Pourquoi Herba Cistanches peut être utilisé pour traiter le syndrome d'insuffisance rénale?

Le profilage métabolique révèle les effets thérapeutiques d'Herba Cistanches dans un modèle animal de « syndrome d'insuffisance rénale » induit par l'hydrocortisone

Contact : emily.li@wecistanche.com

Yunping Qiu, Minjun Chen, Mingming Su, Guoxiang Xie, Xin Li, Mingmei Zhou, Aihua Zhao, Jian Jiang et Wei Jia

Résumé

Arrière plan

Cistanches Herba(Roucongrong) est efficace dans le traitement de Shenxu Zheng ('syndrome d'insuffisance rénale'). Cependant, les mécanismes et les réponses métaboliques systémiques à l'intervention à base de plantes ne sont pas clairs.

Méthodes

En utilisant le profilage métabolique basé sur GC-MS, nous avons étudié les réponses métaboliques àCistanches Herbaintervention dans un modèle de rat de l'hydrocortisone induite 'syndrome d'insuffisance rénale'.

Résultats

Les profils métaboliques des rats après l'injection d'hydrocortisone ont dévié de l'état métabolique pré-dose à différents moments, allant du jour 1 au jour 10, alors que les profils métaboliques des rats traités à la fois avec l'hydrocortisone et l'extrait aqueux deCistanches Herbaretour à l'état pré-dose au jour 10.

Conclusion

L'intervention deCistanches Herbaa provoqué une récupération systémique de la perturbation métabolique induite par l'hydrocortisone chez les rats. Cette étude démontre également que le profilage métabolique est utile pour étudier les mécanismes thérapeutiques des plantes médicinales.

Arrière plan

Grâce à la modulation des réactions biochimiques, des mécanismes de contrôle et des activités enzymatiques, de nombreux médicaments ou produits chimiques provoquent une fluctuation des métabolites présents dans les cellules individuelles, les tissus ou les fluides corporels [1]. Le profilage métabolique, c'est-à-dire sonder les métabolites de faible poids moléculaire (MW < 1000="" da)="" au="" moyen="" d'un="" instrument="" analytique="" avancé="" couplé="" à="" des="" statistiques="" multivariées,="" peut="" montrer="" des="" réponses="" systémiques="" des="" systèmes="" vivants="" aux="" xénobiotiques.="" il="" est="" également="" techniquement="" possible="" de="" cataloguer="" tous="" les="" profils="" métaboliques="" multifactoriels="" héréditaires="" et="" influencés="" par="" l'environnement="" d'un="" organisme,="" y="" compris="" les="" conséquences="" physiopathologiques="" des="" perturbations="" ou="" déséquilibres="" induits="" par="" des="" toxines="" et/ou="" des="" maladies="" dans="" le="" réseau="" de="" régulation="" métabolique="" au="" niveau="" systémique.="" à="" ce="" jour,="" le="" profilage="" métabolique="" a="" été="" établi="" dans="" le="" dépistage,="" le="" diagnostic,="" le="" pronostic="" des="" maladies="" [2–4]="" et="" l'évaluation="" de="" la="" sécurité="" de="" certains="" médicaments="" et="" produits="" chimiques="">

La résonance magnétique nucléaire (RMN) [12] et la spectrométrie de masse (MS) [13], appliquées seules ou en combinaison, ont été utilisées pour profiler et caractériser les conséquences métaboliques des perturbations induites par des toxines et/ou des maladies. La RMN, qui ne nécessite pas de prétraitement fastidieux des échantillons, est une méthode simple et rapide pour obtenir des informations intrinsèques à partir d'échantillons biologiques complexes et intacts. D'autre part, la large application de la MS avec trait d'union dans le profilage métabolique est due à sa sensibilité et sa disponibilité élevées [14, 15]. Notamment, le profilage métabolique basé sur GC-MS a été utilisé pour découvrir les mécanismes des médicaments et des herbicides in vivo, les biomarqueurs de maladies [16] et les effets de l'expression génique altérée sur le métabolisme, et pour surveiller les performances des organismes dans les applications biotechnologiques [17-20]. .

Cistanches Herba(Roucongrong), une herbe tonique chinoise commune qui pousse dans le désert, présente des activités marquées pour améliorer la mémoire [21] et/ou la puissance sexuelle [22], piéger les radicaux libres, anti-âge [23-26] et neuroprotection [27 , 28]. Depuis des siècles,Cistanches Herbaa été efficacement utilisé dans le traitement de Shenxu Zheng ('syndrome d'insuffisance rénale') [29]. RécemmentCistanches Herbail a été démontré qu'il améliorait les troubles rénaux induits par l'hydrocortisone [30] ; cependant, ses conséquences métaboliques ne sont pas claires. Notre étude précédente [31] a révélé que les profils métaboliques de rats exposés à l'hydrocortisone à forte dose (c'est-à-dire un modèle animal pour le 'syndrome d'insuffisance rénale') [32], a montré un modèle biochimique unique de métabolites endogènes dans l'urine. Ces résultats nous ont inspirés à étudier les mécanismes des changements biochimiques cohérents après la modification de l'hydrocortisone, en utilisant le profilage métabolique basé sur GC-MS pour déterminer si Herba Cistanches pouvait inverser ou contrecarrer les effets métaboliques aberrants de l'hydrocortisone.

Cistanche peut améliorer la fonction rénale

Méthodes

Matériaux et instrument

Cistanches Herbaa été acheté auprès de Shanghai Leiyunshang Pharmaceutical Co Ltd (Chine) et identifié comme Cistanche deserticola YC Ma par le Dr Mengyue Wang (Laboratoire de pharmacognostique, École de pharmacie, Shanghai Jiao Tong University) selon un protocole standard [33]. La solution d'hydrocortisone pour injection (0,5 %) a été achetée auprès de Shanghai Xinyi Pharmaceutical Co (Chine). Les réactifs de dérivation étaient le N-méthyl-N-triméthylsilyl trifluoroacétamide (MSTFA) (Sigma-Aldrich Inc, USA) et le triméthyliodosilane (TMSI) (Sigma-Aldrich Inc, USA) mélangés dans un rapport de 1000:1. Tous les réactifs utilisés dans l'expérience étaient de qualité analytique. De l'eau ultra-pure a été préparée avec un système de purification Millipore (18,2 MΩ, USA). Les cages métaboliques ont été achetées auprès de Suzhou Fengshi Laboratory Animal Experiment Co Ltd (Chine).

Préparation de l'extrait d'Herba Cistanches

Cinq cents grammes de matière végétale grossièrement pulvérisée ont été chauffés au reflux avec 2 L d'eau ultra-pure pendant 2 heures. Après filtration, l'extrait a été évaporé à environ un dixième du volume d'origine sur un évaporateur rotatif Buchi et a été dilué à 250 ml dans une fiole jaugée avec de l'eau ultra-pure. La concentration finale de brutCistanches Herbal'extrait était de 2 g/mL.

Dosage et prélèvement

La manipulation de tous les animaux dans cette étude était conforme aux directives nationales et a été effectuée au Centre pour les animaux de laboratoire, Université de médecine traditionnelle chinoise de Shanghai, Shanghai, Chine. Au total, 19 rats mâles Wistar âgés de neuf semaines ont été achetés auprès de Shanghai Laboratory Animal Co Ltd (Chine). Tous les animaux ont été gardés dans un système de barrière avec une température (20–22 degrés) et une humidité (60 ± 10 %) régulées, et sur un cycle d'obscurité/lumière de 12 heures avec des lumières allumées à 8 :00 am. Les rats ont reçu de la nourriture et de l'eau à volonté. Après deux semaines d'acclimatation, les animaux ont été transférés dans des cages métaboliques individuelles et divisés au hasard en trois groupes : (1) groupe de traitement (n=7) dans lequel de l'hydrocortisone (5 %) a été injectée par voie ip à 1,5 mg/100 g de poids corporel suivi de l'administration orale deCistanches Herbaextrait pendant 10 jours ; (2) groupe modèle (n=7) dans lequel l'hydrocortisone (5 %) a été injectée par voie ip à 1,5 mg/100 g une fois par jour pendant 10 jours ; et (3) groupe témoin (n=5) dans lequel le véhicule a été injecté par voie ip à environ 0,6 mL pendant 10 jours [31].Cistanches Herbaa été administré au groupe de traitement à une dose de 20 g/kg suivant la recommandation de Shen et al. [30]. Des échantillons d'urine de vingt-quatre heures ont été prélevés à des intervalles de temps spécifiques : pré-dose (-24 - 0 h), jour 1 (0 - 24 h), jour 3, jour 7 et jour 10. Toute l'urine les échantillons ont été centrifugés (6383 × g, LG 16-W, Beijing Jingli Centrifuge Co Ltd, Chine) pendant 10 minutes pour éliminer les débris en suspension et immédiatement stockés à -80 degré pour une analyse GC-MS ultérieure.

Préparation d'échantillons et GC-MS

La GC-MS a été réalisée selon notre étude précédente avec des modifications mineures [31]. En bref, chaque aliquote de 0,5 μL ​​d'analyte dérivé de triméthylsilyle (TMS) a été injectée dans une colonne capillaire en silice fondue (diamètre intérieur de 17 m × 220 μm, épaisseur de film de 0,11 μm ; HP Ultra{ {9}}, Agilent J&W Scientific, États-Unis). La GC-MS a été réalisée sur une chromatographie en phase gazeuse PerkinElmer et un spectromètre de masse XL du système TurboMass-Auto (PerkinElmer Inc, USA).

Traitement des données et analyse multivariée

Les données GC-MS ont été converties au format NetCDF via DataBridge (PerkinElmer Inc, USA). Des scripts personnalisés ont été exécutés dans MATLAB 7.0 (The MathWorks Inc, États-Unis) pour effectuer la correction de la ligne de base, la déconvolution et l'alignement des pics, l'exclusion du standard interne et la normalisation à la somme totale du chromatogramme. La 3-matrice dimensionnelle résultante englobant l'indice de pic arbitraire (temps de rétention apparié-m/z), les échantillons (observations) et les zones de pic normalisées (variables) ont été importées dans le logiciel SIMCA-P 11.0 package (Umetrics, Suède) pour l'analyse multivariée.

Le centrage moyen a été effectué par colonne pour supprimer les décalages. Tous les métabolites mesurés ont été traités à un niveau égal avec une mise à l'échelle automatique (mise à l'échelle de la variance unitaire) avant l'analyse multivariée. L'analyse en composantes principales (ACP) a été réalisée à l'aide du logiciel SIMCA-P 11.0 pour révéler le regroupement général, le regroupement et les tendances parmi les sujets sans connaissances préalables. La première composante principale (PC1) représente la plus grande variance dans les données. La deuxième composante principale (PC2) est orthogonale à PC1 et représente la quantité maximale de variance non expliquée par PC1. Les composants principaux restants ont été construits de la même manière. Pendant ce temps, les trajectoires moyennes des scores PCA ont été utilisées pour fournir une indication dynamique de l'apparition, de la progression et/ou de la récupération du syndrome dans le temps. Les coefficients de corrélation des moindres carrés partiels - analyse discriminante (PLS-DA) ont été utilisés pour classer l'importance de chaque variable afin de mieux saisir les métabolites exprimés de manière différentielle responsables de la séparation entre les groupes. PLS-DA est dérivé de la méthode des moindres carrés partiels (PLS) qui est une méthode de régression multiple généralisée traitant de multiples prédicteurs colinéaires et variables de réponse [34]. Le PLS-DA a été réalisé à l'aide du logiciel SIMCA-P 11.0 [35]. Une validation croisée 7- typique a été effectuée. Un septième des échantillons a été exclu du modèle à chaque tour afin de valider le modèle. Cette procédure a été répétée de manière itérative pour la validation croisée jusqu'à ce que chaque échantillon ait été exclu une fois.

Herba Cistanches peut être utilisé pour traiter le syndrome d'insuffisance rénale

Analyse univariée

Les métabolites différentiellement exprimés identifiés à partir de l'analyse multivariée ont également été vérifiés dans le logiciel MATLAB 7.0 (The MathWorks Inc, USA) par le test non paramétrique de Kruskal-Wallis avec un niveau de signification à P <0.05 .

Résultats et discussion

Interprétation des spectres GC-MS

Les chromatogrammes typiques du courant ionique total (TIC) GC-MS de l'urine de rat au jour 10 du groupe de traitement, du groupe modèle et du groupe témoin sont illustrés à la figure 1. Utilisation de notre protocole d'analyse GC-MS optimisé en association avec un pic basé sur logiciel procédure de déconvolution, un total de 117 métabolites individuels ont été systématiquement détectés dans au moins 90 % des échantillons d'urine. L'identification des composés des pics d'intérêt a été réalisée en comparant le fragment spectral de masse aux bibliothèques de référence du NIST (National Institute of Standards and Technology), aux bibliothèques Wiley et aux normes de référence. Nous avons pu vérifier 23 des 117 métabolites (20 %), dont la majorité étaient des acides aminés, des polyamines, des acides gras, des purines et des hormones surrénales qui sont principalement impliquées dans le métabolisme énergétique, le métabolisme des lipides et le métabolisme des acides aminés.

Figure 1 Chromatogrammes typiques du courant ionique total (TIC) GC-MS de l'urine au jour 10 du groupe de traitement (A), du groupe modèle (B) et du groupe témoin (C).

Changements dépendant du temps dans les échantillons d'urine

Les trajectoires moyennes des scores PCA dérivés du groupe modèle et du groupe de traitement ont été illustrées à la figure 2. Le changement transitoire dans le tracé de la trajectoire a révélé la progression dynamique du 'syndrome d'insuffisance rénale' induite par l'hydrocortisone seule ou en association avecCistanches Herbatraitement. Dans le groupe modèle, les modèles métaboliques au jour 1 et au jour 3 étaient différents de ceux au jour 7 et au jour 10, ce qui suggère que le réseau de régulation métabolique au jour 1 et au jour 3 pourrait avoir subi une période transitoire avec de fortes fluctuations et que le réseau perturbé aurait pu être restauré au jour 7 et au jour 10, ce qui a finalement conduit à un schéma stable proche de l'état pré-dose. De même, le fait que le schéma métabolique du jour 1 et du jour 3 s'écartait manifestement de celui de la pré-dose dans le groupe de traitement indiquait la dominante 'syndrome d'insuffisance rénale' Etat. Dans cette période, les effets de l'hydrocortisone étaient probablement dominants sur ceux de laCistanches Herbaextrait. Ces résultats étaient cohérents avec l'observation générale selon laquelle les rats des deux groupes ont montré moins d'activité au jour 1 et au jour 3. Fait intéressant, les schémas métaboliques au jour 7 et au jour 10 se sont progressivement et significativement approchés de l'état pré-dose, ce qui suggère queCistanches Herbaa eu des effets antagonistes ou thérapeutiques sur les rats exposés à l'hydrocortisone. Ces résultats confirment les constatations cliniques selon lesquellesCistanches Herbaest efficace dans le traitement de la 'syndrome d'insuffisance rénale'. En général, les deux trajectoires fournissent une image visuelle, globale et dynamique du début, de la progression et de la récupération du 'syndrome d'insuffisance rénale'.

Figure 2 Trajectoire moyenne des scores PC1 vs PC2 pour les échantillons d'urine du groupe modèle (-●-) et du groupe de traitement (--●--). Chaque point indique un score moyen à différents moments, c'est-à-dire avant la dose, les jours 1, 3, 7 et 10. La barre d'erreur représente l'écart type pour chaque moment obtenu par le premier composant principal.

Analyse métabolique comparative d'échantillons d'urine

Pour mieux comprendre les effets métaboliques de l'hydrocortisone, nous avons comparé les profils métaboliques obtenus à partir des groupes de contrôle, de modèle et de traitement. Le regroupement général des trois groupes peut être facilement observé à divers moments, c'est-à-dire avant la dose, le jour 3 et le jour 10 (figure 3). Bien qu'il n'y ait pas de tendance à la séparation dans les profils d'urine avant la dose, les profils métaboliques ont dévié de ceux du groupe témoin au jour 3 après l'exposition à l'hydrocortisone. La perturbation métabolique par l'hydrocortisone est apparue à la fois dans le groupe modèle et dans le groupe de traitement. Cependant, après un traitement consécutif de 7- jours avecCistanches Herba, les profils métaboliques du groupe de traitement sont redevenus comparables à ceux du groupe témoin, indiquant queCistanches Herbaa effectivement restauré le métabolisme perturbé.

Figure 3 Comparaison des profils métaboliques du groupe témoin (losange noir), du groupe modèle (losange rouge) et du groupe de traitement (losange bleu) à différents moments : pré-dose (A), jour 3 (B) et jour 10 (C). Chaque point du graphique des scores PCA représente les données obtenues à partir d'un rat.

Identification différentielle des profils métaboliques

Un modèle PLS-DA à validation croisée a été utilisé pour identifier les métabolites clés dans différents profils métaboliques afin de faciliter la différenciation entre les rats du groupe témoin et les rats du groupe modèle (c'est-à-dire induits par l'hydrocortisone) avec ou sansCistanches Herbatraitement au jour 3 (tableau 1). Les changements de pli dans la concentration relative de chaque métabolite clé entre les groupes ont été déterminés et la visualisation correspondante des changements entre les groupes à la pré-dose, au jour 3 et au jour 1 0 a été produite (Figure 4). Comme le montrent la figure 4 et le tableau 1, alors que la plupart des métabolites endogènes ont augmenté ou diminué de manière significative dans le groupe modèle, ceux du groupe de traitement ont subi une période transitoire comme observé le jour 1 et le jour 3 et se sont progressivement approchés du niveau de contrôle (normal). . Par exemple, par rapport à la légère variation (1,1 à 1,5 fois) des métabolites dans le groupe de traitement au jour 10, les niveaux fortement accrus (1,7 à 3,0 fois) de tyrosine, tyramine, dopamine et noradrénaline urinaires ont été observés dans le groupe modèle tout au long de l'expérience. Notre étude précédente a montré que l'amélioration du métabolisme des catécholamines induite par les glucocorticoïdes entraînait une surconsommation des fonctions immunitaires, conduisant ainsi à la 'syndrome d'insuffisance rénale' [31]. Cistanches Herba, une herbe tonique qui améliore le système immunitaire [36], peut contrecarrer certains effets de l'hydrocortisone.Cistanches Herbapeut également être en mesure de restaurer un réseau de régulation métabolique normal. D'autres expériences avec différentes approches telles que la biologie moléculaire, la biologie cellulaire et la chimie végétale sont nécessaires pour délimiter les actions deCistanches Herba(et ses constituants) dans le 'syndrome d'insuffisance rénale'.

Tableau 1 Liste des métabolites inclus dans le profilage métabolique de la présente étude

Tiré de : Le profilage métabolique révèle les effets thérapeutiques deCistanches Herbadans un modèle animal de 'induite par l'hydrocortisone'syndrome d'insuffisance rénale'

Remarque : Les coefficients de corrélation (coeffs corr) de tous les composés ont été calculés à partir d'un modèle PLS-DA à validation croisée (Q2Ycum=0.899, un modèle satisfaisant utilisant deux composants) au jour 3 entre le groupe témoin et le groupe modèle. avec ou sansCistanches Herbatraitement. De plus, les changements de pli ont été testés par le test non paramétrique de Kruskal-Wallis. Kw (P) désigne les valeurs P du test. H=groupe témoin, M=groupe modèle, D=groupe de traitement. Par exemple, H/M/0 représente les changements de pli relatifs (modèle à contrôler) à l'état pré-dose.

Figure 4 Changements de pli des métabolites clés. La couleur rouge indique des concentrations relativement élevées (variations de pli > 1,5), tandis que la couleur verte indique des concentrations réduites relatives (variations de pli <-1.5). les="" changements="" de="" pli="" allant="" de="" -1.5="" à="" 1.5="" sont="" considérés="" comme="" des="" variations="" physiologiques.="" un="" changement="" de="" pli="" (m/h,="" d/h)="" est="" le="" rapport="" de="" concentration="" du="" groupe="" modèle="" ou="" du="" groupe="" de="" traitement="" au="" groupe="">

Conclusion

La présente étude de profilage métabolique par GC-MS a montré queCistanches Herbaa provoqué une récupération systémique de la perturbation métabolique induite par l'hydrocortisone chez le rat, un modèle animal pour le 'syndrome d'insuffisance rénale'. Cette étude démontre également que le profilage métabolique est une méthode utile pour étudier les effets thérapeutiques des plantes médicinales.

Abréviations

MS : spectrométrie de masse

GC-MS : chromatographie en phase gazeuse-spectrométrie de masse

RMN : résonance magnétique nucléaire

ACP : analyse en composantes principales

PLS-DA : moindres carrés partiels – analyse discriminante

Références

1. Nicholson JK, Lindon JC, Holmes E : « Métabonomique » : Comprendre les réponses métaboliques des systèmes vivants aux stimuli physiopathologiques via une analyse statistique multivariée des données spectroscopiques RMN biologiques. Xénobiotique. 1999, 29 (11) : 1181-1189. 10.1080/004982599238047.

2. Brindle JT, Antti H, Holmes E, Tranter G, Nicholson JK, Bethell HWL, Clarke S, Schofield PM, McKilligin E, Mosedale DE, Grainger DJ : diagnostic rapide et non invasif de la présence et de la gravité des maladies coronariennes en utilisant 1H -Métabonomique basée sur la RMN. Nat Med. 2002, 8 (12) : 1439-1444. 10.1038/nm802.

3. Constantinou MA, Papakonstantinou E, Benaki D, Spraul M, Shulpis K, Koupparis MA, Mikros E : Application de la spectroscopie par résonance magnétique nucléaire associée à l'analyse en composantes principales pour détecter les erreurs innées du métabolisme à l'aide de taches de sang : une approche métabonomique. Anal Chim Acta. 2004, 511 (2) : 303-312. 10.1016/j.aca.2004.02.012.

4. Beckonert O, Monnerjahn J, Bonk U, Leibfritz D : Visualisation des changements métaboliques dans les tissus du cancer du sein à l'aide de la spectroscopie 1H-RMN et de cartes auto-organisées. RMN Biomed. 2003, 16 (1) : 1-11. 10.1002/nbm.797.

5. Mortishire-Smith RJ, Skiles GL, Lawrence JW, Spence S, Nicholls AW, Johnson BA, Nicholson JK : Utilisation de la métabonomique pour identifier le métabolisme altéré des acides gras comme mécanisme de la toxicité induite par les médicaments. Chem Res Toxicol. 2004, 17 (2) : 165-173. 10.1021/tx034123j.

6. Waters NJ, Holmes E, Williams A, Waterfield CJ, Duncan Farrant R, Nicholson JK : Études de RMN et de reconnaissance de formes sur les effets métaboliques liés au temps du -naphtylisothiocyanate sur le foie, l'urine et le plasma chez le rat : Un métabonomique intégratif approcher. Chem Res Toxicol. 2001, 14 (10) : 1401-1412. 10.1021/tx010067f.

7. Coen M, Lenz EM, Nicholson JK, Wilson ID, Pognan F, Lindon JC : Une enquête métabonomique intégrée sur la toxicité de l'acétaminophène chez la souris à l'aide de la spectroscopie RMN. Chem Res Toxicol. 2003, 16 (3) : 295-303. 10.1021/tx0256127.

8. Small-Howard A, Turner H : L'exposition à des matériaux dérivés du tabac induit une surproduction de protéinases sécrétées dans les mastocytes. Toxicol Appl Pharmacol. 2005, 204 (2) : 152-163. 10.1016/j.taap.2004.09.003.

9. Waters NJ, Waterfield CJ, Farrant RD, Holmes E, Nicholson JK : Déconvolution métabonomique de la toxicité intégrée : application à l'hépatotoxicité et à la néphrotoxicité du thioacétamide. Chem Res Toxicol. 2005, 18 (4) : 639-654. 10.1021/tx049869b.

10. Robertson DG : Metabonomics in toxicology : A review. Toxicol Sei. 2005, 85 (2) : 809-822. 10.1093/toxique/kfi102.

11. Robertson DG, Bulera SJ : Toxicologie à haut débit : Considérations pratiques. Curr Opin Drug Discovery Dev. 2000, 3 (1) : 42-47.

12. Nicholson JK, Connelly J, Lindon JC, Holmes E : Metabonomics : Une plate-forme pour étudier la toxicité des médicaments et la fonction des gènes. Nat Rev Drug Discov. 2002, 1 (2) : 153-161. 10.1038/nrd728.

13. Taylor J, King RD, Altmann T, Fiehn O : Application de la métabolomique à la discrimination des génotypes végétaux à l'aide de statistiques et d'apprentissage automatique. Bioinformatique. 2002, 18 (SUPPL 2) : S241-S248.

14. Wilson ID, Nicholson JK, Castro-Perez J, Granger JH, Johnson KA, Smith BW, Plumb RS : Chromatographie liquide « ultra-performance » haute résolution couplée à la spectrométrie de masse oa-TOF comme outil de profilage différentiel des voies métaboliques dans études de génomique fonctionnelle. J Proteome Res. 2005, 4 (2) : 591-598. 10.1021/pr049769r.

15. Jonsson P, Gullberg J, Nordstrom A, Kusano M, Kowalczyk M, Sjostrom M, Moritz T : Une stratégie pour identifier les différences dans de grandes séries d'échantillons métabolomiques analysés par GC/MS. Chimie anale. 2004, 76 (6) : 1738-1745. 10.1021/ac0352427.

16. Ohdoi C, Nyhan WL, Kuhara T : Diagnostic chimique du syndrome de Lesch-Nyhan à l'aide de la détection par chromatographie en phase gazeuse et spectrométrie de masse. J Chromatogr, B: Anal Technol Biomed Life Sci. 2003, 792 (1) : 123-130. 10.1016/S1570-0232(03)00277-0.

17. Fiehn O, Kopka J, Dormann P, Altmann T, Trethewey RN, Willmitzer L : Profilage des métabolites pour la génomique fonctionnelle des plantes. Nat Biotechnol. 2000, 18 (11) : 1157-1161. 10.1038/81137.

18. Lafaye A, Junot C, Pereira Y, Daniel G, Tabet JC, Ezan E, Labarre J : Les analyses combinées du profilage du protéome et des métabolites révèlent des informations surprenantes sur le métabolisme du soufre de la levure. J Biol Chem. 2005, 280 (26) : 24723-24730. 10.1074/jbc.M502285200.

19. Schauer N, Steinhauser D, Strelkov S, Schomburg D, Allison G, Moritz T, Lundgren K, Roessner-Tunali U, Forbes MG, Willmitzer L, Fernie AR, Kopka J : bibliothèques GC-MS pour l'identification rapide des métabolites dans des échantillons biologiques complexes. FEBS Lett. 2005, 579 (6) : 1332-1337. 10.1016/j.febslet.2005.01.029.

20. Willse A, Belcher AM, Preti G, Wahl JH, Thresher M, Yang P, Yamazaki K, Beauchamp GK : Identification des principaux odorants corporels régulés par un complexe d'histocompatibilité par analyse statistique d'une expérience comparative de chromatographie en phase gazeuse/spectrométrie de masse. Chimie anale. 2005, 77 (8) : 2348-2361. 10.1021/ac048711t.

21. Wang XW, Wang XF, Wu LY : Amélioration du souvenir des souris des glycosides phényléthanoïdes de Cistanche deserticola. Représentant Chin Pharm. 2002, 19 : 41-42.

22. Xie JH, Wu CF : Effet de l'extrait éthanolique de Cistanche deserticola sur le contenu des neurotransmetteurs monoamines dans le cerveau du rat. Zhongcaoyao. 1993, 24 : 417-419.

23. Li LL, Wang XW, Wang XF : Peroxydation antilipidique et action antiradiation des glycosides dansherba Cistanches.Chin J Chin Mater Med. 1997, 22 (6) : 364-367.

24. Shahat AA, Nazif NM, Abousetta LM, Ibrahim NA, Cos P, Van Miert S, Pieters L, Vlietinck AJ : Enquête phytochimique et activité antioxydante de Duranta repens. Phytother Res. 2005, 19 (12) : 1071-1073. 10.1002/ptr.1766.

25. Gao J, Igarashi K, Nukina M : Trois nouveaux glycosides phényléthanoïdes de Caryopteris incana et leur activité antioxydante. Chem Pharm Bull. 2000, 48 (7) : 1075-1078.

26. Kyriakopoulou I, Magiatis P, Skaltsounis AL, Aligiannis N, Harvala C : Samioside, un nouveau glycoside phényléthanoïde avec des activités antiradicalaires et antimicrobiennes de Phlomis samia. J Nat Prod. 2001, 64 (8) : 1095-1097. 10.1021/np010128 plus.

27. Deng M, Zhao JY, Ju XD, Tu PF, Jiang Y, Li ZB : Effet protecteur du tubuloside B sur l'apoptose induite par le TNF alpha dans les cellules neuronales. Acta Pharmacol Sin. 2004, 25 : 1276-1284.

28. Geng XC, Song LW, Pu XP, Tu PF : effets neuroprotecteurs des glycosides phényléthanoïdes de la salsa de Cistanches contre le 1-méthyl-4-phényl-1, 2, 3, 6- toxicité dopaminergique induite par la tétrahydropyridine (MPTP) chez la souris C57. Biol Pharma Bull. 2004, 27 : 797-801. 10.1248/bpb.27.797.

29. He W, Shu X, Zong G, Shi M, Xiong Y, Chen M : Rein renforçant et yang soutenant l'action de cistanche deserticola YC Ma avant et après préparation. Zhongguo Zhong Yao Zazhi. 1996, 21 (9) : 534-537. 575

30. Shen LZ, Zhong XY, Wang SX : Effet de Cistanche deserticola sur des rats Shen-yang normaux et déficients. Zhongyao Yaoli Yu Linchuang. 2001, 17 (1) : 17-18.

31. Chen M, Zhao L, Jia W : Étude métabonomique sur les profils biochimiques d'un modèle animal induit par l'hydrocortisone. J Proteome Res. 2005, 4 (6) : 2391-2396. 10.1021/pr050158o.

32. Chen Q, Yi NY : Les modèles animaux et les médicaments pour la déficience en Yin et la déficience en Yang. Méthodologie expérimentale de la recherche pharmacologique en médecine traditionnelle chinoise. Edité par : Chen Q. 1993, Pékin : People's Health Publishing House, 982-984.

33. Comité national de la Pharmacopée : Pharmacopée de la République populaire de Chine. 2005, Pékin : Presse de l'industrie chimique, 1 : 90-

34. Multi- and Megavariate Data Analysis Part I: Basic Principles and Applications, Deuxième édition révisée et augmentée. [http://www.umetrics.com/default.asp/pagename/training_literature/c/5]

35. Guide de l'utilisateur SIMCA-P et SIMCA-P plus 11. [http://www.umetrics.com/default.asp/pagename/downloads_guide de l'utilisateur/c/3]

36. Chin HL, Su YC : Étude sur les effets pharmacologiques de Cistanche deserticola Ma. Zhongguo Zhong Yao Zazhi. 1993, 19 : 143-146.

Extrait de : Médecine chinoise volume 3, numéro d'article : 3 (2008)