L'inhibition de l'entéropeptidase améliore la fonction rénale dans un modèle de rat de maladie rénale diabétique
Mar 13, 2022
INTRODUCTION
Le diabète sucré de type 2 est un trouble métabolique chronique caractérisé par une hyperglycémie, une résistance à l'insuline et une insuffisance relative en insuline. Il s'agit d'un problème clinique mondial qui entraîne des complications diabétiques microvasculaires et macrovasculaires.1 Diabétique maladie du rein(DKD) est une complication microvasculaire majeure du diabète qui se traduit par unemaladie du rein(CKD) et en phase terminalemaladie rénale. Aux États-Unis, plus de 40 % des patients atteints de diabète de type 2 ont une DKD.2 La DKD est définie par une microalbuminurie suivie d'une protéinurie, reflétant des lésions glomérulaires causées par une hyperfiltration induite par l'hyperglycémie, une hypertension et une lésion des podocytes.3 Dans la protéinurie, un excès de protéines la charge sur les cellules tubulaires proximales provoquerénalinflammation et fibrose interstitielle, voies clés deinsuffisance rénaleprogression.4 Le blocage du système rénine-angiotensine (SRA) avec des inhibiteurs de l'enzyme de conversion de l'angiotensine ou des antagonistes des récepteurs de l'angiotensine II (ARA) est cliniquement utilisé comme traitement standard pour les patients atteints de DKD.5 Récemment, le co-transporteur sodium-glucose{ Les inhibiteurs {6}} ont été introduits en tant que nouvelle classe de médicaments rénoprotecteurs.6,7 Cependant, quelles que soient ces interventions médicamenteuses, les patients dont l'état se détériore progressivementfonction rénale restent, et de nouveaux médicaments avec de nouveaux mécanismes d'action sont nécessaires pour améliorer leurrénalétat pathologique.Un apport excessif en protéines alimentaires est considéré comme accélérant la progression deinsuffisance rénaleen induisant une hyperfiltration glomérulaire, une accumulation de toxines urémiques et en inhibant l'autophagie glomérulaire.8 Il a été rapporté qu'un apport alimentaire accru en protéines est positivement corrélé à un risque accru de progression vers le stade terminalinsuffisance rénalechez les patients atteints d'IRC;9 cependant, l'importance thérapeutique de la réduction de l'apport en protéines alimentaires pourfonction rénalereste controversé,10 et l'efficacité des interventions pharmacologiques dans la régulation des cascades digestives protéiques n'est pas claire.
CISTANCHE AMÉLIORE L'INSUFFISANCE RÉNALE/RÉNALE
L'entéropeptidase est une sérine protéase transmembranaire de type II, fortement exprimée du côté luminal des entérocytes sur la bordure en brosse du duodénum. Il convertit le trypsinogène inactif en trypsine active par clivage au niveau du site d'activation du trypsinogène, et la trypsine activée active ensuite d'autres zymogènes digestifs sécrétés par le pancréas, notamment le chymotrypsinogène, la proélastase et les procarboxypeptidases.11–13 Ces enzymes activées régulent la dégradation des protéines en acides aminés ( AA). Ainsi, l'entéropeptidase joue un rôle clé dans la digestion des protéines et l'absorption des AA. SCO-792 est un nouvel inhibiteur d'entéropeptidase disponible par voie orale avec une concentration inhibitrice semi-maximale de<10 nm="" against="" rat="" and="" human="" enteropeptidase="" in="" vitro.14="" in="" mouse="" models,="" enteropeptidase="" inhibition="" improves="" obesity="" and="" diabetes.15="" how="" ever,="" the="" pharmacological="" effects="" of="" enteropeptidase="" inhibition="" on=""> un reinles complications sont largement méconnues. Considérant que l'entéropeptidase est la plus en amont des enzymes impliquées dans la digestion des protéines et le processus d'absorption, une enquête sur l'effet thérapeutique de l'inhibition de l'entéropeptidase sur la condition DKD peut être utile.Dans la présente étude, nous avons examiné les effets d'un inhibiteur d'entéropeptidase, SCO-792, surun rein variables chez les rats gras Wistar (WF), un modèle animal avec DKD.16 Premièrement, nous avons évalué les effets métaboliques et rénoprotecteurs de SCO-792 chez les rats WF. Ensuite, la contribution des modifications de l'absorption des AA à l'efficacité du SCO-792 a été évaluée. Des expériences supplémentaires ont été réalisées pour révéler l'effet de SCO 792 sur l'activité d'autophagie glomérulaire et pour examiner un effet combiné de SCO-792 avec un ARB.
Mots clés:médicament antidiabétique, néphropathie diabétique, développement de médicaments; maladie du rein; insuffisance rénale; rénal
MATÉRIAUX ET MÉTHODES
MatériauxTous les réactifs ont été achetés auprès de FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation (Osaka, Japon), sauf indication contraire. SCO-792 a été synthétisé par Takeda Pharmaceutical Co. Ltd (Tokyo, Japon). Le chlorhydrate de pioglitazone a été acheté auprès de Tokyo Chemical Industry (Tokyo, Japon). L'irbésartan a été acheté auprès de LKT Laboratories, Inc. (St Paul, Minnesota).
AnimauxDes rats mâles WF et les rats maigres Wistar (WL) non typés correspondants ont été obtenus auprès de RABICS Ltd (Kanagawa, Japon). Tous les animaux ont été logés dans une pièce à température (23 °C), humidité (55 %) et éclairage contrôlés (les lumières étaient allumées entre 7 h 00 et 19 h 00), avec un accès gratuit au régime alimentaire standard de laboratoire (CE-2 ; CLEA Japan, Inc., Tokyo, Japon) et à l'eau du robinet. Les procédures de soins aux animaux et les protocoles expérimentaux sur les animaux utilisés dans les présentes études ont été approuvés par le Comité institutionnel de protection et d'utilisation des animaux (Shonan Health Innovation Park), qui est accrédité par l'American Association for Accreditation of Laboratory Animal Care.
CISTANCHE AMÉLIORE LA FONCTION RÉNALE/RÉNALE
Étude de doses répétées de deux semaines chez des rats WFDes rats mâles WF, âgés de 31 semaines, avec un poids corporel initial de 693,5 ± 22,5 g et un taux d'hémoglobine glyquée de 7,4 ± 0,4 %, ont été randomisés en cinq groupes (véhicule, 6, 20 et 60 mg/kg de SCO-792, et 1 mg/kg de chlorhydrate de pioglitazone ; n=7), compte tenu du rapport albumine/créatinine urinaire initial (UACR), de l'hémoglobine glyquée, glucose plasmatique, insuline plasmatique et poids corporel. Des rats WL ont été utilisés comme témoins (n = 5). Des rats ont reçu par voie orale soit un véhicule (0,5 % [p/v] de méthylcellulose), du SCO-792 ou du chlorhydrate de pioglitazone une fois par jour pendant 15 jours. Le premier jour de traitement a été désigné comme le jour 0. Le poids corporel et l'apport alimentaire ont été surveillés tous les 1 à 4 jours, et les matières fécales ont été recueillies le jour 7. Des échantillons de sang ont été prélevés avant la randomisation et le jour 14 pour évaluer les variables sanguines. Des échantillons d'urine ont été prélevés avant la randomisation et aux jours 3, 7 et 13 pour mesurer les variables urinaires. Au jour 15,un reinles tissus ont été isolés des rats anesthésiés et conservés à -80 ° C jusqu'à leur utilisation.
Mesure du taux de filtration glomérulaireDes rats mâles WF, âgés de 30 semaines, ont été randomisés en deux groupes (n=7) en fonction de leur débit de filtration glomérulaire initial (DFG), de l'UACR, de l'hémoglobine glyquée et du poids corporel, puis ont été administrés par voie orale véhicule (0,5 % de méthylcellulose) ou 60 mg/kg de SCO-792 pendant 4 jours. Des rats WL ont été utilisés comme témoins (n = 5). Le GFR a été mesuré en utilisant de l'isothiocyanate de fluorescéine (FITC)-inuline (F3272; Sigma-Aldrich, St Louis, Missouri). L'inuline FITC dissoute dans une solution saline a été injectée dans les veines de la queue du rat à 36 mg/kg, et le sang a été prélevé 20, 40, 60 et 80 minutes après l'injection pour mesurer la concentration d'inuline FITC. Le DFG a été calculé à partir de la clairance FITC-inuline.17
Évaluation de la supplémentation en AA chez les rats WFDes rats mâles WF, âgés de 24 semaines, ont été randomisés en quatre groupes (n=5) en fonction de leur UACR initial, de l'hémoglobine glyquée, du glucose plasmatique et du poids corporel. Les rats ont reçu soit un régime CE-2 en poudre, soit un régime comprenant une augmentation de 51,8 % des AA (au même rapport de CE-2) après une supplémentation en 18 AA L (acide aspartique, thréonine, sérine, acide glutamique). glycine, alanine, valine, isoleucine, leucine, tyrosine, phénylalanine, lysine, histidine, arginine, proline, cystéine, méthionine et tryptophane). Le véhicule (00,5 % de méthylcellulose) ou 60 mg/kg de SCO- 792 a été administré par voie orale aux rats une fois par jour pendant 11 jours. Pour évaluer les changements dans les taux plasmatiques d'AA, des échantillons de sang ont été prélevés avant et 3, 8 et 13 heures après l'administration de SCO-792 au jour 9. Des échantillons d'urine ont été prélevés au jour 11 pour mesurer l'UACR.
Mesure des marqueurs de l'autophagie glomérulaireDes rats mâles WF, âgés de 29 semaines, ont été randomisés en deux groupes en fonction de leur UACR, de leur taux d'hémoglobine glyquée, de leur taux de glucose plasmatique et de leur poids corporel (n=7) et ont ensuite reçu un véhicule par voie orale (0. 5 % de méthylcellulose) ou 60 mg/kg de SCO-792. Après 3 heures,un reinles tissus ont été isolés des rats anesthésiés, puis les glomérules ont été isolés par une méthode de tamisage.18 Les niveaux de protéines cibles, y compris LC3A/B, p62, p-S6, S6, Wilms tumor 1 (WT1) et les glomérules ont été détectés par Western blot.
CISTANCHE AMÉLIORE L'INFECTION RÉNALE/RÉNALE
Traitement combiné de quatre semaines de SCO-792 avec l'irbésartan chez les rats WFDes rats mâles WF, âgés de 32 semaines, avec un poids corporel initial de 675,7 ± 31,2 g et une hémoglobine glyquée de 7,0 % ± 0,3 % ont été randomisés en six groupes (véhicule, {{ 9}}.02 % de SCO-792, 0.{{20}}5 % de SCO-792, 15 mg/kg d'irbésartan, { {29}}.02 % de SCO-792 plus 15 mg/kg d'irbésartan et 0,05 % de SCO-792 plus 15 mg/kg d'irbésartan ; n=7) basé sur leur UACR, leur hémoglobine glyquée, leur glucose plasmatique et leur poids corporel. Des rats WL ont été utilisés comme témoins normaux (n=5). Les rats avaient libre accès au régime en poudre CE-2 contenant chaque composé (p/p : 0,02 et 0,05 % de SCO-792) ou au régime en poudre CE-2 seul. Soit le véhicule (0,5 pour cent de méthylcellulose) soit l'irbésartan (15 mg/kg) a été administré par voie orale une fois par jour. Des échantillons de sang ont été prélevés au jour 28 pour déterminer les variables sanguines. Des échantillons d'urine ont été prélevés avant la randomisation et aux jours 7 et 30 pour déterminer les variables urinaires.Un reinles tissus ont été isolés des rats anesthésiés au jour 33 et conservés à -80 ° C jusqu'à leur utilisation.
analyses statistiquesLa signification statistique a d'abord été analysée à l'aide du test de Bartlett pour l'homogénéité des variances, suivi du test de Williams (P > {{0}}.05) et du test de Shirley-Williams (P inférieur ou égal à 0.{{10}}5) pour les études dose-dépendantes, le test de Dunnett (P > 0.05) et le test Steel (P inférieur ou égal à égal à 0.05) pour les comparaisons multiples par rapport au contrôle, ou le test de Tukey (P > 0,05) pour toutes les comparaisons par paires. Alternativement, la signification statistique a été analysée à l'aide du test F d'homogénéité des variances, suivi d'un test t de Student (P > 0,2) ou d'un test d'Aspin-Welch (P inférieur ou égal à 0,2). Les tests de Williams et de Shirley-William ont été effectués en utilisant un seuil de signification unilatéral de 2,5 % (0,025). D'autres tests ont été effectués en utilisant des niveaux de signification bilatéraux de 1 % (0,01) et 5 % (0,05). Pour évaluer si le traitement combiné avec le SCO-792 et l'irbésartan avait des effets additifs ou synergiques significatifs, une ANOVA à deux voies a été réalisée, qui a fourni les principaux effets et l'effet d'interaction du SCO-792 et de l'irbésartan. Toutes les données sont présentées sous forme de moyenne ± SD. Méthodes de quantification de la teneur en protéines fécales, de mesure des variables sanguines et urinaires, d'analyse de l'expression génique, d'isolement du glomérule, de réalisation de Western blot et de mesurerénalla teneur en collagène sont décrites à l'annexe S1.
RÉSULTATS
SCO-792 a amélioré les variables métaboliques chez les rats WFPour évaluer le potentiel anti-DKD de l'inhibition de l'entéropeptidase, SCO-792 a été administré par voie orale à des rats WF une fois par jour pendant 2 semaines. Les rats WF ont été générés par croisement de rats Wistar Kyoto et de rats gras Zucker19 et sont idéaux pour être utilisés comme modèle DKD en raison de leurs phénotypes métaboliques représentatifs (hyperglycémie, résistance à l'insuline avec obésité sévère, protéinurie progressive à partir de l'âge de 12 semaines16). Les niveaux de protéines fécales, qui sont un marqueur pharmacodynamique de la diminution de la digestion des protéines après l'inhibition de l'entéropeptidase dans l'intestin, ont été augmentés en fonction de la dose chez les rats traités au SCO -792- (figure 1A). Une réduction de l'apport alimentaire a été observée au cours de l'étude et l'apport alimentaire cumulé a été significativement diminué par SCO-792 (Figure 1B). De manière constante, le poids corporel était plus faible chez les rats traités au SCO -792- (figure 1C). Les variables diabétiques telles que le glucose plasmatique, l'hémoglobine glyquée, les taux plasmatiques d'insuline et de glucagon plasmatique ont diminué après la 2-semaine d'administration répétée de SCO-792 (Figure 1D–G). Les taux de lipides plasmatiques ont également été diminués par SCO -792 (Figure 1H, I).
SCO-792 a amélioré les variables rénales chez les rats WFEn plus de l'amélioration des variables diabétiques, SCO-792 a rapidement réduit l'UACR et cet effet a été maintenu pendant l'administration répétée (Figure 2A). En revanche, l'UACR est resté inchangé chez les rats ayant reçu de la pioglitazone, un agoniste des récepteurs activés par les proliférateurs de peroxysomes, malgré une forte réduction du taux de glucose plasmatique.
équivalent à celui de SCO-792 (Figures 1D, 2A). A la fin de l'étude,rénalLes niveaux d'ARNm de Col1a1, un marqueur de fibrose, 20 et de Ccl2, un marqueur d'inflammation, 21 ont diminué chez les rats ayant reçu du SCO-792 (Figure 2B). Urinaireun reinmolécule de blessure-1 (KIM-1), qui est un biomarqueur deun reinblessure tubulaire, 22 a également été réduite chez les rats traités SCO -792- (figure 2C). La mesure du DFG à l'aide de FITC-inuline a révélé un état d'hyperfiltration glomérulaire chez les rats WF par rapport aux rats WL. Cependant, après 4-jour d'administration de SCO-792, la surcharge glomérulaire chez les rats WF a été complètement normalisée (Figure 2D).
La supplémentation en AA du régime a inversé la réduction de l'UACR par SCO-792 chez les rats WFL'augmentation observée du niveau de protéines fécales après le traitement au SCO-792 a confirmé que l'inhibition de l'entéropeptidase empêchait la digestion des protéines (Figure 1A). Ainsi, SCO-792 a atténué la génération d'AA à partir de protéines dans la lumière intestinale. Pour étudier le rôle de l'apport en AA dans les effets rénoprotecteurs du SCO-792, les rats ayant reçu le véhicule ou le SCO-792 ont été hébergés avec un accès libre à une alimentation normale ou à une alimentation supplémentée en AA. Comme prévu, chez les rats normaux nourris au chow, SCO - 792 a abaissé le niveau plasmatique total d'AA (figure 3A, C). Cependant, la supplémentation en AA du régime a annulé le changement induit par l'entéropeptidase (Figure 3B,C). Alors que les niveaux plasmatiques d'acides aminés à chaîne ramifiée (BCAA) tels que la valine, la leucine et l'isoleucine ont été particulièrement diminués par SCO -792 chez les rats normaux nourris avec de la nourriture, encore une fois, ces changements ont été annulés par la supplémentation en AA (Figure 3D – F ). Conformément aux changements observés dans les taux plasmatiques d'AA, la réduction de l'UACR induite par le SCO -792- a été largement atténuée chez les rats nourris avec un supplément d'AA (figure 3G).
SCO-792 a activé la signalisation de l'autophagie dans le glomérule des rats WFLes acides aminés agissent comme un régulateur clé de l'homéostasie des protéines intracellulaires, modulant ainsi l'équilibre entre les processus anaboliques (synthèse des protéines) et cataboliques (autophagie).23 Ceci est réalisé grâce aux protéines de détection des AA, telles que la cible mammifère de la rapamycine (mTOR), et contrôle général de la kinase non dérépressible 2. Pour examiner si SCO-792 affecte une voie d'autophagie dans le glomérule, l'expression des protéines LC3A/BI et LC3A/B-II dans le glomérule de rats WF a été
mesuré par western blot. LC3A/B est un marqueur autophagosome, tandis que LC3A/BI est converti en LC3A/B-II par lipidation C-terminale au cours de l'autophagie. Par conséquent, le rapport d'expression protéique de LC3A/B-II à LC3A/BI est utilisé comme indicateur de l'autophagie.24 Ici, l'analyse Western blot a révélé que SCO-792 augmentait significativement le rapport de LC3A/B-II à LC3A/BI dans le glomérule des rats WF (Figure 4A,B). En revanche, le niveau de protéine de p62, un marqueur d'autophagie alternatif qui fournit des substrats autophagiques aux autophagosomes et est dégradé par l'autophagie, 25 a été réduit par SCO -792 (Figure 4A, C). De plus, SCO-792 a considérablement réduit le niveau de phosphorylation de la protéine S6 ; cela indiquait l'inactivation de la signalisation mTOR (Figure 4A,D). En revanche, les niveaux d'expression de WT1, un marqueur de podocytes, et -actine, contrôle de charge pour le Western blot, étaient inchangés entre les groupes (Figure 4A,E,F).
La combinaison de SCO-792 avec l'irbésartan a diminué de manière additive l'UACR chez les rats WFComme les inhibiteurs du RAS sont largement utilisés comme traitements standard pour les patients atteints de DKD, un effet complémentaire aux inhibiteurs du RAS est requis pour les nouveaux médicaments anti-DKD. Pour évaluer l'effet combiné du SCO-792 avec un ARB, SCO-792 (0.02 % et 0.05 % dans l'alimentation) et de l'irbésartan (15 mg/kg par voie orale une fois par jour) seuls ou en association ont été administrés à des rats WF pendant 4 semaines. Il était intéressant d'évaluer l'efficacité de l'inhibition soutenue de l'entéropeptidase sur les variables de la maladie ; par conséquent, l'administration de SCO -792 avec un mélange de régime a été menée dans cette étude. Les doses calculées de SCO-792 (mg/kg/j) pour chaque groupe étaient de 6,81 pour le groupe 0.02 % de SCO-792, 13,10 pour le groupe de 0,05 % de SCO -792, 6,59 pour le groupe 0,02 % SCO-792 plus irbésartan et 11,44 pour le groupe 0,05 % SCO-792 plus irbésartan. Alors que le SCO-792 seul et l'irbésartan seul ont diminué l'UACR, une combinaison de SCO-792 et d'irbésartan a encore diminué l'UACR. Un effet additif significatif sur la réduction de l'UACR a été observé suite à l'administration de SCO- 792 en association avec l'irbésartan (Figure 5A,B). En revanche,l'irbesartan n'a pas affecté l'effet anti-diabétique ou anti-obèse obtenu par SCO -792 (Figure 5C-F). Notamment, SCO-792 a considérablement réduit larénalteneur en collagène (figure 5G).
DISCUSSIONDans la présente étude, nous avons évalué les effets d'un nouvel inhibiteur d'entéropeptidase, SCO -792, sur l'état de la maladie dans un modèle préclinique de rat de DKD. L'administration orale de SCO-792 à des rats WF a rapidement atténué l'albuminurie après seulement 3 jours de traitement, et cet effet s'est maintenu tout au long de la période d'administration du médicament. De plus, cet effet était probablement indépendant du contrôle du glucose. De plus, une diminution des marqueurs de fibrose, d'inflammation et de lésion tubulaire dans leun reina été observé chez les rats traités au SCO-792-. SCO-792 dosage induit supplémentaireun reineffets protecteurs, y compris le soulagement de l'hyperfiltration glomérulaire et l'activation de l'autophagie dans le glomérule. Une réduction induite par SCO -792- de l'UACR a été largement atténuée par la supplémentation en AA du régime alimentaire. Enfin, la combinaison de SCO-792 et d'irbésartan a réduit efficacement l'UACR Les acides aminés sont un inducteur connu d'hyperfiltration.26 Chez l'homme, un seul repas riche en protéines ou une infusion d'AA augmente transitoirement le DFG.27,28 riche en protéinesle régime alimentaire est supposé accélérer le déclin progressif defonction rénalechez les patients atteints d'IRC.29 Dans la présente étude, les rats WF ont montré un DFG élevé, indiquant une hyperfiltration glomérulaire qui élève probablement l'UACR. Alors que le traitement SCO-792 réduisait les taux plasmatiques d'AA et diminuait l'UACR chez les rats WF, cet effet était annulé après la supplémentation en AA de l'alimentation. De plus, le traitement SCO-792 a normalisé le DFG chez les rats WF. Dans l'ensemble, la diminution induite par le SCO -792- des AA circulants peut jouer un rôle dans l'amélioration de l'hyperfiltration glomérulaire et la réduction de l'UACR chez les rats WF. De plus, SCO-792 a amélioré les marqueurs de fibrose, d'inflammation et de lésion tubulaire dans leun rein.Un excès de protéines dans le filtrat glomérulaire peut induirerénall'inflammation et la fibrose interstitielle dans les cellules tubulaires proximales.4 L'atténuation de l'albuminurie pourrait donc protéger lesrénalcellules tubulaires chez les rats traités au SCO-792-de la progression derénaldéficience.
CISTANCHE AMÉLIORE LA DOULEUR RÉNALE/RÉNALE
Les modifications du rapport LC3AB-II à LC3AB-I et du niveau de protéine p62 ont démontré une activation de l'autophagie induite par SCO -792- dans la fraction glomérulaire duun reintissus chez les rats WF. Fait intéressant, SCO-792 a fortement diminué les taux plasmatiques de BCAA chez les rats WF. Les BCAA, en particulier la leucine, sont des régulateurs clés de la voie d'autophagie avec la signalisation mTOR et inhibent la formation d'autophagosomes.23,30 En fait, la phosphorylation de la protéine S6, qui est une molécule de signalisation en aval de mTOR, a été puissamment inhibée par SCO{{ 4}}, indiquant que la diminution des taux plasmatiques de BCAA par l'inhibition de l'entéropeptidase peut être impliquée dans l'activation de l'autophagie glomérulaire via l'inactivation de la voie mTOR. L'autophagie est généralement une réponse à la privation de nutriments, mais elle est également impliquée dans divers processus physiologiques et le développement de maladies, notammentmaladies rénales.31 Dans le glomérule, l'autophagie est nécessaire pour protéger les podocytes du stress du réticulum endoplasmique et pour maintenir la fonction des podocytes. Par conséquent, il existe un niveau basal élevé d'activité d'autophagie dans les podocytes.32 Une altération de l'autophagie spécifique des podocytes entraîne une protéinurie, indiquant le rôle central de l'autophagie dans la machinerie de filtration glomérulaire. Par conséquent, l'activation de l'autophagie glomérulaire pourrait être l'un des mécanismes liés à l'AA par lesquels SCO -792 a amélioré l'albuminurie chez les rats WF.
L'hyperglycémie chronique serait impliquée dans la genèse de la DKD en induisant l'activation de la voie des polyols, la génération de produits finaux de glycation avancée, le stress oxydatif et l'inflammation.34 Dans la présente étude, la pioglitazone, qui a amélioré l'hyperglycémie, n'a pas réussi à diminuer l'UACR chez les rats WF. Cela suggère que l'amélioration de l'hyperglycémie n'est pas un facteur principal dans la réduction rapide de l'UACR par SCO-792 dans ce modèle. Le RAS est une voie cruciale pour la progression deinsuffisance rénale, et l'effet bénéfique de son inhibition avec les ARA chez les patients atteints de DKD est bien établi.5 Une étude combinée a révélé que le délai d'apparition de la réduction de l'UACR est différent entre le SCO-792 et l'irbésartan, et que ces composés agissaient de manière additive pour améliorer l'UACR chez les rats WF. Ces résultats indiquent que le mécanisme sous-jacent à l'effet anti-albuminurie de SCO-792 est indépendant du RAS. Les rats WF sont normotendus et SCO-792 n'a eu aucun effet sur la tension artérielle chez les rats WF ; par conséquent, l'effet observé de SCO -792 peut ne pas dépendre du contrôle de la pression artérielle (Figure S1). Par conséquent, SCO-792 peut être utilisé comme traitement complémentaire aux inhibiteurs du RAS dans n'importe quel contexte clinique futur. En outre, il a été suggéré qu'une inhibition soutenue de l'entéropeptidase est plus efficace dans le traitement des variables de la maladie, car l'administration de SCO -792 avec un mélange de régime a montré une efficacité thérapeutique plus puissante à une dose quotidienne plus faible qu'une dose orale une fois par jour.
Comme mentionné ci-dessus, les niveaux plasmatiques de BCAA ont été particulièrement diminués parmi les AA par SCO -792 chez les rats WF. Les relations entre les maladies métaboliques et les BCAA ont été largement corrélées avec la résistance à l'insuline.35 De plus, l'ingestion de protéines induit une résistance musculaire à l'insuline chez l'homme.36 Par conséquent, la réduction plasmatique des BCAA causée par l'administration de SCO-792 peut améliorer la résistance à l'insuline et améliorer le phénotype diabétique chez les rats WF. Ceci est cohérent avec les résultats d'études précédentes chez des souris diabétiques qui indiquent que SCO-792 a augmenté la sensibilité à l'insuline (principalement dans le muscle) dans une étude de clamp hyperinsulinémique-euglycémique.15 De plus, la diminution des niveaux d'AA par SCO{{7} } peut être impliqué dans la réduction du glucagon plasmatique via un cycle de rétroaction mutuelle entre le glucagon et les AA.37 Fait intéressant, la puissante amélioration des variables diabétiques a été observée même à la dose qui n'avait que des effets mineurs sur le poids corporel au cours de la 2- semaine répétée étude de dosage de SCO-792. Cela indique que des mécanismes dépendants des AA, notamment l'amélioration de la résistance à l'insuline et la réduction des taux plasmatiques de glucagon, sont susceptibles d'être impliqués dans l'effet antidiabétique du SCO -792 en plus de l'action dépendante de la réduction du poids corporel.
La principale limite de la présente étude est que l'effet de SCO-792 sur la phase tardive de DKD n'a pas été évalué. Les rats WF ont montré une albuminurie avec un DFG élevé, un état pathologique représentant une phase relativement précoce de la DKD. Pour remédier à cette limitation, d'autres modèles CKD présentant une baisse progressive du DFG seraient nécessaires pour l'évaluation à long termerénalrésultat après le traitement SCO-792. Récemment, l'intestin–un reinest devenu l'un des sujets d'intérêt, et l'association du microbiote intestinal et de ses métabolites avecmaladies rénalesa été étudiée.38 Compte tenu du rôle physiologique de l'entéropeptidase, son inhibition peut moduler la composition du microbiote intestinal. Par conséquent, des analyses supplémentaires axées sur les changements induits par SCO-792- dans le microbiote sont également nécessaires.
En conclusion, il s'agit de la première étude à démontrer que l'inhibiteur d'entéropeptidase SCO-792 améliore efficacementun reinvariables dans les modèles de rat de DKD. L'inhibition de la dégradation des protéines dans l'intestin, suivie d'une diminution de l'absorption des AA, est probablement une voie majeure pour les effets rénoprotecteurs de SCO-792, entraînant le soulagement de l'hyperfiltration glomérulaire et l'activation de l'autophagie dans le glomérule. Pris ensemble, les résultats suggèrent que SCO-792 a un potentiel en tant que nouvelle option thérapeutique pour les patients atteints de DKD.