Abstrait

Cistanche tubuleuseest une herbe tonique précieuse largement utilisée en médecine traditionnelle chinoise. Les glycosides phényléthanoïdes représentés par l'échinacoside et l'actéoside sont ses principales substances bioactives. Cette recherche vise à optimiser les paramètres de traitement modernes pourCistanche tubuleusemorceaux de décoction pour améliorer le rendement en échinacoside et en acteoside, et explorer davantage son mécanisme anti-oxydant-stress et anti-inflammatoire au niveau cellulaire.

Des expériences à facteur unique ont été menées, suivies d'une optimisation de la surface de réponse Box-Behnken avec l'épaisseur de la tranche, le temps de cuisson à la vapeur et la température de séchage comme facteurs d'influence. La chromatographie liquide haute performance (HPLC) a été adoptée pour détecter le contenu de deux composés marqueurs. Le modèle de lésion des macrophages RAW264.7 induit par le LPS a été construit pour évaluer les activités pharmacologiques. Les espèces réactives de l'oxygène (ROS), l'oxyde nitrique (NO), le malondialdéhyde (MDA), les activités des enzymes antioxydantes, notamment la teneur en SOD, CAT, LDH et glutathion (GSH), ont été déterminées. ELISA a été utilisé pour tester le niveau de sécrétion des cytokines pro-inflammatoires TNF-, IL-1 et IL-6. Un test Western blot a été réalisé pour analyser l'état de phosphorylation des protéines clés dans la voie de signalisation p38/AKT/JNK/NF-κB.

Les conditions de traitement optimales étaient une épaisseur de tranche de 0,6 cm, un temps de cuisson à la vapeur de 6 minutes et une température de séchage de 57 degrés. Dans ces conditions, la teneur en actéoside atteint 7,25 % et en échinacoside 31,62 %. Les extraits de morceaux de décoction optimisés pourraient réduire considérablement la surproduction de ROS, NO et MDA intracellulaires dans les cellules RAW264.7 stimulées par le LPS. Il a amélioré les activités de SOD, CAT, LDH et augmenté le niveau de GSH intracellulaire, tout en inhibant nettement la libération de TNF-, d'IL-1 et d'IL-6. Les résultats du Western-blot ont indiqué que le rapport de phosphorylation de l'extrait régulait négativement p-p38/p38, p-AKT/AKT, p-JNK/JNK et p-NF-κB/NF-κB.

La technologie optimisée de traitement par séchage à la vapeur peut augmenter efficacement le taux de récupération des principaux glycosides phényléthanoïdes deCistanche tubuleuse. Les morceaux de décoction exercent des effets antioxydants et anti-inflammatoires contre les dommages cellulaires déclenchés par le LPS en inhibant la voie de signalisation p38/AKT/JNK/NF-κB. Cette étude fournit des paramètres techniques pratiques pour le traitement industriel standardisé desCistanche tubuleuse, et offre des preuves expérimentales pour le développement d'aliments fonctionnels et de produits nutraceutiques dérivés de cette ressource végétale.

Mots-clés: Cistanche tubuleuse; technologie de traitement des morceaux de décoction ; l'actéoside; l'échinacoside; stress antioxydant; Macrophages RAW264.7 ; Voie p38/AKT/JNK/NF‑κB

1. Introduction

Cistanche tubuleuse(Schenk) Wight appartient à la famille des Orobanchaceae et sa partie médicinale est la tige charnue séchée avec des feuilles d'écailles. En Chine, cette plante est principalement plantée dans les régions arides du nord-ouest, avec la plus grande zone de plantation dans le sud du Xinjiang. En tant que plante médicinale tonique bien connue, elle a pour fonction de tonifier le yang des reins, de reconstituer l'essence et le sang et d'humidifier les intestins pour soulager la constipation. Cliniquement, il est utilisé pour le traitement de l'insuffisance rénale-yang, de l'insuffisance d'essence-sang, de l'infertilité, des douleurs et de la faiblesse de la taille et des genoux ainsi que de la constipation due à la sécheresse intestinale.

Les glycosides phényléthanoïdes, principalement l'échinacoside et l'actéoside, sont les principaux composants actifs deCistanche tubuleuse. Selon les exigences de la pharmacopée chinoise, la teneur totale en échinacoside et en actéoside des matières premières médicinales qualifiées ne doit pas être inférieure à 1,50 %, ce qui sert d'indicateur critique d'évaluation de la qualité. Approches de traitement traditionnelles pourCistanche tubuleuseadoptent principalement des méthodes de trempage‑humidification, de tranchage‑séchage ou de cuisson à la vapeur du vin. De nombreuses études se concentrent sur l’amélioration du rendement en composants actifs, tandis que les recherches combinant l’optimisation des technologies de transformation et la vérification de l’activité biologique restent insuffisantes.

Le stress oxydatif constitue la base pathologique commune de multiples maladies métaboliques et inflammatoires. Les recherches existantes ont prouvé que les glycosides totaux extraits deCistanche tubuleusepeut supprimer la réponse inflammatoire et activer la voie Nrf2/HO‑1 pour atténuer les lésions hépatiques chez les animaux sepsis. Les fractions glycosides de lignane de cette plante peuvent atténuer l'inflammation des macrophages en régulant la signalisation PI3K/AKT. Néanmoins, les propriétés pharmacologiques des morceaux de décoction traités modernes et son mécanisme moléculaire sous-jacent nécessitent encore une exploration plus approfondie.

Dans cette étude, la conception de surface de réponse Box‑Behnken a été appliquée sur la base de tests à un seul facteur, prenant l'épaisseur des tranches, le temps de cuisson à la vapeur et la température de séchage comme variables pour optimiser le flux de travail de traitement. Après avoir obtenu des paramètres techniques optimaux, un modèle cellulaire de dommages oxydatifs RAW264.7 induit par le LPS a été établi pour évaluer le stress anti-oxydant et la capacité anti-inflammatoire et disséquer le mécanisme de signalisation pertinent. Ce travail vise à fournir des paramètres de traitement stables et exploitables pour une production à l'échelle pilote et à jeter les bases expérimentales pour l'utilisation complète deCistanche tubuleuseressources.

2. Matériels et méthodes

2.1 Matériel végétal, réactifs et instruments

Tiges charnues fraîches deCistanche tubuleuseont été récoltés en automne à Hotan, dans le Xinjiang. Des cellules de leucémie monocytes-macrophages de souris RAW264.7 ont été achetées auprès de Procell Life Science & Technology Co., Ltd (Wuhan, Chine).

L'acétonitrile et le méthanol de qualité HPLC ont été obtenus auprès de la société Merck. Les étalons de référence échinacoside (supérieur ou égal à 98 %) et actéoside (supérieur ou égal à 98 %) ont été fournis par l'Institut de métrologie North Weiye de Pékin. Le diméthylsulfoxyde (DMSO) a été acheté auprès de Sigma‑Aldrich. Le milieu à haute teneur en glucose DMEM, le sérum fœtal bovin (FBS), la solution de double anticorps pénicilline-streptomycine, le kit de quantification des protéines BCA, les kits de test pour NO, MDA, SOD, CAT, GSH et LDH, le lipopolysaccharide (LPS), le réactif MTT et les kits ELISA pour les cytokines inflammatoires étaient tous des produits commerciaux.

Les instruments expérimentaux comprenaient un chromatographe liquide haute performance Shimadzu, un évaporateur rotatif, un pulvérisateur d'herbes chinoises, un four de séchage thermostatique, un cuiseur à vapeur, un lecteur de microplaques pleine longueur d'onde, une balance analytique électronique, une centrifugeuse réfrigérée, une enceinte de biosécurité et un microscope optique inversé.

2.2 Expérience de traitement à un seul facteur

FraisCistanche tubuleuseles tiges charnues ont été coupées en tranches d'épaisseur de 0,2 cm, 0,4 cm, 0,6 cm, 0,8 cm, 1,0 cm et 1,2 cm. Les tranches ont été cuites à la vapeur pendant 3 min, 6 min, 9 min, 12 min, 15 min, 18 min et 21 min respectivement, et séchées sous différents gradients de température, notamment la température ambiante (25 degrés), 40 degrés, 50 degrés, 60 degrés, 70 degrés et 80 degrés. Les échantillons de morceaux de décoction séchés ont été broyés et tamisés à travers un tamis de 40 mailles pour une détection ultérieure. Une formule de notation composite a été adoptée pour une évaluation complète : score composite=teneur en échinacoside × 50 % + teneur en actéoside × 50 %.

2.3 Détermination HPLC de l’actéoside et de l’échinacoside

Préparation de la solution d'échantillon : peser avec précision 1,0 g d'échantillon de poudre, ajouter 100 mL de solution de méthanol à 50 %. Après 30 minutes de trempage, une extraction par ultrasons a été réalisée pendant 40 minutes. La perte de poids a été complétée par 50 % de méthanol après refroidissement. Le surnageant a été filtré sur une membrane microporeuse de 0,22 µm avant injection HPLC.

Une solution étalon de référence mixte d'actéoside et d'échinacoside a été préparée avec 50 % de méthanol et diluée en concentrations en série pour le tracé de la courbe étalon. Conditions chromatographiques : colonne chromatographique COSMOSIL C₁₈ ; le système en phase mobile était constitué d'une solution aqueuse d'acide phosphorique à 0,1 % (A) et d'acétonitrile (B) ; la longueur d'onde de détection a été fixée à 330 nm ; température de la colonne 35 degrés ; débit 1 mL/min. Une méthode standard externe a été utilisée pour le calcul quantitatif des composés cibles.

2.4 Plan expérimental de surface de réponse Box‑Behnken

Selon les résultats expérimentaux à un seul facteur, l'épaisseur de la tranche (X₁), le temps de cuisson à la vapeur (X₂) et la température de séchage (X₃) ont été sélectionnés comme variables indépendantes. La teneur en actéoside (Y₁, %) et la teneur en échinacoside (Y₂, %) ont servi de valeurs de réponse. Le logiciel Design‑Expert 13.0 a été utilisé pour établir un schéma expérimental Box‑Behnken à trois facteurs et à trois niveaux avec un total de 17 groupes de tests. L'ajustement du modèle, l'analyse de la variance et la prédiction des paramètres ont été réalisés par logiciel. Des expériences de vérification pratique ont été réalisées en triple après avoir ajusté les paramètres théoriques optimaux pour les adapter aux opérations de production réelles.

2.5 Culture cellulaire et préparation des échantillons

Un échantillon de morceau de décoction obtenu dans des conditions de traitement optimisées a été préparé en poudre d'extrait. La poudre a été dissoute dans du DMSO puis diluée avec du milieu DMEM complet contenant 10 % de FBS et 1 % de pénicilline-streptomycine pour les expériences cellulaires. Les cellules RAW264.7 ont été cultivées dans un incubateur humidifié à 37 degrés avec 5 % de CO₂.

2.6 Test MTT pour la viabilité cellulaire

La suspension cellulaire a été inoculée dans des plaques à 96 puits à une densité cellulaire de 8 × 10⁴ cellules/mL. Les groupes ont été définis comme un groupe témoin de solvant (0,1 % de DMSO), un groupe modèle LPS (1 ug/mL de LPS) et des groupes de concentrations multiples deCistanche tubuleuseextrait (3,125, 6,25, 12,5, 25, 50, 100, 200, 400 ug/mL). Après 2 heures de pré-incubation des échantillons, du LPS avec une concentration finale de 1 ug/mL a été ajouté, à l'exception des puits de contrôle du solvant, et incubé pendant 24 heures supplémentaires. Une solution de MTT (5 mg/mL) a été ajoutée pour une réaction de 4 heures. Après avoir éliminé le surnageant, du DMSO a été ajouté pour dissoudre le cristal de formazan. La valeur d'absorbance à 490 nm a été détectée par un lecteur de microplaques pour calculer la viabilité cellulaire. Une plage de concentrations sûre a été sélectionnée pour les tests fonctionnels de suivi.

2.7 Mesure des ROS intracellulaires

Les cellules RAW264.7 ont été ensemencées dans des plaques à 6 puits à une densité de 4 × 10⁵ cellules par puits. Après avoir adhéré au mur, les cellules ont été prétraitées avec un gradient de concentrationCistanche tubuleuseextrait (12,5, 25, 50, 100 ug/mL) pendant 2 h, puis stimulé par 1 ug/mL de LPS pendant 24 h. Le niveau de ROS intracellulaire a été détecté avec le kit de réactifs pour sonde fluorescente. L'intensité de fluorescence a été enregistrée sous une longueur d'onde d'excitation de 488 nm et une longueur d'onde d'émission de 525 nm.

2.8 Détection de NO, MDA, SOD, CAT, LDH et GSH

Le surnageant de culture cellulaire a été collecté pour détecter la teneur en NO via la méthode Griess. Les cellules ont été lavées avec du PBS pré-refroidi et lysées sur de la glace. Le lysat cellulaire a été centrifugé à 10 000 tr/min à moins de 4 degrés pendant 5 min pour acquérir le surnageant intracellulaire. La teneur en MDA, les activités enzymatiques des niveaux de SOD, CAT, LDH et GSH ont été mesurées en stricte conformité avec les spécifications du kit. La méthode BCA a été appliquée pour la normalisation des protéines totales.

2.9 Détection ELISA des cytokines pro-inflammatoires

Les cellules RAW264.7 ont été traitées avec un échantillon et du LPS pendant 16 h. Le surnageant de culture a été collecté et centrifugé à 10 000 tr/min pendant 10 min. Les concentrations de sécrétion de TNF‑, IL‑1 et IL‑6 ont été quantifiées par des kits ELISA.

2.10 Analyse par Western Blot

Après une intervention de 45 minutes sur les échantillons et le LPS, la protéine cellulaire totale a été extraite à l'aide du tampon de lyse RIPA. La concentration en protéines a été quantifiée par le kit BCA. Une quantité égale d'échantillon de protéine (50 µg pour chaque piste) a été dénaturée, séparée par électrophorèse SDS-PAGE et transférée sur une membrane PVDF. La membrane a été bloquée avec une solution de TBST à 5 % de lait écrémé pendant 1 h, puis incubée avec des anticorps primaires pendant la nuit à 4 degrés. Après des lavages répétés avec du TBST, l'anticorps secondaire a été incubé à température ambiante pendant 1 h. Les bandes de protéines cibles ont été visualisées par le réactif de chimiluminescence ECL. Une analyse en échelle de gris de bande a été réalisée pour calculer le rapport protéine de phosphorylation/protéine totale.

2.11 Analyse statistique

Le logiciel GraphPad Prism 8.0.2 a été utilisé pour le traçage graphique et l'analyse statistique. L'ANOVA unidirectionnelle et le test t ont été adoptés pour la comparaison des données.P < 0.05 represented statistically significant difference; P < 0.01 and P < 0.001 stood for higher significance. All experimental data were expressed as mean ± standard deviation (\(\bar{x}\pm s\)).

3. Résultats

3.1 Résultats expérimentaux à un seul facteur

L'épaisseur de la tranche a exercé une influence considérable sur la teneur en glycosides cibles. Les tranches de 0,2 cm d'épaisseur étaient faciles à cuire à la vapeur, ce qui provoquait une décomposition thermique des ingrédients actifs. Des tranches trop épaisses empêchaient la libération des substances actives internes. Lorsque le temps de cuisson à la vapeur était fixé à 10 minutes et la température de séchage à 60 degrés, 0,4 cm était le paramètre optimal d'épaisseur de tranche dans le criblage à un seul facteur.

Un temps de cuisson à la vapeur insuffisant ne pouvait pas détruire complètement la structure des cellules végétales et conduisait à un faible rendement en glycosides. Lorsque le temps de cuisson à la vapeur dépassait 6 minutes, une désintégration des tissus se produisait et l'échinacoside ainsi que l'actéoside se dégradaient. Sous une épaisseur de tranche fixe de 0,4 cm et une température de séchage de 60 degrés, 6 minutes étaient les meilleures conditions de temps de cuisson à la vapeur.

Dans une certaine plage, la teneur en glycosides phényléthanoïdes a augmenté parallèlement à l'augmentation de la température de séchage, mais la dégradation a eu lieu une fois que la température dépassait 60 degrés. Avec une épaisseur de tranche de 0,4 cm et un temps de cuisson à la vapeur de 6 minutes, 60 degrés ont montré les meilleures performances globales en matière de criblage à un seul facteur.

3.2 Test d'optimisation et de vérification de la surface de réponse

L'analyse de variance a montré que les modèles de régression pour la teneur en actéoside et en échinacoside étaient significatifs (P < 0.05, P < 0.01). The lack‑of‑fit term was non‑significant (P >0,05), indiquant un bon degré d’ajustement du modèle. Le coefficient de détermination R² était proche de 1, ce qui prouve une forte corrélation entre la valeur prédite et les données expérimentales réelles.

L’ordre des facteurs déterminants pour la teneur en actéoside était l’épaisseur de la tranche > la température de séchage > le temps de cuisson à la vapeur. Pour la teneur en échinacoside, l'ordre était temps de cuisson à la vapeur > température de séchage > épaisseur des tranches.

Les paramètres théoriques optimaux calculés par le logiciel étaient l'épaisseur de la tranche de 0,600 cm, le temps de cuisson à la vapeur de 5,685 minutes et la température de séchage de 57,009 degrés. Compte tenu des conditions pratiques de production, les paramètres ont été ajustés pour une épaisseur de tranche de 0,6 cm, un temps de cuisson à la vapeur de 6 minutes et une température de séchage de 57 degrés. Trois groupes d'expériences de vérification parallèles ont obtenu une teneur en actéoside de 7,25 % et une teneur en échinacoside de 31,62 %. L'écart entre la valeur pratique et la valeur théorique prédite était respectivement de 3,89 % et 4,92 %, ce qui démontre la fiabilité de ce modèle de surface de réponse.

3.3 Résultat du dépistage de la viabilité cellulaire

Dans la plage de concentrations de 0 à 100 ug/mL,Cistanche tubuleuseL'extrait de morceau de décoction n'avait aucune cytotoxicité évidente sur les cellules RAW264.7 et présentait un léger effet favorisant la prolifération. Lorsque la concentration atteignait 200 ug/mL et plus, la viabilité cellulaire diminuait de manière significative. Par conséquent, 12,5 ug/mL, 25 ug/mL, 50 ug/mL et 100 ug/mL ont été sélectionnés comme concentrations de travail pour les expériences cellulaires ultérieures.

3.4 Effet sur le niveau de ROS intracellulaire

Comparé au groupe témoin avec solvant, le groupe modèle LPS présentait une intensité de fluorescence ROS intracellulaire remarquablement élevée (P < 0.001), proving the successful establishment of oxidative‑stress injury model. Pretreatment of Cistanche tubuleusel'extrait a réduit l'accumulation excessive de ROS de manière dose-dépendante (P < 0.001 versus model group).

3.5 Règlement sur les indicateurs liés au NO, au MDA et aux antioxydants

La stimulation du LPS a induit une forte augmentation de la teneur en NO et en MDA dans les cellules RAW264.7. Par rapport au groupe modèle LPS, l'intervention d'extrait a réduit de manière significative le niveau de NO avec une tendance dépendante de la dose. . 12.5 ug/mL d'extrait n'a pas produit d'effet évident sur la teneur en MDA, tandis qu'un extrait de 25 à 100 ug/mL a diminué de manière observable la concentration de MDA (P < 0.001).

Après le traitement au LPS, les activités de la SOD, de la CAT, de la LDH et de la teneur en GSH intracellulaire ont diminué de façon marquée. . 12.5 ug/mL d'extrait pourrait améliorer l'activité de la SOD sans améliorer les activités de la CAT et de la LDH. L'extrait à une concentration de 25 à 100 ug/mL augmente significativement les activités enzymatiques SOD, CAT, LDH et la teneur en GSH de manière dépendante de la concentration.

3.6 Effet inhibiteur sur la sécrétion de cytokines pro-inflammatoires

La stimulation du LPS a déclenché une libération massive de TNF-, d'IL-1 et d'IL-6 dans les macrophages RAW264.7.Cistanche tubuleuseLe prétraitement de l'extrait de décoction a remarquablement supprimé la sécrétion des trois cytokines pro-inflammatoires mentionnées ci-dessus (P < 0.001), presenting prominent dose‑dependent anti‑inflammatory property.

3.7 Modulation sur la voie de signalisation p38/AKT/JNK/NF‑κB

Par rapport au groupe témoin avec solvant, l'intervention LPS a augmenté le rapport de phosphorylation de p‑p38/p38, p‑AKT/AKT, p‑JNK/JNK et p‑NF‑κB/NF‑κB. Les groupes d’extraits à dose moyenne et élevée ont réduit de manière significative le rapport p‑p38/p38 et p‑JNK/JNK. Tous les groupes de concentration ont régulé à la baisse les niveaux de p‑AKT/AKT et de p‑NF‑κB/NF‑κB (P < 0.05 or P < 0.001). Results illustrated that optimized Cistanche tubuleuseL'extrait de morceau de décoction a restreint l'activation de la voie de signalisation p38/AKT/JNK/NF-κB en inhibant la phosphorylation des protéines.

4. Discussion

Exigences de traitement actuelles pourCistanche tubuleuseenregistrés dans la pharmacopée chinoise ne décrivent que des étapes opératoires qualitatives sans paramètres quantitatifs précis. Des recherches antérieures ont indiqué que différentes méthodes de traitement entraîneraient de grandes différences dans la composition chimique et l'activité pharmacologique entre le brut et le transformé.Cistanche tubuleusedes échantillons. Les produits transformés présentent de meilleures performances antioxydantes et immunorégulatrices par rapport aux matières premières.

Dans cette recherche, le traitement moderne par séchage à la vapeur optimisé via la méthodologie de surface de réponse a obtenu un rendement en échinacoside et en acteoside beaucoup plus élevé que de nombreuses techniques de traitement traditionnelles. Il suggère qu’un contrôle précis de l’épaisseur des tranches, de la durée de cuisson à la vapeur et de la température de séchage peut efficacement conserver et améliorer la teneur en phényléthanoïde-glycoside desCistanche tubuleuse.

Le stress oxydatif et l’inflammation sont des processus pathologiques étroitement liés. Un ROS excessif donne lieu à une peroxydation lipidique et à une accumulation de MDA ; dans le même temps, il active les cascades inflammatoires en aval et favorise la génération de NO et de multiples cytokines pro-inflammatoires. Les médiateurs inflammatoires accélèrent encore la production de ROS et forment un cercle pathologique vicieux. Nos résultats expérimentaux cellulaires ont démontré que l'optimisationCistanche tubuleuseL'extrait de décoction pourrait éliminer les ROS redondantes, réduire les marqueurs de dommages oxydatifs NO et MDA, restaurer l'activité du système enzymatique antioxydant représenté par SOD, CAT, LDH et reconstituer le GSH intracellulaire, ainsi qu'inhiber la libération de cytokines pro-inflammatoires avec une relation dose-effet évidente.

p38, JNK appartenant à la famille MAPK et l'axe AKT‑NF‑κB sont les principaux centres de transduction du signal médiateurs de la réponse oxydative-inflammatoire des macrophages. La stimulation par le LPS favorise la phosphorylation de p38, JNK et AKT, active en outre NF-κB et induit la transcription de nombreux gènes pro-inflammatoires. Les données du Western Blot ont révélé queCistanche tubuleuseL'extrait de décoction a bloqué l'activation de la phosphorylation de p38, JNK, AKT et NF‑κB. On en déduit que l'échinacoside et l'actéoside à haute teneur issus d'un traitement optimisé contribuent conjointement à la suppression de la cascade de signalisation p38/AKT/JNK/NF-κB, de manière à soulager le stress oxydatif et les lésions inflammatoires provoqués par le LPS dans les macrophages RAW264.7.

Il existe encore des limites dans cette étude. Toutes les évaluations pharmacologiques ont été réalisées sur un modèle cellulaire in vitro. D'autres expériences sur les animaux sont nécessaires pour vérifier l'efficacité in vivo et les caractéristiques métaboliques des produits transformés.Cistanche tubuleusemorceaux de décoction.

En conclusion, cette étude a établi une technologie de traitement moderne quantifiable et évolutive pourCistanche tubuleusemorceaux de décoction. Sous les paramètres de traitement d'une épaisseur de tranche de 0,6 cm, d'un temps de cuisson à la vapeur de 6 minutes et d'une température de séchage de 57 degrés, la teneur en principaux glycosides phényléthanoïdes est grandement améliorée. Les morceaux de décoction traités peuvent atténuer le stress oxydatif et les dommages inflammatoires dans les macrophages RAW264.7 stimulés par le LPS en inhibant la voie de signalisation p38/AKT/JNK/NF-κB. Cette recherche fournit une référence technique pratique pour la production industrialisée et offre une base expérimentale pour le développement d’aliments fonctionnels et de compléments alimentaires originaires du Xinjiang.Cistanche tubuleuse.

Remerciements

Ce travail a été soutenu par le projet de culture des capacités d'innovation de l'épine dorsale des sciences et technologies des jeunes de l'Académie des sciences agricoles du Xinjiang (xjnkq‑2022022) et du « Programme de doctorat Tianchi » du Xinjiang (2021).

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