Abstrait

Arrière-plan: Les constituants phytochimiques et les activités biologiques de Rosa rugosa Thunb. var. plena Regal flower cell sap (RFCS) ont été étudiés.

Selon des études pertinentes,cistancheest une herbe commune qui est connue comme "l'herbe miracle qui prolonge la vie". Son composant principal estcistanoside, qui a divers effets tels queantioxydant, anti-inflammatoire, etpromotion de la fonction immunitaire. Le mécanisme entre le cistanche et le blanchiment de la peau réside dans l'effet antioxydant du cistancheGlycosides. La mélanine de la peau humaine est produite par l'oxydation de la tyrosine catalysée parTyrosinase, et la réaction d'oxydation nécessite la participation d'oxygène, de sorte que les radicaux sans oxygène dans le corps deviennent un facteur importantaffectant la production de mélanine. Cistanche contient du cistanoside, qui est un antioxydant et peut réduire la génération de radicaux libres dans le corps, ainsiinhibant la production de mélanine.

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Méthodes :Les constituants volatils, tels que le linalol, l'alcool phényléthylique, le citronellol et le -bisabolol, ont été identifiés par GCMS. Les teneurs en hyperoside, kaempférol-3-O-rutinoside, rutine et lutéoline ainsi que la teneur totale en flavonoïdes dans les RFCS ont été déterminées par HPLC et HPLC-MS. La teneur en polyphénols totaux a été évaluée par la méthode colorimétrique de Folin-Ciocalteu. Les activités antioxydantes du RFCS et des standards ont été évaluées par des tests de piégeage des radicaux DPPH et ABTS. Les activités inhibitrices de la tyrosinase des échantillons de rose et de la substance standard ont été déterminées par une méthode spectrophotométrique. Les effets antimicrobiens des RFC ont été évalués en termes de concentrations minimales inhibitrices (MIC) et de concentrations minimales bactéricides (MBC) ou de concentrations minimales fongicides (MFC).

Résultats:La fraction rose présentait une teneur élevée en ingrédients biologiquement actifs. La teneur totale en composés volatils du RFCS était d'environ 48,21 ± 2,76 ng/mL. La teneur totale en acide phénolique et la teneur totale en flavonoïdes étaient de 0.31 ± 0.01 mg/mL et 0.43 ± 0,01 mg/mL, respectivement. Sa valeur IC50 dans le test DPPH était de 1120 ± 42 ug/mL, et sa valeur IC50 pour l'activité de piégeage des radicaux ABTS était de 1430 ± 42 ug/mL.RFCS a fortement inhibé l'oxydation de la L-tyrosine avec une valeur IC50 de 570 ± 21 ug/mL . Chaque composé identifié dans le RFCS a présenté une activité antimicrobienne à large spectre. F. nucleatum était le plus sensible au RFCS avec une CMI de 64 ug/mL et un MBC de 250 ug/mL.

Conclusion :En raison de son arôme de rose, l'alcool phényléthylique peut être combiné avec du linalol pour être utilisé comme agent naturel de blanchiment de la peau et additif de soin de la peau dans les industries pharmaceutiques.

Mots clés:RFCS, Constituants phytochimiques, Antioxydant, Antimicrobien, Activités inhibitrices de la tyrosinase

Arrière-plan

La fleur de Rosa rugosa Thunb. var. plena Regal n'est pas seulement utilisé dans la production de parfums, mais est également utilisé comme aliment de santé et médicament dans les pays asiatiques depuis des milliers d'années. De plus, les roses contiennent des matières actives, telles que des huiles essentielles, des polyphénols, des flavonoïdes et des anthocyanes, qui sont connues pour leurs activités antimicrobiennes, anti-inflammatoires, hypoglycémiques et antioxydantes [1–4]. Les roses peuvent être consommées sous de nombreuses formes, telles que les thés à la rose, les biscuits à la rose et les huiles de rose. La production de thé à la rose ou de pétales de fleurs séchées par séchage à basse température de fleurs de rose (Rosa rugosa cv. Plena) donne un condensat appelé "sève de cellule de fleur de rose" (RFCS). L'élimination de RFCS représente un grand gaspillage de ressources en raison de sa forte teneur en polyphénols et en huile essentielle de rose, qui a une activité biologique très élevée. De plus, une pollution de l'environnement peut être causée par une mauvaise élimination des RFCS car ils sont difficiles à décomposer. De plus, les huiles essentielles et les polyphénols sont des ingrédients actifs dans les industries pharmaceutiques, cosmétiques et alimentaires. Le séchage de 1 kg de pétales de rose bruts ou de bourgeons floraux peut produire environ 0,2 L de condensat. Environ 40 000 kg de boutons floraux de rose et 20 000 kg de pétales sont utilisés par cycle de séchage industriel par micro-ondes rien qu'à Pingyin. À ce jour, aucune étude n'a rapporté de méthode appropriée pour l'élimination des RFCS et des composés bioactifs qu'ils contiennent.

Les eaux usées de distillation d'huile de rose (RODW) sont un autre sous-produit de la distillation à la vapeur de fleurs de rose séchées pour produire de l'huile de rose. Dans des études antérieures, le RODW a été concentré pour générer un résidu enrichi en polyphénols contenant des composés phénoliques non volatils [5]. De plus, la fraction polyphénol de RODW peut fortement inhiber la tyrosinase de champignon (valeur IC50 de 0,41 ug/mL) [6]. Ainsi, les polyphénols de RODW peuvent être utilisés comme substance bioactive pour soulager l'hyperpigmentation.

Les bactéries pathogènes liées aux aliments provoquent des maladies d'origine alimentaire chez des millions de personnes et même des centaines de décès chaque année aux États-Unis seulement, et le coût associé totalise environ 2,4 milliards de dollars [7]. Ainsi, la demande croissante d'agents antimicrobiens sains, non toxiques et efficaces a inspiré la recherche sur les additifs alimentaires multifonctionnels produits naturellement. Bien que l'huile de rose contienne principalement des huiles essentielles connues pour leurs activités antimicrobiennes [8], les effets antimicrobiens des RFC n'ont pas été étudiés.

Les composés phénoliques et les substances volatiles des fleurs ont de fortes activités biologiques telles que des effets antioxydants et inhibiteurs de la tyrosinase [9]. Le développement de méthodes supplémentaires pour inhiber l'activité de la tyrosinase est un domaine de recherche actif dans les industries cosmétiques fonctionnelles et alimentaires en raison de l'effet blanchissant de la tyrosinase et de sa capacité à contrôler le brunissement [10, 11]. Les antioxydants peuvent réduire les risques de problèmes de santé tels que le cancer, le vieillissement et l'athérosclérose en réduisant le niveau d'espèces réactives de l'oxygène (ROS) [12]. Certains antioxydants, tels que l'acide ascorbique, auraient également des effets blanchissants [11].

Dans notre test préliminaire, les activités antimicrobiennes, antioxydantes et inhibitrices de la tyrosinase de RODW de Rosa rugosa Thunb. var. plena Regal a été évalué [13]. Cependant, il n'y a pas de rapports dans la littérature étudiant la composition phytochimique et les activités biologiques des RFC de Rosa rugosa cv. Pléna. Dans cette étude, (1) les contenus des composés phénoliques totaux, des flavonoïdes, des contenus totalement solides et volatils ont été étudiés ; (2) l'activité antibactérienne (six souches) et antifongique (une souche), les activités antioxydantes et inhibitrices de la tyrosinase de chaque composé actif et RFCS ont été examinées. Nos résultats contribueront à améliorer la valeur des roses dans les domaines des produits médicinaux et cosmétiques [13–16].

Méthodes

Produits chimiques

L'alcool phényléthylique, le -bisabolol, le -terpinéol, le citronellol, le nitrate de miconazole, le chlorhydrate de tétracycline, le menthol et le camphre ont été achetés auprès de J&K Scientific Ltd. (Beijing). L'acide kojique, l'hyperoside, la quercétine, l'acide gallique, le kaempférol-3-O-acétylglucosylrhamnoside et le kaempférol-3-O-glucoside ont été achetés auprès de Sigma (Shanghai, Chine). Le milieu de base de gélose au sang anaérobie (CDC), le milieu de bouillon d'actinomycètes (bouillon GAM), le bouillon d'infusion cœur-cervelle (BHI) et la gélose nutritive ont été obtenus auprès de Suolaibao Biotech Co., Ltd. (Pékin, Chine). Les produits chimiques restants étaient de qualité analytique ou chromatographique.

La préparation des échantillons 

RFCS de Rosa rugosa Thunb. var. plena Regal a été obtenu auprès de Fragrant Rose Biological Technology Co., LTD à Pingyin. Les échantillons ont été filtrés à travers une membrane de microfiltration 0.42 μm avant les analyses. La teneur totale en solides du RFCS a été évaluée par lyophilisation. L'identification de Rosa rugosa Thunb. var. plena Regal a été identifié par l'agronome principal Guo et confirmé dans un échantillon de référence (Ser. No. 0712) déposé à l'Herbier, Pingyin Institute of Rose Sciences.

Analyses HPLC

La concentration des constituants polyphénoliques dans l'extrait a été déterminée par des analyses HPLC et UV. L'appareil HPLC était un système HPLC LC-20A (Shimadzu Corporation, Kyoto, Japon), et il était équipé d'une colonne Ultrasphere 5 C18 (4,6 mm × 250 mm, Ultrasphere Co., Ltd., Berkshire, Royaume-Uni ). La phase mobile était une élution par gradient d'eau (A) et d'acétonitrile (B) et était programmée comme suit : en commençant par 10 % de B pendant 10 min, 10 à 25 % de B entre 15 et 20 min, 25 à 30 % de B entre 20 et 25 min, 30 à 60 % de B entre 25 et 50 min, 60 à 10 % de B entre 50 et 51 min et 10 % de B entre 51 et 55 min. Le débit de la phase mobile a été maintenu à 1 mL/min, la longueur d'onde du détecteur a été réglée à 350 nm, le four à colonne a été réglé à 25 degrés et le volume d'injection d'échantillon était de 10 μL.

Conditions HPLC-ESI-MS

Les données de spectrométrie de masse (MS) à ionisation par électropulvérisation (ESI) ont été enregistrées sur un instrument Agilent-LC-1100 (Agilent, USA). Les conditions HPLC pour l'analyse HPLC-ESI-MS étaient telles que décrites ci-dessus. Les paramètres ESI étaient les suivants : le débit de gaz de collision (N2) était maintenu à 10 mL/min, le four à colonne était à 25 degrés, les données étaient acquises en mode ions négatifs [MH]−, les balayages étaient effectués sur m/z 50 –2000, la tension de pulvérisation était de 4,5 kV, la tension capillaire était de 10 V et la température capillaire était de 250 degrés. Les composants de l'échantillon ont été identifiés en fonction de leurs données spectrales de masse et de leur temps de rétention.

Analyse GC/MS

Les constituants volatils du RFCS ont été déterminés par un système Shimadzu GC/MS modèle QP2010 Ultra équipé d'un Rtx-5MS (30 m × 0,25 mm, épaisseur de film 0,25 μm) colonne capillaire. Le programme du four était le suivant : départ à 60 degrés, chauffage à 120 degrés à une vitesse de 1,7 degrés C/min, chauffage à 200 degrés à 2,5 degrés/min, chauffage à 260 degrés à une vitesse de 8 degrés/min, et tenant enfin à 260 degrés pendant 2 min. L'hélium a été utilisé comme gaz porteur et le débit était de 1,0 mL/min. Les températures de l'injecteur et du détecteur ont été maintenues à 250 degrés et 280 degrés, respectivement. Une injection fractionnée a été réalisée en mode sans division. La température de la source d'ions était de 250 degrés et son énergie d'ionisation était de 70 eV. La gamme de masse était de 35 à 500 Da. Les composants de l'échantillon ont été identifiés en fonction de leurs données spectrales de masse et de leur temps de rétention.

Préparation des courbes standard

Des solutions d'alcool phényléthylique (2,23 mg), de -bisabolol (2,1 mg), de -terpinéol (5,23 mg), de citronellol (1,52 mg), de menthol (1,32 mg) et de camphre ont été préparées séparément dans 1 ml d'acétonitrile. Ensuite, les solutions mères ont été diluées par des facteurs de dix mille à un milliard avec de l'acétate d'éthyle, et 1 μL de chaque échantillon a été analysé par GS/MS. Des solutions d'acide kojique (1,12 mg), d'hyperoside (1,07 mg), de quercétine (1,07 mg), d'acide gallique (1,29 mg) et de kaempférol-3-O-acétylglucosylrhamnoside (1,15 mg) ont été préparées séparément dans 1 mL de méthyl alcool. Les solutions mères ont été diluées par des facteurs de 2 avec de l'alcool méthylique, et 10 μL de chaque solution ont été analysés par HPLC. Chaque concentration de la solution de travail a été analysée trois fois. Les courbes d'étalonnage ont été tracées comme les aires des pics par rapport à la concentration de chaque standard. La teneur en substance de référence dans chaque échantillon a été calculée à l'aide des courbes d'étalonnage.

Détermination des composés phénoliques totaux, des flavonoïdes et de la teneur totale en solides

Les contenus phénoliques totaux des RFCS ont été évalués par la méthode colorimétrique de Folin-Ciocalteu [17]. La teneur totale en substance phénolique a été déterminée par comparaison à une courbe étalon d'acide gallique. La teneur totale en flavonoïdes des échantillons RFCS a été évaluée par HPLC, qui a fourni la quantité totale de tous les composés flavonoïdes testés. Un échantillon de 10- mL de RFCS a été lyophilisé pour déterminer la teneur totale en solides. Chaque détermination a été réalisée en triple exemplaire.

Propriétés antioxydantes

Activité de piégeage des radicaux DPPH

L'activité antioxydante du RFCS et des normes a été évaluée par l'activité de piégeage des radicaux DPPH en utilisant une version légèrement modifiée d'une méthode précédemment rapportée [18]. En bref, des aliquotes de 10 μL des échantillons de rose (1000 ug/mL à 62,5 ug/mL) ont été mélangées avec 190 μL d'éthanol à 50 % contenant 0,4 mM de DPPH et incubées dans l'obscurité pendant 30 minutes. Des aliquotes (100 μL) des surnageants ont été transférées dans une microplaque 96-puits, et l'absorbance de chacun a été enregistrée à 517 nm à l'aide d'un spectrophotomètre UV-Vis Spectramax Plus384 (Molecular Devices, Sunnyvale, Californie, États-Unis). L'acide ascorbique (1000 ug/mL à 0,05 ug/mL) a été utilisé comme témoin positif, et une solution de DPPH sans échantillon a été utilisée comme témoin négatif. Les valeurs IC50, qui représentent les concentrations d'échantillons de rose et de substance standard auxquelles 50 % du radical DPPH ont été inhibés, ont été déterminées. Les tests ont été réalisés en triple, et le pourcentage de piégeage du DPPH a été calculé à l'aide de l'équation suivante.

Détermination du piégeage des radicaux ABTS

Le test ABTS de RFCS a été réalisé selon une version modifiée d'une méthode précédemment rapportée [19]. En bref, les solutions mères ont été générées en mélangeant des quantités égales de solution 7,4 mM d'ABTS● plus et de solution de persulfate de potassium 2,6 mM, et le mélange a été incubé à température ambiante pendant 12 h dans l'obscurité. Ensuite, la solution a été équilibrée avec 1 mL d'ABTS● plus une solution contenant 50 % d'éthanol servant de contrôle positif. L'absorbance de la solution à 734 nm était de 1,17 ± 0.02 unités. Des aliquotes (10 μL) des échantillons de rose (1000 ug/mL à 62,5 ug/mL) ont été mélangés avec 1,0 mL de la solution ABTS• plus diluée. Le mélange a été mélangé vigoureusement et incubé à 30 degrés pendant 30 min. L'absorbance a ensuite été mesurée à 520 nm avec une longueur d'onde d'excitation de 734 nm à l'aide du spectrophotomètre. Le standard positif était Trolox (2000 ug/mL à 0,05 ug/mL).

Inhibition( pourcentage )={(Absorbance du blanc - Absorbance de l'échantillon)/Absorbance du blanc} × 100

Détermination de l'activité inhibitrice de la Tyrosinase

Les activités inhibitrices de la tyrosinase des échantillons de rose et de la substance standard ont été déterminées par une méthode spectrophotométrique [17]. Tout d'abord, des aliquotes de 300 μL de différentes concentrations (1000 ug/mL à 62,5 ug/mL) de chaque échantillon ont été diluées avec 700 μL de 0,175 Du tampon phosphate de sodium M (pH 6,8), puis 1,0 ml de solution de DOPA 10 mM et 1,0 ml de tyrosinase de champignon (220 unités/ml) ont été ajoutés. L'éthanol (300 μL, 50 pour cent) et l'acide kojique (2000 ug/mL à 0,1 ug/mL) ont été utilisés comme référence à blanc et standard positif, respectivement. Le mélange réactionnel a été vortexé et maintenu à 37 degrés pendant 15 minutes, puis le maximum d'absorption du dopachrome (fixé à 479 nm) a été mesuré à l'aide d'un lecteur de microplaques (Molecular Devices, Sunnyvale, Californie, États-Unis). Les tests ont été réalisés en triple, et la valeur de l'activité d'inhibition de la tyrosinase a été calculée comme décrit ci-dessus.

Propriétés antimicrobiennes

Dosages antibactériens et antifongiques

L'activité antimicrobienne a été mesurée par la méthode décrite par Xue [20]. Toutes les souches standard ont été obtenues auprès du Guangdong Microbiology Culture Center (Guangzhou, Chine). Listeria ivanovii (ATCC 19119) a été cultivée en BHI, Salmonella enteritidis (ATCC 14028) Staphylococcus aureus (ATCC 25923) et Escherichia coli (ATCC 25922) ont été cultivées en gélose nutritive (NA) pendant 24 h et à 37 degrés. Candida albicans (ATCC 10231) a été cultivé dans du PHB à 37 degrés pendant 24 h. Propionibacterium acnes (ATCC 6919) et Fusobacterium nucléaire um (ATCC 10953) ont été cultivés dans de la gélose CDC à 37 degrés pendant 48 h dans un incubateur anaérobie YQX-II (Shanghai, Chine). Le nombre final de cellules dans 1 mL de bouillon était d'environ 106 unités formant colonies (UFC/mL). Une solution à 10 mg/mL de nitrate de miconazole et de chlorhydrate de tétracycline dans l'eau a été utilisée comme contrôle positif contre les champignons et les bactéries, respectivement.

Détermination de la concentration minimale inhibitrice (MIC) et de la concentration minimale bactéricide (MBC) ou de la concentration minimale fongicide (MFC)

Les valeurs MIC et MBC ou MFC ont été déterminées comme décrit précédemment par Xue. En bref, des dilutions de 100 μL (environ 100,000 UFC/mL) de Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Salmonella enteritidis, Fusobacterium nucleatum et Candida albicans dans un bouillon nutritif et Listeria ivanovii et Propionibacterium acnes dans un bouillon GMA ont été inoculées dans un bouillon GMA. assiettes. Ensuite, des aliquotes de 100 μL des solutions du composé à tester ont été ajoutées après une dilution en série de deux avec un bouillon nutritif (de 2 mg/mL à 3 ug/mL). Des bouillons avec 5 % (v/v) de DMSO ont été utilisés comme témoins. Les boîtes de Pétri ont été incubées à 37 degrés pendant 24 h à l'exception de Propionibacterium acnes et Fusobacterium nucleatum, qui ont été incubées à 37 degrés pendant 48 h. La CMI a été enregistrée comme la concentration la plus faible de l'échantillon ne montrant aucune croissance détectable. Pour déterminer les valeurs MBC ou MFC pour l'absence de croissance bactérienne ou fongique, 10 μL de concentrations sous-inhibitrices des composés testés ont été incubés sur des plaques de gélose CDC ou GMA pendant 24 ou 48 h. Chaque détermination a été réalisée en triple exemplaire.

L'analyse des données

Les données sont présentées sous forme de moyenne de trois répétitions ± écart type. Une ANOVA à une voie avec le test à plages multiples de Duncan a été utilisée pour analyser les résultats avec SPSS 13.0 et Sigma Plot 10.0, respectivement, à l'aide d'un ordinateur (Lenovo, Yangtian B 41) équipé du système d'exploitation Win 7. Une valeur de p < 0,05 a été déterminée comme étant statistiquement significative.

Résultats et discussion

Le contenu de la substance volatile

Étant donné que les échantillons RFCS avaient un parfum de rose spécifique, nous avons analysé et comparé les composants volatils de son extrait d'acétate d'éthyle. Le contenu des composants volatils de l'extrait d'acétate d'éthyle de RFCS a été déterminé par GC/MS et analysé par comparaison à quatre courbes standard, et les résultats sont exprimés en ng/mL.

Six composants principaux ont été simultanément identifiés en fonction de leurs temps de rétention standard et des fragments d'ions MS. Les chromatogrammes GC de la substance de référence dans les RFC sont illustrés à la Fig. 1. Le contenu de chaque élément dans chaque échantillon est présenté dans le Tableau 1. Comme le montre la Fig. 1, six composés ont été séparés avec succès dans le cadre du programme de gradient de température. La teneur totale en composés volatils dans le RFCS était d'environ 48,21 ± 2,76 ng/mL, et six principaux types de composés volatils, dont l'alcool phényléthylique (40.48 ± 2,24 ng/mL), le citronellol (7,83 ± {{ 16}}.77 ng/mL), -bisabolol (0.08 ± 0,01 ng/mL) et acétate de phényléthyle (11,20 ± 0,89 ng/mL) ont été identifiés (deux pics n'ont pas été identifiée et la teneur en linalol est rare). Dans des études antérieures sur les composés volatils dans RODW, GC-MS, plus spécifiquement HS-SPME/GC/MS, les techniques ont été largement utilisées [13, 21–24]. Contrairement à ces études précédentes, notre étude rapporte le contenu absolu des composants. Bien qu'il y ait une large gamme de composés volatils, il n'y avait aucune différence dans les composants dominants. Les principaux composés volatils des RFCS étaient les alcools monoterpéniques (citronellol, linalol et alcool phényléthylique, qui sont spécifiques aux petites roses). Les types de composants dominants dans les RFC sont similaires à ceux de RODW, mais il existe une différence significative dans le contenu des composants [13]. Une des raisons possibles de ces différences est que la plupart des composants volatils ont été perdus lors du processus de séchage du thé à la rose.

Teneur totale en composés phénoliques, flavonoïdes et solides

Les flavonoïdes, leurs temps de rétention et les courbes d'étalonnage des composés standard dans RFCS, tels que déterminés par HPLC, sont illustrés à la Fig. 2. Quatre composés ont été séparés avec succès dans le cadre du programme de gradient de température, comme indiqué à la Fig. 2. La linéarité de les courbes d'étalonnage et les coefficients de régression des flavonoïdes ont été démontrés dans le tableau 2. Il a été constaté que les composés de référence présentaient une bonne linéarité (R2 supérieur ou égal à 0.997). Le RFCS s'est avéré contenir trois composants principaux, à savoir l'hyperoside (0.18 ± 0.01 mg/mL), le kaempférol{{10}}O -rutinée (0.12 ± 0.{{20}}1 mg/mL) et rutine (0.23 ± 0. 01 mg/mL). La teneur totale en composés phénoliques et la teneur totale en flavonoïdes étaient de 0,31 ± 0,01 mg/mL et 0,43 ± 0,01 mg/mL, respectivement. La teneur totale en solides dans le RFCS était de 1,45 ± 0,04 mg/mL.

Des études antérieures ont rapporté que les composés phénoliques et flavonoïdes dominants dans le thé rose rugosa étaient l'acide gallique, la catéchine, l'épicatéchine et la quercétine et que la teneur totale en polyphénols et la teneur en flavonoïdes dans l'extrait de polyphénols de thé Rosa rugosa étaient de 875,2 mg/g et 610,3 mg/g. , respectivement [1]. De plus, la rutine, la mulflorine B, l'hyperoside, le kaempférol et l'acide ellagique ont également été trouvés dans les fractions de résine de RODW [6]. De plus, contrairement aux études précédentes, bien que notre étude ait utilisé la HPLC-MS pour déterminer les composés phénoliques et flavonoïdes dans RODW, un seul des composés dominants, le kaempférol-3-O-rutinosid, a été trouvé dans cette étude et des études antérieures [6 , 13]. Aucun des composés phénoliques n'a été détecté dans les RFCS par HPLC principalement parce que les concentrations de phénols et de flavonoïdes dans les RFCS sont très faibles, et donc ils sont indétectables par HPLC. Ces solides dans RFCS étaient un mélange de petites molécules.

Capacité antioxydante 

Le tableau 3 présente les valeurs DPPH IC50 du RFCS et des composés standards. Les flavonoïdes avec des valeurs IC50 < 1 ug/mL, y compris l'hyperoside (valeur IC50 de 0.695 ± 0.021 ug/mL ), kaempférol-3-O-rutinoside (valeur IC50 de 0.808 ± 0.024 ug/mL) , rutine (valeur IC50 de 0.715 ± {{60}}.017 ug/mL) et lutéoline (valeur IC50 de 0,507 ± 0,015 ug/mL), ont montré des activités de piégeage des radicaux DPPH plus fortes que les RFCS (valeur IC50 de 1120 ± 42 ug/mL). Les composés volatils simples, tels que le linalol, l'alcool phényléthylique, le citronellol et le -bisabolol, ont montré une faible activité de piégeage des radicaux avec des valeurs IC50 > 10,000 ug/mL. Dans des rapports antérieurs, les activités antioxydantes de divers produits naturels, y compris ceux de la rose, ont été attribuées à la teneur en composés phénoliques [25, 26]. Le dosage radical ABTS est également utilisé pour évaluer l'activité de piégeage des radicaux des antioxydants donneurs d'hydrogène et briseurs de chaîne dans de nombreux produits naturels [27, 28]. Comme indiqué dans le tableau. 3, les activités de piégeage des radicaux ABTS des composés simples et RFCS sont exprimées en ug/mL. Conformément aux travaux antérieurs, les flavonoïdes présentaient des activités anti-radicalaires et des capacités antioxydantes significativement plus élevées que les composés volatils [8, 13]. Dans la présente étude, les résultats du balayage ABTS étaient similaires à ceux du DPPH ; composés flavonoïdes avec des valeurs IC50 < 1 ug/mL, y compris l'hyperoside (valeur IC50 de 0,526 ± 0,014 ug/mL), kaempférol-3-O-rutinoside (valeur IC50 de 0,719 ± 0,016 ug/mL), rutine (valeur IC50 de 0,621 ± 0,024 ug/mL), et la lutéoline (valeur IC50 de 0,436 ± 0,026 ug/mL), ont montré des activités antiradicalaires ABTS plus fortes que RFCS (valeur IC50 de 1430 ± 49 ug/mL). Les composés volatils simples, tels que le linalol, l'alcool phényléthylique, le citronellol et le -bisabolol, ont présenté de faibles activités antiradicalaires (valeurs IC50 > 10,000 ug/mL).

Activités inhibitrices de la tyrosinase

La tyrosinase est une enzyme multifonctionnelle contenant du cuivre présente dans les champignons, les mammifères et les plantes [29]. La tyrosinase a deux activités enzymatiques distinctes, à savoir l'activité monophénolase et l'activité diphénolase [30]. Nous avons mené une première étude des activités inhibitrices de la tyrosinase de la tyrosinase de champignon. Selon ce test, le RFCS a montré de fortes activités inhibitrices de la tyrosinase avec une valeur IC50 de 570 ± 21 ug/mL (tableau 3). Les composés volatils, y compris le linalol, l'alcool phényléthylique, le citronellol et le -bisabolol, ont également montré des effets inhibiteurs de la tyrosinase dépendants de la dose avec des valeurs IC50 de 730 ± 44 ug/mL, 315 ± 13 ug/mL, 825 ± 31 ug/mL et 635 ± 22 ug/mL, respectivement. Tous les composés flavonoïdes, à savoir l'hyperoside, le kaempférol-3-O-rutinosid et même la rutine étaient plus puissants que l'acide kojique (80 ± 17 ug/mL), et ils avaient tous des valeurs IC50 inférieures à 1 ug/mL. Semblable au rapport de Solimine, la fraction enrichie en polyphénols de RODW, qui contient des composés flavonoïdes, présente une activité inhibitrice évidente de la tyrosinase avec une valeur IC50 de 0,41 ± 0,01 ug/mL [6]. Pendant ce temps, les effets inhibiteurs de la tyrosinase de RFCS sont plus forts que RODW de Pingyin [13]. La teneur en flavonoïdes contribue à l'effet inhibiteur global de la tyrosinase de RODW.

Activités antimicrobiennes

Les résultats des études d'activité antimicrobienne des différentes fractions de rose, RFCS, et des antibiotiques standard (tétracycline et chlorhydrate) sont présentés dans le tableau 4. 250 ug/mL. Les valeurs de CMI pour RFCS contre P. acnes et S. aureus étaient de 125 ug/mL. Les valeurs de CMI contre d'autres bactéries étaient de 250 ug/mL. Les valeurs MIC et MBC ou MFC des neuf composants du RFCS ont été déterminées pour identifier les constituants responsables des effets antimicrobiens du RFCS. L. ivanovii et F. nucleatum se sont avérés être les plus sensibles au -bisabolol, et ils ont montré des valeurs de CMI de 8 ug/mL et des valeurs de MBC de 32 ug/mL contre ces espèces (tableau 4). Après -bisabolol, l'alcool phényléthylique a montré les valeurs les plus basses de CMI et MBC ou MFC parmi tous les constituants du RFCS. Dans l'ensemble, les constituants volatils ont joué un rôle plus important que les composés flavonoïdes dans l'activité antimicrobienne des RFCS.

Des enquêtes antérieures sur les effets antimicrobiens des différentes fractions de rose ont rapporté des résultats similaires [8, 28, 31]. L'huile essentielle et divers extraits de rose, y compris l'extrait aqueux, l'extrait d'éthanol, l'extrait de chloroforme, la fraction d'acétate d'éthyle et la fraction de butanol, présentent des activités antimicrobiennes à large spectre. À l'exception de la fraction d'acétate d'éthyle, l'huile essentielle de rose est comparativement plus active contre les bactéries testées [28]. Les huiles absolues et essentielles de rose contiennent des niveaux élevés de polyphénols et d'alcool phényléthylique, qui se traduisent par des propriétés antimicrobiennes exceptionnelles [8]. Parce que la teneur en huile volatile dans RODW est plus élevée que RFCS, l'effet antimicrobien de RODW est meilleur que RFCS [13]. La fraction enrichie en polyphénols du thé ru gosa pourrait inhiber Escherichia coli et Pseudomonas aeruginosa quorum sensing et la formation du biofilm [1]. Les effets antimicrobiens de certains des ingrédients actifs de l'huile de rose tels que le linalol, le citronellol et le géraniol ont été confirmés [32, 33]. À ce jour, l'activité antimicrobienne du RFCS de R. Fenghua n'a pas été évaluée. Ce résultat confirme explicitement le fait que des teneurs élevées en alcool phényléthylique et autres composants volatils contribuent aux activités antimicrobiennes des RFCS [34].

conclusion

Notre étude a démontré les fortes activités antioxydantes, antimicrobiennes et inhibitrices de la tyrosinase des RFCS. En raison de l'arôme de rose de l'alcool phényléthylique en combinaison avec les activités inhibitrices de la tyrosinase et l'effet antimicrobien contre les sous-espèces enteritidis de S. enteritidis, C. albicans et P. acnes, le RFCS peut être utilisé comme additif naturel de blanchiment et de soin de la peau. dans l'industrie cosmétique. De plus, en raison de ses activités antioxydantes et de ses effets antimicrobiens contre L. ivanovii, les sous-espèces S., E. coli et S. aureus, le RFCS peut être utilisé comme conservateur naturel et agent antimicrobien dans les industries alimentaires et pharmaceutiques.

Remerciements

Merci à Fragrant Rose Biological Technology Co., LTD à Pingyin pour avoir fourni le RFCS.

Financement

Ce travail a été soutenu par la Ginseng Planting Resource Collection and Innovation (No. 20151FDA31290).

Disponibilité des données et des matériaux

Les ensembles de données utilisés et/ou analysés au cours de l'étude actuelle sont disponibles auprès de l'auteur correspondant sur demande raisonnable.

Contributions des auteurs

GR, GZ et PX ont conçu l'étude. GR et GZ étaient responsables de la collecte et de la saisie des données. PX et XS ont analysé les données et rédigé le manuscrit. Tous les auteurs ont lu et approuvé le manuscrit final.

Approbation éthique et consentement à participer

Ce chapitre ne contient aucune étude avec des participants humains ou des animaux réalisée par l'un des auteurs et il n'y a pas de consentement éclairé impliqué.

Consentement à la publication

N'est pas applicable.

Intérêts concurrents

Les auteurs déclarent n'avoir aucun intérêt concurrent.

Note de l'éditeur

Springer Nature reste neutre sur les revendications juridictionnelles dans les cartes publiées et les affiliations institutionnelles.

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