC (Glycoside total de Cistanche) 125mg·kg -1 le groupe de traitement est violet plus foncé dans le noyau des hépatocytes autour de la zone porte lobulaire du foie du groupe blessé, et la teneur en ADN est significativement augmentée, et le cytoplasme est coloré en rouge foncé, ARN La teneur a augmenté significativement.
3 Débat
L'activité SOD des érythrocytes humains diminue significativement avec l'âge et les peroxydes sériques : la teneur a progressivement augmenté [9]. Dans cet article, il a été observé que les GC (Glycoside total de Cistanche) groupe a considérablement amélioré l'activité SOD dans les globules rouges de souris, diminué la teneur en MDA sérique et augmenté la teneur en ARN de la bande des tissus hépatiques et rénaux, indiquant que les GC (Glycoside total de Cistanche) peut compléter la consommation de SOD Ou réduire la diminution de l'activité de la SOD, améliorant ainsi la capacité à piéger les radicaux libres endogènes, ralentissant le taux deperoxydation lipidiquedans le corps, améliorant la capacité antioxydante et réduisant les dommages des radicaux libres à l'acide nucléique et à d'autres macromolécules biologiques, incitant l'effet protecteur du CGS (Glycoside total de Cistanche) sur les acides nucléiques est liée à saperoxydation anti-lipidiqueeffet. Cela suggère également que les GC (Glycoside total de Cistanche) peut avoir pour effet de favoriser la synthèse des acides nucléiques et de ralentir la décomposition et la destruction des acides nucléiques, et de favoriser davantage la synthèse des protéines, contribuant ainsi à la production de substances immunitaires, à accélérer la réparation et la régénération des cellules tissulaires et à améliorer la défense de l'organisme capacités [6], son mécanisme d'action doit être étudié en profondeur. Il a été rapporté dans la littérature que l'amélioration de la fonction immunitaire du corps peut retarder le vieillissement prématuré, et la nature du vieillissement est étroitement liée au métabolisme des acides nucléiques [10]. Par conséquent, combiné avec leperoxydation anti-lipidiqueet les effets de renforcement immunitaire des GC (TGlycoside total de Cistanche), cela suggère que les GC (Glycoside total de Cistanche) ontperoxydation anti-lipidiqueet des effets d'amélioration immunitaire.TotalGlycoside de Cistanchea des effets anti-âge.
Figure 2 Effet des GC (Total Glycoside of Cistanche) sur la morphologie des tissus hépatiques de souris irradiées
Après que le corps est irradié avec60Co, un grand nombre de radicaux libres d'oxygène toxiques peuvent être produits, provoquant une forteperoxydation lipidiqueréaction, détruisant les acides nucléiques, les protéines, les enzymes et autres macromolécules biologiques, et causant des dommages cellulaires et tissulaires [11]. On constate que l'effet néfaste deradiationest étroitement lié àperoxydation lipidique. Les GC(Glycoside total de Cistanche) groupe de traitement dans cette expérience peut favoriser de manière significative la récupération de l'activité SOD dans les globules rouges des souris irradiées et la récupération de la teneur en acides nucléiques de la rate, et inhiber le foieperoxydation lipidique. Formation. Il montre que leradiationeffet protecteur des GC (Glycoside total de Cistanche) est important pour prévenir les dommages causés par les radicaux libres. L'histomorphologie montre également que les GC (Glycoside total de Cistanche) peut restaurer la structure du foie et de la rate endommagée aprèsirradiation, et peut favoriser la récupération des acides nucléiques, suggérant que l'effet radioprotecteur des GC (Glycoside total de Cistanche) est aussianti-lipidique Peroxydationest lié, et son mécanisme doit être exploré plus avant.
4 références
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