Explorer le mécanisme d'action des glycosides totaux de Cistanche sur les maladies inflammatoires de l'intestin sur la base de la pharmacologie en réseau et des expérimentations animales Ⅲ

3 Résultats et analyse

3.1 Analyse des cibles de glycosides totaux de Cistanche tubulosa et des cibles de maladies

Importez les fichiers de structure tridimensionnelle deingrédients actifsdans la base de données PharmMapper pour obtenir les points cibles correspondant aux différents ingrédients. La base de données UniProt a été utilisée pour obtenir les informations sur le nom de la protéine et le nom du gène correspondant à chaque cible. En combinant les points cibles correspondant aux sept composantes, un total de 354 cibles ont été obtenues. Dans la base de données GeneCards, les gènes pertinents ont été recherchés à l'aide du mot-clé « maladie inflammatoire de l'intestin », les résultats de la recherche ont été triés et 7 851 cibles ont finalement été obtenues. Utilisez des événements pour dessiner un diagramme de Venn en ligne afin d'obtenir l'intersection des cibles de principes actifs de Cistanche tubulosa et les points cibles de l'IBD. Comme le montre la figure 1, 254 cibles de l'ingrédient actif deCistanche tubuleusequi ont un effet protecteur sur les MII ont été obtenus.

Fig.2 Schéma de réseau PPI des cibles communes

Fig.5 Réseau composant-cible-chemin

Fig.7 Les glycosides totaux de Cistanche tubulosa régulent négativement l'ARNm des voies de signalisation TGF et mTOR chez les souris MII

3.4 Les glycosides totaux de Cistanche tubulosa améliorent le score DAI induit par le DSS

Les résultats des tests ont montré qu'à l'exception du groupe CZ, les trois autres groupes présentaient divers degrés de perte de poids et de sang occulte fécal (Figure 6). Parmi eux, le groupe témoin DSS présentait le taux de perte de poids corporel le plus élevé, le sang fécal le plus sévère, le DAI le plus élevé et des saignements fécaux évidents au 6ème jour. Après l'intervention des glycosides totaux de Cistanche tubulosa, le score DAI a progressivement diminué et la situation du sang occulte a progressivement diminué. Le groupe HZ présentait le taux de perte de poids corporel le plus faible et la plus faible quantité de sang caché dans les selles. Les résultats ont montré que les glycosides totaux de Cistanche tubulosa amélioraient les réponses physiologiques provoquées par les maladies inflammatoires de l'intestin.

SUPPLÉMENT CISTANCHE POUR LE TRAITEMENT DES MII PHGS75% ECH 30% ACT 12%

3.5 Les glycosides totaux de Cistanche tubulosa régulent à la baisse les MII

Expression des voies de signalisation mTOR et TGF dans la rate de souris Les voies de signalisation mTOR et TGF sont deux voies de signalisation importantes qui activent les réponses inflammatoires. L'expression de mTOR et TGF- dans le tissu splénique de souris a été détectée par qRT-PCR. Les résultats ont montré que l’expression de l’ARNm de mTOR et du TGF- chez les souris du groupe témoin DSS était significativement augmentée par rapport à celle des souris normales. Par rapport aux souris témoins DSS, par rapport à Cistanche tubulosa, l'expression de mTOR et de TGF- chez les souris a été significativement réduite après l'intervention de Cistanche tubulosa. Parmi eux, le groupe à dose élevée présentait la diminution la plus significative et le niveau d'expression était fondamentalement cohérent avec celui du groupe normal (Figure 7). Les résultats ont montré que les glycosides totaux de Cistanche tubulosa régulaient négativement l'expression des voies de signalisation mTOR et TGF.

Fig.8 Carte thermique du clustering d'abondance fonctionnel PICRUSt2-

3.6 Analyse des annotations fonctionnelles PICRUSt2

PICRUSt2 est un outil bioinformatique permettant de prédire la fonction métagénomique basé sur les informations biologiques sur l'ARNr 16S, l'arbre ASV et les gènes ASV dans la base de données Greengene. La base de données Select COG a été utilisée pour la prédiction fonctionnelle et les résultats ont montré que les fonctions de la flore intestinale impliquent principalement le traitement de l'ARN ; structure et dynamique de la chromatine ; contrôle du cycle cellulaire, division cellulaire, segmentation des chromosomes ; mécanisme de défense; signalisation de la biogenèse de la paroi cellulaire/membrane cellulaire/enveloppe ; cellules Il a plus de 20 fonctions telles que la structure extracellulaire ; le transport intracellulaire, la sécrétion et le transport des vésicules ; production et conversion d'énergie; transport et métabolisme des glucides. Sélectionnez les 15 caractéristiques les plus abondantes et leurs informations d'abondance dans chaque échantillonUne carte thermique (Figure 8) est dessinée pour les informations et regroupée à partir de différents niveaux fonctionnels.

Par rapport au groupe CZ, les souris du groupe témoin DZ avaient COG1132 (système de transport multidrogue de type ABC), COG0745 (régulateur de réponse de liaison à l'ADN), COG1131 (système de transport multidrogue de type ABC), COG1961 (ADN recombinase spécifique au site lié à l'ADN invertase Pin ), COG0438 (Glycosyltransférase impliquéedans la biosynthèse de la paroi cellulaire), COG0534 (Na +- pilotépompe d'efflux multidrogue), COG0642 (histidine kinase de transduction de signal), COG1595 (sous-unité sigma spécialisée d'ARN polymérase dirigée par l'ADN), COG0463 (Endonucléase), COG4974 (recombinase spécifique au site XerD), COG2207 (domaine de liaison à l'ADN de type AraC et AraC - contenant des protéines), COG1136 (système d'exportation de lipoprotéines de type ABC) et les anomalies d'expression des gènes fonctionnels COG1309 (régulateur transcriptionnel de liaison à l'ADN). Ces gènes sont principalement impliqués dans : V : mécanisme de défense ; T : mécanisme de transduction du signal ; M : biogenèse de la paroi cellulaire/membrane cellulaire/enveloppe ; I : transport et métabolisme des lipides ; K : transcription ; L : réplication, recombinaison et réparation.

Après avoir administré à ces six fonctions des glycosides totaux de Cistanche tubulosa, l'expression de ces différentes fonctions physiologiques était proche de celle du groupe normal. Comparées aux souris des groupes CZ et DZ, les souris du groupe HZ présentaient une expression élevée des gènes COG1028 (famille des alcools déshydrogénases à chaîne courte) et COG0451 (nucléoside-phosphate-sucre épimérase). Ces deux gènes sont liés au I : transport et métabolisme des lipides. Et M : Les fonctions de biogenèse de la paroi cellulaire/membrane cellulaire/enveloppe sont étroitement liées. Par conséquent, on suppose que les glycosides totaux de Cistanche tubulosa pourraient réguler les dommages causés aux souris IBD en régulant le métabolisme des lipides, le métabolisme du glucose et les mécanismes de transduction des signaux de défense associés chez la souris.