Évaluation de l'activité anti-fatigue des saponines totales de Radix Notoginseng

Xu Yong-xin et Zhang Jian-jun

Collège d'éducation physique, Université de Zhengzhou, Zhengzhou, République populaire de Chine

Pour plus d'informations : ali.ma@wecistanche.com

Contexte & objectifs :

Plusieurs activités biologiques des saponines totales de Radix notoginseng (TSRN), une médecine traditionnelle chinoise ont été rapportées. La présente étude a été réalisée pour étudier lesactivité anti-fatiguede TSRN chez des souris Kunming mâles.

Méthodes :

Les souris ont été divisées en quatre groupes. Le premier groupe désigné comme groupe témoin a reçu quotidiennement de l'eau distillée par gavage. Les deuxième, troisième et quatrième groupes désignés comme groupes de traitement TSRN ont reçu respectivement 20, 40 et 80 mg/kg de poids corporel/jour de TSRN. Le traitement a duré 28 jours. Le temps de nage exhaustif, le lactate sanguin et la teneur en glycogène des tissus des souris après la nage ont été déterminés.

Résultats:

Le TSRN a prolongé le temps de nage exhaustif des souris, retardé efficacement l'augmentation du lactate dans le sang et augmenté la teneur en glycogène des tissus.

Interprétation & conclusions :

TSRN s'est montré prometteuractivité anti-fatiguedans un modèle animal. Cependant, une étude plus approfondie est nécessaire pour élucider le mécanisme de l'effet du TSRN surfatigue.

Mots clés : Activité anti-fatigue - lactate - natation - saponines totales de Radix notoginseng

Panax notoginseng (Burk.) FH Chen est cultivé dans tout le sud-ouest de la Chine, en Birmanie et au Népal. La racine, la partie couramment utilisée de cette plante appelée Radix notoginseng ou Sanchi, a une longue histoire comme remède dans la médecine traditionnelle orientale1-3. En Chine, R. notoginseng est utilisé pour favoriser la circulation sanguine, éliminer la stase sanguine, induire la coagulation du sang, soulager l'enflure, retarderfatigue,et soulager la douleur4,5. R. notoginseng serait bénéfique pour les maladies coronariennes, les maladies vasculaires cérébrales, le cancer, le diabète sucré ainsi que l'amélioration de l'apprentissage et de la mémoire dans des études expérimentales6-8. Ces effets thérapeutiques sont attribués à ses ingrédients actifs, à savoir les saponines, les flavonoïdes et les polysaccharides9-11. Les saponines totales de R. notoginseng (TSRN) sont considérées comme les principaux ingrédients actifs et sont un mélange de plus de 20 saponines de type Dammarane, dont les ginsénosides Rg1, Rg2, Rb1, Rb2, Rb3, Rc, Rd, Re, Rh, F2 , et notoginsenoside R1, R2, R3, R4, R6, Fab, Fc, Fe, etc12. Bien que de nombreuses activités biologiques et fonctions pharmacologiques du TSRN soient connues. On sait qu'il existe peu d'études portant sur ses effets surfatigue physique. Par conséquent, la présente étude a été conçue pour étudier laactivité antifatiguedes saponines totales de R. notoginseng dans un modèle de rat.

Matériel & Méthodes

L'étude a été menée au Laboratoire de biochimie de l'Université de Zhengzhou (Zhengzhou, Chine). Matériel végétal : Un échantillon séché de R. notoginseng a été obtenu auprès de la Henan Chinese Herbal Medicine Company (Zhengzhou, Chine) et a été authentifié par le Département de botanique de l'Université de Zhengzhou (Zhengzhou, Chine.). L'échantillon a été identifié par des caractéristiques macro-morphologiques et microscopiques et par chromatographie sur couche mince (TLC). Basé sur la pharmacopée chinoise, il a été identifié comme la racine de

Panax notoginseng (Burk.) FH Chen. Préparation des saponines totales de R. notoginseng (TSRN) :

Le R. notoginseng séché a été réduit en poudre et passé à travers un tamis à mailles 40. Le TSRN a été préparé par la méthode de Sun et al13. En bref, les échantillons alimentés (1 kg) ont été extraits avec 70% d'éthanol à 100 degrés (3 × 4 l) et concentrés sous vide (40 degrés) pour évaporer le solvant pour donner un petit volume. Après extraction avec de l'éther (3 x 0,5 1), la partie de la couche aqueuse a été extraite avec du n-butanol jusqu'à ce que la couche de n-butanol devienne incolore. La solution de n-butanol a été concentrée et séchée sous vide (60 degrés). L'extrait séché a été soumis à une Chromatographie sur colonne de résine D101, lavé avec H2O et élué avec de l'éthanol pour donner TSRN. Le TSRN contenait 64,3 ± 1,15 % de notoginsénoside, tel que déterminé par chromatographie sur couche mince et méthode spectrophotométrique.

Animaux:

Des souris Kunming mâles, pesant entre 18- 22 g, ont été obtenues auprès du Laboratory Animal Center, Medical College of Zhengzhou University (Zhengzhou, China.), et ont été nourries avec un régime commercial et de l'eau à volonté. Le régime alimentaire commercial se composait de 12 % de matières grasses, 60 % de glucides et 28 % de protéines. Les animaux ont été logés sous un cycle lumière/obscurité 12-h à une température de 22 ± 1 degré et une humidité de 50 ± 5 %. Les souris ont été laissées s'acclimater à l'environnement du laboratoire pendant au moins 1 semaine avant les expériences. L'autorisation éthique pour effectuer les expériences sur les animaux a été obtenue auprès du Comité institutionnel d'éthique animale.

Regroupement d'animaux :

Quatre-vingt-seize souris ont été réparties au hasard en quatre groupes, chacun composé de 24 souris. Le premier groupe désigné comme groupe témoin (Contrôle) a reçu de l'eau distillée par gavage tous les jours. Les deuxième, troisième et quatrième groupes désignés comme groupes de traitement TSRN ont reçu respectivement 20, 40 et 80 mg/kg de corps/poids par jour de TSRN. L'administration d'eau distillée ou de TSRN a été poursuivie pendant 28 jours. Les doses de TSRN et 28 jours de temps de traitement utilisés dans cette étude ont été confirmées comme étant appropriées et efficaces chez les souris testées, selon des expériences préliminaires.

Test de natation exhaustif :

Après le traitement final avec du TSRN ou de l'eau distillée, les souris ont été laissées au repos pendant 30 min. Ensuite, huit souris ont été retirées de chaque groupe pour un test de nage exhaustif. Les animaux ont été placés dans le bassin de nage (50 × 50 × 40 cm) à 30 cm de profondeur avec une eau maintenue à 25 ± 2 degrés. La queue de chaque souris était chargée d'un paquet de morceaux de plomb, qui représentait 10% de son poids corporel. L'épuisement a été déterminé en observant la perte de mouvements coordonnés et l'incapacité à revenir à la surface dans les 10 secondes14. Le temps de nage a été immédiatement enregistré.

Mesure des paramètres biochimiques liés à la fatigue :

Après le traitement final avec du TSRN ou de l'eau distillée, les souris ont été laissées au repos pendant 30 min. Ensuite, huit souris ont été retirées de chaque groupe pour des analyses de lactate sanguin. Les souris ont été forcées de nager pendant 30 minutes après la charge de poids (2% du poids corporel) et du sang a été prélevé de la veine caudale avant et après la nage. La teneur en lactate sanguin a été mesurée selon les procédures recommandées fournies par le kit de diagnostic commercial (Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute, Jiangsu, Chine). Les huit souris restantes ont été retirées de chaque groupe pour des analyses de glycogène tissulaire. Les souris ont été forcées de nager pendant 90 minutes sans charges. Après une heure de repos, les souris ont été tuées par dislocation cervicale sous anesthésie. Le foie et les muscles gastrocnémiens ont été prélevés15. La teneur en glycogène des tissus a été testée selon les procédures recommandées fournies par le kit de diagnostic commercial (Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute, Jiangsu, Chine).

analyses statistiques

: Tous les tests ont été réalisés en triplicat. Les données expérimentales ont été exprimées en moyenne ± écart-type. Une analyse de variance unidirectionnelle (ANOVA), des tests LSD et T3 de Dunnett ont été effectués pour déterminer la différence significative entre les échantillons dans l'intervalle de confiance de 95 %, à l'aide du logiciel SPSS 13.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, ETATS-UNIS).

Résultats

Effets du TSRN sur le temps de nage exhaustif des souris :

Le temps de nage exhaustif des troisième et quatrième groupes a augmenté de manière significative (P<0.05) when="" compared="" with="" the="" control="" group.="" however,="" the="" exhaustive="" swimming="" time="" of="" the="" second="" group="" showed="" no="" significant="" changes="" compared="" with="" the="" control="" group="" (fig.="" 1).="" the="" swimming="" time="" of="" the="" second,="" third,="" and="" fourth="" groups="" increased="" by="" 21.15,="" 27.41,="" and="" 34.01="" percent,="" respectively.="">

Effets du TSRN sur la teneur en lactate sanguin des souris après la baignade :

Il n'y avait pas de différence significative dans la teneur en lactate sanguin entre les groupes de traitement TSRN et le groupe témoin avant la natation. Après la natation, la teneur en lactate sanguin de chaque groupe de traitement TSRN a diminué de manière significative (P<0.05) when="" compared="" to="" the="" control="" group="" (fig.="" 2).="" the="" results="" indicated="" that="" the="" blood="" lactate="" contents="" of="" the="" second,="" third="" and="" fourth="" groups="" decreased="" by="" 47.14,="" 57.59,="" and="" 61.96="" percent,="">

Effets du TSRN sur le contenu en glycogène des tissus des souris après la baignade :

Après la natation, les teneurs en glycogène hépatique et musculaire de chaque groupe de traitement TSRN ont augmenté de manière significative (P<0.05) when="" compared="" with="" that="" of="" the="" control="" group="" (fig.="" 3).="" the="" liver="" glycogen="" contents="" of="" tsrn="" treatment="" groups="" increased="" by="" 58.12,="" 115.84,="" and="" 153.58="" percent,="" respectively.="" the="" muscle="" glycogen="" contents="" of="" treatment="" groups="" increased="" by="" 58.54,="" 83.74,="" and="" 73.98="" percent,="">

Discussion

La présente étude a été conçue pour étudier l'activité anti-fatigue des saponines totales de R. notoginseng (TSRN). La nage forcée des animaux a été employée comme critère de leur capacité de travail physique. De nombreuses études ont souligné que la natation présente des avantages par rapport à d'autres formes d'exercice, y compris le tapis roulant16-19. Pour normaliser la charge de travail et réduire le temps de nage, des poids à des pourcentages de poids corporel spécifiques ont été ajoutés à la poitrine ou à la queue de l'animal17,20. La présente étude a montré que le TSRN prolongeait le temps de nage exhaustif des souris, ce qui indiquait que le TSRN avait une activité anti-fatigue et pouvait augmenter la tolérance à l'exercice. Pour explorer les mécanismes, certains paramètres biochimiques ont été déterminés chez les souris après la baignade. Le lactate sanguin est le produit de la glycolyse des glucides dans des conditions anaérobies, et la glycolyse est la principale source d'énergie pour un exercice intense en peu de temps21,22. Ainsi, le lactate sanguin est l'un des indicateurs importants pour juger du degré de fatigue sportive. Dans la présente étude, le TSRN a effectivement retardé l'augmentation du lactate dans le sang et l'apparition de la fatigue. L'énergie pour l'exercice provient initialement de la dégradation du glycogène, après un exercice intense, le glycogène musculaire viendra s'épuiser, et plus tard, l'énergie proviendra du glucose circulant libéré par le foie. Ainsi, les teneurs en glycogène hépatique et musculaire sont des paramètres sensibles liés à la fatigue23-25. Dans la présente étude, le TSRN a considérablement augmenté la teneur en glycogène des tissus des souris après la baignade. En conclusion, les résultats suggèrent que le TSRN a une activité anti-fatigue, qui prolonge le temps de nage exhaustif des souris, retarde efficacement l'augmentation du lactate dans le sang et augmente la teneur en glycogène des tissus. Une étude plus approfondie est nécessaire pour élucider le mécanisme exact de l'effet du TSRN sur la fatigue.

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