L'isoastilbine inhibe l'apoptose neuronale et le stress oxydatif dans le modèle Arat de lésion d'ischémie-reperfusion dans le cerveau : implication du SIRT1/3/6

Pour plus d'informationstina.xiang@wecistanche.com

Résumé

Arrière plan.Il a été démontré que l'isoastilbine (IAB) aantioxydantet les fonctions anti-apoptotique. Une étude récente a révélé que l'IAB peut réduireoxydantstresser dans la maladie d'Alzheimer. Cependant, on ne sait pas si la fonction antioxydante de l'IAB est également protectrice dans d'autres maladies du cerveau.
Objectifs.Étudier les rôles et les mécanismes sous-jacents de l'IAB dans la reperfusion par occlusion de l'artère cérébrale moyenne (MCAO/R) chez le rat.
Matériaux et méthodes.Des rats mâles Wistar ont été divisés au hasard en 5 groupes : groupe fictif, groupe MCAO/R et 3 groupes MCAO/R auxquels on a administré de l'IAB (20 mg/kg, 40 mg/kg ou 80 mg/kg) une fois par jour pendant 3 jours. Taille de l'infarctus, score de gravité neurologique modifié (mNSS),oxydantstresserdes marqueurs et des marqueurs d'apoptose neuronale ont été utilisés pour tester la fonction de l'IAB.
Résultats.Par rapport au groupe MCAO/R, l'administration d'IAB a réduit la taille de l'infarctus et les scores mNSS chez les rats MCAO/R. L'isoastilbine a également diminué le niveau de malondialdéhyde (MDA) et amélioré l'activité de la catalase (CAT), de la superoxyde dismutase (SOD) et de la glutathion peroxydase (GSH-PX). Le traitement à l'isoastilbine a atténué les neurones induits par MCAO/Rapoptosepar rapport au groupe MCAO/R, comme l'indiquent les résultats des essais d'encoche X-dUTP à médiation par la désoxynucléotide terminale (TUNEL) et de Western blot. L'isoastilbine a également inversé la régulation à la baisse induite par MCAO/R de l'expression de la protéine SIRT1/3/6.
Conclusions.Ces observations suggèrent que l'IAB protège contreoxydantstress et apoptose neuronale chez le rat suite à une lésion cérébrale d'ischémie-reperfusion (I/R) par le biais de la régulation à la hausse de SIRT1/3/6, indiquant que l'IAB pourrait être un agent thérapeutique prometteur pour les lésions cérébrales d'I/R.
Mots clés:apoptose, stress oxydatif, isoastilbine, lésion d'ischémie-reperfusion cérébrale focale

Arrière plan

Les AVC ischémiques et hémorragiques comptent parmi les principales causes d'invalidité et de décès dans le monde.1,2Les AVC ischémiques sont causés par des obstructions dans les vaisseaux sanguins, ce qui expose les organes cibles à un risque de mort cellulaire.3Bien que le traitement le plus efficace de l'ischémie cérébrale consiste à rétablir l'approvisionnement en sang, la thérapie thrombolytique peut augmenter la taille de l'infarctus et aggraver les lésions d'ischémie-reperfusion (I/R) dans le cerveau.1,4 Par conséquent, il est urgent de développer de nouveaux médicaments pour le traitement des lésions cérébrales d'I/R.

Les lésions d'ischémie-reperfusion dans le cerveau impliquent une physiopathologie complexe, y compris la survenue deoxydantstresser, l'apoptose et l'épuisement de l'adénosine triphosphate (ATP), qui peuvent tous entraîner des lésions neuronales.5 Les espèces réactives de l'oxygène (ROS) sont produites pendant l'ischémie, entraînant uneapoptoseet dysfonctionnement neurologique.6 Plus précisément, les NADPH oxydases génèrent des ROS pendant les lésions I/R, ce qui provoqueoxydantstresser. Ce stress est marqué par une augmentation de la peroxydation lipidique, une diminution de l'activité de la catalase (CAT) et de la superoxyde dismutase (SOD) et une diminution du taux de glutathion (GSH)7–11.oxydantstresserdéclenchera à son tour la mort cellulaire par la voie apoptotique mitochondriale après une lésion cérébrale I / R.12 Les pores de transition de la perméabilité mitochondriale peuvent s'ouvrir en raison de l'accumulation superflue de ROS, entraînant un potentiel transmembranaire mitochondrial plus faible et une production accrue d'activateurs de caspase tels que comme le cytochrome c, initiant finalement la cascade de caspases et entraînant la mort cellulaire.12 Geng et al. ont proposé que l'apoptose des cellules neuronales soit au moins partiellement médiée par la voie de l'apoptose mitochondriale dans les lésions cérébrales I/R.13 Par conséquent, l'inhibition ou l'inversion du stress oxydatif et de l'apoptose neuronale sont de nouvelles méthodes prometteuses pour atténuer les lésions cérébrales I/R.

Pour explorer le mécanisme par lequel l'IAB atténue les dommages induits par l'I/R, nous nous sommes concentrés sur la cascade de signalisation SIRT. Des études récentes ont montré un rôle protecteur de SIRT1/3/6 dans diverses maladies, y compris la dégénérescence neurale dans le cerveau, l'inflammation des vaisseaux sanguins et l'accumulation de graisse corporelle. En effet, nous avons constaté que le traitement par l'IAB augmente le niveau d'expression de SIRT pendant les lésions I/R, indiquant que l'IAB peut protéger contre les cellulesapoptoseen régulant à la hausse l'expression de SIRT. Pris ensemble, nos résultats suggèrent que l'IAB est un traitement potentiellement utile pour les lésions cérébrales I/R cliniques.

Objectifs

Notre objectif général était d'examiner les effets et les mécanismes sous-jacents de l'IAB dans les lésions I/R à l'aide du modèle animal MCAO/R.

matériaux et méthodes

Animaux

Des rats mâles Wistar ont été acquis auprès de la Shanghai Laboratory Animal Company (Shanghai, Chine). Des rats âgés de 60 à 90 jours et ayant un poids corporel normal (200 à 250 g) ont été nourris à volonté avec de la nourriture et de l'eau et maintenus dans un environnement constant (25 ± 2 degrés, 40 ± 10 % d'humidité relative et 12 h de cycle lumière/obscurité) . Les animaux ont été manipulés conformément aux directives pour le soin et l'utilisation des animaux de laboratoire du Jiamusi College, Heilongjiang University of Traditional Chinese Medicine, Chine. Le comité institutionnel de protection et d'utilisation des animaux du Jiamusi College, Université de médecine chinoise du Heilongjiang, a approuvé les procédures animales (approbation n° 20190815).

Établissement de la blessure MCAO/R et du traitement IAB

La toxicité de l'IAB a été déterminée comme décrit précédemment.15 L'isoastilbine (Chengdu Purechem-Standard Co., Ltd., Chengdu, Chine) a été diluée à des concentrations finales de 20 mg/kg, 40 mg/kg et 80 mg/kg dans du phosphate -solution tamponnée (PBS). Les animaux ont été randomisés en 5 groupes : 1. simulacre ; 2. OACM/R ; 3. MCAO/R suivi de 20 mg/kg d'IAB ; 4. MCAO/R suivi de 40 mg/kg IAB ; et 5. MCAO/R suivi de 80 mg/kg IAB.

Les rats ont été anesthésiés par injection intrapéritonéale (ip.) de 50 mg/kg de pentobarbital sodique (Sinopharm Chemical Reagent, Pékin, Chine). Pour introduire MCAO/R, nous avons exposé les artères carotides, à savoir l'artère carotide externe (ECA), l'artère carotide commune droite (CCA) et l'artère carotide interne (ICA). L'ECA et le CCA ont été ligaturés de manière proximale. L'ICA a été ligaturé à l'aide d'une suture monofilament de 0,285 mm, insérée dans la lumière de l'ICA sur environ 18 mm à travers le moignon de l'ECA pour obstruer l'artère cérébrale moyenne (MCA). Un laserLe Doppler (USCN KIT INC., Wuhan, Chine) a été utilisé pour confirmer que le flux sanguin était réduit à moins de 20 % du niveau normal. Le groupe fictif a subi la même opération ; cependant, les artères n'étaient pas ligaturées. Après 2 h d'occlusion, les artères ligaturées ont été reperfusées et les rats ont ensuite été gavés avec de l'IAB (20 mg/kg, 40 mg/kg ou 80 mg/kg) ou du PBS quotidiennement pendant 3 jours consécutifs. Enfin, 72 h après MCAO/R, la capacité neurologique des rats a été évaluée.

Évaluation du volume d'infarctus cérébral de rat

Après le traitement par IAB, les cerveaux ont été rapidement pesés pour mesurer leur poids humide. Par la suite, les cerveaux ont été déshydratés à 100 degrés pendant 24 h pour évaluer leur poids sec. La concentration d'eau dans le cerveau a été calculée comme suit : ((poids humide ‒ poids sec)/poids humide) × 100 % .

Score de gravité neurologique modifié (mNSS)

Les fonctions neurologiques sensorielles, motrices, d'équilibre et réflexes ont été évaluées 72 h après la chirurgie MCAO à l'aide de mNSS.17 La gravité des déficits neurologiques a été classée sur une échelle de 0 à 10, un score plus élevé indiquant des dommages plus graves au système nerveux.

Mesure de la superoxyde dismutase (SOD), du malondialdéhyde (MDA), de la catalase (CAT) et de la glutathion peroxydase (GSH-PX)

Après le traitement par IAB, la teneur en protéines a été déterminée à partir des tissus cérébraux. La concentration en protéines des homogénats corticaux a été déterminée à l'aide de kits BCA (Beyotime, Shanghai, Chine). Les SOD, MDA, CAT et GSH-PX ont été détectés à l'aide des kits correspondants (n° de catalogue A003-1, A001-3, A007 et A005 ; Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute, Nanjing, Chine). Brièvement, le surnageant d'homogénat cortical a été recueilli. Pour la SOD, les échantillons ont été incubés avec une solution de travail WST-8/enzyme à 37 degrés pendant 30 min. L'absorption a été mesurée à une longueur d'onde de 450 nm. Une unité d'activité enzymatique SOD (U) a été définie comme la quantité d'échantillon nécessaire pour atteindre un taux d'inhibition de 50 % du colorant formazan WST-8. Pour le MDA, les échantillons ont été mélangés avec une solution de travail puis chauffés à 100 degrés pendant 15 min. L'absorption du surnageant a été mesurée à une longueur d'onde de 532 nm. Pour CAT, les échantillons ont été mélangés avec un tampon de détection CAT et une solution de peroxyde d'hydrogène, puis incubés à 25 degrés pendant 5 min. L'absorption a été détectée à une longueur d'onde de 520 nm. Pour GSH-PX, les échantillons ont été mélangés avec GSH à 37 degrés pendant 5 min. L'absorption du surnageant a été mesurée à une longueur d'onde de 412 nm. Une unité (U) d'activité enzymatique a été définie comme la quantité de GSH-PX dans 1 mg de protéine qui a catalysé la consommation de 1 μmol/L de GSH tout en déduisant l'effet de la réaction non enzymatique.

Coloration TUNEL (terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling)

Les tissus cérébraux de l'hémisphère ipsilatéral ont été isolés, fixés dans du paraformaldéhyde à 4 % et inclus dans de la paraffine. Les tissus ont ensuite été coupés en tranches de 5- μm et l'antigène exposé après 10 minutes de chauffage par micro-ondes dans un tampon citrate. L'apoptose neuronale a été évaluée à l'aide du test TUNEL (kit de détection de la mort cellulaire in situ ; Roche, Penzberg, Allemagne), conformément aux instructions du fabricant. En bref, des tranches de cerveau ont été placées dans du paraformaldéhyde à 4 % glacé pendant 30 min, puis incubées dans l'obscurité avec le mélange réactionnel TUNEL à 37 degrés pendant 1 h. Ensuite, les noyaux ont été colorés avec du 6-diamidino-2-phénylindole (DAPI ; Sigma-Aldrich). Les échantillons ont été imagés et l'indice d'apoptose a été calculé comme le nombre de cellules positives au TUNEL divisé par le nombre total de cellules.

Western blot

Des tissus cérébraux de rat ont été lysés à l'aide d'un tampon de test de radio-immunoprécipitation (RIPA) (Beyotime, Dalian, Chine). Les protéines ont été soumises à une électrophorèse sur gel de polyacrylamide-dodécylsulfate de sodium (SDS-PAGE) à 12–15%, puis transférées sur des membranes de fluorure de polyvinylidène (PVDF) (Millipore, Billerica, États-Unis). Les membranes ont été bloquées avec du lait écrémé à 5% et incubées avec des anticorps primaires à 4 degrés pendant la nuit. Les anticorps secondaires conjugués à la peroxydase de raifort (HRP) ont ensuite été incubés à température ambiante pendant 2 h. Des signaux spécifiques de protéines marquées ont été détectés à l'aide d'un système de chimiluminescence. La -actine a été utilisée pour normaliser les niveaux d'expression des protéines de Bcl-2, Bax et Sirtuin (SIRT1/3/6). Les images ont été analysées à l'aide du logiciel ImageJ.

analyses statistiques

Les données sont présentées sous forme de moyenne ± écart type (SD) à partir de 3 expériences indépendantes. Les données de chaque groupe ont été confirmées pour suivre une distribution normale à l'aide du test de Shapiro-Wilk. Les différences entre les groupes ont été analysées à l'aide d'une analyse de variance unidirectionnelle (ANOVA), suivie du test post hoc de Tukey à l'aide du logiciel Prism v. 8 (GraphPad Software, San Diego, États-Unis). Une valeur de p< 0.05 indicated="" statistical="" significance.="" a post="" hoc="" power="" analysis="" was="" performed="" using="" g*power="" 3.1.9.7="" software="" (heinrich="" heine="" university,="" düsseldorf,="">

Résultats

L'isoastilbine protège les neurones des lésions induites par MCAO/R

Pour explorer si l'IAB protégeait les neurones soumis à l'I/R cérébrale, la concentration d'eau dans le cerveau et le volume de l'infarctus ont été analysés. Chez les animaux témoins, il n'y a pas eu d'infarctus et la concentration d'eau était relativement faible (Fig. 1B, C; groupe fictif). Après la chirurgie MCAO/R, nous avons observé des augmentations significatives de la taille de l'infarctus et de la concentration en eau (Fig. 1B, C). L'infarctus et l'œdème ischémique indiquent que notre approche a généré avec succès le modèle I/R chez le rat. Fait intéressant, lorsque nous avons appliqué différentes concentrations d'IAB (20 mg/kg, 40 mg/kg et 80 mg/kg) immédiatement après la blessure, nous avons observé une récupération dose-dépendante de l'infarctus et de l'œdème cérébral ischémique (Fig. 1B, C). Ce résultat suggère que l'IAB protège contre les lésions cérébrales induites par l'ischémie. Ensuite, nous avons examiné la celluleapoptoseen utilisant le test mNSS. Comme le montre la figure 1D, les rats opérés de manière fictive ne présentaient aucun déficit neurologique évident, tandis que les rats MCAO / R présentaient des scores mNSS significativement accrus. Conformément aux changements morphologiques illustrés à la Fig. 1B et à la Fig. 1C, le traitement par IAB a significativement diminué le score mNSS des rats MCAO/R (Fig. 1D). Pris ensemble, ces résultats fournissent la preuve que l'IAB a une fonction neuroprotectrice dans un modèle de rongeur Vivo de lésion cérébrale I/R. Étant donné qu'une concentration plus élevée d'IAB avait de meilleurs effets protecteurs sans effets secondaires évidents, nous avons utilisé 80 mg/kg pour les expériences suivantes.

L'isoastilbine atténue le stress oxydatif chez les rats MCAO/R

Pour évaluer l'influence de l'IAB surstress oxydatif, les niveaux de GHS-PX, MDA, SOD et CAT ont été évalués après le traitement par IAB. En raison de l'augmentation du stress oxydatif, les rats soumis à MCAO/R avaient des niveaux plus élevés de MDA par rapport aux rats simulés. Cet effet a été atténué par le traitement IAB (Fig. 2A). De plus, les niveaux de CAT, SOD et GHS-PX ont diminué chez les rats MCAO / R par rapport aux rats fictifs (Fig. 2B, D). Le traitement avec IAB a élevé les niveaux de CAT, SOD et GHS-PX chez les rats MCAO / R (Fig. 2B, D), suggérant que l'IAB protégeait contre les lésions cérébrales I / R en atténuant le stress oxydatif.

L'isoastilbine inhibe l'apoptose neuronale chez les rats MCAO/R

Ensuite, nous avons utilisé le test TUNEL pour évaluer les neuronesapoptoseaprès une lésion cérébrale I/R. Comme le montre la figure 3A, il y avait une augmentation du nombre de cellules TUNEL-positives chez les rats MCAO / R, qui a été réduit par le traitement IAB (figure 3A). Pour explorer les mécanismes sous-jacents de la protection de l'IAB, nous avons examiné l'expression des protéines d'apoptose Bax et Bcl-2 à l'aide de western blot. Chez les rats soumis à MCAO/R, l'expression de Bax (marqueur pro-apoptotique) était régulée positivement, tandis que celle de Bcl-2 (marqueur anti-apoptotique) était régulée négativement, par rapport au groupe fictif (Fig. 3B, C ). Cependant, le traitement par IAB a empêché les changements induits par MCAO/R (Fig. 3B, C). Ces résultats suggèrent que l'IAB a inhibé l'apoptose neuronale chez les rats MCAO/R.

L'isoastilbine régule à la hausse l'expression de SIRT

Ensuite, nous avons cherché à examiner comment l'IAB protège les neurones destress oxydatif. La SIRT, une désacétylase dépendante du NAD plus principalement localisée dans les mitochondries, s'est avérée associée à la survie et à l'apoptose des cellules, au métabolisme cellulaire et à la réponse au stress. Le SIRT peut activer les signaux et les voies mitochondriales pour favoriser la prolifération des mitochondries et la génération d'ATP. Il participe également à l'inflammation, de sorte que la réduction de la SIRT entraîne l'augmentation des facteurs d'inflammation chronique, tels que l'activité NFκB et RelA/p65.18–20 Fait intéressant, plusieurs études ont montré que la SIRT exerce un effet protecteur neural et atténue l'oxydation oxydative. stress dans la physiopathologie des lésions cérébrales I/R.21 Ici, nous avons étudié l'expression cérébrale de SIRT1/3/6 chez des rats soumis à MCAO/R. Nous avons constaté que les lésions MCAO / R réduisaient les niveaux de protéines de SIRT1 / 3/6, tandis que le traitement IAB atténuait ces effets (Fig. 4A – D). Ces données suggèrent que l'IAB pourrait être protecteur chez les rats MCAO/R en régulant à la hausse l'expression de SIRT1/3/6 dans la protection contre le stress oxydatif.

Discussion

La concentration de ROS atteint un pic, ce qui peut potentiellement induire une apoptose ou une nécrose cellulaire.25–28 Il existe plusieurs marqueurs bien établis du stress oxydatif. Par exemple, le MDA, un composé cytotoxique produit par la peroxydation des lipides,29 est augmenté dans les cardiomyocytes de rat après des dommages I/R.30 Les enzymes antioxydantes SOD, CAT et GHS-PX jouent un rôle important dans le piégeage des superoxydes et la prévention des dommages oxydatifs.31, 32 De plus, les modifications de l'activité de ces enzymes sont également liées au stress oxydatif. L'atténuation du stress oxydatif est un moyen potentiel de protéger les tissus contre les lésions d'I/R.

Une étude récente a démontré que l'effet neuroprotecteur de l'IAB pourrait être dû à la modulation du stress oxydatif. Plus précisément, l'étude a révélé que l'IAB inhibait la génération de ROS et induisait la SOD et le GSH-PX pour atténuer les dommages oxydatifs dans un modèle de MA chez la souris.15 Cependant, on ne sait pas encore si et comment l'IAB protège contre les lésions I/R dans le cerveau. Dans la présente étude, nous avons démontré que l'IAB atténue avec succès les lésions cérébrales I/R en réduisant le volume de l'infarctus et les déficits neurologiques après une lésion MCAO/R. Pour tester si les effets de l'IAB sont dus à l'atténuation des espèces ROS, nous avons mesuré plusieurs marqueurs de stress oxydatif. Il a été constaté que le traitement à l'isoastilbine après MCAO/R diminuait les niveaux de MDA, mais augmentait l'activité de CAT, SOD et GSH-PX. Ces résultats suggèrent que le mécanisme sous-jacent de la neuroprotection médiée par l'IAB contre les lésions d'I/R passe par la réduction du stress oxydatif.

En effet, l'I/R cérébrale est capable d'induire l'apoptose des neurones.33,34 L'activation des protéines pro-apoptotiques (Bax et Bak) et l'inactivation parallèle des protéines anti-apoptotiques (telles que Bcl-2) se sont Blessure I/R. Bcl-2 et Bax se trouvent tous deux dans la partie extérieure de la membrane mitochondriale et participent à la modulation de l'apoptose cellulaire.35–37 Des études antérieures ont montré que la surexpression de Bcl-2 bloque la mort neuronale in vitro et in vivo.38Erfani et al. ont constaté que le rapport Bax/Bcl-2 était augmenté lors d'une lésion cérébrale I/R, contribuant à l'apoptose neuronale39. 40 En outre, il a été constaté que l'IAB module les niveaux d'expression protéique de Bcl-2 et de Bax pour améliorer le système redox chez les souris atteintes de MA, indiquant le rôle anti-apoptotique de l'IAB dans cette condition.15 étude, nous avons montré que l'administration d'IAB réduisait l'apoptose neuronale induite par l'I/R in vivo en régulant à la baisse Bax et en régulant à la hausse Bcl-2. Ces résultats impliquent que la capacité neuroprotectrice de l'IAB dépend de son activité anti-apoptotique chez le rat. Cependant, l'I/R peut également entraîner une nécrose, qui n'est pas médiée par le stress oxydatif.25–28 Il est très intéressant d'examiner si l'IAB peut également fonctionner en inhibant la nécrose pour atténuer les lésions I/R.

Pour examiner le mécanisme par lequel l'IAB atténue le stress oxydatif, nous nous sommes concentrés sur les protéines SIRT. Un rapport précédent a révélé que la surexpression de SIRT3 inhibait la fission mitochondriale pour se protéger contre les lésions cérébrales I/R. De plus, SIRT6 peut protéger le cerveau contre les dommages I/R en supprimant le stress oxydatif. 6 était significativement régulé à la baisse chez les rats MCAO/R, alors que l'administration d'IAB augmentait l'expression de SIRTl/3/6. À notre connaissance, cette étude est la première à démontrer que l'IAB peut augmenter l'expression de la protéine SIRT1/3/6 pour atténuer le stress oxydatif et l'apoptose neuronale induite par une lésion cérébrale I/R.

Limites

Il existe de nombreuses voies de protection contre le stress oxydatif. Ici, nous avons démontré que le mécanisme de signalisation de la protection IAB passe par SIRT 1/3/6. Cependant, d'autres mécanismes contre le stress oxydatif ou les lésions cérébrales d'I/R doivent être mieux élucidés. Lors d'une lésion I/R, l'apoptose et la nécrose sont impliquées ; cependant, nous nous sommes concentrés uniquement sur l'apoptose. Ainsi, des recherches supplémentaires sur le rôle de l'IAB dans la nécrose seront nécessaires pour expliquer pleinement la fonction protectrice de l'IAB lors d'une blessure I/R.

conclusion

Ici, nous avons démontré que l'IAB peut atténuer le stress oxydatif et l'apoptose des neurones chez les rats soumis à une I/R cérébrale. De plus, le stress antioxydant et les fonctions anti-apoptotique de l'IAB pourraient résulter de la régulation de l'expression de SIRT1/3/6. Pris ensemble, nos données suggèrent que l'IAB est un traitement candidat pour les lésions d'I/R cérébrales.

ORCID iDs Lifeng An  https://orcid.org/0000-0002-4835-1817 Dandan Zhu  https://orcid.org/0000-0001-9119-9956 Xin Zhang  https://orcid.org/0000-0002-9496-1691 Jingwen Huang  https://orcid.org/0000-0001-6449-5362 Guangbao Lu https://orcid.org/0000-0002-2465-8996

Vieng An1,B,D, Dandan Zhu2,B, Xin Zhang2,C, Jingwen Huang1,C, Guangbao Lu1,A,F

1 Jiamusi College, Université de médecine chinoise du Heilongjiang, Chine

2 École supérieure, Université de médecine chinoise du Heilongjiang, Jiamusi, Chine

A – concept et conception de la recherche ; B – collecte et/ou assemblage de données ; C – analyse et interprétation des données ;

D – rédaction de l'article ; E – révision critique de l'article ; F – approbation finale de l'article

Références

1. Rossi DJ, Brady JD, Mohr C. Métabolisme et signalisation des astrocytes pendant l'ischémie cérébrale. Nat Neurosci. 2007;10(11):1377–1386. doi:10.1038/ nn2004
2. Ribeiro PW, Cola PC, Gatto AR, et al. Relation entre la dysphagie, le score National Institutes Of Health Stroke Scale et les prédicteurs de pneumonie après un AVC ischémique. J Stroke Cerebrovasc Dis. 2015 ; 24(9):2088–2094. doi:10.1016/j.jstrokecerebrovasdis.2015.05.009
3. Hu X, De Silva TM, Chen J, Faraci FM. Maladie vasculaire cérébrale et lésion neurovasculaire dans l'AVC ischémique. Circ Res. 2017;120(3):449–471. doi:10.1161/circresaha.116.308427
4. Tabassum R, Vaibhav K, Shrivastava P, et al. L'alcool périllylique améliore les résultats fonctionnels et histologiques contre les lésions d'ischémie-reperfusion en atténuant le stress oxydatif et en réprimant COX-2, NOS-2 et NF-κB chez les rats en occlusion de l'artère cérébrale moyenne. Eur J Pharmacol. 2015;747:190–199. doi:10.1016/j.ejphar.2014.09.015
5. Woodruff TM, Thundyil J, Tang SC, Sobey CG, Taylor SM, Arumugam TV. Physiopathologie, traitement et modèles animaux et cellulaires de l'AVC ischémique humain. Mol Neurodegener. 2011;6(1):11. doi : 10.1186/1750- 1326-6-11
6. Gonzalez-Rodriguez PJ, Xiong F, Li Y, Zhou J, Zhang L. L'hypoxie fœtale augmente la vulnérabilité des lésions cérébrales hypoxiques-ischémiques chez les rats nouveau-nés : rôle des récepteurs des glucocorticoïdes. Neurobiol Dis. 2014;65:172–179. doi:10.1016/j.nbd.2014.01.020
7. Rodrigo R, Fernández-Gajardo R, Gutiérrez R, et al. Stress oxydatif et physiopathologie de l'AVC ischémique : nouvelles opportunités thérapeutiques. CNS Neurol Disord Drug Targets.2013;12(5):698–714. doi:10.2174/ 1871527311312050015
8. Zhang C, Ling CL, Pang L, et al. Administration directe de médicaments macromoléculaires dans la zone d'ischémie cérébrale à l'aide de nanoparticules médiées par les neutrophiles. Théranostiques. 2017;7(13):3260–3275. doi:10.7150/thno.19979
9. Kahles T, Luedike P, Endres M, et al. La NADPH oxydase joue un rôle central dans les dommages de la barrière hémato-encéphalique lors d'un AVC expérimental. Accident vasculaire cérébral. 2007;38(11):3000–3006. doi:10.1161/strokeaha.107.489765
10. Chen H, Song YS, Chan PH. L'inhibition de la NADPH oxydase est neuroprotectrice après ischémie-reperfusion. J Cereb Blood Flow Metab. 2009 ; 29(7):1262–1272. doi:10.1038/jcbfm.2009.47
11. Kapoor M, Sharma N, Sandhir R, Nehru B. Effet de l'apocynine, inhibiteur de la NADPH oxydase, sur la lésion de l'hippocampe par ischémie-reperfusion dans le cerveau du rat. Pharmacologue Biomed. 2018;97:458–472. doi : 10.1016/j. biopha.2017.10.123
12. Yu S, Wang C, Cheng Q, et al. Un composant actif des polypeptides d'Achyranthes bidentata fournit une neuroprotection par l'inhibition de la voie apoptotique dépendante des mitochondries dans des neurones en culture et dans des modèles animaux d'ischémie cérébrale. PLoS One. 2014 ; 9(10):e109923. doi:10.1371/journal.pone.0109923
13. Geng HX, Li RP, Li YG, et al. 14,15-EET supprime l'apoptose neuronale dans l'ischémie-reperfusion par la voie mitochondriale. Neurochem Res.2017;42(10):2841–2849. doi : 10.1007/s11064-017-2297-6
14. Du Q, Li L, Jerz G. Purification de l'astilbine et de l'isoastilbine dans l'extrait de rhizome de smilax glabra par chromatographie à contre-courant à grande vitesse. J Chromatogr A. 2005;1077(1):98–101. doi:10.1016/j.chroma. 2005.04.072
15. Yu H, Yuan B, Chu Q, Wang C, Bi H. Rôles protecteurs de l'isoastilbine contre la maladie d'Alzheimer via l'antioxydation et l'anti-apoptose médiées par Nrf2-. Int J Mol Med.2019;43(3):1406–1416. doi:10.3892/ijmm. 2019.4058
16. Zhou X, Xu Q, Li JX, Chen T. Révision structurelle de deux glycosides de flavanonol de Smilax glabra. Planta Med. 2009;75(6):654–655. doi:10. 1055/s-0029-1185360
17. Morimoto J, Yasuhara T, Kameda M, et al. La stimulation électrique améliore la capacité migratoire des cellules stromales de la moelle osseuse greffées dans un modèle d'AVC ischémique chez les rongeurs. Cell Physiol Biochem. 2018 ; 46(1):57–68. doi:10.1159/000488409
18. Torrens-Mas M, Pons DG, Sastre-Serra J, Oliver J, Roca P. Le silençage SIRT3 sensibilise les cellules cancéreuses du sein aux traitements cytotoxiques grâce à une augmentation de la production de ROS. J Cell Biochem. 2017;118(2):397–406. doi:10.1002/jcb.25653
19. Nassir F, Arndt JJ, Johnson SA, Ibdah JA. La régulation de la protéine trifonctionnelle mitochondriale module la stéatose hépatique non alcoolique chez la souris. J Lipid Res. 2018;59(6):967–973. doi:10.1194/jlr.M080952
20. Torrens-Mas M, Hernández-López R, Oliver J, Roca P, Sastre-Serra J. Le silençage de Sirtuin 3 améliore l'efficacité de l'oxaliplatine par l'acétylation de MnSOD dans le cancer du côlon. J Cell Physiol. 2018;233(8):6067–6076. doi:10.1002/jcp.26443
21. Hernández-Jiménez M, Hurtado O, Cuartero MI, et al. Le régulateur d'information silencieux 1 protège le cerveau contre les dommages ischémiques cérébraux. Accident vasculaire cérébral. 2013;44(8):2333–2337. doi:10.1161/strokeaha.113.001715
22. Chen GY, Nuñez G. Inflammation stérile : détection et réaction aux dommages. Nat Rev Immunol. 2010;10(12):826–837. doi:10.1038/nri2873
23. Eltzschig HK, Eckle T. Ischémie et reperfusion : du mécanisme à la traduction. Nat Med. 2011;17(11):1391–1401. doi:10.1038/nm.2507
24. Dziedzic T. Inflammation systémique comme cible thérapeutique dans l'AVC ischémique aigu. Expert Rev Neurother.2015;15(5):523–531. doi:10.1586/ 14737175.2015.1035712
25. Yemisci M, Gursoy-Ozdemir Y, Vural A, Can A, Topalkara K, Dalkara T. La contraction des péricytes induite par le stress oxydatif-nitratif altère le reflux capillaire malgré l'ouverture réussie d'une artère cérébrale occluse. Nat Med. 2009;15(9):1031–1037. doi:10.1038/nm.2022
26. Chen H, Yoshioka H, ​​Kim GS, et al. Stress oxydatif dans les lésions cérébrales ischémiques : mécanismes de mort cellulaire et cibles moléculaires potentielles pour la neuroprotection. Signal redox antioxydant. 2011;14(8):1505–1517. doi:10.1089/ars.2010.3576
27. Olmez I, Ozyurt H. Espèces réactives de l'oxygène et maladie cérébrovasculaire ischémique. Neurochem Int. 2012;60(2):208–212. doi : 10.1016/j. neuf.2011.11.009
28. Guo J, Cheng C, Chen CS, et al. La surexpression de Fibulin-5 atténue les lésions d'ischémie/reperfusion après occlusion de l'artère cérébrale moyenne chez le rat. Mol Neurobiol. 2016;53(5):3154–3167. doi : 10.1007/s12035- 015-9222-2
29. Qiang M, Xu Y, Lu Y, et al. Autofluorescence de protéines modifiées par MDA comme sonde in vitro et in vivo dans l'analyse du stress oxydatif. Cellule protéique. 2014;5(6):484–487. doi : 10.1007/s13238-014-0052-1
30. Hou S, Zhao MM, Shen PP, et al. Effet neuroprotecteur des acides salvianoliques contre l'ischémie cérébrale/lésion de reperfusion. Int J Mol Sci. 2016;17(7). doi:10.3390/ijms17071190
31. Adibhatla RM, Hatcher JF. Oxydation et peroxydation des lipides dans la santé et la maladie du SNC : des mécanismes moléculaires aux opportunités thérapeutiques. Signal redox antioxydant. 2010;12(1):125–169. doi:10.1089/ ars.2009.2668
32. Staroń A, Mąkosa G, Koter-Michalak M. Stress oxydatif dans les érythrocytes de patients atteints de polyarthrite rhumatoïde. Rheumatol Int. 2012 ; 32(2):331–334. doi : 10.1007/s00296-010-1611-2
33. Aşcı S, Demirci S, Aşcı H, Doğuç DK, Onaran İ. Effets neuroprotecteurs de la prégabaline sur l'ischémie cérébrale et la reperfusion. Balkan Med J. 2016;33(2):221–227. doi:10.5152/balkanmedj.2015.15742
34. Tao T, Li CL, Yang WC, et al. Effets protecteurs du propofol contre l'ensemble de l'ischémie cérébrale/lésion de reperfusion chez le rat par l'inhibition de la voie du facteur induisant l'apoptose. Brain Res.2016;1644 : 9–14. doi:10.1016/j.brainres.2016.05.006
35. Martinou JC, Youle RJ. Mitochondries en apoptose : membres de la famille Bcl-2 et dynamique mitochondriale. Cellule de développement. 2011;21(1):92–101. doi:10.1016/j.devcel.2011.06.017
36. Borner C, Andrews DW. Le pore apoptotique sur les mitochondries : Sommes-nous en train de percer ou toujours bloqués ? La mort cellulaire diffère. 2014;21(2):187–191. doi:10.1038/cdd.2013.169
37. Siddiqui WA, Ahad A, Ahsan H. Le mystère de la famille BCL2 : protéines Bcl-2 et apoptose. Une mise à jour. Arch Toxicol. 2015;89(3):289–317. doi : 10.1007/s00204-014-1448-7
38. Maes ME, Schlamp CL, Nickells RW. BAX à l'essentiel : comment la famille de gènes BCL2 contrôle la mort des cellules ganglionnaires de la rétine. Prog Retin Eye Res. 2017 ; 57 : 1–25. doi:10.1016/j.preteyeres.2017.01.002
39. Erfani S, Khaksari M, Oryan S, Shamsaei N, Aboutaleb N, Nikbakht F. Nampt/PBEF/visfatin exerce des effets neuroprotecteurs contre les lésions d'ischémie/reperfusion via la modulation du rapport Bax/Bcl-2 et la prévention de la caspase{ {2}} activation. J Mol Neurosci. 2015;56(1):237–243. doi : 10.1007/s12031-014-0486-1

40. Chen L, Cao J, Cao D, et al. Effet protecteur de la dexmédétomidine

contre l'ischémie cérébrale/lésion de reperfusion exacerbée par l'hyperglycémie diabétique : une étude in vivo et in vitro, Life Sdi,2019:235:116553.doi ; 10.1016/ilfs.2019116553

41. Zhao H, Luo Y, Chen L, et al. Sirt3 inhibe les lésions cérébrales d'ischémie-reperfusion en normalisant la voie Wnt/-caténine et en bloquant la fission mitochondriale. Chaperons de stress cellulaire. 2018;23(5):1079–1092. doi :10.1007/s12192-018-0917-y

42. Zhang W, Wei R, Zhang L, Tan Y, Qian C. Sirtuin 6 protège le cerveau des lésions d'ischémie/reperfusion cérébrales par l'activation de NRF2. Neuroscience.2017;366:95–104. doi:10.1016/j.neuroscience.2017.09.035