Noyaux thalamiques antérieurs : un substrat essentiel pour la mémoire associée non spatiale chez le rat, partie 2

2|MATÉRIELS ET MÉTHODES

2.1|Animaux et conditions de logement

Des rats mâles Long-Evans (âgés de 12 mois ; moyenne 630 g) ont été hébergés en groupes de trois ou quatre dans des cages Makrolon (48 28 22 cm) selon un cycle lumière-obscurité inversé de 12- heures (lumières allumées à 20 heures). ).

Des tests comportementaux ont eu lieu pendant la phase sombre du cycle lumineux, cinq séances par semaine ; les observations ont confirmé que les rats étaient relativement plus actifs pendant la phase sombre. Les rats ont été maintenus à 85 % de leur poids corporel en alimentation libre avec de l'eau à volonté ; la nourriture était à volonté avant et après la chirurgie pour la récupération postopératoire.

La chirurgie est le processus de traitement des maladies et d’amélioration de la santé physique. Le processus de récupération après une intervention chirurgicale nécessite une attention particulière. En plus de la récupération physique, se sentir bien nécessite également de se concentrer sur la récupération de la mémoire. Il existe un lien étroit entre la récupération postopératoire et la mémoire.

Pendant l'opération, des facteurs tels que la réaction du corps à l'adversité et les effets des médicaments anesthésiques affectent souvent la fonction de mémoire du cerveau. Une fois le corps récupéré, veillez à maintenir une bonne alimentation, un exercice modéré et un sommeil suffisant. Pendant la période de récupération en dehors de l'hôpital, vous devez continuer à éviter les activités excessives et à maintenir un état corporel confortable.

En plus des habitudes de vie, des ajustements psychologiques raisonnables sont également utiles pour restaurer la santé et la mémoire. Détendez-vous, gardez un esprit paisible et aidez-vous à vous adapter à la récupération de la mémoire. Dans le même temps, vous devez participer activement à des activités récréatives et communiquer avec vos proches et amis pour garder votre cerveau actif et améliorer vos capacités cognitives et de mémoire. Cette activité peut être augmentée progressivement et peut être pratiquée essentiellement une fois par semaine.

En bref, le processus de récupération après une intervention chirurgicale nécessite une attention toute particulière. Le maintien de bonnes habitudes de vie et les ajustements psychologiques jouent un rôle très important dans la promotion de la récupération physique et de la récupération de la mémoire. Affrontons-le de manière positive, avec pleine confiance et espoir. Nous devons améliorer la mémoire, et Cistanche deserticola peut améliorer considérablement la mémoire, car Cistanche deserticola peut également réguler l'équilibre des neurotransmetteurs, comme en augmentant les niveaux d'acétylcholine et de facteurs de croissance. Ces substances sont très importantes pour la mémoire et l’apprentissage. En outre, la viande peut également améliorer la circulation sanguine et favoriser l'apport d'oxygène, ce qui peut garantir que le cerveau reçoive suffisamment de nutriments et d'énergie, améliorant ainsi sa vitalité et son endurance.

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Toutes les procédures étaient conformes aux directives approuvées par le comité d'éthique animale de l'Université de Canterbury. Quatre groupes de rats ont été établis par répartition aléatoire après familiarisation préopératoire dans le labyrinthe à bras radial (RAM) et la piste. Les quatre groupes étaient des lésions ATN bilatérales avec ou sans trace entre les stimuli d'odeur et d'objet lorsqu'ils étaient entraînés à la tâche associée en paire et les deux groupes de lésions fictives correspondants.

Les tailles d'échantillon finales étaient (1) Sham-No Trace=7 (c'est-à-dire un groupe de lésions fictives sans intervalle entre les stimuli d'odeur et d'objet utilisé dans la tâche associée en paire) ; (2) Sham-Trace=7 (le groupe Shamlesion reçoit une trace de 10- entre la présentation de l'odeur et les stimuli de l'objet) ; (3) ATN-No Trace=8 ; et (4) ATN-Trace=9. Un rat supplémentaire présentant une lésion ATN a été exclu car ne répondant pas aux critères de lésion (voir ci-dessous).

2.2|Chirurgie

Les rats ont été anesthésiés à l'isoflurane (induction 4 % ; entretien 2,5 %) et placés dans un appareil stéréotaxique doté de barres auriculaires atraumatique (Kopf, Tujunga, CA). La barre incisive a été placée à 7,5 mm en dessous de la ligne interaurale pour minimiser les dommages au fornix.

Dans chaque hémisphère, deux perfusions ont été dirigées vers le noyau antéroventral (AV ; supérieur et inférieur) et une perfusion a été dirigée vers le noyau antéro-médial (AM). Chaque intervention chirurgicale a utilisé l'une des cinq coordonnées antéro-postérieures (AP) par rapport à la distance Bregma-Lambda d'un rat individuel (toutes les valeurs en mm). Pour les lésions AV, les coordonnées AP étaient : 2,20 pour B–L 6,9–7,2 ; 2,25 pour B–L 7,3 à 7,6 ; 2,30 pour B–L Supérieur ou égal à 7,7. Les perfusions AV ont été effectuées à 5,68 et 5,73 sous la dure-mère et à 1,52 latéralement par rapport à la ligne médiane.

La perfusion AM a été réalisée {{0}},1 mm plus en avant que la coordonnée AV, à 5,76 en dessous de la dure-mère et 1,16 latéralement ; la première lésion AM a été réalisée après avoir terminé toutes les perfusions AV et a commencé en controlatéral par rapport au dernier site de lésion AV. 0,15 M de N-méthyl-d-aspartate (NMDA ; Sigma, CastleHill, NSW) dans 0,1 M de tampon phosphate (pH 7,20) a été infusé dans chaque site à raison de 0,04 ul par minute via un 2.5-seringue ulHamilton (Reno, NV, USA) à l'aide d'une micro-pompe à perfusion (Stoelting, Wood Dale, IL).

Les sites AV par hémisphère ont reçu respectivement {{0}},12 et 0,10 ul pour les sites dorsal et ventral ; 0,06 ul a été utilisé pour chaque site AM. L'aiguille de la seringue est restée en place pendant 3 minutes par côté, après la perfusion.
Les chirurgies de lésions fictives ont utilisé la même procédure, mais l'aiguille a été abaissée à 1 mm au-dessus des sites de lésions AV et AM supérieurs sans aucune perfusion administrée.

2.3|Tâches comportementales

Une RAM à huit bras a confirmé le déficit de la mémoire spatiale chez les rats présentant une lésion ATN après une intervention chirurgicale. Un appareil de piste a été utilisé pour entraîner les rats à toutes les tâches non spatiales, c'est-à-dire la discrimination simple d'odeur et d'objet simple et les tâches associées à une paire d'odeur-objet et d'odeur-trace-objet.

Avant l'opération, les rats soumis à des restrictions alimentaires étaient habitués au RAM à huit bras, décrit ci-dessous, pour récupérer 0,1 g de morceaux de chocolat (Foodfirst LTD Auckland, NZ) et s'adapter à l'ouverture et à la fermeture des portes des bras. Dans une piste en Perspex rouge (Figure 1), les rats ont également été façonnés pour piquer avec leur nez un capuchon circulaire en plastique blanc de 2- cm situé à 10 cm au-dessus du niveau du sol et au centre d'une fine éponge sur un insert en Perspex transparent attaché à le mur du fond.

Ils étaient également façonnés pour pousser (à l'aide d'un nez ou d'une patte) un objet articulé à l'arrière de sa base jusqu'au sommet d'un puits à nourriture encastré au centre d'un bloc de bois de 5,8,5,3 cm. La nourriture contenait des morceaux de chocolat (et contenait des aliments inaccessibles sous la niche). L'objet utilisé pour le pré-entraînement n'a pas été réutilisé. Après l’opération, les rats en convalescence ont été refamiliarisés avec le RAM et la piste.

2.4|Mémoire de travail spatiale dans la RAM

La mémoire de travail spatiale postopératoire a été testée à l'aide de la RAM située au centre d'une pièce sans fenêtre (3,3 m). Le labyrinthe avait un moyeu central en bois peint en gris de 35 cm de large avec huit bras en aluminium (65 cm de long sur 8,6 cm de large, avec des bordures de 4,5 cm de haut), surélevés de 67,5 cm au-dessus du sol de la pièce. Des parois en Perspex transparent (19 cm de long et 25 cm de haut) s'étendent le long d'un côté de chaque bras à partir du moyeu pour empêcher les rats de sauter entre les bras.

Un puits alimentaire en bois noir (5 8,5 3 cm), avec des aliments inaccessibles en dessous, a été placé à l'extrémité de chaque bras. Lors des tests, 2 0,1 g de morceaux de chocolat étaient présents dans chaque puits alimentaire au début de chaque procès. Des portes à guillotine en Perspex transparent, qui pouvaient être soulevées depuis le dessous du moyeu par un système de poulie, contrôlaient l'accès aux bras du moyeu.

Dix jours consécutifs de formation formelle au RAM ont été utilisés pour tester la mémoire de travail spatiale. Le rat a été placé dans le moyeu central et 10 secondes plus tard, les huit bras ont été ouverts et le rat a été autorisé à faire un choix défini comme étant les deux pattes postérieures au-dessus du seuil du bras. Une fois que le rat était entré dans un bras, toutes les portes étaient fermées et il restait confiné dans le bras pendant 15 secondes, qu'il ait ou non fait le bon choix.

Le rat a ensuite été autorisé à revenir dans le hub central et y est resté pendant 10 secondes avant que toutes les portes ne soient rouvertes pour permettre un autre choix de bras. L'essai s'est terminé lorsque le rat avait visité les huit bras, que 20 choix de bras avaient été faits ou que 10 minutes s'étaient écoulées.

2.5|Tâches non spatiales : discrimination simple et apprentissage en binôme

Les tâches de discrimination simple et les tâches associées par paires utilisaient la même piste en Perspex rouge (93,26,26 cm) placée sur une table de 75- cm de hauteur (Figure 1). La piste pouvait être divisée par trois portes amovibles verticalement (Perspex rouge, 26 - 26 cm) sélectionnées en fonction de la tâche comportementale spécifique. Quant à la familiarisation, l'éponge fine de 6,5 à 6 à 8 mm avec le capuchon en son centre contenait une récompense alimentaire en chocolat (Figure 1).

L'éponge était fixée sur une porte amovible de la piste (pour les tâches associées en binôme) ou sur la paroi d'extrémité de la piste (pour la tâche de discrimination simple). Une éponge Doorplus différente a été utilisée pour chaque odeur, qui a été infusée à proximité du récipient avec 5 ml d'huile de tournesol mélangée à 20 ul d'huiles essentielles de Nouvelle-Zélande.

Les odeurs étaient celles du citron et du clou de girofle pour les tâches en binôme, et de la cannelle et du citron vert pour les tâches de discrimination simple, ou l'inverse dans les groupes contrebalancés. Des objets légers et visuellement distincts (Figure 1) étaient fixés par une charnière à l'arrière de sa base au sommet du puits de nourriture afin qu'un rat puisse facilement repousser l'objet (que ce soit le nez ou la patte) pour chercher dans le puits une récompense alimentaire.

Un cadre en bois (1,8 m de haut à partir du sol et 1,3 m de large), drapé de rideaux noirs, entourait tous les côtés de la zone de test pour réduire les signaux spatiaux pendant le test.

Les discriminations simples (odeur uniquement; objet uniquement) et les tâches associées par paires utilisaient une procédure « go/no-go ».

Le premier essai de chaque séance a commencé en maintenant le rat dans la zone de départ pendant 120 s pour se réacclimater au labyrinthe ; les essais ultérieurs ont utilisé 20 s dans cette zone de départ. Les Allrats ont reçu 12 essais groupés par séance quotidienne, avec six essais (récompensés) et six essais non-récompensés (non récompensés) dans un ordre pseudo-randomisé. Pas plus de trois essais réussis ou trois essais non autorisés ont été exécutés consécutivement au cours d'une séance.

Aucune des quatre paires différentes de stimuli odeur-objet n'a été répétée lors d'essais consécutifs. Les éléments corrects dans les tâches de discrimination simples et les paires de stimulus correctes dans les tâches associées par paires ont été contrebalancés entre les rats.

Pour la simple discrimination des odeurs, une réponse a été définie comme un nez perçant le capuchon au centre de l'éponge théodorisée ; renifler uniquement l’éponge était considéré comme une réponse interdite. La nourriture était toujours présente dans le capuchon au centre de l'éponge pour les tâches associées à l'odeur et à l'objet ; l'aspect go/no-go fait ici référence au fait que l'objet a été poussé pour révéler si une récompense alimentaire se trouvait en dessous, au bout de la piste.

Pour les objets, une réponse était définie comme toute poussée avec le nez ou la patte qui faisait basculer l'objet vers l'arrière. Le temps de latence entre le moment où la dernière porte était levée et le moment où le rat interagissait avec l'odeur (nez piqué dans le capuchon ; pour une simple discrimination d'odeur) ou avec l'objet (repoussé sur la charnière, pour une simple discrimination d'objet et des tâches associées à des paires) était mesuré à l'aide d'un chronomètre silencieux (Dick Smith, Nouvelle-Zélande).

L'observateur était assis à l'intérieur des rideaux et à côté de la piste pour actionner les portes et enregistrer son comportement. Un essai était désigné comme « correct » si le rat répondait en moins de 8 s aux essais en cours ou ne répondait pas avant 8 s aux essais sans départ.

2.6|Discriminations simples

La moitié des rats ont reçu une formation à la tâche de discrimination simple des odeurs suivie de la tâche de discrimination simple des objets et vice versa pour l'autre moitié. La latence entre la porte X (Figure 1a) et l'interaction avec l'odeur ou l'objet à l'extrémité de la piste a été enregistrée. Les rats ont été entraînés à la tâche de discrimination simple d'odeur et d'objet simple jusqu'à ce qu'ils atteignent le critère (80 % de correction sur 2 jours consécutifs).

Pour la tâche simple de discrimination des odeurs, une seule odeur a été présentée à chaque essai. Le rat devait distinguer laquelle de deux odeurs était associée à une récompense alimentaire présentée dans l'éponge à l'extrémité du compartiment B (Figure 1a).

Dans la tâche simple de discrimination d'objets, un seul objet a été présenté à chaque essai à la fin du compartiment B (non représenté sur la figure 1). Le rat devait apprendre lequel des deux objets était associé à une récompense alimentaire présentée sous l'objet.

2.7|Tâches associées par paires (trace et non-trace) Ces tâches utilisaient une nouvelle disposition de portes amovibles verticalement (Figure 1). Les rats ont appris laquelle des deux paires odeur-objet serait récompensée (par exemple Odeur 1 + Objet A et Odeur 2 + Objet B) et quelles paires n'étaient pas récompensées (par exemple Odeur 1 + Objet B et Odeur). 2 + Objet A).

Quel que soit l'appariement, les rats recevaient toujours une récompense pour la présentation de l'odeur lorsqu'ils étaient autorisés à entrer dans le deuxième compartiment de la piste. Il s'agissait du compartiment C pour la condition « sans trace » dans laquelle le compartiment A n'était pas utilisé et le compartiment B était le compartiment de départ. L'odeur se trouvait à l'extrémité du compartiment B pour la condition « trace », pour laquelle le compartiment A a été utilisé comme boîte de départ.

Les rats en condition de trace ont été soumis à un délai de 10- s entre les présentations de l'odeur et les stimuli de l'objet, en étant maintenus dans le compartiment C, tandis que les rats en condition sans trace ont été exposés à l'objet immédiatement après leur interaction avec l'odeur (après manger la récompense). Dans des conditions de trace et sans trace, nous avons enregistré la latence pour traverser le compartiment D, à partir du moment où DoorZ a été soulevé jusqu'à ce que le rat interagisse avec l'objet ou s'abstienne d'interagir avec lui pendant 8 secondes.

Deux groupes de rats (lésion Sham et lésion ATN) ont été entraînés à des tâches associées à une paire d'objets odeur-objet (groupes No Trace), et deux groupes correspondants ont été formés à une tâche associée à une paire d'objets odeur-trace (groupes Trace) jusqu'à ce qu'ils critère atteint (80 % d'essais corrects sur 3 jours) ou un maximum de 50 jours.

2.8|Test de rétention post-acquisition

La rétention de la tâche en binôme pour n'importe quel rat a été effectuée 5 jours après avoir atteint le critère ou après 50 jours d'entraînement. Cette session a utilisé 12 essais groupés récompensés/non récompensés sur une seule journée, de la même manière que celle utilisée précédemment pour ce rat.

2.9|Histologie

2.9.1|Perfusion et prélèvement de tissus

Les 3 jours précédant le test de rétention, des rats isolés ont été familiarisés avec une cage vide et propre pendant 90 minutes dans une pièce sombre et calme. Immédiatement après le dernier essai de test de rétention, le rat a été placé dans sa cage dans la pièce sombre et calme familière 90 minutes avant la perfusion.

Les rats ont été profondément anesthésiés avec du pentobarbital de sodium (125 mg/kg) et perfusés par voie transcardiaque avec une solution saline suivie de paraformaldéhyde [4 % de PFA dans du 0,1 M de tampon phosphate (PB)] pour fixer le cerveau. Les cerveaux ont été post-fixés dans 4 % de PFA, suivis d'un minimum de 48 h dans une solution à long terme (20 % de glycérol dans 0,1 M PB). Des coupes coronales de 40- µm ont été collectées à l'aide d'un microtome de congélation (Thermo Fisher, Royaume-Uni) et conservées dans une solution cryoprotectrice (30 % de glycérol, 30 % d'éthylène glycol dans 0,1 M de PB) à 20 °C jusqu'à ce qu'elles soient traitées pour l'immunohistochimie.

Les coupes coronales ont été collectées en deux séries distinctes. La première série a capturé des coupes consécutives dans cinq cryotubes pour l'immunohistochimie (soit une sur cinq). Cette série comprenait un bloc antérieur de sections allant du cortex préfrontal à la zone septale (à environ {{0}},7 à 0,6 mm de Bregma) et un bloc postérieur allant du thalamus médiodorsal (à environ 3,5 mm de Bregma) à la partie caudale. cortex rétrosplénial.

La deuxième série a capturé des sections consécutives pour la vérification des lésions. Ces coupes ont été recueillies dans quatre flacons cryogéniques depuis immédiatement l'avant de l'ATN jusqu'au thalamus médiodorsal postérieur (à environ 0,6 à 3,5 mm de Bregma).

2.9.2|Coloration Neu-N et vérification des lésions ATN

Les coupes flottantes dans toute la région ATN ont été lavées (3,10 min) dans une solution saline tamponnée au phosphate 0,1 M avec Triton-X (0,2 % ; PBSTx) avant d'être incubées dans un tampon de blocage de peroxydase endogène pendant 30 minutes. min [1 % de peroxyde d'hydrogène (H2O2), 50 % de méthanol (CH3OH) dans 2 % de PBSTx].

Les coupes ont été incubées pendant une nuit à 4 °C dans un anticorps primaire anti-NeuN (1 : 5 000 ; monoclonal-MouseCat # MAB377 ; Millipore, Californie, États-Unis) dans du PBSTx avec 1 % de sérum de chèvre normal (NGS ; Life Technologies, NZ).

L'excès de tampon d'anticorps a été éliminé avec du PBSTx et suivi d'une incubation dans un anticorps secondaire de chèvre anti-souris biotinylé (1 : 1000 Cat# BP-9200-50 : VectorLaboratories, Californie, États-Unis) pendant une nuit à 4 °C dans du PBSTx et 1 % de NGS. Les coupes ont été placées dans ExtrAvidin (peroxydase conjugué; 1: 1000; Sigma, NSW Australie), PBSTx et 1% NGS pendant 2 h à température ambiante.

Pour éliminer l'excès d'ExtrAvidin et de Triton X{{0}}, les coupes ont été lavées dans du PBS, du PB, puis du tampon Tris (pH 7,4 dans H2 distillé0) pour préparer les coupes pour la visualisation avec de la diaminobenzidine fraîchement préparée ( DAB 0,05 % ; Sigma, dans 0,01 % H2O2 dans un tampon Tris).

La réaction DAB (environ 5 min) a été arrêtée en utilisant du tampon Tris (lavage 1 à 10 min) et les coupes ont été placées dans du PB à 4 °C pendant la nuit avant de les monter sur des lames gélatinisées et de les laisser sécher. Les lames ont été déshydratées dans de l'alcool classé (70 % à 100 %) avant d'être clarifiées dans du xylène et montées avec du DPX (06522 ; Sigma-Aldrich) et une lamelle.

Le nombre de cellules Neu-N-positives dans l'ATN a été utilisé pour déterminer l'étendue de la lésion. Cela a utilisé des sections des hémisphères gauche et droit pour chaque section de quatre 40- μm dans l'ensemble de l'ATN et de la zone quantifiée à l'aide d'ImageJ (NIH, États-Unis). La coloration cellulaire NeuN-positive a été photographiée sur 5 objectifs sur un microscope droit LeicaDM6 B et une caméra DFC7000T (Leica Microsystems, Allemagne).

Des décomptes automatisés des cellules ont été obtenus via ImageJ (logiciel d'analyse d'images, National Institute of Health, NIH, USA). La zone entourant les neurones dans la région ATN a été sélectionnée manuellement et les images ont été converties en {{0}} niveaux de gris binaires, l'arrière-plan a été soustrait (roulant=40), converti en masque et la fonction de bassin versant a été appliquée, et toutes les cellules neuronales au-dessus du seuil (seuil « MaxEntropy », circularité 0,5–1,0) ont été comptées.

Le seuil de détection était le même pour toutes les sections. Les noyaux de cellules colorés au NeuN automatisé ont été comptés chez neuf des rats fictifs (cinq dans le groupe Sham-Trace et quatre dans le groupe Sham-No Trace) pour exprimer le nombre de cellules dans l'ATN.

Le nombre automatisé de noyaux colorés NeuN de cellules épargnées chez tous les rats présentant une lésion ATN a été comparé au nombre moyen de cellules NeuN observées chez les rats fictifs. Les lésions acceptables ont été définies comme atteignant le critère de 50 % de perte de cellules dans l'ATN, avec un minimum de 25 % par hémisphère. Ceci est cohérent avec les critères de lésion ATN dans des études précédentes (Mitchell & Dalrymple-Alford, 2005, 2006 ; Perryet al., 2018).

2.9.3|Immunohistochimie Zif268

Les sections flottantes ont été traitées de la même manière que pour NeuN, mais incubées dans un anticorps primaire polyclonal de lapin Zif268 (Egr-1 ; 1 : 1000 Cat# sc-110 ; Santa CruzBiotechnology, USA) pendant 72 h à 4 C dans du PBSTx avec 1 % de NGS, suivi d'une incubation dans un anticorps secondaire de chèvre anti-lapin biotinylé (1 : 1 000 : Vector LaboratoriesBA-1000) pendant la nuit dans du PBSTx et 1 % de NGS.

Après la visualisation DAB (18 min), la coloration cellulaire positive Zif268-dans chaque région d'intérêt a été photographiée avec un objectif 10 avec un microscope optique (Leica, Allemagne). Des décomptes automatisés des cellules ont été obtenus via ImageJ ( NIH, USA) de la même manière que les cellules NeuNpositives, sauf que la circularité a été fixée à 0,65–1,0.

Le nombre de cellules Zif268-positives pour toutes les régions a utilisé le même algorithme de seuil, avec entre deux et six sections par région d'intérêt chez chaque rat quantifié. Le nombre moyen de cellules positives Zif268-par mm2 dans les sections (des deux hémisphères) dans une région d'intérêt a été utilisé.

2.10|L'analyse des données

Une ANOVA utilisant Statistica (v13 ; Dell Inc.) a été réalisée pour tester les différences moyennes entre les quatre groupes de rats (Sham-No Trace, Sham-Trace, ATN-No Trace et ATNTrace). Des facteurs de mesures répétées ont été ajoutés pour les jours (RAM et discrimination simple), les blocs d'essais (tâches associées par paires) et les comptes Zif268 dans les régions ou sous-régions d'intérêt associées.

L'ANOVA pour les tâches RAM et de discrimination simple a comparé quatre groupes pour confirmer que les deux groupes de lésions fictives et les deux groupes de lésions ATN étaient cohérents les uns avec les autres, mais notez qu'il n'y avait aucune trace de composant dans les tâches RAM ou de discrimination simple. Pour les tâches de discrimination simple et les tâches associées par paires sur la piste, une transformation réciproque des données de latence dans des essais individuels a été utilisée pour garantir l'homogénéité de la variance.

Lors d'une journée de test donnée, les latences transformées ont généré une latence moyenne pour chacun des six essais non récompensés et des six essais récompensés. Pour les tâches de discrimination simples, nous avons analysé le score moyen de différence de latence (la moyenne des essais récompensés moins la moyenne des essais non récompensés), mais pas les essais récompensés et non récompensés séparément en raison d'une panne de stockage des données.

Les trois mesures de latence étaient disponibles pour les tâches de mémoire associées (essais non récompensés, essais récompensés et différence de latence). Pour tenir compte des comparaisons multiples et équilibrer les erreurs de type I et de type II, nous avons utilisé le niveau de signification de p < 0,02 pour les analyses comportementales car il y avait trois mesures liées dans la tâche associée par paires (essais non récompensés, essais récompensés). et différence de latence moyenne).

Il y a eu six analyses principales pour les régions d'intérêt pour l'expression de Zif268, la signification de ces analyses a donc été fixée à p < 0,01. Les tests posthoc de Newman – Keuls (NK) ont évalué les différences de groupe par paire. Une analyse simple des effets principaux a été utilisée lorsqu'il y avait des interactions significatives impliquant des facteurs de mesures répétées.

3|RÉSULTATS

3.1|Vérification des lésions

Tous les rats présentant des lésions ATN, sauf un, répondaient au critère a priori de 50 % de dommages bilatéraux à l'ATN et d'un minimum de 25 % par hémisphère. Les dommages bilatéraux médians étaient de 76 % dans les deux groupes de lésions ATN (plage : ATN-No Trace, 61 % à 93 % ; ATN-Trace, 63 % à 93 % ; Figure 2). Le rat exclu présentait une lésion satisfaisante dans un seul hémisphère (48 % au total, 75 % à gauche et 20 % à droite).

La figure 2d montre que le nombre de NeuN pour les neurones ATN chez les rats présentant une lésion ATN (M=3388, SD=2024) était bien inférieur aux valeurs trouvées chez les rats présentant une lésion fictive (M=15, 339, SD=1065 ; ce décompte était similaire à celui rapporté par Frost et al., 2020). Huit des 17 rats lésés (quatre dans le groupe Trace et quatre dans le groupe No-Trace) n'ont présenté aucun dommage ni au thalamus médiodorsal (MD) ni aux noyaux réunionnais/rhomboïdes (Re/Rh), et il y a eu relativement peu de dommages aux ces structures chez les neuf rats restants présentant des lésions.

Lorsque des dommages MD se sont produits, c'était dans les faces antérieures adjacentes à l'ATN. Ainsi, les dommages MD ont été évalués entre environ {{0}},72 à +2,10 mm à partir de Bregma, où ils variaient de 0 % à 41 % de perte de cellules sur l'ensemble de la zone. groupe (médiane=21 %). Lorsque des dommages Re/Rh se sont produits, ils étaient également adjacents à la région ATN, ils ont donc été évalués à environ 1,08 à 2,04 mm à partir de Bregma, où ils variaient de 0 % à 33 % (médiane=6 %). Notez que ces pourcentages de blessures ne représentent pas l'ensemble des régions MD et Re/Rh, car les régions postérieures des deux noyaux étaient intactes chez tous les rats présentant une lésion ATN.

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