PARTIE Ⅱ : Évaluations de l'efficacité curative de G. Fruticosus sur des rats mâles Wistar néphrolithiatiques
Mar 22, 2022
Contact : Audrey Hu Whatsapp/hp : 0086 13880143964 E-mail :audrey.hu@wecistanche.com
Tilahun Alelign, Tesfaye Sisay Tessema, Asfaw Debella et Beyene Petros
Résumé
Contexte : Dans la médecine traditionnelle éthiopienne, on prétend que les plantes médicinales peuvent traiter la lithiase urinaire, bien qu'il n'y ait pas suffisamment de preuves scientifiques. L'objectif de cette étude était d'évaluer l'efficacité curative des extraits de Gomphocarpus fruticosus chez des rats néphrolithiatiques induits expérimentalement.
Méthodes : Une lithiase urinaire a été induite chez des rats mâles Wistar en leur donnant de l'éthylène glycol dans de l'eau potable pendant 28 jours. Les effets curatifs ont été évalués après des administrations orales de 200 mg/kg des extraits de 15 à 28 jours. Des échantillons d'urine ont été prélevés 1 jour avant de sacrifier les rats. Des échantillons de sang, de foie et de rein ont été prélevés sous anesthésie au jour 28. Les cristaux dans l'urine ont également été analysés par microscopie optique.
Résultats:G. fruticosusL'extrait d'EtOAc a réduit significativement le niveau de sodium (P<0.001), whereas="" it="" was="" significantly="" elevated="" the="" levels="" of="" magnesium="" and="" citrate=""><0.01)compared to="" lithiatic="" control.="">G. fruticosusL'extrait de BuOH a abaissé les niveaux de potassium (P<0.01), calcium,="" and="" phosphate="" in="" urolithiatic="" rats.="" it="" was="" also="" observed="" that="">G. fruticosusL'extrait d'EtOAc a diminué le niveau d'oxalate dans l'urine (P<0.001), whereas="" it="" was="" increased="" the="" levels="" of="" magnesium=""><0.05) and="" citrate=""><0.01) in="" serum="" analysis="" after="" exposure="" to="" buoh="" extract.="" in="" the="" kidneys,="" caox="" crystal="" deposits="" were="" reduced="" significantly="" by="">G. fruticosusExtrait EtOAc (P<>
Conclusion : Il a été noté queG. fruticosusL'extrait d'EtOAc était puissant dans le traitement de la lithiase urinaire. Cependant, une étude plus approfondie est nécessaire pour évaluer l'efficacité des composés actifs contre la lithiase urinaire. Mots clés : Efficacité, Gomphocarpus fruticosus, In vivo, Urolithiase
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Résultats
Efficacité curative des extraits de G. fruticosus
Dans les études curatives (thérapeutiques), la dose de l'extrait sélectionné était de 200 mg/kg de poids corporel de rats, soit un dixième de la dose maximale tolérée de 2000 mg/kg pc [32]. Celui-ci a été choisi sur la base d'études antérieures de toxicité aiguë et/ou subaiguë révélant son innocuité jusqu'à une dose de 2000 mg/kg. L'induction de calculs rénaux par l'administration de 0,75 % d'EG combiné avec du chlorure d'ammonium (1 %) dans l'eau potable a été confirmée chez des rats mâles Wistar.
Analyse photomicroscopique des urines (24 h)
L'analyse des échantillons d'urine a montré des variations dans la densité et la taille des cristaux. Parmi lesG. fruticosusextraits successifs au solvant,G. fruticosusExtraits d'EtOAc (Fig. 1k) etG. fruticosusLes extraits de BuOH (Fig.1l) ont également réduit le nombre et la taille des cristaux (Fig. 1).
Fig. 1 Photomicrographies d'urine de cristaux de CaOx après traitement curatif à une dose d'extraits de 200 mg/kg.La morphologie et le nombre de cristaux d'oxalate de calcium observés au microscope optique (40x), dans l'urine du matin de rats mâles Wistar a Témoin/véhicule normal ; b Contrôle lithiasique ; traitement avec c Citrate de potassium (K-Cit); d Cystone ; jeG. fruticosusextrait de PET ; jG. fruticosusChl. extrait; kG. fruticosusextrait EtOAc; jeG. fruticosusextrait de BuOH ; et MG. fruticosusfraction aqueuse.
Analyse d'urine et de sérum pour les électrolytes et test de la fonction rénale
Chez les rats expérimentaux,G. fruticosusL'extrait d'EtOAc a considérablement réduit le niveau de sodium par rapport au témoin lithiasique (P<0.001). the="" level="" of="" potassium="" was="" reduced="" by="">G. fruticosusExtrait de BuOH (P<0.010). treatment="" with="" the="" aqueous="" extract="" of="" etoac="" and="" buoh="" extracts="" of="">G. fruticosusa montré une réduction significative des excrétions urinaires de protéines (P<0.011) in="" relation="" to="" lithiatic="" control.="" sodium="" concentration="" was="" also="" reduced="" very="" significantly="" with="" the="" treatment="" of="" etoac="" extract="" of="">G. fruticosus (P<0.001). treatment="" by="" the="" extract="" of="">G. fruticosusBuOH a abaissé le niveau d'acide urique par rapport au groupe lithiatique (P<0.050). however,="" lithogenic="" induction="" may="" cause="" impairments="" of="" renal="" function="" as="" evidenced="" by="" raising="" the="" levels="" of="" creatinine,="" proteins,="" and="" uric="" acids.="" in="" the="" serum="" analysis,="" the="" level="" of="" potassium="" was="" reduced="" by="">G. fruticosusExtrait d'EtOAc par rapport au témoin lithiasique (P<0.010). it="" was="" also="" found="" that="" the="" effects="" of="">G. fruticosusL'extrait de BuOH au niveau de chlorure était proche du témoin normal. Le taux de créatinine a été augmenté parG. fruticosusextrait brut et extrait PET(P<0.01)compared to="" the="" normal="" control="" (table="">
cistanche tubulosa
Tableau 2 Excrétions urinaires (24 h) et analyse sérique des électrolytes formant des calculs rénaux et des marqueurs de la fonction rénale chez des rats Wistar mâles expérimentaux traités avec des extraits de plantes sélectionnés à une dose de 200 mg/kg le 28e jour après le traitement.L'extrait mixte {{0}} la combinaison d'extraits d'A. Aspera, S. punctata et R. abyssinicus (rapport 1:1:1), Aqueux (aq.), Acétate d'éthyle (EtOAc), Butanol (BuOH), chloroforme (Chl) et éther de pétrole (PET). Les données ont été présentées la moyenne ± SD pour 6 rats dans chaque groupe (n=6). Des comparaisons entre les moyennes ont été faites contre le groupe I (témoin de véhicule) et le groupe II (témoin lithiasique). *p < 0.{{10}}5,="" **p="">< 0.01,="" ***p="">< 0,001="" indiquent="" des="" changements="" significatifs="" par="" rapport="" à="" groupe="" i="" (véhicule="" témoin),="" #p="">< 0,05,="" ##p="">< 0,01,="" ###p="">< 0,001="" indiquent="" un="" changement="" significatif="" par="" rapport="" au="" groupe="" ii="" (témoin="">
Analyse urinaire et sérique des inhibiteurs et promoteurs de formation de cristaux
Comme indiqué dans le tableau 3, le niveau de magnésium a été significativement élevé par la supplémentation enG. fruticosusExtrait d'EtOAc comparé au témoin lithiasique (P<0.010). similar="" to="" k-cit,="" the="" effects="" of="">G. fruticosusL'extrait d'EtOAc a augmenté le niveau de citrate de manière significative (P<>G. fruticosusL'extrait de BuOH a abaissé de manière significative les niveaux élevés de calcium et de phosphate dans l'urine par rapport au témoin malade (lithiasique) (rats du groupe I) (P<0.010). it="" was="" also="" observed="" that="">G. fruticosusL'extrait d'EtOAc a diminué le niveau d'oxalate dans le rine par rapport au témoin lithiatique (P<0.001). in="" the="" serum="" analysis,="" the="" excretions="" of="" calcium,="" oxalate,="" and="" phosphate="" were="" grossly="" increased="" in="" lithiatic="" induced="" male="" wistar="" rats.="" the="" etoac="" extract="" of="">G. fruticosusaugmenté la concentration de magnésium (P<0.052). the="" serum="" level="" of="" citrate="" was="" increased="" after="" exposure="" to="" buoh="" extract="" of="">G. fruticosus(P<0.011), suggesting="" similar="" effects="" to="" potassium=""><0.001).>G. fruticosusChl. l'extrait réduit significativement le taux de cit-rate par rapport au témoin normal (P<0.001)(table>
Tableau 3 Effets des extraits de plantes à la dose de 200 mg/kg sur les modifications de l'excrétion urinaire (24 h) et des inhibiteurs et promoteurs des cristaux sériques chez les rats mâles Wistar au 28ème jour post-traitement.L'extrait mixte {{0}} la combinaison d'extraits d'A. aspera, S. punctata et R. abyssinicus (ratio 1 : 1 : 1). Les données ont été présentées sous forme de moyenne ± SD pour 6 rats dans chaque groupe (n=6). Des comparaisons entre les moyennes ont été faites contre le groupe I (témoin de véhicule) et le groupe II (témoin lithiasique). *p < 0.{{10}}5,="" **p="">< 0.01,***p="">< 0,001="" indiquent="" des="" changements="" significatifs="" par="" rapport="" à="" groupe-i="" (véhicule="" témoin),="" #p="">< 0,05,="" ##p="">< 0,01,="" ###p="">< 0,001="" indiquent="" des="" changements="" significatifs="" par="" rapport="" au="" groupe="" ii="" (témoin="">
Le taux sérique d'alanine aminotransférase (ALT) et d'aspartate aminotransférase (AST) a augmenté chez le contrôle lithiasique par rapport au contrôle normal (sain) (P<0.050).>G. fruticosusL'extrait de PET a augmenté de manière significative le taux sérique d'AST (P<0.001)compared to="" the="" healthy="" control.="" buoh="" extract="" of="" g.fruticosus="" lowered="" significantly="" the="" level="" of="" ast="" similar="" to=""><0.001) compared="" to="" lithiatic="" control="" (table="">
Tableau 4 Effets des extraits de plantes sur l'activité enzymatique sérique en relation avec le traitement des calculs rénaux à une dose d'extrait de 200 mg/kg au 28ème jour post-traitement.L'extrait mixte {{0}} la combinaison d'extraits d'A. aspera, S. punctata et R. abyssinicus (ratio 1:1:1). Les données ont été présentées sous forme de moyenne ± SD pour 6 rats dans chaque groupe (n=6). Des comparaisons entre les moyennes ont été faites contre le groupe I (témoin de véhicule) et le groupe II (témoin lithiasique). *p < 0.{{10}}5,="" **p="">< 0.01,***p="">< 0,001="" indiquent="" des="" changements="" significatifs="" par="" rapport="" à="" groupe="" i="" (véhicule="" témoin),="" #p="">< 0,05,="" ##p="">< 0,01,="" ###p="">< 0,001="" indiquent="" des="" changements="" significatifs="" par="" rapport="" au="" groupe="" ii="" (témoin="">
Analyse de l'homogénat de rein
Les concentrations de calcium, de phosphore et d'oxalate ont été augmentées dans le groupe lithiatique (groupe II) par rapport au témoin normal (groupe I). Tous les traitements ont montré des réductions significatives du niveau de phosphate (P<0.050), except="" treatment="" with="" buoh="" and="" chl.="" extracts="" of="" g.fruticosus.="" the="" administration="" of="" the="" aqueous="" mixed="" extract="" and="">G. fruticosusL'extrait d'EtOAc a réduit le niveau d'oxalate de manière significative par rapport aux groupes lithiatiques non traités (P<0.011)(table>
Tableau 5 Effet des extraits de plantes sur les constituants de l'homogénat de rein en phosphate, oxalate et calcium suite aux administrations du test curatif au 28ème jour à la dose de 200 mg/kg.L'extrait mixte {{0}} la combinaison d'extraits d'A. aspera, S. punctata et R. abyssinicus (ratio 1 : 1 : 1). Les données ont été présentées sous forme de moyenne ± SD pour 6 rats dans chaque groupe (n=6). Des comparaisons entre les moyennes ont été faites contre le groupe I (témoin de véhicule) et le groupe II (témoin lithiasique). *p < 0.{{10}}5,="" **p="">< 0.01,***p="">< 0,001="" indiquent="" des="" changements="" significatifs="" par="" rapport="" à="" le="" groupe="" i="" (témoin="" véhicule),="" #p="">< 0,05,="" ##p="">< 0,01,="" ###p="">< 0,001="" indiquent="" des="" changements="" significatifs="" par="" rapport="" au="" groupe="" ii="" (témoin="">
Évaluations des reins par rapport aux dépôts de cristaux de CaOx Un examen au microscope optique pour les cristaux de CaOx dans les coupes histologiques de rein a révélé des cristaux de CaOx dans la lumière tubulaire. La taille et la quantité de dépôts de CaOx ont diminué parmi les groupes traités par rapport aux témoins lithiatiques. L'effet deG. fruticosusL'extrait d'EtOAc (G) et sa fraction BuOH (H) ont réduit le nombre de cristaux par rapport au témoin lithiatique (B), mais ne réduisent pas pour les extraits aqueux deG. fruticosus(I)(Fig. 2).
Fig. 2 Images photomicroscopiques représentatives (100x) de coupes rénales de rats Wistar mâles testés dans des extraits de plantes pour l'effet de dépôt de cristaux anti-CaOx (dose d'extraits 200 mg/kg).Histopathologie des tissus rénaux a Témoin normal/véhicule, b Témoin lithiasique, traitement avec c K-Cit, d Cystone, eG. fruticosusExtrait de PET, fG. fruticosusChl. extrait, gG. fruticosusExtrait EtOAc, hG. fruticosusExtrait de BuOH, et jeG. fruticosusaq. fraction. Les extraits mixtes (la combinaison d'extraits d'A. aspera, S. punctata et R. abyssinicus dans un rapport 1:1:1). Cristaux de CaOx irréguliers polymorphes dans les tubules rénaux (cercle jaune/flèches). Les images étaient des sections de paraffine de 5 μm d'épaisseur avec une coloration à l'hématoxyline-éosine.
Bénéfice de l'extrait de cistanche tubulosa : élimine les radicaux libres
Effets des extraits de G.fruticosus sur le dépôt de CaOx dans les reins
Le nombre de dépôts de cristaux a été compté à partir du cortex, de la moelle et de la papille en prenant la moyenne de 4 champs microscopiques. En comparaison avec les groupes lithogéniques, les dépôts de cristaux de CaOx dans les reins ont été réduits de manière significative parG. fruticosusExtrait EtOAc p<0.010). the="" number="" of="" crystal="" deposits="" was="" counted="" via="" a="" sagittal="" section="" or="" longitudinal="" plane="" of="" each="" renal="" tissue="" specimen="" divided="" into="" 4="" equal-sized="" regions(two="" virtual="" lines)and="" taking="" the="" mean="" of="" all="" fields(fig.="" 3).="" it="" has="" been="" noted="" that="">G. fruticosusL'extrait d'EtOAc était l'agent le plus puissant dans le traitement de la lithiase urinaire, suivi de l'extrait de BuOH.
Fig. 3 Scores de dépôt de cristaux de CaOx dans l'étude curative après traitement avec différents extraits successifs de G. fruticosus (dose d'extraits : 200 mg/kg).Les données ont été exprimées en moyenne ± SD de n {{0}} rats par groupe. *p < 0.05,="" **p="">< 0,01="" et="" ***p="">< 0,001="" indique="" un="" changement="" significatif="" par="" rapport="" au="" témoin="" lithiasique="" (groupe="">
avantage de l'extrait de cistanche tubulosa : antibactérien
Discussion
Les reins filtrent les déchets du sang et les rejettent dans l'urine, ce n'est pas possible si les déchets ne se dissolvent pas complètement dans l'urine, entraînant la formation de calculs rénaux [59]. Les processus de biominéralisation impliquent des changements physico-chimiques successifs tels que la sursaturation, la nucléation, la croissance, l'agrégation et la rétention dans les tubules rénaux [60,61]. L'hyperoxalurie est le principal facteur de risque de formation de calculs rénaux par rapport à l'hypercalciurie [62].
Les excrétions urinaires d'oxalate, de phosphate et de calcium ont augmenté, tandis que les niveaux de magnésium et de citrate ont diminué dans l'urine par rapport au groupe traité à la dose de 200 mg/kg pc, ce qui était similaire aux études rapportées par Lemann et al. [63] et Sathish et al. [39]. L'augmentation des constituants minéraux dans l'urine pourrait être due à une réabsorption tubulaire rénale défectueuse. De même, les électrolytes (sodium, potassium et chlorure) sont utilisés pour dépister l'acidose rénale qui facilite la formation de calculs rénaux [64]. Dans l'étude curative, le niveau de sodium a été réduit de manière significative parG. fruticosusExtrait EtOAc (P<0.001).in contrast,="" previous="" studies="" reported="" that="" excessive="" excretions="" of="" sodium="" and="" chloride="" in="" the="" urine="" indicate="" the="" diuretic="" activity="" of="" the="" test="" extract="" [65,="" 66],="" with="" increasing="" urinary="" output,="" which="" inhibits="" stone="" developments="">
Le magnésium se lie aux ions oxalate pour former des complexes d'oxalate solubles dans l'urine et diminue la disponibilité de l'oxalate, qui se lie au calcium conduisant à la formation de CaOx [68,69]. Par conséquent, on pourrait suggérer que les calculs de CaOx sont plus susceptibles d'être formés par des personnes déficientes en magnésium. Cela était soutenu par le fait queG. fruticosusL'extrait d'EtOAc a élevé les niveaux de magnésium et de citrate (P<0.010) similar="" to="" k-cit="" in="" the="" curative="" test.="" the="" etoac="" extract="" of="">G. fruticosusa diminué les niveaux d'oxalate dans l'urine (P<0.001) compared="" to="" lithiatic="" control="" in="" the="" curative="" study.="" in="" the="" curative="" test,="" a=""><0.01) reduction="" in="" urinary="" levels="" of="" calcium="" and="" phosphate="" following="" g.fruticosus="" buoh="" extract="" administration="" indicates="" the="" presence="" of="" caox="" inhibitory="" constituents,="" which="" interfere="" with="" crystal="" nucleation="" and="" aggregations.="" moreover,="" an="" increase="" in="" calcium="" concentrations="" is="" a="" favoring="" environment="" for="" nucleation,="" and="" precipitation="" of="" calcium="" oxalate="" or="" calcium="" phosphate="" with="" subsequent="" crystal="" growth="" [32,39].="" similarly,="" increased="" urinary="" phosphate="" and="" oxalate="" excretions="" also="" provide="" a="" favorable="" environment="" for="" the="" formation="" of="" calcium="" phosphate,="" in="" turn,="" leading="" to="" calcium="" oxalate="" crystal="" depositions="" in="" the="" renal="" tubules="" [18,="">
Dans l'étude curative,G. fruticosusExtrait EtOAc (P<0.010) reduced="" serum="" levels="" of="" potassium.="" in="" addition,="" the="" effects="" of="">G. fruticosusL'extrait de BuOH au niveau de chlorure s'est avéré proche du contrôle normal au cours de l'étude curative. Le taux sérique de sodium a été significativement réduit parG. fruticosusExtraits de BuOH (P<0.050) compared="" to="" lithiatic="" control="" in="" the="" curative="" study.="" there="" was="" a="" decrease="" in="" serum="" oxalate="" excretions="" by="" etoac="" and="" buoh="" extracts="" of="">G. fruticosuspar rapport au témoin lithiasique. Cela pourrait être dû soit aux inhibitions de la formation d'oxalate, soit à une interférence avec le métabolisme de l'ox-alate. De la même manière,G. fruticosusExtraits EtOAc et BuOH(p<0.050) decreased="" calcium="" levels="" compared="" to="" lithiatic="" control="" in="" the="" curative="" test.="" the="" ability="" of="" these="" extracts="" to="" alter="" calcium="" and="" oxalate="" excretions="" may="" be="" due="" to="" the="" disintegration="" of="" mucoproteins,="" which="" are="" promoters="" of="" crystallization="" as="" reported="" by="" doddola="" et="" al.="" [34].="" in="" the="" present="" study,="" the="" level="" of="" citrate="" in="" the="" serum="" was="" increased="" by="">G. fruticosusExtraits de BuOH (P<0.011), suggesting="" a="" possible="" curative="" effect="" close="" to="" k-cit="" treated="" group=""><0.001). the="" presence="" of="" tannins="" and="" flavonoids="" can="" lead="" to="" the="" relaxation="" of="" smooth="" muscles="" of="" the="" urinary="" tract,="" which="" could="" facilitate="" the="" expulsion="" of="" kidney="" stones="" as="" studied="" in="" rats="" [54],="" which="" were="" confirmed="" their="" presence="" in="" the="" phytochemical="" analysis="" of="">G. fruticosusextraits de la présente étude. Dans la présente étude thérapeutique, il a également été manifestement prouvé que le G. fruticosusLes extraits de BuOH ont abaissé les niveaux d'AST de manière très significative (P<0.001), which="" was="" close="" to="" k-cit="" compared="" to="" the="" lithiatic="" control="" in="" the="" curative="" studies.="" this="" can="" be="" attributed="" to="" the="" fact="" that="" abnormal="" levels="" of="" liver="" enzymes,="" particularly="" aminotransferases="" including="" alanine="" aminotransferase(alt),="" and="" aspartate="" aminotransferase="" (ast)="" are="" prognostic="" features="" (indicators)of="" the="" damages="" of="" liver="" cells,="" and="" the="" cellular="" integrity="" of="" the="" kidneys="" [71,="">
Le dépôt de cristaux de CaOx induit expérimentalement dans les reins est également associé à une inflammation localisée, comme en témoigne l'infiltration de monocytes et de macrophages au site [73]. Extrait d'EtOAc de G. fruticosus (P<0.051)and its="" buoh="" extract=""><0.051) treated="" groups,="" the="" severity="" of="" caox="" crystal="" depositions="" reduced="" the="" kidneys="" compared="" to="" lithiatic="" control,="" which="" was="" similar="" to="" a="" study="" on="" the="" other="" herbal="" extract="" [74].="" in="" the="" curative="" study,="" etoac="" extract="" of="">G. fruticosusréduit significativement le niveau de phosphate (P<0.051)compared to="" the="" lithiatic="" control.="" tissue="" injury="" could="" be="" caused="" by="" exposures="" to="" phosphate="" and="" calcium="" phosphate="" crystals,="" leading="" to="" the="" generation="" of="" oxidative="" stress,="" lipid="" peroxidation,="" and="" depletion="" of="" antioxidant="" enzymes="" [75].="" consequently,="" the="" renal="" epithelial="" injury="" promotes="" crystal="" retention,="" as="" epithelial="" injury="" exposes="" a="" variety="" of="" crystal="" adhesion="" molecules="" on="" epithelial="" surfaces="" and="" promotes="" stone="" formation="" [73,="" 76].="" com="" accumulates="" in="" the="" kidneys="" by="" attaching="" to="" tubular="" cell="" membranes,="" followed="" by="" internalization="" by="" endocytosis,="" leading="" to="" cell="" death="" [75].="" the="" precipitation="" of="" oxalate="" as="" com="" in="" the="" tubular="" lumen="" has="" been="" linked="" with="" renal="" toxicity="" and="" inflammation,="" damaging="" the="" structures="" of="" mitochondria,="" inhibiting="" mitochondrial="" respiratory="" functions="" in="" proximal="" tubular="" cells,="" altering="" cellular="" permeability,="" and="" leading="" to="" renal="" cell="" death="">
Une limitation majeure de l'étude est l'incapacité d'utiliser un microscope à lumière polarisée qui grossit et résout mieux les cristallisations in vivo pour différencier les cristaux COM et COD, ce qui aurait amélioré la qualité des données. Les effets des extraits de test sur les activités diurétiques urinaires n'ont pas été évalués. Malgré ces limitations, la force de la présente étude était l'utilisation de plans et de procédures expérimentaux standard pour tester l'efficacité potentielle des plantes médicinales traditionnelles utilisées dans l'étude.
cistanche peut anti-inflammatoire
conclusion
La présente étude a fourni des preuves de l'utilisation traditionnelle deG. fruticosusextraits dans la gestion de la lithiase urinaire. Des tests in vivo/animaux ont confirmé l'efficacité curative deG. fruticosusextraits, qui ont été mis en évidence à partir de résultats biochimiques et histopathologiques. Les présents résultats ont démontré l'efficacité curative du CaOx deG. fruticosusExtrait EtOAc. Des recherches supplémentaires sont nécessaires pour identifier les composés actifs responsables du traitement de la lithiase urinaire.
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