Relation entre les concentrations d’IL-2, d’IL-17 et les taux sériques de créatinine chez les hommes atteints de maladies rénales chroniques

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Abstrait

Arrière-plan:Maladie rénale chronique(MRC), est un défi majeur de santé publique dans le monde entier. Il est plus répandu dans les pays développés que dans le reste du monde, en raison des taux plus élevés d’espérance de vie et des facteurs liés au mode de vie malsain. L’objectif de la présente étude est d’évaluer la relation entre les concentrations d’interleukines I-2 et I-17 et les marqueurs de la fonction rénale chez les hommes atteints d’IRC.

Méthode:Quarante-cinq hommes atteints d’IRC et soixante-dix témoins ont été recrutés dans la présente étude pour évaluer la relation entre les paramètres de l’interleukine-2 (IL-2), de l’interleukine-17 (IL-17) et de l’IRC. Des échantillons de sang à jeun ont été prélevés sur des patients atteints d’IRC et leurs témoins en même temps. L’IL-2 et l’I-17 sériques ont été mesurés chez des patients atteints d’IRC et leurs témoins, puis la relation entre ces interleukines et la créatinine sérique, l’urée sérique, l’acide urique sérique et l’albumine urinaire a été évaluée.

Résultats: Une relation significative a été détectée entre l’IL-2 (p<0.001), il-17=""><0.001)levels, and="" serum="" creatinine="" concentrations.="" the="" significant="" increase="" in="" i-2="" and="" i-17="" levels="" were="" also="" paralleled="" with="" a="" significant="" increase="" in="" serum="" urea=""><0.001), and="" urine="" albumin=""><0.001) concentrations="">

Conclusions:L-2 et L-17 peuvent jouer un rôle essentiel dans la physiopathologie de l’IRC. L’augmentation significative de I-2 et L-17 est associée à des concentrations significativement élevées de créatinine, d’urée sérique et d’albumine urinaire, ce qui suggère que ces interleukines pourraient être utilisées comme cibles pour de futurs biomarqueurs et thérapie moléculaire. Cependant, en raison de la taille limitée de l’échantillon de la présente étude, des cohortes prospectives plus importantes sont nécessaires pour confirmer ces observations.

Mots-clés: Maladie rénale chronique, Interleukines, Créatinine sérique, Urée sérique, Albumine urinaire.

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Introduction

L’insuffisance rénale chronique (MRC) est un problème majeur de santé publique, touchant 10 à 15% de la population mondiale et son taux d’incidence augmente (1, 2). Par rapport au reste du monde, l’IRC est plus répandue dans les pays développés en raison des taux plus élevés d’espérance de vie et des facteurs liés au mode de vie malsain (3,4). Les pays développés ont une prévalence élevée de maladies liées au mode de vie telles que l’obésité, l’hypertension, le diabète de type 2 (DT2) et les maladies cardiovasculaires (MCV), qui sont toutes connues pour être des facteurs de risque établis d’IRC (5,6,7). La physiopathologie de l’IRC est très complexe et est généralement influencée par des facteurs exogènes et endogènes et leur interaction.

Les cytokines font partie des facteurs endogènes produits principalement par les macrophages(8,9). Quelle que soit la cause initiatrice, le développement de l’IRC est associé à un niveau d’inflammation significativement plus élevé conduisant à une activation du système immunitaire. L’inflammation influence directement le développement de l’IRC, en raison de l’acuitélésion rénale(AKD), et une lésion rénale aiguë post-rénale, ou indirectement en favorisant l’athérosclérose conduisant à l’IRC et à la détérioration subséquente de la fonction rénale (10, 11, 12). L’étendue de la réponse inflammatoire est associée à la gravité de l’IRC et augmente linéairement avec la progression de l’insuffisance rénale(8).

Les macrophages sanguins activés produisent des cytokines en tant que médiateurs essentiels pour aider à déterminer l’étendue de la réponse immunitaire, ce qui est extrêmement important pour arbitrer la progression de la maladie(11). L’équilibre physiopathologique entre les cytokines pro- et anti-inflammatoires est nécessaire pour déterminer l’effet net d’une réponse inflammatoire (2). Ces cytokines sont toutes deux activées dans les maladies rénales aiguës et chroniques (2, 11, 12, 13). Les pro-inflammatoireles cytokines comprennent;  interleukine-1 (IL-1), interleukine-2 (IL-2), interleukine-6 (IL-6), interleukine-8 (IL-8), interleukine-17 (IL-17) et facteur de nécrose tumorale-a(TNF-a)(14,15). Les facteurs de risque d’inflammation chronique comprennent la progression de l’âge, l’obésité, le diabète de type 2 et les infections chroniques récurrentes (2, 5, 6,13).

Le développement de l’IRC s’accompagne d’une augmentation des taux sériques de créatinine(16) et d’autres marqueurs liés à l’IRC, notamment l’urée sérique, l’albumine urinaire et, dans une moindre mesure, l’acide urique sérique(10, 17,18, 19, 20). Néanmoins, la créatinine sérique est mesurée régulièrement afin de diagnostiquer les personnes soupçonnées d’IRA(16, 21). Il est également utilisé pour évaluer l’amélioration et / ou la détérioration de la fonction rénale tout au long du traitement de l’IRA et de l’IRC(16, 18). Bien que l’IRC soit médiée par l’inflammation à différents stades du développement de la maladie(2, 11,13), les preuves de leur association directe avec le risque de maladie restent peu concluantes. La présente étude a été conçue pour évaluer la relation entre la concentration d’interleukines I-2 et IL-17 et les marqueurs de la fonction rénale chez les hommes atteints d’IRC admis dans le plus grand hôpital public de la ville de Ramadi, la capitale de la province d’Al-Anbar, en Irak.

Matériaux et méthodes

Autorisation éthique :Cent quinze hommes arabes irakiens est le nombre réel de participants à la présente étude. Le protocole de l’étude a été approuvé éthiquement par l’Université d’Anbar (No:166SC-2021), et chaque participant a signé un formulaire de consentement écrit après avoir écouté une brève présentation sur le projet.

Définition de cas et confirmation CKD :Dans la présente étude, un cas confirmé d’IRC a été défini comme suit : toute personne ayant un débit de filtration glomérulaire (DFGe) estimé à moins de 60 mL/min/1,73 m² de surface corporelle ou des signes de lésions rénales (même lorsque le DFGe est normal), détectée par une augmentation anormale de la créatinine sérique et de l’albumine urinaire, persistant pendant plus de 3 mois comme établi précédemment (18).

Collecte des participants à l’étude: Cette étude a été menée entre avril 2021 et août 2021. Tous les patients ont été évalués avant le début du traitement. Pour faciliter le processus de collecte des contrôles, nous avons demandé à chaque patient atteint d’IRC d’amener un parent ou un ami. Nous avons également réussi à recruter plus de contrôles dans le même hôpital où les patients ont été recrutés.

Examen clinique: Des entrevues exhaustives prévues ont été menées à l’hôpital par des infirmières hautement qualifiées afin de recueillir des détails démographiques, socioéconomiques et anthropométriques. Des détails sur les antécédents médicaux des individus ont également été obtenus. La pression artérielle a été obtenue à l’aide d’une machine entièrement automatisée (tensiomètre Omran). Tous les participants à la présente étude ont subi un examen clinique pour s’assurer que chaque participant (patients et témoins) répond aux critères de l’étude.

Critères d’inclusion et d’exclusion :Des hommes irakiens âgés de 30 à 70 ans, vivant dans la province d’Al-Anbar et désireux de participer à l’étude, ont été inclus dans la présente étude. Afin d’éviter tout intermède possible de la génétique d’autres races, nous n’avons inclus que les Arabes. Pour éliminer l’effet de tout facteur physiopathologique et pathogénétique qui pourrait influencer les résultats de l’étude, les sujets ont été exclus s’ils n’étaient pas arabes ou s’ils souffraient de diabète sucré ou de valeurs sanguines anormales. Selon les antécédents médicaux (étayés par un rapport d’auto-confirmation), les personnes atteintes de maladies inflammatoires et/ou de maladies infectieuses telles que la polyarthrite rhumatoïde, le psoriasis, l’hyperthyroïdie, les maladies inflammatoires de l’intestin (MII), le virus de l’immunodéficience humaine (VIH), le virus de l’hépatite B (VHB), le virus de l’hépatite C (VHC), la covid-19, la grippe, l’infection pulmonaire et l’amygdalite ont également été exclues. D’autres sujets ont été exclus s’ils avaient une maladie musculaire connue, effectuaient un entraînement physique vigoureux dans les 3 mois ou avaient un travail nécessitant un levage lourd. Tous les participants à la présente étude ont été invités à renoncer au tabagisme et à la consommation d’alcool.

Prélèvement et manipulation d’échantillons de sangUne semaine avant le prélèvement sanguin, les sujets se sont abstenus d’utiliser des analgésiques et de faire de l’activité physique. On a demandé à tous les participants de ne pas boire ou manger quoi que ce soit après 21 heures la nuit précédant le prélèvement de leur sang. Après 8 à 10 heures de jeûne nocturne, 10 ml de sang frais ont été prélevés dans la veine antécubitale. Afin de réconforter les participants à la présente étude, des infirmières bien formées ont expliqué la procédure à chaque participant avant la ponction de la veine à l’aide d’une seringue en plastique jetable. Deux types de tubes ont été utilisés pour la collecte de sang (jaune et violet). Tous les échantillons de sang ont été prélevés entre 7h30 et 8h30, les échantillons de sang ont ensuite été conservés pendant 30 minutes dans une chambre froide avant que les échantillons des tubes jaunes ne soient séparés des cellules par centrifugation à 3000xg pendant 10 minutes. Le plasma a été congelé par pression et stocké à -20 ° CCuntil test. Des tubes violets ont été laissés sur un mélangeur de laboratoire sanguin, avant le traitement pour obtenir des mesures de glycohémoglobine AlC (HbAlc) qui ont

déclarés en pourcentage de l’hémoglobine totale. Tous les échantillons ont été traités selon un protocole normalisé.

Prélèvement et manipulation d’échantillons d’urine: Les échantillons d’urine ont été prélevés dans des contenants stériles tôt le matin avant le prélèvement des échantillons de sang. Puis, plus tard le même jour, un échantillon suffisant d’urine a été transféré lentement dans un tube ordinaire stérile de 6 ml à l’aide d’une seringue en plastique d’élimination de 50 ml après le retrait de l’aiguille. Tous les échantillons ont été conservés dans un réfrigérateur jusqu’à ce que suffisamment d’échantillons soient prélevés et analysés en trois exemplaires. Tous les participants ont été invités à obtenir des échantillons d’urine ininterrompus au milieu du cours du cours d’une chaîne. Un court métrage d’animation illustratif a été projeté par l’un des membres du personnel du projet qui a été désigné pour décrire une collecte d’urine intermédiaire étape par étape afin d’aider tous les participants à appliquer les instructions exactes pour prélever un échantillon d’urine représentatif et propre au milieu du cours.

Diagnostic du diabète:Les participants ont été exclus si leur taux moyen de glucose à jeun était supérieur à (125 mg / L) et le non-jeûne de ≥200 mg / L et leur glycohémoglobine AIC (HbAlc) était supérieur à 7. En outre, nous nous sommes également appuyés plus tôt sur les dossiers médicaux individuels et les antécédents de traitement pour exclure les volontaires inapplicables.

Mesure des interleukines plasmatiques sériques:Les taux plasmatiques d’IL-2 et d’IL-17 ont été mesurés à l’aide d’un kit elisa (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay Kit). Les kits ELISA ont été fournis par la société My-bio-source, États-Unis) et des tests de la fonction rénale tels que l’urée sanguine, la créatinine sérique, l’acide urique sérique et l’albumine urinaire ont également été effectués sur tous les sujets à l’aide d’un auto-analyseur. Chaque échantillon a été mesuré en trois exemplaires et la valeur moyenne de chaque échantillon a ensuite été considérée comme prête pour l’analyse statistique. La microalbuminurie a été définie comme l’excrétion de 30 à 150 mg de protéines par jour comme signe d’insuffisance rénale précoce décrite précédemment(22). Le protocole du fabricant du test a été strictement suivi et tous les échantillons ont été testés non dilués.Analyse statistique:L’analyse statistique a été effectuée à l’aide de GraphPad Prism version 7.04 et du logiciel Excel 2016. Les statistiques descriptives pour chaque paramètre comprenaient l’erreur-type (SE), la moyenne et l’écart-type (ET). Le niveau de signification statistique a été établi tant que la valeur de P est inférieure à 0,05, et la relation entre I-2, I-17 et d’autres paramètres des patients atteints d’IRC et des témoins a été évaluée à l’aide de la corrélation de Pearson (r = -1 à 1). Un modèle de régression logistique a été réalisé pour justifier la relation entre les variables interleukines et CKD et pour éliminer toute interférence possible d’autres variables. Les variables qui peuvent confondre les résultats de la présente étude sont les suivantes: Âge, IMC, tour de taille et rapport taille-hanches.

Résultats: Soixante-dix-huit patients et soixante-quinze témoins ont signé des formulaires de consentement pour être inscrits à la présente étude. Après l’application des critères d’inclusion et d’exclusion et sur la base des antécédents médicaux de chaque participant, vingt-sept patients atteints d’IRC ont été exclus car cinq ont déjà reçu un diagnostic de VHB et les autres étaient diabétiques. En outre, six autres patients ont été exclus après que leurs valeurs sanguines (glucose à jeun et HbAlC) ont montré qu’ils souffraient de diabète de type 2. Sur le nombre total de personnes qui avaient rejoint le groupe témoin, seules cinq ont été exclues car elles ont reçu un diagnostic de diabète de type 2. Ainsi, le nombre final qui satisfaisait aux critères d’inclusion de la présente étude était quarante-cinq hommes atteints d’IRC prévalente (tranche d’âge 30-70 ans, âge moyen; 53,66±6,03, IMC moyen: 28,91±3,39; tour de taille moyen: 106,41 + 8,81; SBP moyen: 140,3915,90; DBP moyen: 86,77±10,20; FSG moyen: 118±4,71; HbAlc moyen:

5,67±1,38) et soixante-dix hommes en bonne santé dans la même tranche d’âge (âge moyen: 51,64 + 5,59; IMC moyen: 26,83±1,85; tour de taille moyen: 93,25±6,46; SBP moyen: 123,34±5,91; DBP moyen: 80,95±4,39; FSG moyen: 101±5,24; HbAlc moyen: 5,1±0,97) sans maladie infectieuse active et autres maladies inflammatoires actives connues ont servi de témoins.

Paramètres CKD :Par rapport aux témoins, nous avons observé une augmentation significative de la créatinine sérique(p< 0.0="" 01),="" urine="" 0.0="" 01),="" and="" serum="" urea=""><0.0 01)="" as="" seen="" in="" figures="" 1,="" 2,="" and3.no="" such="" relationship="" was="" seen="" in="" serum="" uric="" acid="" concentrations="" between="" ckd="" patients="" and="" their="" controls(fig.="">

La relation entre les interleukines et les paramètres CKD:La présente étude a montré pour la première fois une relation linéaire significative entre le taux de créatinine et I-2(p<0.001)and il-17=""><0.001)as shown="" in="" figure="" l,="" respectively.="" these="" interleukins="" have="" also="" been="" associated="" with="" a="" significant="" increase="" in="" serum=""><0.001), and="" urine="" albumin=""><0.0 01),="" respectively="" (figs.2="" and="" 3).="" no="" significant="" differences="" in="" uric="" acid="" were="" observed="" between="" serum="" patients="" with="" ckd="" and="" controls,="" neither="" there="" was="" any="" association="" with="" il-2="" and="" il-17="" levels="" (fig.="">

Discussion:Dans les rapports cliniques et pathologiques, les concentrations sériques de créatinine sont couramment utilisées pour diagnostiquer les patients atteints d’IRA et pour obtenir une évaluation générale des personnes traitées(16,17, 21). En outre, la créatinine sérique associée à l’albumine urinaire a été utilisée pour surveiller les patients atteints d’IRC tout au long de l'traitementet d’évaluer toute amélioration ou détérioration de la fonction rénale(16,18,22,23). Chez les patients atteints d’IRC, les concentrations sériques de créatinine augmentent régulièrement, ainsi que l’urée sérique et l’albumine urinaire parallèlement à la détérioration de la fonction rénale(17,20,22). Bien qu’un nombre limité d’études antérieures aient montré une augmentation significative des taux sériques d’acide urique chez les patients atteints d’AKIand CKD, il n’est pas fréquemment prescrit dans la pratique clinique quotidienne (24). La détérioration de la fonction rénale chez les patients atteints d’IRC se produit progressivement, il s’agit d’un processus irréversible et est généralement associé à des niveaux significativement élevés de marqueurs inflammatoires. L’inflammation chronique est un facteur de risque établi d’IRC et a été associée à une augmentation marquée du taux de morbidité et de mortalité(2, 19,25). Dans la présente étude, nous avons observé une augmentation significative de la créatinine sérique(p<0.001), serum=""><0. 001),="" and="" urine=""><0.001) in="" patients="" with="" ckd="" compared="" with="" controls.="" in="" contrast,="" no="" significant="" relationship="" was="" observed="" in="" serum="" uric="" acid="" between="" ckd="" patients="" and="" their="">

L’élévation de la concentration sérique de créatinine a été associée à une augmentation significative des deux L-2(p<0.001)and><0.001)levels(fig.1). similarly,="" il-2="" and="" il-17="" levels="" were="" strongly="" associated="" with="" urine albumin="" concentrations="" (fig.2),="" and serum="" urea="" (fig.3),="" suggesting="" that="" these="" interleukins="" may="" play="" critical="" roles="" in="" the="" pathogenesis="" of="" ckd.="" no="" correlation="" was="" detected="" between="" serum="" uric="" acid="" and="" il-2="" and="" i-17="" levels(fig.4).to="" our="" knowledge,="" this="" is="" the="" first="" study="" performed="" to="" evaluate="" the="" relationship="" between="" these="" interleukins="" and="" the="" classic="" biochemical="" markers="" of="" ckd.="" the="" prognostic="" importance="" of="" elevated="" il-2="" and="" i-17levels="" are="" independent="" of="" and="" additive="" to="" the="" prognostic="" effect="" of="" creatinine="" and="" other="" classic="" kidney="" function="" markers="" including="" serum="" urea="" and="" urine="" albumin.="" a="" previous="" study="" targeted="" interleukins="" in="" relationship="" to="" lupus="" nephritis="" histopathology="" and="" therapy="" response="" has="" suggested="" that="" high="" levels="" of="" i-17="" could="" be="" related="" to="" therapy="" resistance,="" the="" severity="" of="" the="" disease,="" or="" disease="" phenotype(26).="" the="" high="" levels="" of="" interleukins="" have="" been="" reported="" in="" a="" wide="" range="" of="" diseases="" such="" as="" metabolic="" syndrome="" (27)="" and="" different="" types="" of="">cancer(28).