PARTIE 1 Activité anti-ostéoporotique d’une médecine traditionnelle chinoise comestible Cistanche Deserticola sur le métabolisme osseux de rats ovariectomisés par les voies de signalisation médiées par RANKL / RANK / TRAF6

Bo Zhang 1†, Ling-Ling Yang 1†, Shu-Qin Ding 1†, Jing-Jing Liu 1, Yan-Hong Dong 1,

Yan-Ting Li 1, Nan Li 1, Xiao-Jun Zhao 1, Chang-Ling Hu 2, Yiping Jiang 3* et Xue-Qin Ma 1*

1 Laboratoire clé de la modernisation de la médecine ethnique Hui, Département d’analyse pharmaceutique, Ministère de l’éducation, École de pharmacie, Université médicale du Ningxia, Yinchuan, Chine, 2 Laboratoire pour les aliments fonctionnels et la santé humaine, Centre d’excellence en technologies post-récolte, Campus de recherche de Caroline du Nord, Université d’État Caroline du Nord, Greensboro, NC, États-Unis, 3 Département de pharmacognosie, La deuxième université médicale militaire, Shanghai, Chine

cistanchepeut traiterostéoporose

Compte tenu des limites des agents thérapeutiques existants pour le traitement de l’ostéoporose postménopausique, il reste encore un besoin de plus d’options avec à la fois une efficacité et moins d’effets indésirables.Cistanche deserticolaY. C. Ma est connu comme une herbe tonique populaire traditionnellement utilisée pour traiter la carence en énergie rénale, y compris la faiblesse musculaire dans les zones minoritaires des comtés asiatiques. Basé sur la théorie de « l’os dominant les reins », un modèle ovariectomisé (OVX) de l’ostéoporose postménopausique a été utilisé pour évaluer l’effet thérapeutique deC. deserticolaextrait (CDE) sur la perte osseuse. Quarante-huit rats Sprague-Dawley femelles, âgés d’environ 12 semaines, ont été répartis au hasard en six groupes, y compris le groupe simulé administré par voie orale avec 0,5% de carboxyméthylcellulose sodique (CMC-Na) (simulacre), le groupe positif traité avec 1 mg / kg de valérate d’œstradiol (EV), les groupes à dose faible, modérée et élevée administrés par voie orale avec 200, 400 et 800 mg / kg / jour de CDE, respectivement. Après 3 mois d’intervention continue, le CDE a présenté une activité anti-ostéoporotique significative mise en évidence par l’amélioration de la densité minérale osseuse totale, la microarchitecture osseuse améliorée; augmentation de l’activité de la phosphatase alcaline; diminution des taux de désoxypyridinoline, de cathepsine K, de phosphatase acide résistante au tartrate et de malondialdéhyde; alors que les poids du corps, de l’utérus et du vagin chez les rats OVX n’ont pas été influencés par l’intervention CDE. En outre, un phénomène apparemment contradictoire sur les niveaux de calcium et de phosphore entre OVX et les rats simulés a été observé et élucidé. Mécaniquement, le CDE a significativement régulé à la baisse les niveaux de TRAF6, RANKL, RANK, NF-κB, IKKβ, NFAT2 et régulé à la hausse les expressions de phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K), AKT, ostéoprotégérine et c-Fos, ce qui impliquait que le CDE pouvait supprimer l’activation induite par RANKL / RANK des voies NF-κB et PI3K / AKT en aval et, en fin de compte, prévenir l’activité des protéines ostéoclastogéniques clés NFAT2 et c-Fos. Toutes les données suggéraient que le CDE possédait une activité anti-ostéoporotique potentielle et cet effet était, au moins en partie, impliqué dans la modulation de la signalisation NF-κB et PI3K/AKT médiée par RANKL/RANK/TRAF6 ainsi que des niveaux de c-Fos et de NFAT2. Par conséquent, le CDE peut représenter un candidat remède prometteur utile pour le traitement de l’ostéoporose postménopausique.

Mots-clés:Cistanche deserticola, antiostéoporotique, TRAF6, RANKL, RANK

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INTRODUCTION

Étant donné que l’ostéoporose n’a pas été considérée comme faisant partie du vieillissement normal, des progrès importants dans le domaine de l’ostéoporose ont été obtenus. Aujourd’hui, l’ostéoporose est devenue un danger majeur pour la santé affectant plus de 200 millions de populations dans le monde entier, avec les 10 milliards de dollars dépensés chaque année pour ces personnes (Ma et al., 2015). L’ostéoporose, y compris l’ostéoporose postménopausique et sénile, était caractérisée par une détérioration micro-architecturale et une faible densité de masse osseuse (DMO) en raison d’un déséquilibre entre la formation osseuse médiée par les ostéoblastes et la résorption osseuse médiée par les ostéoclastes, respectivement (Kanis et coll., 2015). Compte tenu des limites des options thérapeutiques actuelles et de certains effets indésirables indésirables des agents synthétiques (Ye et al., 2015) pour le traitement de la maladie de l’ostéoporose, il est nécessaire d’avoir des solutions de remplacement avec une efficacité et des effets secondaires minimes (Tan et al., 2017). En tant que moyen thérapeutique complémentaire et alternatif remarquable pour le traitement de diverses affections, y compris l’ostéoporose postménopausique, l’herbe médicinale naturelle, en particulier les médecines traditionnelles chinoises (MTC), a été progressivement reconnue et hautement justifiée (Czerwinska et Melzig, 2018; Ma et coll., 2018). Il y a deux mille ans,Cistanche deserticolaY. C. Ma a été trouvé bénéfique pour la santé humaine et enregistré dans le livre médicinal classique chinois nommé Shen Nong Herbal (Anonymous, 1981). Maintenant, c’est une importante MTC officiellement enregistrée dans la pharmacopée chinoise (Chinoise et Pharmacopée, 2015) et aussi comme une herbe tonique célèbre qui a été utilisée dans les comtés asiatiques, y compris la Chine et le Japon pendant des siècles d’années (Wong et al., 2006).C. deserticolas’est avéré posséder un profil d’innocuité favorable (Liao et al., 2018) et de larges fonctions médicinales: chez les personnes, il était largement utilisé pour cuisiner avec des sortes de cuisine à base de plantes pour le traitement de la déficience rénale, de la débilité musculaire et de la faiblesse lombaire; de nos jours, une attention croissante a été accordée à ses diverses fonctions pharmacologiques, y compris anti-inflammatoire, anti-fatigue, antitumoral, activité antioxydante, renforcement de l’immunité, etc. (Gu et al., 2016; Fu et coll., 2018). Il est également bien connu sous le nom de « ginseng du désert » en Chine en raison de son excellent effet curatif médical clinique. L’application traditionnelle et moderne deC. deserticolaa rendu cette herbe populaire à la fois dans la médecine et l’industrie des aliments naturels, ayant ainsi été développée en liquide médicinal et nutritionnel approuvé par la State Food and Drug Administration. DonnéC. deserticolaétait généralement utilisé pour traiter la déficience rénale dans la médecine populaire chinoise, ce qui impliquait que cette plante médicinale comestible peut être considérée comme un agent alternatif prometteur pour intervenir dans l’ostéoporose sur la base de la théorie de « l’os dominant les reins » (Wang et al., 2016). Les données publiées avaient prouvé l’effet anti-ostéoporotique des extraits de C. deserticola in vivo et in vitro (Liang et coll., 2011; Li et coll., 2012; Liang et coll., 2013; Xu et coll., 2017; Song et coll., 2018), et plusieurs composés isolés, dont l’échinacoside (Li et coll., 2013), l’actéoside (Lee et coll., 2013) et le cistanoside A (Xu et coll., 2017) qui avaient également été signalés dans le traitement d’activités anti-ostéoporotiques; et d’autres composés comme le 2'-acétylactéoside ont été confirmés comme possédant des potentiels antioxydants, anti-inflammatoires, neuroprotecteurs, hépatoprotecteurs, immunostimulants (Li et coll., 2016) et anti-âge (Peng et coll., 2016). À ce jour, des dizaines de glycosides phényléthanoïdes bioactifs ont été identifiés à partir duHerbe de Cistanche(Wang et al., 2012), l’échinacoside et l’actéoside sont les principaux composés existants chez la plupart des espèces de Cistanche, dont le contenu était de 1,83 à 41,49 et de 0,27 à 8,28 mg/kg, respectivement; tandis que les autres glycosides phényléthanoïdes, y compris le 2'-acétylactéoside, le 6'-acétylactéoside, le cistanoside A, le cistanoside C et l’isoactéoside, étaient de 1,56 à 3,16 mg/g, de 0,49 à 1,66 mg/kg, de 1,41 à 10,11 mg/kg, de 0,33 à 2,24 mg/kg et de 0,08 à 5,00 mg/kg (Dong et coll., 2018). Sur la base des données publiées ci-dessus, nous avons constaté que les mécanismes moléculaires anti-ostéoporotiques sous-jacents deC. deserticolaen particulier, la signalisation en amont n’était pas claire; et le composé lui-même ne peut pas représenter l’effet de l’herbe qui contenait la propriété de synergie apportée par différents types de composants; en outre, les cibles spécifiques des voies de signalisation étaient totalement différentes entre les différentes composantes. Les travaux en cours visaient à étudier l’effet protecteur potentiel deC. deserticolacontre des rats ovariectomisés (OVX) in vivo en mettant l’accent sur la régulation du facteur 6 associé au récepteur du facteur de nécrose tumorale (TRAF6), l’activateur des récepteurs du ligand kappa B du facteur nucléaire (RANKL), les expressions RANK et les signaux kappa B (NF-κB) induits par le facteur nucléaire RANKL / RANK / TRAF6 et la phosphoinositide 3-kinase (PI3K) / protéine kinase (AKT). Le remodelage osseux, y compris la reconstruction et la réparation, est un processus complexe régi par l’équilibre entre la formation osseuse ostéoblastique et la résorption osseuse ostéoclastique, et l’augmentation de la résorption osseuse principalement causée par une ostéoclastogenèse améliorée conduit généralement à l’ostéoporose même à la fracture osseuse. La plupart des signaux cellulaires, des hormones et des facteurs de croissance essentiels à la différenciation et à la fonction des ostéoclastes étaient contrôlés par RANK et ses deux ligands, RANKL et l’ostéoprotégérine (OPG) (Lacey et coll., 1998). Et des découvertes récentes ont en outre révélé que TRAF6 était un facteur réglementaire clé dans les cascades de signalisation déclenchées par RANKL / RANK (Tan et al., 2017). Par le recrutement de TRAF6, RANKL lié à son récepteur RANK, puis les cascades de signalisation en aval, y compris NF-κB et PI3K / AKT ont été déclenchées, puis les protéines ostéoclastogènes clés de c-Fos et le facteur nucléaire des cellules T activées c2 (NFAT2) (Takayanagi, 2007) ont été régulés à la hausse, et enfin, la différenciation des ostéoclastes a été initiée. Dans la présente étude, le mécanisme anti-ostéoporotique sous-jacent du CDE sur la résorption osseuse médiée par RANKL/RANK/TRAF6 est étudié et discuté.

MATÉRIAUX ET MÉTHODES

Animaux, cellules, anticorps et réactifs

Rats Sprague-Dawley adultes femelles (Université de médecine du Ningxia, Yinchuan, Chine); cellules RAW264.7 (Zhong Qiao Xin Zhou Biotechnology Co., Ltd., Shanghai, Chine); facteur de stimulation des colonies de macrophages (M-CSF) et RANKL (PerroTech, Inc. USA); valérate d’estradiol [valérate d’estradiol (EV), Delpharm Lille SAS, Paris, France]; kit ELISA cathepsine K (CK) (BioVision, américain); la désoxypyridinoline (DPD) et la gla-protéine osseuse (BGP) relient les kits ELISA croisés (Xinyu Biological Engineering Co., Ltd, Shanghai, Chine); kits de réactifs au malondialdéhyde (MDA), au glutathion (GSH) et à la superoxyde dismutase (SOD) (Jianchen Biological Engineering, Nanjing, Chine); pénicilline et streptomycine (Gibco, États-Unis); membrane de fluorure de polyvinylidène (PVDF) (Millipore Life Sciences, États-Unis); des anticorps primaires, dont GAPDH (18AF0401), β-actine (17AV0411), IκB kinase β (IKKβ) (AD01134589), TRAF6 (2), RANKL (GR3193842-5), RANK (AA02113656), NFκBIA (AH04138226), PI3K (AC09021266), OPG (AG06292776), c-Fos (AG12059411), AKT (AF05173234), NFAT2 (AO11015648) et des anticorps secondaires (anti-lapin de chèvre conjugué au raifort, immunoglobuline G, 134658) ont été proposés par ZSGB-BIO (Beijing, Chine); Le milieu d’aigle modifié (DMEM) de Dulbecco, le kit de dosage de la protéine de l’acide bicinchoninique, le sérum fœtal bovin (FBS) et la solution saline tamponnée au phosphate (PBS) de Dulbecco ont été achetés à Hylcone (Logan, UT, États-Unis); échinacoside [chromatographie liquide haute performance (CLHP)≥98 %, 11167-200503, National Institutes for Food and Drug Control, Chine]; acteoside (HPLC≥98 %, AB0497, ALFA, Chine); isoactéoside (HPLC≥98 %, AB17021202, ALFA, Chine); 2'-acétyl actéoside (HPLC≥98%, PRF7081243, Chengdu Pu Rui Fa Technology, Co., Ltd. Chine); cistanoside A, cistanoside C et 6'-acétyl actéoside (CLHP≥95 %, isolés et purifiés en laboratoire) (Xu et al., 2017).

Matériel végétal et préparation

Tiges séchées deC. deserticolaY. C. Ma ont été achetés du comté de Yongning, province du Ningxia, en septembre 2015, les coordonnées spécifiques de la cueillette des plantes étaient (106.026597, 38.262816). L’herbe a été identifiée par le professeur Ling Dong (département de pharmacognosie, Université de médecine du Ningxia), avec un échantillon de bon (# 20150901) était disponible dans l’herbier d’analyse pharmaceutique. Un total de 10,0 kg séchés et en poudreC. deserticolaa été extrait en utilisant la méthode du reflux thermique, la procédure détaillée était la suivante: le solvant était de 75% d’éthanol, le rapport deC. deserticolale matériau en solvant était de 1:8, le temps de reflux a duré 2 h et les matériaux ont été reflux trois fois; ensuite, tous les filtrats ont été mélangés ensemble et concentrés sous pression réduite pour obtenir 6,5 kgC. deserticolaextraits d’éthanol (CDE). Pour l’expérimentation animale, 0,5 % de carboxyméthylcellulose sodique (CMC-Na) a été utilisé pour suspendre le CDE, et la posologie administrée par voie orale a été fixée à 200, 400 et 800 mg/kg/jour, avec un volume de 1 ml/100 g de poids corporel de chaque animal; pour l’analyse par transfert western, le sulfoxyde de diméthyle a été utilisé pour dissoudre le CDE, puis dilué avec du DMEM pour acquérir la concentration finale de 0,01, 0,1 1 mg/ml; pour l’analyse CLHP, le méthanol a été appliqué pour dissoudre le CDE, puis filtré et dilué avec la phase mobile initiale pour obtenir la concentration appropriée.

Analyse par chromatographie liquide haute performance deExtrait de Cistanche deserticola

Les principaux constituants chimiques du CDE ont été identifiés en utilisant la CLHP avec les substances de référence correspondantes. Les conditions de chromatographie ont été fixées comme suit : instrument Agilent 1220 RP-HPLC avec colonne C18 (4,6 i.d. × 250 mm ; 5 μm), une phase mobile d’élution de gradient contenant principalement de l’eau et de l’acétonitrile a été utilisée pour obtenir des pics bien séparés : solvant A (eau contenant 0,5 % d’acide acétique) et B (acétonitrile) : 0–4 min, 85–83 % A ; 4–10 min, 83–80 % A; 10–30 min, 80–75% A; 30–40 min, 75–70% A. Le volume d’injection de l’échantillon était de 5 μl, la température était contrôlée à 30 °C et la détection uv était effectuée à 333 nm (Dong et al., 2018). Des substances de référence, notamment l’échinacoside, l’actéoside, l’isoactéoside, le cistanoside A, le cistanoside C, le 2'-acétyl actéoside et le 6'-acétyl-actéoside ont été utilisées pour identifier le pic correspondant.

cistanchepouvoiranti-apoptose

Expérimentation animale

Pour les expériences sur les animaux, toutes les procédures ont été effectuées en stricte conformité avec le protocole approuvé par le guide du comité institutionnel de soins et d’utilisation des animaux de l’Université de médecine du Ningxia (NXMU-20130311). Quarante-huit rats Sprague-Dawley femelles adultes pesant environ 237 ± 25 g ont été obtenus (Université médicale du Ningxia, Yinchuan, Chine) et entretenus pendant 1 semaine avec un régime standard en granulés et de l’eau du robinet dans des conditions environnementales contrôlées. Ensuite, chaque rat a subi soit une anesthésie (hydrate de chloral, 100 mg/kg, i.p.) seulement, ovariectomisé simulé (simulacre), soit deux ovaires ont été retirés puis divisés au hasard en cinq groupes: le groupe modèle (OVX) a été administré par voie orale avec 0,5% de CMC-Na; groupe positif (EV) avec 1 mg/kg/jour de valérate d’œstradiol; groupes à dose faible (CDEL), modérée (CDEM) et élevée (CDEH) avec 200, 400 et 800 mg / kg / jour de CDE, respectivement. Les expériences ont duré 12 semaines; le poids corporel de chaque rat a été mesuré toutes les deux semaines avec la dose d’administration ajustée en conséquence. Après le dernier jour de l’intervention, 24 h d’urine, de sérum, de fémur, de tibia et d’utérus ont été collectés et stockés à −80 ° C pour une analyse différente ultérieure.

Paramètres biochimiques

Les taux sériques de SOD, de GSH, de MDA, de cathepsine K, de BGP et de DPD urinaire ont été déterminés par les kits de réactifs correspondants, tandis que l’activité de la phosphatase acide résistante au tartrate (TRAP) a été évaluée selon une référence (Jiao et al., 2009). L’activité de la phosphatase alcaline (ALP) et les niveaux de Ca et de P ont été estimés à l’aide d’un analyseur automatique (Ciba-Corning 550, États-Unis).

Analyse de la densité minérale osseuse et de la micro-tomodensitométrie

Un appareil d’absorptiométrie à rayons X à double énergie (Lunar, États-Unis) a été utilisé pour estimer la densité minérale osseuse (DMO, g / cm2) du fémur droit de chaque rat avec le mode de balayage a été défini comme un petit animal. Ensuite, le même fémur a été utilisé pour évaluer l’image 3D de la microarchitecture osseuse trabéculaire en appliquant un appareil de micro-scanner CT (GE, américain), la région d’intérêt (ROI) a été choisie en définissant les mêmes coordonnées dans la plaque de croissance du fémur de chaque échantillon, les paramètres de microarchitecture y compris la teneur en minéraux osseux (BMC), la teneur en minéraux tissulaires (TMC), la densité minérale tissulaire (TMD), la séparation trabéculaire (Tb. Sp), le nombre trabéculaire (Tb. N) et l’épaisseur trabéculaire (Tb. Th) ont été obtenus en analysant le retour sur investissement.

Détermination du transfert western

Les ostéoclastes ont été induits en utilisant des cellules RAW 264,7 ajoutées avec MCSF (25 ng / ml) et RANKL (20 ng / ml) (Yang et al., 2019). Après 6 jours de stimulation, les cellules ostéoclastes matures qui ont été identifiées pour l’activité TRAP ont été traitées avec ou sans CDE (0,01, 0,1 et 1 mg / ml, respectivement) pendant 48 h, puis les cellules ont été lysées par tampon de lyse, et les surnageants ont été centrifugés et séparés par électrophorèse de gel de dodécylsulfate de sodium-polyacrylamide et transférés sur des membranes PVDF. La membrane a été bloquée avec du lait 5% écrémé à température ambiante pendant 1 h, puis incubée avec des anticorps primaires contre TRAF6 (1:400), RANKL (1:400), RANK (1:400), IKKβ (1:400), NFκBIA (1:400), OPG (1:400), PI3K (1:400), AKT (1:400), c-Fos (1:400), NFAT2 (1:400), β-actine et GAPDH (1:1 000). Les mêmes membranes ont été dépouillées et sondées à nouveau avec les anticorps correspondants, détectés par le logiciel Image Lab à la fin. Chacune des expériences a été répétée trois fois, avec β-actine ou GAPDH comme contrôle interne.

Analyse statistique

Les données de nos expériences, décrites comme la moyenne ± SD, ont été analysées à l’aide d’une analyse unidirectionnelle de la variance suivie du test de Dennett (logiciel SPSS 22.0, SPSS, USA), p< 0.05="" was="" considered="" as="" statistically="">

cistancheégalement être connu sous le nom dedésertGinseng

RÉSULTATS Principaux constituants chimiques deCistanches deserticola

Extrait En utilisant des substances de référence correspondantes, sept composés principalement de glycosides phényléthanoïdes, y compris l’échinacoside,cistanosideUnacteoside, isoacteoside,cistanosideC, 2'-acétyleacteoside,et 6'-acétyleacteosideont été identifiés existant dans cet extrait, leurs pics de chromatographie correspondants et leurs structures ont été montrés à la figure 1.

Effets deCistanches deserticolaExtrait sur le corps, l’utérus et les poids du vagin

Il n’y avait pas de différence significative dans le poids corporel moyen initial avant la chirurgie. Cependant, 3 mois après l’opération ovariectomisée, le poids corporel des rats du groupe modèle OVX a été significativement augmenté de 35,7%, tandis que les poids humides utérins et vaginaux ont fortement diminué de 91,2 et 61,8%, respectivement, par rapport aux rats simulés (p< 0.001).="" cde,="" with="" the="" dosage="" of="" 200–800="" mg/kg/day,="" showed="" no="" influence="" on="" these="" noticeably="" increased="" body="" weights="" and="" decreased="" uterine="" and="" vagina="" wet="" weights,="" as="" figure="" 2="" showed.="" however,="" totally="" different="" to="" cde,="" 1="" mg/kg/day="" of="" ev="" exhibited="" a="" significant="" estrogenic="" effect,="" of="" which="" the="" gained="" body="" weight="" and="" decreased="" uterine="" and="" vagina="" weights="" in="" ovx="" rats="" were="" significantly="" reversed="" by="" ev="">

Effets deCistanches deserticolaExtrait sur la densité minérale osseuse et la microarchitecture osseuse

Une tendance intuitive à la baisse a été observée dans le groupe OVX avec DMO était de 0,158 ± 0,016 g / cm2 par rapport aux rats simulés avec la DMO était de 0,180 ± 0,010 g / cm2 (p< 0.001),="" which="" implied="" the="" bmd="" of="" the="" rats="" in="" ovx="" model="" group="" decreased="" about="" 12.2%="" after="" 12="" weeks="" of="" the="" ovariectomized="" surgery="" as="" compared="" to="" the="" sham="" rats.="" as="" figure="" 3="" showed,="" all="" cde="" treated="" rats="" showed="" an="" increased="" bmd="" by="" 15.1%="" (p="">< 0.001),="" 8.1%="" (p="">< 0.05),="" and="" 9.2%="" (p="">< 0.05),="" respectively,="" as="" compared="" to="" ovx="" model="" group.="" the="" 3d="" image="" and="" the="" corresponding="" quantitative="" results="" of="" the="" trabecular="" bone="" microarchitecture="" of="" rats="" were="" shown="" in="" figure="" 4.="" consistent="" with="" the="" results="" of="" bmd,="" an="" obvious="" reduction="" of="" the="" trabecular="" area="" was="" obtained="" in="" the="" ovx="" model="" group="" as="" compared="" with="" the="" sham="" rats.="" however,="" the="" deterioration="" of="" trabecular="" bone="" was="" partly="" improved="" by="" cde="" intervention,="" except="" tmd="" and="" tb.="" th,="" the="" other="" trabecular="" bone="" parameters="" include="" bmc,="" tmc,="" and="" tb.="" n="" were="" significantly="" increased="" and="" tb.="" sp="" was="" notably="" decreased="" after="" cde="">

Effets deCistanches deserticolaExtrait sur l’urine et les paramètres biochimiques sériques

Douze semaines après l’opération ovariectomisée, une tendance à la baisse mais non statistique du taux d’excrétion urinaire de Ca a été observée dans le groupe modèle OVX, comme l’a montré la figure 5, tandis que le niveau d’urine P chez les rats du groupe modèle OVX a diminué environ trois fois moins que chez les rats simulés (p< 0.001).="" after="" treatment="" with="" cde="" (200–400="" mg/kg/day)="" for="" 12="" weeks,="" the="" reduction="" of="" serum="" ca="" and="" p="" were="" significantly="" prevented="" (p="">< 0.05),="" and="" the="" decreased="" urinary="" excretion="" level="" of="" p="" was="" also="" inhibited="" in="" all="" the="" cde="" treated="" groups="" (p=""><>

Effets deCistanches deserticolaExtrait sur la formation osseuse et les marqueurs de résorption

En ce qui concerne les marqueurs de formation osseuse de l’ALP et du BGP (Figure 6), l’activité de l’ALP, et non du BGP, a été significativement améliorée dans les trois groupes traités par des doses de CDE (200 à 800 mg / kg / jour) par rapport aux rats simulés. En ce qui concerne les marqueurs de résorption osseuse de TRAP, DPD et cathepsine K (Figure 7), les activités des trois résorptions osseuses

les marqueurs ont été significativement augmentés d’environ 20,9 ~ 74,8% chez les rats du groupe modèle OVX par rapport aux rats simulés; et comme on pouvait s’y attendre, le CDE présentait un grand potentiel pour supprimer tous ces indices, dont l’activité de la cathepsine K a diminué de 49,9 à 66,7 % (p< 0.001),="" the="" level="" of="" dpd="" was="" declined="" by="" 22.9~39.3%="" (p="">< 0.01),="" and="" the="" property="" of="" trap="" was="" prevented="" by="" 20.1~27.6%="" (p="">< 0.01),="" respectively,="" as="" compared="" with="" the="" rats="" of="" ovx="" model="">

Effets de l’extrait de Cistanches deserticola sur les activités du glutathion et de la superoxyde dismutase ainsi que sur la teneur en malondialdéhyde

Il n’y avait pas de différences significatives dans les activités de la SOD et du GSH entre les groupes OVX et sham après 3 mois d’opération ovariectomisée, comme le montre la figure 8, alors que la teneur en MDA était évidemment améliorée chez les rats d’OVX

de 68,2 % par rapport aux rats simulés, et ces taux accrus de MDA ont été significativement supprimés par des doses faibles, modérées et élevées de groupes traités par CDE, les pourcentages d’inhibition étant respectivement de 66,1, 44,0 et 62,8 %, par rapport aux rats du groupe modèle OVX.

Effets deCistanches deserticolaExtrait sur les niveaux d’expression protéique de TRAF6, RANKL, RANK, NFκBIA, IKKβ, PI3K, AKT, OPG, c-Fos et NFAT2

Comme l’a montré la figure 9, les expressions de TRAF6, RANKL, RANK, IKKβ, NFκBIA et NFAT2 étaient significativement régulées à la baisse, tandis que les niveaux de PI3K, AKT, OPG et c-Fos étaient évidemment régulés à la hausse après le traitement par CDE par rapport au témoin. Mécanisme hypothétique (Figure 10) par lequel CDE pourrait réguler à la baisse les niveaux de RANKL, RANK et TRAF6 et réguler à la hausse l’expression d’OPG, de sorte que les quantités de liaison de RANKL avec RANK ont été réduites; par conséquent, les voies en aval, y compris le signal NF-κB, ont été supprimées et PI3K / AKT a été stimulé, et ces cascades de signalisation ensemble ont conduit à l’activation de c-Fos a été favorisée et NFAT2 a été inhibé, et enfin la résorption osseuse ostéoclastique a été empêchée. DISCUSSION