Polysaccharides cistanche du Xinjiang : capables d’éliminer les espèces réactives de l’oxygène et les radicaux libres
Jul 23, 2025
abstrait
L'activité antioxydante du polysaccharide Cistanche deserticola in vitro a été étudiée. En prenant l'acide ascorbique comme contrôle, en prenant la réaction de type Fenton pour produire des radicaux hydroxyles, la réaction d'autoxydation de la dopamine pour produire des radicaux anions superoxyde, la réaction de l'hypochlorite de sodium avec le peroxyde d'hydrogène pour produire de l'oxygène singulet, les radicaux diphényl hydrazine amer comme modèle expérimental, les effets des polysaccharides de Cistanche deserticola sur les radicaux anions superoxyde, les radicaux hydroxyles DPPH · radical libre (radical diphényl hydrazine amer), le effet récupérateur de l’oxygène singulet. Les résultats ont montré que les polysaccharides de Cistanche deserticola avaient des effets piégeurs évidents sur les radicaux libres ci-dessus, et que l'effet piégeur était positivement corrélé à la concentration de polysaccharides.
Mots-clés :Cistanche désertique; Polysaccharide ; Radical libre
1 .Présentation
Le corps produit en permanence divers radicaux libres réactifs d'oxygène (ROS) au cours du métabolisme oxydatif des activités vitales, qui sont les produits intermédiaires de la réaction d'oxydo-réduction du métabolisme aérobie.La recherche a montré qu'un excès de radicaux libres attaquera les macromolécules de la vie et divers organites, provoquant divers dommages au niveau moléculaire, au niveau cellulaire, au niveau des tissus et des organes, accélérant le processus de vieillissement du corps et induisant des maladies telles que la thrombose, le diabète, l'athérosclérose, les tumeurs, etc.. [1]. En raison de la toxicité des antioxydants chimiquement synthétisés pour le corps humain, la recherche d'antioxydants naturels à haute efficacité et faible toxicité capables d'éliminer les radicaux libres d'oxygène est devenue un sujet de recherche brûlant dans les domaines de la médecine, de l'alimentation, du génie chimique et d'autres domaines ces dernières années.
Cistanche désertique (Y.C...)est une médecine traditionnelle chinoise rare et est connue sous le nom de « ginseng du désert » [2]. Cistanche désertique male polysaccharide est l'un des principaux composants bioactifs de Cistanche deserticola, mais il n'existe aucun rapport indiquant si le polysaccharide de Cistanche deserticola a pour effet d'éliminer les radicaux libres. Dans cet article, les effets de piégeage du polysaccharide Cistanche deserticola sur le radical anion superoxyde, le radical hydroxyle, le radical libre DPPH · et l'oxygène singulet ont été déterminés par analyse spectrale pour évaluer son activité antioxydante et fournir une base scientifique pour le développement et l'utilisation complets de cette ressource naturelle.
Cistanche aux herbes chinoises
2. Partie expérimentale
2.1 Instruments et réactifs
UV-2401 Spectrophotomètre UV-visible (Simadzu, Japon) ; Luminomètre à tube ultra-sensible LumatLB9507 (Allemagne
BertholdTechnologies); RE-52CS évaporateur rotatif (usine d'instruments biochimiques de Shanghai Yarong) ; Bain-marie thermostatique électronique HW-SY (Jintan Xinhang Instrument Factory) ; PHS-3C pH-mètre (Shanghai Precision Scientific Instrument Co., Ltd.) ; DZF-6020 étuve de séchage sous vide (Shanghai Yiheng Technology Co., Ltd.). Cistanche deserticola : achetée auprès de Kuitun Pharmaceutical Corporation. Le Luminol (Sigma, USA), la dopamine (Institut chinois pour le contrôle des produits pharmaceutiques et biologiques), FeSO4, EDTA, vitamine C, H2O2, NaClO, Na2CO3, NaHCO3, etc., sont tous des réactifs analytiques nationaux. L'eau expérimentale est de l'eau distillée par échange d'ions.
2.2 Méthode expérimentale
2.2.1 Méthode d'extraction du polysaccharide Cistanche deserticola
Prenez 30 g de poudre de Cistanche deserticola et mettez-la dans une fiole conique de 500 mL. Plongez-le dans une solution chaude d'éther de pétrole (60 à 90 degrés), d'éther et d'éthanol à 80 % (30 degrés) pendant 6 heures, respectivement, et le résidu est volatilisé pour sécher le solvant. Trempez les résidus du filtre dans l'eau dans un rapport de 1:10 pendant 24 heures, chauffez-les à 30 degrés et extrayez-les pendant 100 minutes. Après extraction, centrifuger pour obtenir le surnageant. Après concentration du surnageant sous pression réduite, il est précipité avec de l'éthanol à 95%, 3 fois le volume. Il est laissé au repos pendant 24 heures à 4 degrés. Après centrifugation, il est récupéré et précipité. Après séchage sous vide, le polysaccharide brut de Cistanche deserticola peut être obtenu. Pesez 1,00 g de polysaccharide brut, dissolvez-le avec de l'eau et mettez-le dans une fiole jaugée de 50 ml en attente.
Ginseng du désert-Antioxydant
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2.2.2 Test sur la capacité de piégeage du polysaccharide de Cistanche deserticola vis-à-vis de l'O2 · des radicaux libres
La capacité de piégeage du polysaccharide Cistanche deserticola à O-2 · a été testée par la production de radicaux libres superoxydes (O-2 ·) à partir de l'autoxydation de la dopamine [3]. Ajoutez 3,0 ml de solution tampon carbonate 0,1 mmol/LpH=10.12, 3,0 ml d'eau et 0,5 ml de solution d'échantillon de polysaccharide de différentes concentrations dans le tube à essai de séchage avec du tartre tour à tour. Après préchauffage dans un bain-marie à 30 degrés pendant 5 minutes, ajoutez 1,0 ml de dopamine à 2,0 mmol/L préchauffée dans un bain-marie à 30 degrés, mélangez et chronométrez immédiatement, maintenez la réaction à 30 degrés pendant 5 minutes et arrêtez immédiatement la réaction avec 2 gouttes de 10 mol/L de HCl. Utilisez la solution tampon comme référence, mesurez l'absorbance (échantillon A) à 221 nm, remplacez l'échantillon (blanc A) par 0,5 ml d'eau dans le groupe blanc et remplacez l'échantillon par 0,5 ml d'acide ascorbique dans le groupe témoin, mesurez chaque échantillon trois fois en parallèle et prenez la valeur moyenne. O-2 taux de liquidation (%)=(Un blanc - Un échantillon)/Un blanc × 100 %
2.2.3 Test sur la capacité de piégeage du polysaccharide de Cistanche deserticola contre les radicaux libres · OH
Dcistanche vivante du désert-Antioxydant
Le système EDTA-Fe (Ⅱ) - bleu de méthylène - H2O2 a été utilisé pour tester la capacité de piégeage du polysaccharide Cistanche deserticola sur le radical hydroxyle. Le principe est que l'EDTA-Fe (Ⅱ) réagit avec le peroxyde d'hydrogène pour produire des radicaux libres · OH, ce qui réduit le pic d'absorption caractéristique de la solution de bleu de méthylène à 660 nm.
Ajouter 1,0 ml de solution LFeSO4 à 5 mmol/L, 1,2 ml de solution LEDTA à 5 mmol/L, 2,0 ml de solution tampon NaH2PO4-Na2HPO4 (pH=7.4) à 0,03 mol/L et 1,3 ml de solution de peroxyde d'hydrogène à 20 mmol/L dans une série de tubes à essai de 10 ml avec bouchons, bien agiter, ajouter 0,7 ml de solution de bleu de méthylène à 0,2 mmol/L, puis ajouter 1,0 ml de la solution à tester et de la vitamine C1,0 de différentes concentrations respectivement, diluer à 10,00 ml avec de l'eau, bien mélanger, conserver à 37 degrés pendant 30 minutes et mesurer la valeur d'absorbance de chaque solution à 660 nm. Le groupe vierge a remplacé la solution échantillon par de l'eau. Chaque échantillon doit être mesuré trois fois en parallèle et la valeur moyenne doit être prise. · Taux d'élimination des radicaux OH de l'échantillon (%)=[(A2-A1)/(A0-A1) × Dans la formule de 100 % : A0 -- valeur d'absorbance du tube non endommagé ; Une valeur d'absorbance 1 - du tube endommagé ; A2 -- Valeur photométrique après ajout de l'échantillon.
2.2.4 Test sur DPPH · capacité de piégeage du polysaccharide Cistanche deserticola
Prenez 0,1 ml de solution de polysaccharide Cistanche deserticola et ajoutez-le à 5,0 ml de solution DPPH ·, mélangez-le rapidement et laissez reposer 10 minutes à température ambiante.
Déterminez son changement d’absorbance à une longueur d’onde de 517 nm [4]. Chaque échantillon doit être mesuré trois fois en parallèle et la valeur moyenne doit être prise. Le taux de clairance de l'échantillon de DPPH · (%)=1 - [(AB)/A0] × Dans la formule de 100 % : A0 -- valeur d'absorbance de DPPH · (1,9 mLDPPH ·+0.1mL d'éthanol à 50 %) sans échantillon ; A - valeur d'absorbance de l'échantillon après réaction avec DPPH · ; B - valeur d'absorbance de l'échantillon à blanc (échantillon 0,1 mL+1.9mL d'éthanol à 50 %).
2.2.5 Test d'oxygène 1O2 singulet piégeant le polysaccharide de Cistanche deserticola
L'oxygène monoligne (1O2) est produit par la réaction chimique de NaClO et H2O2 à 37 degrés [5]. La solution utilisée pour la détermination de 1O2 est une solution de NaClO de 100 μL2,8 mmol/L, 400 μL de solution de 5 mmol/NaOH, 300 μL de solution de 10 mmol/H2O2 et 50 μL de solution de 1 mmol/L/Luminol. Pendant la réaction, la solution réactionnelle est ajoutée à la solution échantillon et l'instrument de chimiluminescence enregistre automatiquement le processus de réaction en même temps. Prenez NaClO-H2O2-NaOH-Luminol comme contrôle à blanc. Démarrez la réaction et ajoutez la solution réactionnelle dans le tube d'échantillon provenant du flacon de stockage de l'instrument de chimiluminescence selon la quantité définie par la procédure. Ensuite, l'intensité de chimiluminescence du mélange réactionnel est enregistrée sur le papier d'enregistrement toutes les 5 secondes, chaque échantillon est mesuré trois fois en parallèle et la valeur moyenne est prise.
Le taux de dégagement est calculé selon la formule suivante : taux de dégagement (%) = (intensité lumineuse de contrôle - intensité lumineuse de l'échantillon)/intensité lumineuse de contrôle × 100 %
3 Résultats et discussion
3.1 Effet récupérateur du polysaccharide Cistanche deserticola sur O-2 ·
Avantages de la cistanche tubulosa-Antioxidant
La propriété chimique de O-2 · est active, ce qui peut amener les acides gras présents sur le biofilm à produire du peroxyde, puis à détruire les cellules [6]. Dans cet article, la méthode dopaminergique a été utilisée pour déterminer la capacité de piégeage de l'O2 ·. La capacité de piégeage de Cistanche deserticola en O2 · est illustrée à la figure 1. Les résultats ont montré que le polysaccharide de Cistanche deserticola pouvait inhiber l'O2 · produit par l'autoxydation de la dopamine et augmentait avec l'augmentation de la concentration dans la plage de concentrations mesurée (0-8 mg/mL), mais la capacité de piégeage était inférieure à celle de l'acide ascorbique.
3.2 Effet récupérateur du polysaccharide Cistanche deserticola · OH
·OH est l'un des radicaux libres d'oxygène les plus actifs parmi les espèces d'oxygène actif. Il peut réagir avec presque toutes les macromolécules biologiques des cellules vivantes et conduire à des processus biochimiques tels que la peroxydation lipidique, la polymérisation des protéines, la dépolymérisation, la rupture des acides nucléiques, etc. dans les tissus corporels, provoquant des maladies tissulaires et cellulaires, conduisant à l'apparition de diverses maladies et accélérant le vieillissement du corps [7]. La capacité de piégeage du polysaccharide de Cistanche deserticola sur · OH est illustrée dans la figure 2. Les résultats ont montré que le polysaccharide de Cistanche deserticola avait un bon effet de piégeage sur · OH, et il augmentait avec l'augmentation de la concentration.
3.3 La capacité de piégeage du polysaccharide Cistanche deserticola vis-à-vis du DPPH ·
DPPH · (radical diphényl amer hydrazine) est un radical libre stable, qui est violet dans les solvants organiques et a une forte absorption près de 517 nm. Après l'ajout d'antioxydants, certains radicaux libres sont éliminés, ce qui affaiblit l'absorption, ce qui peut être utilisé pour évaluer l'activité antioxydante de cette substance [8]. Voir la figure 3 pour la capacité de piégeage DPPH · du polysaccharide Cistanche deserticola. Les résultats expérimentaux ont montré que la capacité de piégeage du polysaccharide Cistanche deserticola sur DPPH · était positivement corrélée à sa concentration et que la capacité de piégeage était supérieure à celle de l'acide ascorbique.
3.4 Capacité de récupération du polysaccharide de Cistanche deserticola en 1O2
L'oxygène monoligne est de l'oxygène moléculaire excité doté de propriétés chimiques actives. Parce que les électrons non appariés ont tendance à s'apparier, les radicaux libres présentent des propriétés chimiques plus actives [9]. La capacité de piégeage du polysaccharide de Cistanche deserticola en 1O2 est illustrée à la figure 4. Les résultats expérimentaux ont montré que la capacité de piégeage du polysaccharide de Cistanche deserticola était inférieure à celle de l'acide ascorbique dans la plage de 0 à 4,0 mg/mL, et la capacité de piégeage du polysaccharide de Cistanche deserticola était supérieure à celle de l'acide ascorbique lorsque la concentration était supérieure à 4,0 mg/mL.
4. Conclusion
L'activité antioxydante des polysaccharides de Cistanche deserticola in vitro a été étudiée en détail à travers différents systèmes réactifs de radicaux libres sans oxygène.D'après les résultats expérimentaux, on peut voir que dans la plage de concentrations expérimentales, l'extrait polysaccharidique de Cistanche deserticola a des effets de piégeage sur O2 ·, · OH, DPPH · et 1O2, et que les effets de piégeage sont différents selon les systèmes.Les résultats ont montré queLe polysaccharide Cistanche deserticola est un antioxydant naturel exogène efficace, qui mérite des recherches, un développement et une utilisation complète..
Cistanche 200 mg-Antioxidant
référence
[1] Ling Guanting. Alimentation antioxydante et santé [M]. Pékin : Chemical Industry Press, 2004.1-58.
[2] Gao Ming, Tian Ziyu, Cai Hongmei et al. Extraction alcaline et analyse chimique des polysaccharides de Cistanche deserticola [J]. Sciences et technologies agricoles et alimentaires, 2008,2 (3) : 32-34.
[3] Shi Shuangqun, Song Xinfang. L'autoxydation de la dopamine [J]. Journal de l'Université normale du Hebei, 1997,21 (4) : 387-389.
[4] Zhang Zeqing, Tian Yingjuan, Zhang Jing. Étude sur l'activité antioxydante du polysaccharide Fangfeng [J]. Médecine chinoise, 2008,31 (2) : 268-271.
[5] Li Haiping, Zhang Shuhai, Zhang Kunsheng. Etude sur l'activité antioxydante du lentinan [J]. Recherche et développement alimentaires, 2008,29 (4) : 56-60.
[6] Mo Jian. Introduction à la biologie médicale des radicaux libres [M]. Pékin : Maison d'édition de la santé du peuple, 1989.21-25.
[7]FrederickVL.FreeRadicals[J].ClinicalChemistry,1993,65(12):374-377.
[8] MatsudaM, NagahamaY, SatoTetal.DMY est un gène de domaine DM spécifique requis pour le développement masculin chez le poisson Medaka [J]. Nature, 2002, 30 : 559-563.
[9]KanofskyJR.SingletOxygenProductionbyLactoperoxydase[J].JournalofBiologicalChemistry,1983,258(10):5991-5993.
